梁建英 曹志娟

摘要：以培養(yǎng)藥學(xué)學(xué)生綜合能力、創(chuàng)新思維能力及國(guó)際視野為目的，將藥物合成（天然藥物化學(xué)）、藥物分析、藥劑、藥理各門(mén)課程整合開(kāi)設(shè)綜合藥學(xué)實(shí)驗(yàn)，包括從藥物合成或天然產(chǎn)物的提取分離、藥物的質(zhì)量評(píng)價(jià)、劑型設(shè)計(jì)、藥效學(xué)和安全性初步評(píng)價(jià)等。針對(duì)藥物研發(fā)的特點(diǎn)將藥物分析貫穿綜合實(shí)驗(yàn)始終，同時(shí)采用中國(guó)藥典、美國(guó)藥典及英國(guó)藥典方法對(duì)藥物進(jìn)行評(píng)價(jià)，系統(tǒng)地培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力和科研意識(shí)。

關(guān)鍵詞：綜合藥學(xué)實(shí)驗(yàn);藥物分析實(shí)驗(yàn);綜合能力;科研意識(shí)

中圖分類(lèi)號(hào)：G642.0 ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A ? ? 文章編號(hào)：1674-9324（2019）20-0267-02

藥物分析是我國(guó)藥學(xué)專(zhuān)業(yè)規(guī)定設(shè)置的一門(mén)主要專(zhuān)業(yè)課程，是整個(gè)藥學(xué)學(xué)科領(lǐng)域一個(gè)重要的組成部分，是全面保證與控制藥品質(zhì)量的學(xué)科，具有很強(qiáng)的綜合性、實(shí)踐性與應(yīng)用性。實(shí)驗(yàn)教學(xué)是該門(mén)課程的重要環(huán)節(jié)，它不僅具有強(qiáng)化學(xué)生理論知識(shí)、培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手能力等傳統(tǒng)功能，也是培養(yǎng)學(xué)生綜合利用知識(shí)能力分析解決實(shí)際問(wèn)題與創(chuàng)新思維的重要手段。作為藥物分析課程的重要補(bǔ)充，一些高校已經(jīng)增設(shè)了綜合性、設(shè)計(jì)性、研究性的藥物分析實(shí)驗(yàn)，并改進(jìn)了教學(xué)與評(píng)價(jià)方法。[1，2]但是，系統(tǒng)性地從化學(xué)藥物合成或者中藥有效成分提取到制成制劑并進(jìn)行全程質(zhì)量控制的教學(xué)模式卻鮮有報(bào)道。復(fù)旦大學(xué)藥學(xué)院結(jié)合藥物研發(fā)的規(guī)律，將藥物化學(xué)、藥物分析、藥劑、藥理等不同學(xué)科知識(shí)進(jìn)行整合，開(kāi)設(shè)了綜合藥學(xué)實(shí)驗(yàn)課程。其中的藥物分析部分改變了以往依據(jù)藥典標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作的單項(xiàng)驗(yàn)證性試驗(yàn)，而代之以全程化綜合實(shí)驗(yàn)，并與美國(guó)藥典、英國(guó)藥典方法進(jìn)行比較，以培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新思維、開(kāi)拓國(guó)際化視野與提升解決實(shí)際問(wèn)題能力為目的，將實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的驗(yàn)證功能、不同學(xué)科知識(shí)的內(nèi)在聯(lián)系與學(xué)生能力的提升作為一個(gè)整體進(jìn)行考慮與布局。以下以阿司匹林為例，介紹其藥物分析實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。

一、原料的檢驗(yàn)

藥品檢驗(yàn)是藥物分析的重要組成部分，藥品檢驗(yàn)依賴(lài)于藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括藥物的性狀、鑒別、檢查與含量測(cè)定四部分內(nèi)容，除含量測(cè)定每部分內(nèi)容包括2—8個(gè)小項(xiàng)目。一般來(lái)說(shuō)藥物分析實(shí)驗(yàn)主要用來(lái)驗(yàn)證理論課的重點(diǎn)與難點(diǎn)，強(qiáng)化學(xué)生對(duì)理論知識(shí)的理解與記憶。

依據(jù)中國(guó)藥典（2015版）中阿司匹林的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)合成的原料進(jìn)行檢驗(yàn)，取代以往市售藥品的檢驗(yàn)，由于原料的合格與否直接關(guān)系到后續(xù)的藥劑、藥理試驗(yàn)，同時(shí)秉承對(duì)自己合成樣品負(fù)責(zé)的態(tài)度，學(xué)生對(duì)待藥品檢驗(yàn)會(huì)更加認(rèn)真，對(duì)檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)結(jié)果印象更加深刻。這樣一方面增強(qiáng)了學(xué)生對(duì)藥品檢驗(yàn)知識(shí)體系的整體把握，又提高了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣與效果。

除了常規(guī)的性狀、鑒別等內(nèi)容，檢查項(xiàng)下我們重點(diǎn)關(guān)注了其中的特殊雜質(zhì)游離水楊酸。游離水楊酸即藥物合成的原料，同時(shí)藥物在貯存過(guò)程中會(huì)水解產(chǎn)生水楊酸。作為特殊雜質(zhì)，其含量的多少與藥物品質(zhì)及使用安全性密切相關(guān)，因此很多國(guó)家藥典中均將游離水楊酸列為檢查項(xiàng)目。盡管限度規(guī)定值均為0.1%，但所采用方法不盡相同，如中國(guó)藥典采用高效液相色譜法（HPLC）[3]，美國(guó)藥典采用硫酸鐵銨的目視比色法[4]。學(xué)生通過(guò)兩種不同方法的比對(duì)，會(huì)發(fā)現(xiàn)目視比色法進(jìn)行雜質(zhì)限量檢查更直觀，而HPLC法不僅能進(jìn)行雜質(zhì)限量檢查，還可以進(jìn)行雜質(zhì)的含量測(cè)定。此外，針對(duì)含量測(cè)定項(xiàng)目同樣進(jìn)行了中國(guó)藥典和美國(guó)藥典方法的比較。中國(guó)藥典采用氫氧化鈉在中性乙醇中直接進(jìn)行滴定，美國(guó)藥典則采用先加入定量過(guò)量氫氧化鈉滴定液然后硫酸滴定液回滴的水解后剩余滴定法，盡管均為酸堿滴定，但方法原理存在差異，通過(guò)試驗(yàn)學(xué)生會(huì)發(fā)現(xiàn)中國(guó)藥典方法無(wú)法排除藥物中的游離水楊酸或醋酸等酸性雜質(zhì)的干擾，相比而言美國(guó)藥典方法盡管煩瑣但專(zhuān)屬性更強(qiáng)。將獨(dú)立的鑒別、檢查、含量測(cè)定等實(shí)驗(yàn)內(nèi)容串成一個(gè)整體同時(shí)與國(guó)外藥典方法進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)，使不同知識(shí)點(diǎn)融會(huì)貫通，這樣學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)的理解和掌握更加牢固，思維能力和創(chuàng)新能力也因此得以提高。

如果原料檢驗(yàn)不合格，學(xué)生會(huì)進(jìn)一步對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行純化直至符合中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)。這同時(shí)也培養(yǎng)了學(xué)生認(rèn)真負(fù)責(zé)的精神。

二、片劑的檢驗(yàn)

原料經(jīng)過(guò)檢驗(yàn)符合藥典標(biāo)準(zhǔn)后進(jìn)行壓片制成片劑。片劑檢驗(yàn)的重點(diǎn)項(xiàng)目為溶出和含量測(cè)定。與中國(guó)藥典常規(guī)HPLC法不同，美國(guó)藥典以庚烷磺酸鈉作為離子對(duì)試劑進(jìn)行色譜分析。離子對(duì)色譜法是把離子對(duì)試劑加入到含水流動(dòng)相中，使被分析組分在流動(dòng)相中與離子對(duì)試劑的反離子生成不帶電荷的中性離子，從而增加待測(cè)藥物與非極性固定相的作用，使分配系數(shù)增加，改善分離效果。通過(guò)不同色譜法的比較，可以大大增強(qiáng)學(xué)生對(duì)高效液相色譜法這一現(xiàn)代分析技術(shù)的理解。毫無(wú)疑問(wèn)，對(duì)于片劑各國(guó)藥典關(guān)注的主要是溶出度的測(cè)定。眾所周知，我國(guó)正在開(kāi)展藥物一致性評(píng)價(jià)。藥物一致性評(píng)價(jià)，是《國(guó)家藥品安全“十二五”規(guī)劃》中的一項(xiàng)藥品質(zhì)量要求，開(kāi)展仿制藥一致性評(píng)價(jià)，可以使仿制藥在質(zhì)量和療效上與原研藥一致，在臨床上可替代原研藥，這不僅可以節(jié)約醫(yī)療費(fèi)用，同時(shí)也可提升我國(guó)的仿制藥質(zhì)量和制藥行業(yè)的整體發(fā)展水平，保證公眾用藥安全有效。而其中體外溶出度的測(cè)定是評(píng)價(jià)藥品是否一致的最簡(jiǎn)單、最重要的環(huán)節(jié)之一。從藥品檢驗(yàn)的角度上講，溶出度系指藥物從片劑或膠囊等固體制劑在規(guī)定的溶劑中溶出的速度和程度。美國(guó)藥典溶出介質(zhì)選用pH4.5的醋酸鹽緩沖液，轉(zhuǎn)速50rpm，紫外分光光度法檢測(cè)。中國(guó)藥典選用溶出介質(zhì)為稀鹽酸溶液，轉(zhuǎn)速100rpm，高效液相色譜法檢測(cè)。采樣時(shí)間均為30min，溶出限度亦相同均為80%[3，4]。美國(guó)藥典方法溶出介質(zhì)和轉(zhuǎn)速的選擇更加科學(xué)合理，但定量方法過(guò)于簡(jiǎn)單，缺乏專(zhuān)屬性;中國(guó)藥典定量方法相對(duì)復(fù)雜，但能同時(shí)測(cè)定水解產(chǎn)物游離水楊酸和阿司匹林，溶出量的測(cè)定也更加準(zhǔn)確，兩套方法各有千秋。通過(guò)對(duì)藥物制劑的分析，進(jìn)一步激發(fā)和引導(dǎo)學(xué)生自主學(xué)習(xí)藥物一致性評(píng)價(jià)的相關(guān)知識(shí)，達(dá)到舉一反三的目的。除此以外，通過(guò)原料和制劑的各項(xiàng)分析學(xué)生可以對(duì)定量方法驗(yàn)證中的指標(biāo)尤其是準(zhǔn)確度、精密度、專(zhuān)屬性等有更深刻的理解。

綜合藥學(xué)實(shí)驗(yàn)既有多學(xué)科交叉、融合和匯總、又有單一學(xué)科多個(gè)知識(shí)點(diǎn)串聯(lián)。尤其是通過(guò)藥物分析將藥學(xué)研究各環(huán)節(jié)有機(jī)銜接，將過(guò)去相對(duì)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目聯(lián)系起來(lái)，學(xué)生從實(shí)驗(yàn)中充分體會(huì)到藥學(xué)各專(zhuān)業(yè)彼此間就是一個(gè)整體。另外，通過(guò)與國(guó)外先進(jìn)方法的比對(duì)及國(guó)家藥品發(fā)展戰(zhàn)略的了解，既提高了學(xué)習(xí)興趣，增強(qiáng)了科研意識(shí)，強(qiáng)化了科學(xué)實(shí)踐能力，同時(shí)對(duì)學(xué)生開(kāi)拓國(guó)際視野也會(huì)產(chǎn)生非常積極的影響。

參考文獻(xiàn)：

[1]隋會(huì)敏，李莉，王慧玉，楊瑩，梁鑫.基于全程綜合實(shí)驗(yàn)與案例教學(xué)的藥物分析實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革[J].藥學(xué)教育，2018，34（3）：24-27.

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[3]中國(guó)藥典（2015年版）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：545.

[4]The United States Pharmacopeia：Official Monographs.USP 40：2873-2874.