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        海產貝類脂溶性貝毒素的高效液相色譜—串聯(lián)質譜分析方法及其食用安全性評價

        2018-11-01 06:07:36申慧慧陳軍輝徐秀麗潘蕾何秀平王小如
        分析化學 2018年6期
        關鍵詞:串聯(lián)質譜高效液相色譜食品安全

        申慧慧 陳軍輝 徐秀麗 潘蕾 何秀平 王小如

        摘 要 針對海產貝類存在多種脂溶性貝毒素復合污染的現(xiàn)狀,采用高效液相色譜-串聯(lián)質譜聯(lián)用技術(HPLC-MS/MS)對海產貝類中的常見脂溶性貝毒素進行同步檢測,結合多種毒素復合污染的風險評估方法,用于市售海產貝類的食用安全風險評價。結果表明,在選定的實驗條件下,8種典型脂溶性貝毒素加標回收率在63.2%~88.8%之間,方法的精密度(相對標準偏差(RSD)≤14.5%)和靈敏度(檢出限為0.5~2.7 ng/g)良好,能滿足海產貝類樣品的檢測要求。在采集的105個市售海產貝類樣品中,42.86%的樣品中至少檢出了一種脂溶性貝毒素,其中鰭藻毒素-1(DTX1)的含量均值最高,為47.6 μg/kg,對海產貝類污染最嚴重。根據(jù)每日人均貝類攝入量(TDI)和各種脂溶性貝毒素的急性中毒參考劑量(ARfD),通過計算綜合風險指數(shù)∑ERI進行市售海產貝類食用安全性評價,結果表明,在所檢測的樣品中,存在食用安全隱患和高風險的市售海產貝類比率為19.05%,其中扇貝的食用安全風險最大。本研究建立的基于海產貝類中脂溶性貝毒素物質組復合污染的風險評價方法,與歐盟的海產品貝毒素限量標準評價方法(單指標法)相比更加嚴格,可以使貝類食用者更好地規(guī)避中毒風險。

        關鍵詞 高效液相色譜-串聯(lián)質譜; 海產貝類; 脂溶性貝毒素; 復合污染; 食品安全

        1 引 言

        海產貝類種類繁多,味道鮮美,是人們餐桌上常見的海洋食品。由于近海環(huán)境富營養(yǎng)化加劇,有害藻華時有發(fā)生,加之海產貝類獨特的濾食習性,對海洋有害藻中的毒素具有很強的蓄積能力[1,2]。因此,世界各地的海產貝類消費者均不同程度地遭受染毒海產品帶來的健康威脅。目前已發(fā)現(xiàn)的海洋貝毒素及其衍生物有200多種,其中脂溶性貝毒素約占90%[3],常見的脂溶性貝毒素主要包括大田軟海綿酸(OA)及其衍生物鰭藻毒素-1(DTX1)、蝦夷扇貝毒素(YTX)、原多甲藻酸毒素(AZAs)、米氏裸甲藻毒素(GYM)、螺環(huán)內酯毒素(SPX1)、扇貝毒素-2(PTX2)等。食用脂溶性貝毒素污染的貝類而引起的中毒事件,在全球范圍內時有發(fā)生。我國海產貝類也正遭受不同種類脂溶性貝毒素的污染威脅[4],中毒事件屢有發(fā)生[5,6]。因此,需加強對市售海產貝類中脂溶性貝毒素的檢測及其食用安全風險評價,保護食用者的健康。

        目前,用于海產品中脂溶性貝毒素檢測的方法主要包括小鼠生物法[7]、酶聯(lián)免疫吸附法[8]、高效液相色譜法[9]和液相色譜-質譜/多級質譜法[10]等。與前幾種方法相比,液相色譜-串聯(lián)質譜法具有檢測速度快、準確性高、檢出限低以及可以同時檢測多種類型貝毒素的優(yōu)點而被廣泛應用[10~12],也是目前檢測貝類中脂溶性貝毒素的最佳方法。然而,僅憑海產貝類中幾種主要脂溶性貝毒素的含量測定結果,仍然無法準確評價貝類的食用安全風險,特別是對于被多種脂溶性貝毒素復合污染的海產品,仍需發(fā)展適用性較強的食用安全風險評價方法。

        目前,在國際上針對海產品中的幾種常見脂溶性貝毒素,基于其小鼠毒理實驗數(shù)據(jù)[13],制定了相關的限量標準,用于指導管理部門進行海產品食用安全性評價。例如,歐盟食品安全局(European Food Safety Authority, EFSA)對貝類中的OA、DTX、AZA、PTX毒素的限量標準均設定為160 μg/kg,YTX的限量標準為1000 μg/kg[14,15]; GYM和SPX毒素目前還沒有設定限量標準。但是,我國僅針對OAs系列脂溶性貝毒素設定了限量標準,其它脂溶性貝毒素均未設定限量標準。然而,采用EFSA制定的限量標準法,僅適用于評價受一種或少數(shù)幾種高含量(超過限量值)毒素污染海產品的食用安全性,對于被低濃度或中等濃度的多種脂溶性貝毒素復合污染的海產品,則無法給出可靠的食用安全性評價結果。因此,針對海產貝類存在多種脂溶性貝毒素復合污染的現(xiàn)狀,發(fā)展基于多種脂溶性貝毒素污染綜合評價的海產貝類食用安全風險方法極為緊迫。本研究采用高效液相色譜-多級質譜分析海產貝類中多種脂溶性貝毒素, 建立一種基于多種脂溶性貝毒素污染綜合評價的海產貝類食用安全風險評估新方法,并用于市售海產貝類的食用安全風險評價。

        4 結 論

        采用本研究建立的基于脂溶性貝毒素物質組HPLC-MS/MS分析的海產貝類食用安全風險評價方法,可以得出多種脂溶性貝毒素復合污染造成的總和食用安全風險,與歐盟食品安全局的限量標準法相比,能夠更嚴苛地評價市售海產品的食用安全質量,降低消費者食用海產貝類的中毒風險,更好地保障貝類消費者的健康。在后續(xù)研究中可以采用液相色譜-高分辨率質譜聯(lián)用技術,對市售海產貝類中有文獻報道的所有貝毒素進行篩查分析,將更多種類的貝毒素及其衍生物納入到海產貝類食用安全性評價指標體系中。

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        Abstract In view of the present situation that edible marine shellfishes are combinedly contaminated by different kinds of lipophilic toxins, common lipophilic shellfish toxins in marine shellfishes were simultaneously detected by liquid chromatography-tandem mass spectrometry, and the safety risk of commercial marine shellfish was evaluated using the risk assessment method based on combined contamination of various toxins. Under the optimum conditions, satisfactory recoveries (63.3%-88.8%), precision (relative standard deviations RSD≤14.5%) and sensitivity (limit of detection in the range of 0.5-2.7 ng/g) of the method were achieved for all the analytes. Among the 105 commercially available shellfish samples, 42.86% of the samples had at least a kind of toxin. The highest average content was 47.6 μg/kg of DTX1, which was the most serious contaminant for marine shellfishes. The total Expose Risk Index (ΣERI) was calculated based on Tolerable Daily Intake (TDI) and Acute Reference Dose (ARfD) of each toxin to evaluate the safety risk of commercial marine shellfish. The results showed that the ratio of commercially available marine shellfish with safety risk was 19.05% and the food safety risk of scallop was the highest. In summary, a new method based on the combined contamination of lipophilic shellfish toxins was successfully developed for risk assessment of the commercial marine shellfish. The proposed method is more harsh compared with the European Food Safety Authority (EFSA) regulation and can make shellfish consumers better to avoid the risk of poisoning.

        Keywords Liquid chromatography-tandem mass spectrometry; Marine shellfishes; Lipophilic shellfish toxins; Combined contamination; Food safety

        (Received 10 August 2017; accepted 28 March 2018)

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