焦?jié)櫚?，李朝周，劉高順，閆士朋，焦 健 （1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院， 甘肅 蘭州70070；2.甘肅省作物遺傳改良和種質(zhì)創(chuàng)新重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅蘭州 70070；.甘肅省隴南市經(jīng)濟(jì)林研究院，甘肅隴南 746000；4.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院，甘肅蘭州 70070）

叢枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi，AMF）是一類重要的土壤真菌，能夠與陸地上80%以上的植物根系建立共生關(guān)系［1］，形成叢枝菌根（ar?buscular mycorrhiza，AM）。AMF生態(tài)適應(yīng)性強(qiáng)，能夠促進(jìn)宿主植物對礦質(zhì)營養(yǎng)的吸收［2-3］。蔡邦平［4］研究了野生分布區(qū)和栽培區(qū)梅根系和根際土壤中與梅形成共生菌根的AMF多樣性；張春蘭等［5］對不同獼猴桃品種根際AMF多樣性、空間分布規(guī)律進(jìn)行了研究；劉輝等［6］調(diào)查了安徽茶區(qū)茶樹AMF資源分布情況；慕晶［7］對2種瀕危植物星葉草和桃兒七進(jìn)行AMF多樣性研究，在星葉草根系內(nèi)檢測到AMF 3屬，桃兒七根系內(nèi)檢測到4屬，并指出星葉草和桃兒七根內(nèi)群落組成有較大差異。上述研究均在單作系統(tǒng)進(jìn)行。也有學(xué)者對于2種或多種植物構(gòu)成的復(fù)合生態(tài)系統(tǒng)AMF進(jìn)行研究：CRUZ等［8］研究發(fā)現(xiàn)在三隔室根箱AMF菌絲在多種植物之間可形成連接土壤-植物系統(tǒng)的網(wǎng)絡(luò)，在植物之間交換營養(yǎng)物；來自百喜草的根系分泌物可在體外刺激AMF菌絲生長［9］。ZHANG等［10］研究發(fā)現(xiàn)AMF定殖促進(jìn)受體植物的生長、根葡萄糖積累和根際土壤性質(zhì)改良。即AMF可以在形態(tài)和功能上聯(lián)結(jié)2種植物，并促進(jìn)植物生長。王玉坤［11］對梨-旱稻復(fù)合系統(tǒng)研究發(fā)現(xiàn)梨園間作旱稻后影響了梨樹根際土壤真菌的多樣性，增加了2個種。已有研究證明能形成AM的植物中包含油橄欖（Olea europaea）［12］，有研究表明AM的形成能促進(jìn)油橄欖生長，提高油橄欖植株對移栽、干旱、高溫、高鹽和重金屬等脅迫的抗逆性［13］。卯吉華等在云南不同栽培區(qū)進(jìn)行了油橄欖AMF的調(diào)查研究，但關(guān)于生草制油橄欖園這種復(fù)合生態(tài)系統(tǒng)的菌根發(fā)育研究還鮮有報(bào)道。

油橄欖為木樨科（Oleaceae）木樨欖屬（Olea）常綠喬木，是著名的亞熱帶木本油料兼果用樹種［14］。由于油橄欖大面積種植在易發(fā)生水土流失和養(yǎng)分流失的山地，且清耕制的坡面蓄水、抑蒸、保墑、抗蝕效果較差［15］，故有必要改善隴南山地油橄欖園的土壤管理方式。果園生草也稱作果園生草覆蓋制，是在果園生長期內(nèi)采取的一種現(xiàn)代化的土壤管理制度，即果園果樹采用寬行距（一般4～5 m）的栽培條件下，全園或行間（株間）長期種植多年生豆科或禾本科牧草作為土壤覆蓋，不使土壤裸露，每年刈割1～2次后覆于樹盤下或用于發(fā)展養(yǎng)殖業(yè)，或常年不刈割。在果園草生長期內(nèi)，果園保持得像綠地毯似的一種土壤管理制度，以達(dá)到果品優(yōu)質(zhì)、豐產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、綠色、安全的目的［16］。生草對果園環(huán)境的影響表現(xiàn)為減少坡地果園的水土和養(yǎng)分流失，穩(wěn)定可靠地增加土壤有機(jī)質(zhì)含量，改善土壤理化性狀、增強(qiáng)土壤肥力相關(guān)酶活性，增加土壤微生物數(shù)量等多個方面［17］。有研究表明，由AMF的菌絲和孢子壁分泌的球囊霉素相關(guān)土壤蛋白（glomalin?related soil pro?tein，GRSP）可以增加土壤有機(jī)碳庫，并改善土壤水穩(wěn)性團(tuán)聚體結(jié)構(gòu)，改善土壤團(tuán)聚體［18］，而生草制果園可以促進(jìn)AMF侵染根系，AMF在果園草和果樹根系間可以形成菌絲橋，菌絲橋可使鄰近的不同種植株之間進(jìn)行養(yǎng)分運(yùn)輸和傳遞［19］。AMF可直接在油橄欖和生草2種植物根系之間以菌絲橋連接，或者當(dāng)生草的生長狀況變?nèi)鯐r(shí)AMF可轉(zhuǎn)移侵染油橄欖根系，提高果樹吸收養(yǎng)分的能力，而且生草制果園的AMF豐度較清耕制果園高，這對于解決清耕制果園坡面抗蝕效果差的問題很有意義。

研究生草對油橄欖根際土壤AMF多樣性及其對油橄欖菌根侵染率的影響，對于合理利用果園生草具有重要意義，因此研究開展了不同生草措施影響油橄欖根部AMF侵染和AMF生物多樣性的調(diào)查與分析，以期為油橄欖園生草草種選擇提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

油橄欖盆栽實(shí)驗(yàn)在甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心植物生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，油橄欖苗來自于甘肅省隴南市武都區(qū)大堡油橄欖園，供試油橄欖品種為豆果（Arbequina，原產(chǎn)地西班牙），苗齡2年，2017年4月5日種植，花盆規(guī)格為22 cm×20 cm（內(nèi)徑×高），在每個花盆中央移栽單株油橄欖苗，共12盆。將所有花盆分成4組，于2017年4月26日種植草。Ⅰ：間作百喜草（Paspalum notatum），品種為Pensacola A33；Ⅱ：間作白三葉草（Trifolium repens），品種 海發(fā)（Haifa）；Ⅲ：間作紅三葉（Trifolium pratense）品種為瑞德；Ⅳ：不種草。油橄欖苗的周圍以環(huán)形等距離種植6穴草，穴距6～9 cm，同穴播種草種子3粒，穴與油橄欖苗（盆圓心）的距離為6～9 cm。牧草種子發(fā)芽至苗高3～5 cm時(shí)給牧草間苗，每盆保留長勢相對一致的6株牧草。每組3盆，草種購于蘭州興隴草業(yè)技術(shù)服務(wù)有限公司，在2017年11月初油橄欖生長停止時(shí)采集油橄欖根系及根際土，除去表層土后，每株按東西南北4個方向在5～20 cm深處采集油橄欖帶有細(xì)根的根系，輕輕抖落附在根上的土壤，將剩下的根系和土壤在無菌自封袋中輕輕抖動約1 min作為根際土，隨后將根際土混合作為該處理的土壤樣品，油橄欖根樣清水洗凈后剪成1 cm長根段，置于FAA固定液中固定，土樣裝入無菌自封袋中密封，于4℃冰箱保存。

1.2 菌根侵染情況

AMF侵染率的測定采用TROUVELOT等［20］的方法，采用φ=10%的KOH溶液消化透明，采用堿性過氧化氫溶液軟化，采用φ=5%的乳酸溶液酸化，采用φ=0.08%的曲利苯藍(lán)Trypanblue染液染色，用φ=50%的甘油洗去根的浮色，普通光學(xué)顯微鏡下觀察侵染情況［21］。侵染強(qiáng)度按照文獻(xiàn)［22］的方法計(jì)算。

1.3 油橄欖根際AMF的分離與鑒定

采用濕篩法進(jìn)行AMF孢子分離。參照文獻(xiàn)［23-24］中的AMF特征描述對AMF進(jìn)行種的鑒定。

1.4 油橄欖根際AMF多樣性指數(shù)的測定

AMF孢子密度（spore density，SD）：采用濕篩傾析法分離孢子，所用篩為從上到下疊在一起的孔徑分別為0.20、0.075、0.038 5 mm的篩子，再采用φ=50%的蔗糖溶液離心純化。每100 g風(fēng)干土中的孢子數(shù)記為孢子密度［6］。

AMF種的物種豐度（species richness，SR）、AMF分布頻度（frequency，F(xiàn)）、AMF相對多度（relative abundance，RA）、重要值（importance value，IV）方法計(jì)算參照文獻(xiàn)［6］，以IV為標(biāo)準(zhǔn)劃分各處理油橄欖根際土壤AMF優(yōu)勢度等級。相對豐度（relative abun?dance，RA）為某個土樣中某個AMF種的孢子數(shù)量占該土樣所有AMF種孢子數(shù)量的比例［25］。

AMF物種多樣性指數(shù)（diversity index，DI）：選取Margalef物種豐富度、Shannon?Wiener指數(shù)、Pielou均勻度指數(shù)和Simpson′s指數(shù)作為多樣性指標(biāo)來描述AMF的多樣性。計(jì)算公式［6，26］為

式（1）～（4）中，R為Margalef物種豐富度指數(shù)；H為Shannon?Wiener指數(shù)；E為Pielou均勻度指數(shù)；D為Simpson′s優(yōu)勢度指數(shù)；S為某樣地中孢子種數(shù)；N為某一樣方中所有物種個體數(shù)之和；pi為某一土壤樣品中某AMF的孢子數(shù)占該樣品所有孢子數(shù)的比例［27］115-122。

1.5 油橄欖根際AMF群落相似性系數(shù)的測定

按劉輝等［6］的方法測定油橄欖根際AMF群落相似性系數(shù)。

1.6 油橄欖根際土中球囊霉素相關(guān)土壤蛋白含量的測定

采用檸檬酸緩沖液提取土壤易提取球囊霉素相關(guān)土壤蛋白（easily extractable glomalin?related soil protein，EE?GRSP）和總球囊霉素相關(guān)土壤蛋白（to?tal glomalin?related soil protein，T?GRSP），用考馬斯亮藍(lán)法測定其含量［6］。

1.7 油橄欖根際土中微生物量含量的測定

土壤微生物量碳、氮和磷提取采用氯仿熏蒸浸提法［28］。土壤微生物量碳（soil microbial biomass car?bon，SMBC，CSMB）測定采用比色法［29］，計(jì)算公式為

式（5）中，Ec和Ec0分別為熏蒸和未熏蒸土壤浸提液中有機(jī)碳含量，mg·kg-1；0.38為校正系數(shù)。

土壤微生物量氮（soil microbial biomass nitro?gen，SMBN，NSMB）測定采用茚三酮比色法［30］，計(jì)算公式為

式（6）中，EN和EN0分別為熏蒸和未熏蒸土壤浸提液中全氮含量，mg·kg-1；0.54為校正系數(shù)。

土壤微生物量磷（soil microbial biomass phos?phorus，SMBP，PSMB）計(jì)算公式為

式（7）中，Ep和Ep0分別為熏蒸和未熏蒸土壤浸提液中磷含量，mg·kg-1；0.40為校正系數(shù)。

1.8 數(shù)據(jù)處理

利用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)差異顯著性分析和相關(guān)分析，采用Ducan法進(jìn)行處理間差異的多重比較（α=0.05）。采用Excel 2013軟件處理數(shù)據(jù)并繪圖。

2 生草對油橄欖根際土壤AMF組成的影響

2.1 油橄欖根際土壤AMF組成的分布特征

從4種處理的油橄欖根際土壤中共分離出4屬19種AMF，其中無梗囊霉屬（Acaulospora）10種，占總種數(shù)的52.63%；球囊霉屬（Glomus）7種，占總種數(shù)的36.84%；管柄囊霉屬（Funneliformis）和內(nèi)養(yǎng)囊霉屬（Entrophospora）各1種，分別占分離出AMF的5.26%，具體見表1。

2.2 油橄欖根際土壤AMF相對豐度特征

無草處理土壤中以縮球囊霉、孔窩無梗囊霉、細(xì)齒無梗囊霉的相對豐度為最高，白三葉處理土壤中以近明球囊霉、雙網(wǎng)無梗囊霉為最高，百喜草處理土壤中以縮球囊霉、近明球囊霉、明球囊霉為最高，紅三葉處理土壤中以雙網(wǎng)無梗囊霉、孔窩無梗囊霉、近明球囊霉為最高（表2）。

表1 不同處理油橄欖根區(qū)土壤AMF的組成Table 1 AMF composition from different treaments in ol‐ive rhizosphere soil

表2 不同處理油橄欖根區(qū)土壤中AMF的相對豐度Table 2 Relative Abundance of the AMF species from different treaments in olive rhizosphere soil

以不同處理油橄欖根際土為研究對象，統(tǒng)計(jì)其中的AMF種類，不同處理油橄欖AMF的種類數(shù)量、優(yōu)勢種和特有種上均表現(xiàn)出較大的差異。其中，百喜草和紅三葉處理油橄欖AMF的種類最多，均為14種，均占AMF總種數(shù)的73.68%；白三葉處理AMF種類為12種，占分離的AMF總種數(shù)的63.16%，而無草處理只分離鑒定出9種AMF，占AMF總種數(shù)的47.37%，這表明生草提高了油橄欖根際土壤中AMF的種類數(shù)，以紅三葉和百喜草處理效果最佳。此外，大型無梗囊霉是紅三葉處理的特有種，沙荒球囊霉、楓香球囊霉是百喜草處理的特有種；白三葉處理無特有種（表2）。

通過統(tǒng)計(jì)油橄欖根際土中AMF種的分布頻度和相對多度并計(jì)算重要值可知：近明球囊霉、縮球囊霉、孔窩無梗囊霉、明球囊霉、脆無梗囊霉、稀有內(nèi)養(yǎng)囊霉的重要值≥50%，故將其作為油橄欖根際土壤AMF的優(yōu)勢種；雙網(wǎng)無梗囊霉、光壁無梗囊霉、大果球囊霉是常見種；其余10種為少見種，即優(yōu)勢屬包含球囊霉屬和無梗囊霉屬；無稀有種。

2.3 生草對油橄欖根際土壤AMF主要特征指標(biāo)的影響

2.3.1 油橄欖AMF侵染率

由表3可知，4種處理的油橄欖根系均有不同程度的AMF侵染，無草處理的侵染率和侵染強(qiáng)度均最低，分別為56.67%和14.13%，說明油橄欖根部確實(shí)與AMF形成共生關(guān)系，間作百喜草的油橄欖根系侵染率和侵染強(qiáng)度均最高，分別較無草高58.82%和233.25%，5級侵染的根段數(shù)以間作白三葉的油橄欖根系最多，4級侵染的根段數(shù)以間作百喜草的油橄欖的根系最多，生草處理提高了叢植菌根的侵染率和侵染強(qiáng)度。

2.3.2 油橄欖根際土壤AMF資源分布

由表4可知，無草處理油橄欖根際土壤AMF孢子密度最小，為111.240 個·（100 g）-1，物種豐度、Margalef物種豐富度指數(shù)和Simpson′s指數(shù)均最小，說明該處理油橄欖AMF種多樣性偏低；百喜草處理油橄欖AMF物種豐度為14，Margalef物種豐富度指數(shù)、Shannon?Wiener指數(shù)和 Simpson′s指數(shù)均最高。均勻度指數(shù)則以無草處理最高，白三葉處理最低。綜上所述，生草增加了油橄欖根際土壤中AMF的多樣性。

表3 油橄欖菌根侵染情況Table 3 Mycorrhizal infection of olive

表4 不同處理AMF的孢子密度、物種豐度和多樣性指數(shù)Table 4 Spore density,species richness and diversity index of AMF from different treatments

2.3.3 不同處理油橄欖根際AMF群落相似性

由表5可知，不同處理油橄欖根際AMF種類組成的相似性系數(shù)為0.52～0.85。其中，紅三葉和白三葉處理之間油橄欖根際AMF群落Sorensen相似性系數(shù)最高，為0.85；百喜草與白三葉處理、紅三葉處理之間油橄欖根際AMF群落Sorensen相似性系數(shù)分別為0.67和0.76；無草處理與白三葉、百喜草、紅三葉處理之間油橄欖根際AMF群落Sorensen相似性系數(shù)分別為0.67、0.75和0.52。綜上，無草處理與2種豆科牧草處理的油橄欖根際AMF群落相似度較低，群落差異大，2種豆科牧草之間的AMF群落相似度最大，群落差異最小。

2.3.4 不同處理油橄欖根際土壤GRSP含量

由圖1可知，不同處理油橄欖根際土中T?GRSP和 EE?GRSP含量存在差異，T?GRSP含量為9.44～24.03 mg·g-1，百喜草和白三葉處理顯著高于紅三葉和無草處理（P＜0.05），百喜草和白三葉處理分別較無草處理提高154.67%和121.37%；EE?GRSP含量為2.76～9.52 mg·g-1，百喜草、白三葉和紅三葉處理的EE?GRSP均顯著高于無草處理（P＜0.05），分別是無草處理的3.45、2.53和2.87倍。說明生草處理顯著提高了油橄欖根際土壤GRSP含量。

表5 不同處理油橄欖根際AMF群落Sorensen相似性系數(shù)Table 5 Sorensen similarity indices of AMF in different treaments

圖1 不同處理油橄欖根際土中球囊霉素相關(guān)土壤蛋白含量Fig.1 Contents of glomalin from rhizosphere soil of olive from different treaments

2.4 不同處理油橄欖根際土壤微生物量變化特征

由表6可知，間作生草可明顯提高油橄欖根際土壤的微生物量，間作百喜草處理對土壤微生物量碳（SMBC）和土壤微生物量磷（SMBP）的提高效果最顯著（P＜0.05），分別較無草處理提高248.94%和640.23%，土壤微生物量氮（SMBN）的提高以2種豆科植物——白三葉和紅三葉處理效果最顯著（P＜0.05），分別是無草處理的28.25和36.22倍。

2.5 油橄欖根際土壤AMF多樣性與AMF主要特征指標(biāo)的相關(guān)性

相關(guān)性分析結(jié)果（表7）表明，油橄欖根際土壤AMF的Shannon?Wiener指數(shù)與AMF物種豐度呈極顯著正相關(guān)（r=0.730，P＜0.01），與SMBP也呈極顯著正相關(guān)（r=0.737，P＜0.01），與EE?GRSP、SMBC呈顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），相關(guān)系數(shù)r值分別為0.678和0.658。Simpson′s指數(shù)與AMF的物種豐度呈顯著正相關(guān)（r=0.590，P＜0.05）。

表6 不同生草處理對油橄欖根際土壤微生物量的影響Table 6 Effect of different treatments of sod‐culture on rhizospheric soil microbial biomass in olive

表7 油橄欖根際土壤AMF多樣性與AMF主要特征指標(biāo)之間的相關(guān)關(guān)系Table 7 Relationship between AMF diversity and mainly characteristic index

3 討論

果園生草制對于土壤中AMF群落結(jié)構(gòu)而言有雙重作用，一為增加了宿主植物的種類，二是改變了土壤管理方式。有關(guān)研究表明獨(dú)特的植物種類和特殊生態(tài)條件的長期影響是AMF演化為各自不同的優(yōu)勢種群的重要前提。宿主植物的不同使AMF的群落結(jié)構(gòu)存在較大差異：封曄等［31］研究表明8種植物根際AMF的種類和數(shù)量有較大差異，植物種類和根際環(huán)境對根際微生物群落結(jié)構(gòu)有較大影響；有研究表明同一國家的2種入侵植物根圍的AMF群落結(jié)構(gòu)存在明顯差異［32］，隸屬同科的線葉菊根圍分布的AMF種與加拿大一枝黃花差異很大［33］；唐建軍等［34］研究表明，加拿大一枝黃花的入侵使得本地種雞眼草根圍土壤AMF群落組成由以摩西球囊霉和幼套球囊霉為優(yōu)勢種轉(zhuǎn)為以地球囊霉和幼套球囊霉為優(yōu)勢種；蔡曉布等［35］認(rèn)為針茅屬植物種類對AMF物種多樣性具有重要影響；姚青等［36］通過比較不同草種根際土壤中AMF的PCR?DGGE圖譜，發(fā)現(xiàn)藿香薊、柱花草和百喜草3種草根際的AMF群落結(jié)構(gòu)存在差異。而不同土壤管理方式下根際AMF的優(yōu)勢種也有所差異：張錦娟［37］研究發(fā)現(xiàn)，生草處理的根際土壤中聚叢球囊霉（G.aggregatum）、近明球囊霉（G.claroideum）為優(yōu)勢種，透光球囊霉（G.diaphanum）、幼套多孢囊霉（G.etunicatum）、根內(nèi)球囊霉（G.intraradices）、扭形球囊霉（G.tortuo?sum）、G.sp1為常見種；免耕處理的根際土壤中幼套多孢囊霉（G.etunicatum）為優(yōu)勢種，聚叢球囊霉（G.aggregatum）、近明球囊霉（G.claroideum）為常見種。筆者研究表明，不同處理油橄欖AMF的種類數(shù)量、優(yōu)勢種和特有種上均表現(xiàn)出較大的差異。其中百喜草和紅三葉處理的油橄欖AMF種類最多；白三葉處理的AMF種類為12種，而無草處理只分離鑒定出9種AMF，這表明生草提高了油橄欖根際土壤中AMF的種類數(shù)，以紅三葉和百喜草處理效果最佳。此外，百喜草處理下縮球囊霉、近明球囊霉、明球囊霉的相對豐度最高，紅三葉處理下雙網(wǎng)無梗囊霉、孔窩無梗囊霉、近明球囊霉的相對豐度最高，而白三葉處理下雙網(wǎng)無梗囊霉和近明球囊霉的相對豐度最高大。

果園生草制可以改變根際土壤AMF的群落結(jié)構(gòu)，從而改變油橄欖根際土中AMF的多樣性，百喜草處理油橄欖AMF的Margalef物種豐富度指數(shù)、Shannon?Weiner指數(shù)和 Simpson′s指數(shù)均最高。無草處理與生草處理的油橄欖根際AMF群落Sorensen相似度較低，群落差異大。說明間作生草的小生境所帶來的空間異質(zhì)性對AMF的優(yōu)勢種、屬和遺傳多樣性產(chǎn)生了影響。

果園生草對根際土中AMF的生態(tài)效應(yīng)主要包括改變?nèi)郝浣Y(jié)構(gòu)和多樣性，而個體效應(yīng)主要包括AMF的侵染和代謝2個方面。從AMF侵染的角度來說，仝瑞建等［38］研究表明生草區(qū)的山地長壽沙田柚成年果樹菌根侵染率和AMF孢子密度均高于清耕區(qū)，生草處理可顯著提高這2個指標(biāo)；曾明等［39］研究發(fā)現(xiàn)百喜草和白三葉草生草區(qū)土壤AMF孢子數(shù)和柑桔根系菌根侵染率顯著高于清耕區(qū)；馬永甫［2］調(diào)查發(fā)現(xiàn)生草奉節(jié)臍橙園的AMF菌根侵染率高于清耕果園，生草區(qū)的AMF孢子密度最高；張錦娟［37］發(fā)現(xiàn)生草處理更有利于提高柑橘根際土壤中AMF的多樣性，生草管理的泡囊侵染率、叢枝侵染率、總侵染率與孢子密度顯著優(yōu)于免耕。筆者研究發(fā)現(xiàn)生草促進(jìn)了油橄欖根際土壤中AMF對油橄欖根的侵染，可能是因?yàn)椴莞翟谕寥乐械拇┎迨杷闪送寥溃寥赖耐庑栽鰪?qiáng)，這為好氣性的AMF孢子萌發(fā)與生長提供了有利條件，此外，AMF可以侵染生草，與生草形成菌根，這也促進(jìn)了孢子的萌發(fā)。因此，該研究中生草處理的油橄欖根系A(chǔ)MF孢子密度高于無草處理。

從AMF代謝的角度來說，AMF的菌絲和孢子壁可分泌GRSP，土地利用方式會影響土壤中GRSP含量及分布［40］。ZOU等［41-42］研究發(fā)現(xiàn)間作白三葉可顯著增加柑橘園土壤中GRSP和土壤有機(jī)碳、水穩(wěn)性聚集體的濃度；WANG等［43］研究表明植草柑橘園中的AMF繁殖體和GRSP含量顯著高于清耕果園。筆者研究發(fā)現(xiàn)不同生草處理油橄欖根際土中T?GRSP和EE?GRSP含量均提高，百喜草和白三葉處理的T?GRSP含量顯著高于紅三葉和無草處理；百喜草、白三葉和紅三葉處理的EE?GRSP均顯著高于無草處理，這與ZOU等［41］的研究結(jié)果相似。

果園生草能通過改變果樹根際土中AMF的群落結(jié)構(gòu)、多樣性、侵染、增殖和代謝特性來綜合影響土壤微生物量。油橄欖根際土中微生物量呈現(xiàn)出生草處理高于無草的現(xiàn)象，特別是百喜草處理對微生物量磷和豆科生草對微生物量氮的影響較為明顯。關(guān)于SMBC、SMBN、SMBP含量在各生草處理間的差異，可能的原因有：生草促進(jìn)AMF的侵染和定殖，使得AMF豐度和生物量增加，所以SMBC含量會增加，AMF對不同草種的侵染狀況不同，所以SMBC含量存在差異，紅三葉和白三葉為豆科植物，可以促進(jìn)固氮菌的活動，促進(jìn)土壤中氮循環(huán)的速率，可能造成SMBN含量增加。百喜草為禾本科作物，所以3種生草之間SMBN含量存在差異，固氮菌的增加也可促進(jìn)SMBC含量增加；有研究表明藿香薊、柱花草和百喜草3種草根系的磷含量存在顯著差異，AMF可以促進(jìn)植物對磷元素的吸收，王菲［44］指出植物可為真菌和解磷細(xì)菌提供充足的碳水化合物以滿足其生長代謝需要，進(jìn)而充分發(fā)揮其功能，將從土壤有機(jī)磷中活化出來的磷再通過真菌的根外菌絲傳遞給植物。真菌可將磷資源轉(zhuǎn)化成微生物量磷，這部分磷也是土壤中植物有效磷的潛在磷庫，所以種草會導(dǎo)致SMBP含量增加，不同生草之間SMBP存在差異。筆者發(fā)現(xiàn)間作百喜草的油橄欖根系侵染率和侵染強(qiáng)度均最高，即不同草處理下AMF相關(guān)性狀指標(biāo)存在差異。

在生態(tài)系統(tǒng)中，物種數(shù)目、個體生長和代謝會與群落特征相互影響。從回歸分析（表7）來看，油橄欖根際土壤AMF的Shannon?Wiener指數(shù)與AMF物種豐度呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與SMBP含量也呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與EE?GRSP、SMBC含量呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）。從物種數(shù)與群落物種多樣性間的關(guān)系來看，AMF物種豐度指植物根際單位質(zhì)量土壤中AMF種數(shù)，物種多樣性指一個群落中的物種數(shù)和各物種個體數(shù)分配的均勻度［27］115-122，兩者均可反映物種數(shù)，所以兩者呈極顯著正相關(guān)關(guān)系，但Shannon?Wiener指數(shù)還可以對群落物種組成的均勻度進(jìn)行評價(jià)。從個體生長與群落物種多樣性間的關(guān)系來看，李玉潔等［45］研究表明草原土壤微生物Shannon?Wiener指數(shù)與SMBC和SMBN含量呈顯著正相關(guān)，并指出草原土壤微生物的繁殖和數(shù)量會影響SMBC和SMBN含量，土壤微生物功能多樣性變化可能是導(dǎo)致土壤微生物量變化的主要原因。AMF群落的物種多樣性也可能影響其功能多樣性進(jìn)而影響微生物量，所以Shannon?Wiener指數(shù)會與SMBC和SMBP含量呈正相關(guān)關(guān)系，與SMBP含量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系。從AMF代謝與AMF群落物種多樣性間的關(guān)系來看，大量研究表明土壤GRSP濃度與土壤團(tuán)聚體水穩(wěn)性有很高的正相關(guān)性，高濃度GRSP促使土壤結(jié)構(gòu)優(yōu)化，良好的土壤結(jié)構(gòu)為AMF生存創(chuàng)造了良好的條件，使得多種AMF和植物形成共生關(guān)系，導(dǎo)致Shannon?Wiener指數(shù)增加；另一方面，AMF群落的Shannon?Wiener指數(shù)增加意味著多種代謝強(qiáng)度的AMF存在，而高分泌潛力的AMF種類增加促使土壤GRSP含量升高。

該研究以盆內(nèi)植草的油橄欖根和根際土壤為研究對象，探究生草對油橄欖根際土壤中AMF多樣性的影響，從4種處理方式的油橄欖根際土中鑒定出4屬19種AMF，其中無梗囊霉屬和球囊霉屬是油橄欖根際土中AMF的優(yōu)勢屬。不同處理油橄欖AMF的種類、優(yōu)勢種和特有種均表現(xiàn)出較大差異，百喜草和紅三葉處理的油橄欖AMF種類最多，生草種類對油橄欖根際土中AMF多樣性產(chǎn)生重要影響，百喜草處理油橄欖根際土壤AMF的Margalef物種豐富度指數(shù)、Shannon?Wiener指數(shù)和Simpson′s指數(shù)均最高。無草處理與生草處理的油橄欖根際AMF群落Sorensen相似度較低，群落差異大。生草促進(jìn)了油橄欖根際土壤中AMF對油橄欖根的侵染，豐富了油橄欖根際的AMF資源，生草處理的油橄欖根系土壤AMF孢子密度高于無草處理。不同生草處理油橄欖根際土中T?GRSP和EE?GRSP含量均提高，百喜草和白三葉處理的T?GRSP含量顯著高于紅三葉和無草處理；百喜草、白三葉和紅三葉處理的EE?GRSP均顯著高于無草處理。果園生草能增加油橄欖根際土中土壤微生物量，特別是百喜草處理對微生物量磷和豆科生草對微生物量氮的影響較為明顯。研究結(jié)果可為篩選菌根侵染率高且GRSP分泌量多、促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)吸收效率高、對土壤抗蝕能力強(qiáng)的生草種類提供指導(dǎo)，對于合理利用果園生草具有重要意義。建議將百喜草作為適宜于油橄欖園果園生草的牧草。