劉 卓，劉 莉，蘭明紅，沈 巍，霍 軍

（海軍航空大學(xué)一基地錦西場站醫(yī)院，遼寧 葫蘆島 215000）

中藥的療效不僅與藥材的質(zhì)量及炮制方法有關(guān)，還與其煎煮工藝密切相關(guān)。李時(shí)珍稱“凡服湯藥，雖品物專精，修治如法，而煎藥者魯莽造次，水火不良，火候失度，則藥亦無功”。 清代醫(yī)家徐靈胎稱“煎藥之法最宜深講，藥之效與不效，全在于此”。桑菊飲方劑出自清朝吳瑭的《溫病條辨》卷一，屬于辛涼解表劑，具有宣肺止咳、疏風(fēng)清熱之功效，常用于治療外感風(fēng)熱、咳嗽初起之證[1]。此方劑中的桑葉、菊花為君藥，主要的有效成分是蘆丁和綠原酸，均具有抗炎、抗病毒等作用[2-3]。為了進(jìn)一步探討制備桑菊飲的最佳煎煮工藝，筆者按照《溫病條辨》中所記載的古代煎煮法、臨床醫(yī)療機(jī)構(gòu)煎煮法、古今結(jié)合煎煮法和正交試驗(yàn)優(yōu)選出的煎煮法分別制備桑菊飲，并按照2010版《中國藥典》中規(guī)定的方法測定使用上述4種煎煮法制備的桑菊飲中蘆丁和綠原酸的含量[4-6]。然后，對(duì)用這四種方法制備的桑菊飲進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，從中選出制備桑菊飲的最優(yōu)煎煮工藝。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 儀器與試劑

1.1 研究儀器

本次研究使用的儀器為高效液相色譜儀(由美國RerkinElmer公司提供，型號(hào)為Altus A10)、PDA檢測器、Empower3數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)、360EP 125SM型電子分析天平（由德國Sartorius賽多利斯提供），數(shù)控超聲波清洗器(由昆山市超聲儀器有限公司提供，型號(hào)為HS6150)，水浴鍋(由鞏義市英峪予華儀器廠提供)， WX-9A祝爾康煎藥壺(由廣州文新電器有限公司提供)。

1.2 研究試劑

1）分析試劑：甲醇的純度為色譜純，水為重蒸水，其他試劑的純度均為分析純。2）對(duì)照品：蘆丁對(duì)照品(批號(hào)為100080—200306)和綠原酸對(duì)照品(批號(hào)為110753—200413)，均由中國藥品生物制品檢定所提供。3）桑葉、菊花、薄荷等飲片均購于安泰堂中藥飲片有限公司，并由甘肅省中醫(yī)院質(zhì)檢部鑒定為正品。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方

本次研究所用處方出自清朝吳瑭《溫病條辨》卷一，即由桑葉7.5 g、菊花3 g、杏仁6 g、薄荷2.5 g、連翹5 g、桔梗6 g、生甘草2.5 g、蘆葦6 g八味藥組成。

2.2 制備桑菊飲的方法

2.2.1 方法A 按照《溫病條辨》中記載的桑菊飲煎煮法“水二杯，煮取一杯，日二服”制備，方法是：按照處方比例分別稱取三份藥材，分別將藥材放入電磁壺中，在每份藥材中加入400 ml的水，煮沸后再煎煮15 min，取濾液200 ml，備用。

2.2.2 方法B 按照臨床醫(yī)療機(jī)構(gòu)所用的煎煮法制備桑菊飲，方法是：按照處方比例分別稱取三份藥材，分別將藥材放入電磁壺中，第一煎在藥材中加9倍量的水（360 ml）浸泡30 min，煮沸后再煎煮15 min，過濾取藥汁；第二煎在過濾后的藥渣中加入4倍量的水（160 ml），煮沸后再煎煮10 min，過濾取藥汁；合并兩次所得的藥汁，備用。

2.2.3 方法C 結(jié)合方法A和方法B制備桑菊飲，方法是：按照處方比例稱取三份藥材，將藥材放入電磁壺中，第一煎在每份藥材中加入7倍量的水（280 ml）浸泡30 min，煮沸后再煎煮7 min，取藥汁140 ml；第二煎在過濾后的藥渣中加入3倍量的水（120 ml），煮沸后再煎煮8 min, 取藥汁60 ml；合并兩次所得的藥汁，備用。

2.2.4 方法D 按照正交試驗(yàn)優(yōu)選出的煎煮法制備桑菊飲，方法是：按照處方比例稱取三份藥材，將藥材放入電磁壺中，第一煎在每份藥材中加入10倍量的水（400 ml）浸泡30 min，煮沸后再煎煮30 min，濾出藥汁；第二煎在過濾后的藥渣中加入10倍量的水（400 ml），煮沸后再煎煮30 min，濾出藥汁；合并兩次所得的藥汁，備用[7]。

2.3 對(duì)用這四種方法制備的桑菊飲進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)

2.3.1 對(duì)桑菊飲中蘆丁和綠原酸的含量進(jìn)行檢測[8-9]

2.3.1.1 色譜條件 1）色譜柱：Waters Symmetry C 18 (250 mm×4.6 mm，5 μm)。2）流動(dòng)相：甲醇(A)-0.1%的磷酸溶液(B)。3）洗脫程序：0～10 min、A為30%，30 min、A為5O%，40 min、A為60%。4）流速：1 ml/min。5）柱溫為35℃。6）檢測波長：350 nm。7）進(jìn)樣量：l0μl。

2.3.1.2 制備對(duì)照品溶液 分別精密稱取0.85 mg的綠原酸對(duì)照品和1 mg的蘆丁對(duì)照品，將其放入10 mL的容量瓶中，加入甲醇至預(yù)設(shè)刻度，制成每0.085 mg/ml的綠原酸對(duì)照品溶液和0.1 mg/ml的蘆丁對(duì)照品溶液。

2.3.1.3 制備供試品溶液 精密吸取用四種方法所制的桑菊飲各2 ml，分別將其放入5 ml的容量瓶中，加入甲醇定容至預(yù)設(shè)刻度，搖勻后作為供試品溶液。

2.3.1.4 線性關(guān)系考察 分別精密吸取綠原酸對(duì)照品貯備液0.05 mL、0.1 mL、0.15 mL、0.3 mL、0.4 mL，將其分別放入l mL的容量瓶中，加入甲醇稀釋至預(yù)設(shè)刻度后搖勻，使藥液的濃度分別為 4.25 μg/mL、8.5 μg/mL、12.75 μg/mL、25.5 μg/mL、34 μg/mL。精密吸取濃度為0.1 mg/ml的蘆丁對(duì)照品溶液0.005 mL、0.01 mL、0.015 mL、0.03 mL、0.4 mL，分別將其放入l mL的容量瓶中，加入甲醇稀釋至預(yù)設(shè)刻度后搖勻，使藥液的濃度分別為0.5 μg/mL、1.0 μg/mL、1.5 μg/mL、3.0 μg/mL、4.0 μg/mL。分別吸取上述對(duì)照品溶液各10 μL，加入液相色譜儀中，按照上述色譜條件測定藥液的峰面積值，以峰面積均值(Y)為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣的濃度(X)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出綠原酸的回歸方程Y=14.079X-4.4328，r=0.999 5(n=5)，蘆丁的回歸方程Y=1633.7X+17.898，r=0.999 2（n=5）。結(jié)果顯示：綠原酸的進(jìn)樣量在4.25～34 μg/mL的范圍內(nèi)、蘆丁的進(jìn)樣量在0.5～4 μg/mL的范圍內(nèi)可呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系。

2.3.1.5 樣品含量的測定 分別精密吸取10 μL的供試品溶液注入到液相色譜儀中，每個(gè)樣品均平行進(jìn)樣2次，使用外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算樣品中綠原酸的含量和蘆丁的含量。結(jié)果見表1。

2.3.1.6 對(duì)樣品進(jìn)行綜合評(píng)估 分別精密吸取10 ml的樣品藥液，將其放在已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，再將其放入溫度為105℃的烘箱中干燥3 h，取出后放入干燥器內(nèi)冷卻30 min，迅速精密稱重，計(jì)算浸出物的得率[10]。按照綠原酸和蘆丁的2次進(jìn)樣指標(biāo)，對(duì)樣品藥液進(jìn)行綜合評(píng)分。綜合加權(quán)評(píng)分公式：綜合評(píng)分=(綠原酸平/綠原酸max+蘆丁平/蘆丁max)×80+浸出物平／浸出物max×20[11]。將干膏率、綠原酸和蘆丁作為指標(biāo)，對(duì)四組樣品藥液進(jìn)行綜合評(píng)估。結(jié)果顯示：用古今結(jié)合法制備的桑菊飲中綠原酸和蘆丁的含量明顯高于用其他3種煎煮法制備的桑菊飲；用正交試驗(yàn)優(yōu)選的煎煮法制備的桑菊飲其浸出物的得率最高；用古今結(jié)合法制備的桑菊飲的綜合評(píng)分最高。結(jié)果見表1。

表1 對(duì)用4種方法制備的桑菊飲進(jìn)行綜合評(píng)估的結(jié)果

2.3.2 對(duì)用古今結(jié)合法制備桑菊飲進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)的結(jié)果以古今結(jié)合法為煎煮工藝標(biāo)準(zhǔn)，制備3批樣品后，對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。結(jié)果顯示：用古今結(jié)合煎法制備的桑菊飲的綜合評(píng)分最高，且用此法煎煮所得三批湯劑進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)的結(jié)果相比無差異。這說明，此工藝穩(wěn)定可行，可將其作為制備桑菊飲的標(biāo)準(zhǔn)化煎煮工藝。結(jié)果見表2。

表2 對(duì)用古今結(jié)合法制備桑菊飲進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)的結(jié)果（%）

3 討論

筆者通過查閱文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)目前對(duì)桑菊飲煎煮方法的研究僅局限于單一的煎煮法，未對(duì)不同的煎煮方法進(jìn)行相互對(duì)比研究。在《溫病條辨》中未明確記載桑菊飲的煎煮時(shí)間，只注明“水二杯，煮取一杯……”；在現(xiàn)代中藥研究中對(duì)解表藥的煎煮要求為“用武火迅速煮沸，改用文火維持lO～15 min即可”[12]；在臨床醫(yī)療機(jī)構(gòu)煎藥室的質(zhì)量管理規(guī)范中要求“解表類中藥不宜久煎，煮沸后再煎煮15～20 min…第二煎的煎煮時(shí)間應(yīng)當(dāng)比第一煎的時(shí)間略縮短”；在金仲達(dá)等[13]通過正交試驗(yàn)法優(yōu)選的桑菊飲煎煮工藝為“浸泡30 min加8倍量的水，煎煮2次，每次煎煮30 min”。古代與現(xiàn)代的中藥煎煮方法在煎藥器具、浸泡時(shí)間、煎煮次數(shù)、煎煮方法方面均存在一定的差異[14]。本次研究的結(jié)果證實(shí)，與其他煎煮法相比，用古今結(jié)合煎法制備桑菊飲的效果最為理想，可較好地保留湯劑中藥物的有效成分。因此，可將此煎煮法作為制備桑菊飲的標(biāo)準(zhǔn)化煎煮工藝。