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        藍(lán)墨云班課平臺(tái)建設(shè)之草履蟲(chóng)活體觀察方法優(yōu)選

        2019-06-20 09:17:24喬征磊金志民劉鑄田新民李殿偉趙杰
        課程教育研究 2019年13期
        關(guān)鍵詞:草履蟲(chóng)蓋玻片玉米面

        喬征磊 金志民 劉鑄 田新民 李殿偉 趙杰

        【摘要】建設(shè)藍(lán)墨云班課,就要為平臺(tái)提供優(yōu)質(zhì)的課程材料,《動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)》中的草履蟲(chóng)觀察,由于草履蟲(chóng)的活體難于觀察,因此很難提供好的素材,本文通過(guò)多種草履蟲(chóng)觀察方法的篩選實(shí)驗(yàn),最后確定了體積定量法是觀察效果最好的一種方法,值得推廣應(yīng)用。

        【關(guān)鍵詞】草履蟲(chóng) ?體積定量法

        【基金項(xiàng)目】牡丹江師范學(xué)院教學(xué)改革項(xiàng)目(18-XJ20059和18-XJ20013)資助。

        【中圖分類號(hào)】G642 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2095-3089(2019)13-0157-02

        要借助于藍(lán)墨云班課改進(jìn)課程教學(xué)方法,就必然需要為平臺(tái)提供好的素材,以便使學(xué)生能提前充滿興趣,提高預(yù)習(xí)效果和自主學(xué)習(xí)的主動(dòng)性。為此需要對(duì)一些效果不是很理想的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行探索,以期改進(jìn)和提高課程效果。

        草履蟲(chóng)屬原生動(dòng)物門纖毛綱,是大學(xué)實(shí)驗(yàn)課程中最常用的單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的代表,是觀察研究原生動(dòng)物和單細(xì)胞動(dòng)物的好材料。活體觀察是研究原生動(dòng)物的一種重要手段,由于其形體微小,需要利用顯微鏡進(jìn)行觀察,但由于其在水中運(yùn)動(dòng)快速往往導(dǎo)致跑出顯微鏡的視野不能夠?qū)ζ浣Y(jié)構(gòu)和運(yùn)動(dòng)方式進(jìn)行比較全面和細(xì)致的觀察。因此尋找一種好的觀察方法成為《動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)》教學(xué)過(guò)程中很重要的一項(xiàng)研究?jī)?nèi)容。

        目前所使用的《動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)》指導(dǎo)書上一般都是用棉纖維進(jìn)行固定觀察的,取單層薄棉絮放在載玻片上,滴上草履蟲(chóng)培養(yǎng)液,蓋片鏡檢,如果草履蟲(chóng)還快速游動(dòng),可用吸水紙?jiān)谏w玻片的一端吸去一些水分。這種方法的不足是,棉纖維的量拿捏不準(zhǔn),另外棉纖維不易分開(kāi),造成模糊,嚴(yán)重影響草履蟲(chóng)的活體觀察效果。為此,我們對(duì)多種可能的方法進(jìn)行了試驗(yàn),以期對(duì)草履蟲(chóng)的活體觀察方法進(jìn)行優(yōu)選,為《動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)》教學(xué)提供簡(jiǎn)單、結(jié)構(gòu)清楚全面的觀察方法。

        1.擦鏡紙纖維阻攔法

        把擦鏡紙剪成與蓋玻片等大的小方塊,放在載玻片上,再將草履蟲(chóng)培養(yǎng)液滴到擦鏡紙上(以正好能濕潤(rùn)鏡紙為宜),然后鏡檢。也可先將草履蟲(chóng)培養(yǎng)液滴在玻片中央,再覆蓋擦鏡紙,使其充分濕潤(rùn)后加蓋玻片。

        這種方法的優(yōu)點(diǎn)是鏡紙本身呈細(xì)密網(wǎng)絡(luò)狀,質(zhì)地薄而均勻,能較好地限制草履蟲(chóng)的運(yùn)動(dòng);不足是所加溶液必須適量,稍微多一點(diǎn)都容易因水分多導(dǎo)致限制不了草履蟲(chóng)的運(yùn)動(dòng),溶液量過(guò)少又容易導(dǎo)致草履蟲(chóng)數(shù)量偏少難以找到阻滯住效果好的蟲(chóng)體。而且和棉花纖維一樣容易因?yàn)槔w維的阻擋不能夠詳細(xì)觀察蟲(chóng)體的全部結(jié)構(gòu)和自然的運(yùn)動(dòng)方式。

        2.膠水稀釋法

        擠一滴稀釋過(guò)的膠水于載玻片,滴一滴草履蟲(chóng)培養(yǎng)液于困擾劑中,用解剖針攪勻,再蓋上蓋玻片,然后顯微鏡下觀察。此法操作簡(jiǎn)便,蟲(chóng)體運(yùn)動(dòng)極其緩慢甚至停滯不前,不僅能清楚地看清它的內(nèi)部結(jié)構(gòu),如伸縮泡和收集管,而且還能較清晰地看見(jiàn)其纖毛有節(jié)律的擺動(dòng)。另外由于膠水使得草履蟲(chóng)內(nèi)外滲透壓變化較大所以引起草履蟲(chóng)較高頻率地滲透壓調(diào)節(jié),從而使得刺絲泡和收集管調(diào)節(jié)滲透壓的觀察效果更好。

        此法的不足在于膠水要稀釋,否則極易導(dǎo)致草履蟲(chóng)失水變形和死亡,另外膠水稀釋程度難把握,因此這種方法需要反復(fù)多次嘗試,而且稀釋膠水易變質(zhì),不利于后續(xù)細(xì)胞核染色或刺絲泡釋放實(shí)驗(yàn)。

        3.玉米面糊法

        將6 g細(xì)粒玉米面放入100 ml水中,攪拌均勻,加熱至沸騰后,繼續(xù)加熱15 min,加熱過(guò)程中必須有人觀察,如發(fā)生溢出現(xiàn)象要及時(shí)處理;如果水分蒸發(fā)過(guò)多,玉米糊過(guò)稠,要注意添加水分使其始終保持100ml溶液。待混合物冷卻至室溫后,將草履蟲(chóng)培養(yǎng)液和玉米面糊按1:1—1:2混合均勻,即可進(jìn)行觀察。

        玉米糊粘稠度較大,草履蟲(chóng)的運(yùn)動(dòng)受阻,運(yùn)動(dòng)速度明顯減慢??梢杂^察到草履蟲(chóng)的整體外形。玉米面糊中含有大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可觀察到草履蟲(chóng)吞食營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)顆粒的過(guò)程。因此可以容易觀察到草履蟲(chóng)的攝食,還可以觀察到刺絲泡。由于玉米面顆粒較大 ,還可以觀察到草履蟲(chóng)通過(guò)狹窄縫隙時(shí)身體的變形現(xiàn)象。

        4.體積定量法

        用移液槍加入一定量的草履蟲(chóng)培養(yǎng)液于載玻片上,然后蓋片鏡檢。這種觀察方法的優(yōu)點(diǎn)是,由于幾乎沒(méi)有人為加入雜質(zhì)的影響,形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察特別清楚,但同時(shí)由于水量有限,短時(shí)間后即容易失水變形甚至致死,尤其顯微鏡電源和光闌開(kāi)的過(guò)大時(shí)容易導(dǎo)致快速失水。如果要進(jìn)行較長(zhǎng)時(shí)間的觀察,改善的方法是從蓋玻片一側(cè)不斷補(bǔ)充草履蟲(chóng)培養(yǎng)液。由于蓋玻片有不同規(guī)格的,因此對(duì)應(yīng)地溶液量也有所不同。常見(jiàn)的18×18mm2、20×20mm2、22×22mm2及24×24mm2等不同規(guī)格的蓋玻片的最適草履蟲(chóng)培養(yǎng)液體積分別為6.5~7.0uL、10~11uL、11~12uL和 14uL。當(dāng)然溶液越多草履蟲(chóng)數(shù)目越多越便于找到效果更好的,因此建議使用尺寸較大的蓋玻片進(jìn)行觀察。

        綜上所述,棉纖維法作為一種傳統(tǒng)的訓(xùn)練方法,不能夠使觀察者觀察到清晰完整的草履蟲(chóng)結(jié)構(gòu),效果最好的是體積定量法,它具有簡(jiǎn)單、方便、準(zhǔn)確和迅速的優(yōu)點(diǎn),能使觀察者在短時(shí)間內(nèi)觀察到完整的草履蟲(chóng)結(jié)構(gòu)以及運(yùn)動(dòng)方式,但滲透壓的調(diào)節(jié)不如膠水稀釋法;取食和排泄過(guò)程的效果不如玉米面糊法,總體而言體積定量法是最值得推廣應(yīng)用的一種草履蟲(chóng)活體觀察法,是目前常用的草履蟲(chóng)活體觀察法中最優(yōu)的一種。

        作者簡(jiǎn)介:

        喬征磊(1980.9-),男,漢族,講師,博士,主要從事動(dòng)物學(xué)的教學(xué)和科研工作。

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