焦?jié)櫚?，李朝周，劉高順，閆士朋，焦 健 （1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院， 甘肅 蘭州70070；2.甘肅省作物遺傳改良和種質(zhì)創(chuàng)新重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅蘭州 70070；.甘肅省隴南市經(jīng)濟(jì)林研究院，甘肅隴南 746000；4.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院，甘肅蘭州 70070）

叢枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi，AMF）是一類(lèi)重要的土壤真菌，能夠與陸地上80%以上的植物根系建立共生關(guān)系［1］，形成叢枝菌根（ar?buscular mycorrhiza，AM）。AMF生態(tài)適應(yīng)性強(qiáng)，能夠促進(jìn)宿主植物對(duì)礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)的吸收［2-3］。蔡邦平［4］研究了野生分布區(qū)和栽培區(qū)梅根系和根際土壤中與梅形成共生菌根的AMF多樣性；張春蘭等［5］對(duì)不同獼猴桃品種根際AMF多樣性、空間分布規(guī)律進(jìn)行了研究；劉輝等［6］調(diào)查了安徽茶區(qū)茶樹(shù)AMF資源分布情況；慕晶［7］對(duì)2種瀕危植物星葉草和桃兒七進(jìn)行AMF多樣性研究，在星葉草根系內(nèi)檢測(cè)到AMF 3屬，桃兒七根系內(nèi)檢測(cè)到4屬，并指出星葉草和桃兒七根內(nèi)群落組成有較大差異。上述研究均在單作系統(tǒng)進(jìn)行。也有學(xué)者對(duì)于2種或多種植物構(gòu)成的復(fù)合生態(tài)系統(tǒng)AMF進(jìn)行研究：CRUZ等［8］研究發(fā)現(xiàn)在三隔室根箱AMF菌絲在多種植物之間可形成連接土壤-植物系統(tǒng)的網(wǎng)絡(luò)，在植物之間交換營(yíng)養(yǎng)物；來(lái)自百喜草的根系分泌物可在體外刺激AMF菌絲生長(zhǎng)［9］。ZHANG等［10］研究發(fā)現(xiàn)AMF定殖促進(jìn)受體植物的生長(zhǎng)、根葡萄糖積累和根際土壤性質(zhì)改良。即AMF可以在形態(tài)和功能上聯(lián)結(jié)2種植物，并促進(jìn)植物生長(zhǎng)。王玉坤［11］對(duì)梨-旱稻復(fù)合系統(tǒng)研究發(fā)現(xiàn)梨園間作旱稻后影響了梨樹(shù)根際土壤真菌的多樣性，增加了2個(gè)種。已有研究證明能形成AM的植物中包含油橄欖（Olea europaea）［12］，有研究表明AM的形成能促進(jìn)油橄欖生長(zhǎng)，提高油橄欖植株對(duì)移栽、干旱、高溫、高鹽和重金屬等脅迫的抗逆性［13］。卯吉華等在云南不同栽培區(qū)進(jìn)行了油橄欖AMF的調(diào)查研究，但關(guān)于生草制油橄欖園這種復(fù)合生態(tài)系統(tǒng)的菌根發(fā)育研究還鮮有報(bào)道。

油橄欖為木樨科（Oleaceae）木樨欖屬（Olea）常綠喬木，是著名的亞熱帶木本油料兼果用樹(shù)種［14］。由于油橄欖大面積種植在易發(fā)生水土流失和養(yǎng)分流失的山地，且清耕制的坡面蓄水、抑蒸、保墑、抗蝕效果較差［15］，故有必要改善隴南山地油橄欖園的土壤管理方式。果園生草也稱(chēng)作果園生草覆蓋制，是在果園生長(zhǎng)期內(nèi)采取的一種現(xiàn)代化的土壤管理制度，即果園果樹(shù)采用寬行距（一般4～5 m）的栽培條件下，全園或行間（株間）長(zhǎng)期種植多年生豆科或禾本科牧草作為土壤覆蓋，不使土壤裸露，每年刈割1～2次后覆于樹(shù)盤(pán)下或用于發(fā)展養(yǎng)殖業(yè)，或常年不刈割。在果園草生長(zhǎng)期內(nèi)，果園保持得像綠地毯似的一種土壤管理制度，以達(dá)到果品優(yōu)質(zhì)、豐產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、綠色、安全的目的［16］。生草對(duì)果園環(huán)境的影響表現(xiàn)為減少坡地果園的水土和養(yǎng)分流失，穩(wěn)定可靠地增加土壤有機(jī)質(zhì)含量，改善土壤理化性狀、增強(qiáng)土壤肥力相關(guān)酶活性，增加土壤微生物數(shù)量等多個(gè)方面［17］。有研究表明，由AMF的菌絲和孢子壁分泌的球囊霉素相關(guān)土壤蛋白（glomalin?related soil pro?tein，GRSP）可以增加土壤有機(jī)碳庫(kù)，并改善土壤水穩(wěn)性團(tuán)聚體結(jié)構(gòu)，改善土壤團(tuán)聚體［18］，而生草制果園可以促進(jìn)AMF侵染根系，AMF在果園草和果樹(shù)根系間可以形成菌絲橋，菌絲橋可使鄰近的不同種植株之間進(jìn)行養(yǎng)分運(yùn)輸和傳遞［19］。AMF可直接在油橄欖和生草2種植物根系之間以菌絲橋連接，或者當(dāng)生草的生長(zhǎng)狀況變?nèi)鯐r(shí)AMF可轉(zhuǎn)移侵染油橄欖根系，提高果樹(shù)吸收養(yǎng)分的能力，而且生草制果園的AMF豐度較清耕制果園高，這對(duì)于解決清耕制果園坡面抗蝕效果差的問(wèn)題很有意義。

研究生草對(duì)油橄欖根際土壤AMF多樣性及其對(duì)油橄欖菌根侵染率的影響，對(duì)于合理利用果園生草具有重要意義，因此研究開(kāi)展了不同生草措施影響油橄欖根部AMF侵染和AMF生物多樣性的調(diào)查與分析，以期為油橄欖園生草草種選擇提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

油橄欖盆栽實(shí)驗(yàn)在甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心植物生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，油橄欖苗來(lái)自于甘肅省隴南市武都區(qū)大堡油橄欖園，供試油橄欖品種為豆果（Arbequina，原產(chǎn)地西班牙），苗齡2年，2017年4月5日種植，花盆規(guī)格為22 cm×20 cm（內(nèi)徑×高），在每個(gè)花盆中央移栽單株油橄欖苗，共12盆。將所有花盆分成4組，于2017年4月26日種植草。Ⅰ：間作百喜草（Paspalum notatum），品種為Pensacola A33；Ⅱ：間作白三葉草（Trifolium repens），品種 海發(fā)（Haifa）；Ⅲ：間作紅三葉（Trifolium pratense）品種為瑞德；Ⅳ：不種草。油橄欖苗的周?chē)原h(huán)形等距離種植6穴草，穴距6～9 cm，同穴播種草種子3粒，穴與油橄欖苗（盆圓心）的距離為6～9 cm。牧草種子發(fā)芽至苗高3～5 cm時(shí)給牧草間苗，每盆保留長(zhǎng)勢(shì)相對(duì)一致的6株牧草。每組3盆，草種購(gòu)于蘭州興隴草業(yè)技術(shù)服務(wù)有限公司，在2017年11月初油橄欖生長(zhǎng)停止時(shí)采集油橄欖根系及根際土，除去表層土后，每株按東西南北4個(gè)方向在5～20 cm深處采集油橄欖帶有細(xì)根的根系，輕輕抖落附在根上的土壤，將剩下的根系和土壤在無(wú)菌自封袋中輕輕抖動(dòng)約1 min作為根際土，隨后將根際土混合作為該處理的土壤樣品，油橄欖根樣清水洗凈后剪成1 cm長(zhǎng)根段，置于FAA固定液中固定，土樣裝入無(wú)菌自封袋中密封，于4℃冰箱保存。

1.2 菌根侵染情況

AMF侵染率的測(cè)定采用TROUVELOT等［20］的方法，采用φ=10%的KOH溶液消化透明，采用堿性過(guò)氧化氫溶液軟化，采用φ=5%的乳酸溶液酸化，采用φ=0.08%的曲利苯藍(lán)Trypanblue染液染色，用φ=50%的甘油洗去根的浮色，普通光學(xué)顯微鏡下觀察侵染情況［21］。侵染強(qiáng)度按照文獻(xiàn)［22］的方法計(jì)算。

1.3 油橄欖根際AMF的分離與鑒定

采用濕篩法進(jìn)行AMF孢子分離。參照文獻(xiàn)［23-24］中的AMF特征描述對(duì)AMF進(jìn)行種的鑒定。

1.4 油橄欖根際AMF多樣性指數(shù)的測(cè)定

AMF孢子密度（spore density，SD）：采用濕篩傾析法分離孢子，所用篩為從上到下疊在一起的孔徑分別為0.20、0.075、0.038 5 mm的篩子，再采用φ=50%的蔗糖溶液離心純化。每100 g風(fēng)干土中的孢子數(shù)記為孢子密度［6］。

AMF種的物種豐度（species richness，SR）、AMF分布頻度（frequency，F(xiàn)）、AMF相對(duì)多度（relative abundance，RA）、重要值（importance value，IV）方法計(jì)算參照文獻(xiàn)［6］，以IV為標(biāo)準(zhǔn)劃分各處理油橄欖根際土壤AMF優(yōu)勢(shì)度等級(jí)。相對(duì)豐度（relative abun?dance，RA）為某個(gè)土樣中某個(gè)AMF種的孢子數(shù)量占該土樣所有AMF種孢子數(shù)量的比例［25］。

AMF物種多樣性指數(shù)（diversity index，DI）：選取Margalef物種豐富度、Shannon?Wiener指數(shù)、Pielou均勻度指數(shù)和Simpson′s指數(shù)作為多樣性指標(biāo)來(lái)描述AMF的多樣性。計(jì)算公式［6，26］為

式（1）～（4）中，R為Margalef物種豐富度指數(shù)；H為Shannon?Wiener指數(shù)；E為Pielou均勻度指數(shù)；D為Simpson′s優(yōu)勢(shì)度指數(shù)；S為某樣地中孢子種數(shù)；N為某一樣方中所有物種個(gè)體數(shù)之和；pi為某一土壤樣品中某AMF的孢子數(shù)占該樣品所有孢子數(shù)的比例［27］115-122。

1.5 油橄欖根際AMF群落相似性系數(shù)的測(cè)定

按劉輝等［6］的方法測(cè)定油橄欖根際AMF群落相似性系數(shù)。

1.6 油橄欖根際土中球囊霉素相關(guān)土壤蛋白含量的測(cè)定

采用檸檬酸緩沖液提取土壤易提取球囊霉素相關(guān)土壤蛋白（easily extractable glomalin?related soil protein，EE?GRSP）和總球囊霉素相關(guān)土壤蛋白（to?tal glomalin?related soil protein，T?GRSP），用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定其含量［6］。

1.7 油橄欖根際土中微生物量含量的測(cè)定

土壤微生物量碳、氮和磷提取采用氯仿熏蒸浸提法［28］。土壤微生物量碳（soil microbial biomass car?bon，SMBC，CSMB）測(cè)定采用比色法［29］，計(jì)算公式為

式（5）中，Ec和Ec0分別為熏蒸和未熏蒸土壤浸提液中有機(jī)碳含量，mg·kg-1；0.38為校正系數(shù)。

土壤微生物量氮（soil microbial biomass nitro?gen，SMBN，NSMB）測(cè)定采用茚三酮比色法［30］，計(jì)算公式為

式（6）中，EN和EN0分別為熏蒸和未熏蒸土壤浸提液中全氮含量，mg·kg-1；0.54為校正系數(shù)。

土壤微生物量磷（soil microbial biomass phos?phorus，SMBP，PSMB）計(jì)算公式為

式（7）中，Ep和Ep0分別為熏蒸和未熏蒸土壤浸提液中磷含量，mg·kg-1；0.40為校正系數(shù)。

1.8 數(shù)據(jù)處理

利用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)差異顯著性分析和相關(guān)分析，采用Ducan法進(jìn)行處理間差異的多重比較（α=0.05）。采用Excel 2013軟件處理數(shù)據(jù)并繪圖。

2 生草對(duì)油橄欖根際土壤AMF組成的影響

2.1 油橄欖根際土壤AMF組成的分布特征

從4種處理的油橄欖根際土壤中共分離出4屬19種AMF，其中無(wú)梗囊霉屬（Acaulospora）10種，占總種數(shù)的52.63%；球囊霉屬（Glomus）7種，占總種數(shù)的36.84%；管柄囊霉屬（Funneliformis）和內(nèi)養(yǎng)囊霉屬（Entrophospora）各1種，分別占分離出AMF的5.26%，具體見(jiàn)表1。

2.2 油橄欖根際土壤AMF相對(duì)豐度特征

無(wú)草處理土壤中以縮球囊霉、孔窩無(wú)梗囊霉、細(xì)齒無(wú)梗囊霉的相對(duì)豐度為最高，白三葉處理土壤中以近明球囊霉、雙網(wǎng)無(wú)梗囊霉為最高，百喜草處理土壤中以縮球囊霉、近明球囊霉、明球囊霉為最高，紅三葉處理土壤中以雙網(wǎng)無(wú)梗囊霉、孔窩無(wú)梗囊霉、近明球囊霉為最高（表2）。

表1 不同處理油橄欖根區(qū)土壤AMF的組成Table 1 AMF composition from different treaments in ol‐ive rhizosphere soil

表2 不同處理油橄欖根區(qū)土壤中AMF的相對(duì)豐度Table 2 Relative Abundance of the AMF species from different treaments in olive rhizosphere soil

以不同處理油橄欖根際土為研究對(duì)象，統(tǒng)計(jì)其中的AMF種類(lèi)，不同處理油橄欖AMF的種類(lèi)數(shù)量、優(yōu)勢(shì)種和特有種上均表現(xiàn)出較大的差異。其中，百喜草和紅三葉處理油橄欖AMF的種類(lèi)最多，均為14種，均占AMF總種數(shù)的73.68%；白三葉處理AMF種類(lèi)為12種，占分離的AMF總種數(shù)的63.16%，而無(wú)草處理只分離鑒定出9種AMF，占AMF總種數(shù)的47.37%，這表明生草提高了油橄欖根際土壤中AMF的種類(lèi)數(shù)，以紅三葉和百喜草處理效果最佳。此外，大型無(wú)梗囊霉是紅三葉處理的特有種，沙荒球囊霉、楓香球囊霉是百喜草處理的特有種；白三葉處理無(wú)特有種（表2）。

通過(guò)統(tǒng)計(jì)油橄欖根際土中AMF種的分布頻度和相對(duì)多度并計(jì)算重要值可知：近明球囊霉、縮球囊霉、孔窩無(wú)梗囊霉、明球囊霉、脆無(wú)梗囊霉、稀有內(nèi)養(yǎng)囊霉的重要值≥50%，故將其作為油橄欖根際土壤AMF的優(yōu)勢(shì)種；雙網(wǎng)無(wú)梗囊霉、光壁無(wú)梗囊霉、大果球囊霉是常見(jiàn)種；其余10種為少見(jiàn)種，即優(yōu)勢(shì)屬包含球囊霉屬和無(wú)梗囊霉屬；無(wú)稀有種。

2.3 生草對(duì)油橄欖根際土壤AMF主要特征指標(biāo)的影響

2.3.1 油橄欖AMF侵染率

由表3可知，4種處理的油橄欖根系均有不同程度的AMF侵染，無(wú)草處理的侵染率和侵染強(qiáng)度均最低，分別為56.67%和14.13%，說(shuō)明油橄欖根部確實(shí)與AMF形成共生關(guān)系，間作百喜草的油橄欖根系侵染率和侵染強(qiáng)度均最高，分別較無(wú)草高58.82%和233.25%，5級(jí)侵染的根段數(shù)以間作白三葉的油橄欖根系最多，4級(jí)侵染的根段數(shù)以間作百喜草的油橄欖的根系最多，生草處理提高了叢植菌根的侵染率和侵染強(qiáng)度。

2.3.2 油橄欖根際土壤AMF資源分布

由表4可知，無(wú)草處理油橄欖根際土壤AMF孢子密度最小，為111.240 個(gè)·（100 g）-1，物種豐度、Margalef物種豐富度指數(shù)和Simpson′s指數(shù)均最小，說(shuō)明該處理油橄欖AMF種多樣性偏低；百喜草處理油橄欖AMF物種豐度為14，Margalef物種豐富度指數(shù)、Shannon?Wiener指數(shù)和 Simpson′s指數(shù)均最高。均勻度指數(shù)則以無(wú)草處理最高，白三葉處理最低。綜上所述，生草增加了油橄欖根際土壤中AMF的多樣性。

表3 油橄欖菌根侵染情況Table 3 Mycorrhizal infection of olive

表4 不同處理AMF的孢子密度、物種豐度和多樣性指數(shù)Table 4 Spore density,species richness and diversity index of AMF from different treatments

2.3.3 不同處理油橄欖根際AMF群落相似性

由表5可知，不同處理油橄欖根際AMF種類(lèi)組成的相似性系數(shù)為0.52～0.85。其中，紅三葉和白三葉處理之間油橄欖根際AMF群落Sorensen相似性系數(shù)最高，為0.85；百喜草與白三葉處理、紅三葉處理之間油橄欖根際AMF群落Sorensen相似性系數(shù)分別為0.67和0.76；無(wú)草處理與白三葉、百喜草、紅三葉處理之間油橄欖根際AMF群落Sorensen相似性系數(shù)分別為0.67、0.75和0.52。綜上，無(wú)草處理與2種豆科牧草處理的油橄欖根際AMF群落相似度較低，群落差異大，2種豆科牧草之間的AMF群落相似度最大，群落差異最小。

2.3.4 不同處理油橄欖根際土壤GRSP含量

由圖1可知，不同處理油橄欖根際土中T?GRSP和 EE?GRSP含量存在差異，T?GRSP含量為9.44～24.03 mg·g-1，百喜草和白三葉處理顯著高于紅三葉和無(wú)草處理（P＜0.05），百喜草和白三葉處理分別較無(wú)草處理提高154.67%和121.37%；EE?GRSP含量為2.76～9.52 mg·g-1，百喜草、白三葉和紅三葉處理的EE?GRSP均顯著高于無(wú)草處理（P＜0.05），分別是無(wú)草處理的3.45、2.53和2.87倍。說(shuō)明生草處理顯著提高了油橄欖根際土壤GRSP含量。

表5 不同處理油橄欖根際AMF群落Sorensen相似性系數(shù)Table 5 Sorensen similarity indices of AMF in different treaments

圖1 不同處理油橄欖根際土中球囊霉素相關(guān)土壤蛋白含量Fig.1 Contents of glomalin from rhizosphere soil of olive from different treaments

2.4 不同處理油橄欖根際土壤微生物量變化特征

由表6可知，間作生草可明顯提高油橄欖根際土壤的微生物量，間作百喜草處理對(duì)土壤微生物量碳（SMBC）和土壤微生物量磷（SMBP）的提高效果最顯著（P＜0.05），分別較無(wú)草處理提高248.94%和640.23%，土壤微生物量氮（SMBN）的提高以2種豆科植物——白三葉和紅三葉處理效果最顯著（P＜0.05），分別是無(wú)草處理的28.25和36.22倍。

2.5 油橄欖根際土壤AMF多樣性與AMF主要特征指標(biāo)的相關(guān)性

相關(guān)性分析結(jié)果（表7）表明，油橄欖根際土壤AMF的Shannon?Wiener指數(shù)與AMF物種豐度呈極顯著正相關(guān)（r=0.730，P＜0.01），與SMBP也呈極顯著正相關(guān)（r=0.737，P＜0.01），與EE?GRSP、SMBC呈顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.05），相關(guān)系數(shù)r值分別為0.678和0.658。Simpson′s指數(shù)與AMF的物種豐度呈顯著正相關(guān)（r=0.590，P＜0.05）。

表6 不同生草處理對(duì)油橄欖根際土壤微生物量的影響Table 6 Effect of different treatments of sod‐culture on rhizospheric soil microbial biomass in olive

表7 油橄欖根際土壤AMF多樣性與AMF主要特征指標(biāo)之間的相關(guān)關(guān)系Table 7 Relationship between AMF diversity and mainly characteristic index

3 討論

果園生草制對(duì)于土壤中AMF群落結(jié)構(gòu)而言有雙重作用，一為增加了宿主植物的種類(lèi)，二是改變了土壤管理方式。有關(guān)研究表明獨(dú)特的植物種類(lèi)和特殊生態(tài)條件的長(zhǎng)期影響是AMF演化為各自不同的優(yōu)勢(shì)種群的重要前提。宿主植物的不同使AMF的群落結(jié)構(gòu)存在較大差異：封曄等［31］研究表明8種植物根際AMF的種類(lèi)和數(shù)量有較大差異，植物種類(lèi)和根際環(huán)境對(duì)根際微生物群落結(jié)構(gòu)有較大影響；有研究表明同一國(guó)家的2種入侵植物根圍的AMF群落結(jié)構(gòu)存在明顯差異［32］，隸屬同科的線葉菊根圍分布的AMF種與加拿大一枝黃花差異很大［33］；唐建軍等［34］研究表明，加拿大一枝黃花的入侵使得本地種雞眼草根圍土壤AMF群落組成由以摩西球囊霉和幼套球囊霉為優(yōu)勢(shì)種轉(zhuǎn)為以地球囊霉和幼套球囊霉為優(yōu)勢(shì)種；蔡曉布等［35］認(rèn)為針茅屬植物種類(lèi)對(duì)AMF物種多樣性具有重要影響；姚青等［36］通過(guò)比較不同草種根際土壤中AMF的PCR?DGGE圖譜，發(fā)現(xiàn)藿香薊、柱花草和百喜草3種草根際的AMF群落結(jié)構(gòu)存在差異。而不同土壤管理方式下根際AMF的優(yōu)勢(shì)種也有所差異：張錦娟［37］研究發(fā)現(xiàn)，生草處理的根際土壤中聚叢球囊霉（G.aggregatum）、近明球囊霉（G.claroideum）為優(yōu)勢(shì)種，透光球囊霉（G.diaphanum）、幼套多孢囊霉（G.etunicatum）、根內(nèi)球囊霉（G.intraradices）、扭形球囊霉（G.tortuo?sum）、G.sp1為常見(jiàn)種；免耕處理的根際土壤中幼套多孢囊霉（G.etunicatum）為優(yōu)勢(shì)種，聚叢球囊霉（G.aggregatum）、近明球囊霉（G.claroideum）為常見(jiàn)種。筆者研究表明，不同處理油橄欖AMF的種類(lèi)數(shù)量、優(yōu)勢(shì)種和特有種上均表現(xiàn)出較大的差異。其中百喜草和紅三葉處理的油橄欖AMF種類(lèi)最多；白三葉處理的AMF種類(lèi)為12種，而無(wú)草處理只分離鑒定出9種AMF，這表明生草提高了油橄欖根際土壤中AMF的種類(lèi)數(shù)，以紅三葉和百喜草處理效果最佳。此外，百喜草處理下縮球囊霉、近明球囊霉、明球囊霉的相對(duì)豐度最高，紅三葉處理下雙網(wǎng)無(wú)梗囊霉、孔窩無(wú)梗囊霉、近明球囊霉的相對(duì)豐度最高，而白三葉處理下雙網(wǎng)無(wú)梗囊霉和近明球囊霉的相對(duì)豐度最高大。

果園生草制可以改變根際土壤AMF的群落結(jié)構(gòu)，從而改變油橄欖根際土中AMF的多樣性，百喜草處理油橄欖AMF的Margalef物種豐富度指數(shù)、Shannon?Weiner指數(shù)和 Simpson′s指數(shù)均最高。無(wú)草處理與生草處理的油橄欖根際AMF群落Sorensen相似度較低，群落差異大。說(shuō)明間作生草的小生境所帶來(lái)的空間異質(zhì)性對(duì)AMF的優(yōu)勢(shì)種、屬和遺傳多樣性產(chǎn)生了影響。

果園生草對(duì)根際土中AMF的生態(tài)效應(yīng)主要包括改變?nèi)郝浣Y(jié)構(gòu)和多樣性，而個(gè)體效應(yīng)主要包括AMF的侵染和代謝2個(gè)方面。從AMF侵染的角度來(lái)說(shuō)，仝瑞建等［38］研究表明生草區(qū)的山地長(zhǎng)壽沙田柚成年果樹(shù)菌根侵染率和AMF孢子密度均高于清耕區(qū)，生草處理可顯著提高這2個(gè)指標(biāo)；曾明等［39］研究發(fā)現(xiàn)百喜草和白三葉草生草區(qū)土壤AMF孢子數(shù)和柑桔根系菌根侵染率顯著高于清耕區(qū)；馬永甫［2］調(diào)查發(fā)現(xiàn)生草奉節(jié)臍橙園的AMF菌根侵染率高于清耕果園，生草區(qū)的AMF孢子密度最高；張錦娟［37］發(fā)現(xiàn)生草處理更有利于提高柑橘根際土壤中AMF的多樣性，生草管理的泡囊侵染率、叢枝侵染率、總侵染率與孢子密度顯著優(yōu)于免耕。筆者研究發(fā)現(xiàn)生草促進(jìn)了油橄欖根際土壤中AMF對(duì)油橄欖根的侵染，可能是因?yàn)椴莞翟谕寥乐械拇┎迨杷闪送寥溃寥赖耐庑栽鰪?qiáng)，這為好氣性的AMF孢子萌發(fā)與生長(zhǎng)提供了有利條件，此外，AMF可以侵染生草，與生草形成菌根，這也促進(jìn)了孢子的萌發(fā)。因此，該研究中生草處理的油橄欖根系A(chǔ)MF孢子密度高于無(wú)草處理。

從AMF代謝的角度來(lái)說(shuō)，AMF的菌絲和孢子壁可分泌GRSP，土地利用方式會(huì)影響土壤中GRSP含量及分布［40］。ZOU等［41-42］研究發(fā)現(xiàn)間作白三葉可顯著增加柑橘園土壤中GRSP和土壤有機(jī)碳、水穩(wěn)性聚集體的濃度；WANG等［43］研究表明植草柑橘園中的AMF繁殖體和GRSP含量顯著高于清耕果園。筆者研究發(fā)現(xiàn)不同生草處理油橄欖根際土中T?GRSP和EE?GRSP含量均提高，百喜草和白三葉處理的T?GRSP含量顯著高于紅三葉和無(wú)草處理；百喜草、白三葉和紅三葉處理的EE?GRSP均顯著高于無(wú)草處理，這與ZOU等［41］的研究結(jié)果相似。

果園生草能通過(guò)改變果樹(shù)根際土中AMF的群落結(jié)構(gòu)、多樣性、侵染、增殖和代謝特性來(lái)綜合影響土壤微生物量。油橄欖根際土中微生物量呈現(xiàn)出生草處理高于無(wú)草的現(xiàn)象，特別是百喜草處理對(duì)微生物量磷和豆科生草對(duì)微生物量氮的影響較為明顯。關(guān)于SMBC、SMBN、SMBP含量在各生草處理間的差異，可能的原因有：生草促進(jìn)AMF的侵染和定殖，使得AMF豐度和生物量增加，所以SMBC含量會(huì)增加，AMF對(duì)不同草種的侵染狀況不同，所以SMBC含量存在差異，紅三葉和白三葉為豆科植物，可以促進(jìn)固氮菌的活動(dòng)，促進(jìn)土壤中氮循環(huán)的速率，可能造成SMBN含量增加。百喜草為禾本科作物，所以3種生草之間SMBN含量存在差異，固氮菌的增加也可促進(jìn)SMBC含量增加；有研究表明藿香薊、柱花草和百喜草3種草根系的磷含量存在顯著差異，AMF可以促進(jìn)植物對(duì)磷元素的吸收，王菲［44］指出植物可為真菌和解磷細(xì)菌提供充足的碳水化合物以滿足其生長(zhǎng)代謝需要，進(jìn)而充分發(fā)揮其功能，將從土壤有機(jī)磷中活化出來(lái)的磷再通過(guò)真菌的根外菌絲傳遞給植物。真菌可將磷資源轉(zhuǎn)化成微生物量磷，這部分磷也是土壤中植物有效磷的潛在磷庫(kù)，所以種草會(huì)導(dǎo)致SMBP含量增加，不同生草之間SMBP存在差異。筆者發(fā)現(xiàn)間作百喜草的油橄欖根系侵染率和侵染強(qiáng)度均最高，即不同草處理下AMF相關(guān)性狀指標(biāo)存在差異。

在生態(tài)系統(tǒng)中，物種數(shù)目、個(gè)體生長(zhǎng)和代謝會(huì)與群落特征相互影響。從回歸分析（表7）來(lái)看，油橄欖根際土壤AMF的Shannon?Wiener指數(shù)與AMF物種豐度呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與SMBP含量也呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01），與EE?GRSP、SMBC含量呈顯著正相關(guān)（P＜0.05）。從物種數(shù)與群落物種多樣性間的關(guān)系來(lái)看，AMF物種豐度指植物根際單位質(zhì)量土壤中AMF種數(shù)，物種多樣性指一個(gè)群落中的物種數(shù)和各物種個(gè)體數(shù)分配的均勻度［27］115-122，兩者均可反映物種數(shù)，所以?xún)烧叱蕵O顯著正相關(guān)關(guān)系，但Shannon?Wiener指數(shù)還可以對(duì)群落物種組成的均勻度進(jìn)行評(píng)價(jià)。從個(gè)體生長(zhǎng)與群落物種多樣性間的關(guān)系來(lái)看，李玉潔等［45］研究表明草原土壤微生物Shannon?Wiener指數(shù)與SMBC和SMBN含量呈顯著正相關(guān)，并指出草原土壤微生物的繁殖和數(shù)量會(huì)影響SMBC和SMBN含量，土壤微生物功能多樣性變化可能是導(dǎo)致土壤微生物量變化的主要原因。AMF群落的物種多樣性也可能影響其功能多樣性進(jìn)而影響微生物量，所以Shannon?Wiener指數(shù)會(huì)與SMBC和SMBP含量呈正相關(guān)關(guān)系，與SMBP含量呈極顯著正相關(guān)關(guān)系。從AMF代謝與AMF群落物種多樣性間的關(guān)系來(lái)看，大量研究表明土壤GRSP濃度與土壤團(tuán)聚體水穩(wěn)性有很高的正相關(guān)性，高濃度GRSP促使土壤結(jié)構(gòu)優(yōu)化，良好的土壤結(jié)構(gòu)為AMF生存創(chuàng)造了良好的條件，使得多種AMF和植物形成共生關(guān)系，導(dǎo)致Shannon?Wiener指數(shù)增加；另一方面，AMF群落的Shannon?Wiener指數(shù)增加意味著多種代謝強(qiáng)度的AMF存在，而高分泌潛力的AMF種類(lèi)增加促使土壤GRSP含量升高。

該研究以盆內(nèi)植草的油橄欖根和根際土壤為研究對(duì)象，探究生草對(duì)油橄欖根際土壤中AMF多樣性的影響，從4種處理方式的油橄欖根際土中鑒定出4屬19種AMF，其中無(wú)梗囊霉屬和球囊霉屬是油橄欖根際土中AMF的優(yōu)勢(shì)屬。不同處理油橄欖AMF的種類(lèi)、優(yōu)勢(shì)種和特有種均表現(xiàn)出較大差異，百喜草和紅三葉處理的油橄欖AMF種類(lèi)最多，生草種類(lèi)對(duì)油橄欖根際土中AMF多樣性產(chǎn)生重要影響，百喜草處理油橄欖根際土壤AMF的Margalef物種豐富度指數(shù)、Shannon?Wiener指數(shù)和Simpson′s指數(shù)均最高。無(wú)草處理與生草處理的油橄欖根際AMF群落Sorensen相似度較低，群落差異大。生草促進(jìn)了油橄欖根際土壤中AMF對(duì)油橄欖根的侵染，豐富了油橄欖根際的AMF資源，生草處理的油橄欖根系土壤AMF孢子密度高于無(wú)草處理。不同生草處理油橄欖根際土中T?GRSP和EE?GRSP含量均提高，百喜草和白三葉處理的T?GRSP含量顯著高于紅三葉和無(wú)草處理；百喜草、白三葉和紅三葉處理的EE?GRSP均顯著高于無(wú)草處理。果園生草能增加油橄欖根際土中土壤微生物量，特別是百喜草處理對(duì)微生物量磷和豆科生草對(duì)微生物量氮的影響較為明顯。研究結(jié)果可為篩選菌根侵染率高且GRSP分泌量多、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收效率高、對(duì)土壤抗蝕能力強(qiáng)的生草種類(lèi)提供指導(dǎo)，對(duì)于合理利用果園生草具有重要意義。建議將百喜草作為適宜于油橄欖園果園生草的牧草。