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        UHPLC測定不同產(chǎn)地芍藥根的有效成分

        2019-04-02 07:59:08石鈺
        人人健康 2019年3期
        關鍵詞:芍藥苷有效成分質(zhì)量評價

        石鈺

        【關鍵詞】芍藥根;芍藥苷;有效成分;UHPLC測定試驗;質(zhì)量評價

        我國芍藥種類以白芍藥與赤芍藥為主,它們被主要種植在四川、浙江、安徽等各省。對不同產(chǎn)地芍藥的芍藥根有效成分及質(zhì)量進行評價能夠了解芍藥根的質(zhì)量差異,而所采用的試驗測定方法主要是UHPLC測定。

        一、關于UHPLC測定試驗

        UHPLC測定試驗的全稱是UHPLC-DAD技術,它是一種建立在芍藥苷、芍藥根、芍藥內(nèi)酯苷、沒食子酸等8種各大有效成分基礎之上的吸收波長檢測方法。該試驗主要針對產(chǎn)自于我國四川、浙江、安徽等各省的白芍藥進行樣品試驗,試驗樣品數(shù)量高達60份以上,專門測定芍藥根中的8種有效成分。另外,還會對不同生長年限的芍藥根質(zhì)量進行測定試驗分析,以此為我國白芍藥主產(chǎn)地建立更大規(guī)模種植基地提供合理有效的科學依據(jù)。

        二、不同產(chǎn)地白芍藥根的UHPLC測定試驗應用分析

        本文將針對四川、浙江這兩大白芍藥產(chǎn)地的白芍藥根進行UHPLC測定試驗,專門對兩省白芍藥根中的各種有效成分與質(zhì)量進行對比分析。

        (一)試驗儀器

        在針對白芍藥根的UHPLC測定試驗應用中主要包括了超高效液相色譜儀、四元梯度泵、自動進樣儀、柱溫箱、電子天平以及雙頻數(shù)控超聲波清洗儀等等。

        (二)藥品與試劑

        UHPLC試驗中所采用藥品與試劑包括了芍藥根、芍藥苷、五沒食子酰葡萄糖、丹皮酚、苯甲酰芍藥苷等等。藥材方面結合四川、浙江兩省的芍藥根藥材樣品首先進行根莖剪除處理,然后快速沖洗除去其中泥沙,最后烘干備用。

        (三)試驗方法

        1色譜條件試驗:在試驗過程中首先要明確一點色譜條件,其色譜柱應該為lOOmmx 4.5mmx 2.8μm,另外它的流動相選擇了濃度為0.05%的乙腈磷酸溶液。對芍藥根進行7分鐘左右的梯度洗脫,保持柱溫在30℃左右,且洗脫液體流速保持在l.OmL/min左右,如此測量其進樣量應該在3μL左右,測量檢測波長應該為250nm。此時芍藥根中的氧化芍藥苷含量應該為258nm(四川)和269nm(浙江),丹皮酚含量分別為274nm和291nm,兒茶素含量分別為280mn和282nm。在普通色譜條件下,兩省的芍藥根樣品中8種待測有效成分的分離度均保持良好。

        2 溶液制備線性試驗:UHPLC試驗中還要對樣品溶液制備線性范圍進行考察,主要是對兩省的芍藥根樣品在量瓶中加入甲醇到制定刻度位置(分別為0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2刻度)然后得出的混合對照品溶液濃度(前為四川、后為浙江)分別為122/128、96/98、60/70、80/78、303.60/350.21、51.28/47.29μg/mL。在甲醇定容到刻度位置后搖勻處理,在經(jīng)過0.24μm的微孔濾膜過濾以后獲得上述6個濃度梯度的最終混合對照品溶液。根據(jù)對比試驗結果表明,兩省芍藥根中的8種有效成分指標均在合理濃度范圍內(nèi),且它們的峰面積線性關系表現(xiàn)均相對良好。

        3 精密度試驗:除上述試驗外,還對兩省的芍藥根進行了精密度試驗,即取用兩省各一份供試品溶液,連續(xù)進行6次精密度試驗,專門測定兩省芍藥根中的有效成分峰面積。就以沒食子酸為例,四川省芍藥根中的沒食子酸峰面積達到0.64%,而浙江省芍藥根中的沒食子酸峰面積達到0.77%,這表明試驗用儀器精密度相對良好,準確測量出兩省芍藥根的峰面積。

        4 含量測定試驗:最后對兩省芍藥根進行有效成分含量測定試驗,其中每一份芍藥根的粉末含量取2份,并按照前文所提到的色譜條件測定方法進行測定,再基于回歸方程計算出兩省芍藥根中8種有效成分的供試品溶液含量濃度(μg/mL),另外還有藥材粉末含量(mg/g)。最后計算兩份平行芍藥根樣品中的藥材粉末含水量。以丹皮酚為例,四川省芍藥根的丹皮酚含量在0.0486mg/g,而浙江芍藥根的丹皮酚含量為0.0432mg/g,兩省(四川、浙江)的芍藥根樣品有效成分PCA綜合得分分別為0.4535和0.0182[1]。

        (四)試驗結果分析

        最后在兩省芍藥根的質(zhì)量評價中,專門挑選干燥待測樣品進行測量。其中四川產(chǎn)的芍藥根中沒食子算的葡萄糖含量相對較高,而浙江省產(chǎn)的芍藥根中兒茶素含量較高。如果單純以芍藥苷作為基礎指標進行對比分析,可能難以評價兩省芍藥根的正確質(zhì)量,因此還要結合兩省芍藥根中的8種有效成分含量進行主成分綜合分析,最終得出綜合質(zhì)量評價結果[2]。

        總結:

        在色譜條件優(yōu)化前提下,本文專門建立了UHPLC測定試驗,對四川省、浙江省兩省的芍藥根中8種不同有效成分指標進行測定,該測定方法分析時間較短且重復性良好,結果準確,非常適用于對白芍藥的質(zhì)量及有效成分檢測,對兩省的芍藥生產(chǎn)管理成本優(yōu)化與采收年限確定(3~4年收)具有利好參考作用。

        [參考文獻]

        [1]劉永強,馬越,楊博文,等.UHPLC測定不同產(chǎn)地芍藥根的有效成分[J].中藥材,2016,39(5):980-985.

        [2]李鳳玉,藏小丹,曹陽.HPLC法測定牡丹江地區(qū)栽培芍藥根中芍藥苷的含量[J]北方園藝,2017(20).

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