田家浩，姜東琪，李記明，張衛(wèi)強(qiáng)，姜文廣，崔文娟，許 程，趙玉平*

（1.煙臺(tái)大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，山東 煙臺(tái) 264005；2.煙臺(tái)張?jiān)＜瘓F(tuán)有限公司 山東省葡萄酒微生物發(fā)酵技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 煙臺(tái) 264001）

冰葡萄酒是將葡萄推遲采收，當(dāng)環(huán)境溫度低于-7℃時(shí)，在葡萄藤上保持一段時(shí)間，使其結(jié)冰，并在結(jié)冰狀態(tài)下進(jìn)行采收、壓榨、發(fā)酵而成的葡萄酒[1]。冰酒因其獨(dú)特的風(fēng)味特征和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值被譽(yù)為酒中極品、液體黃金和葡萄酒皇后。研究發(fā)現(xiàn)，由于種植區(qū)域、采收日期、工藝環(huán)節(jié)等因素的影響，我國(guó)冰酒產(chǎn)區(qū)——遼寧桓仁某些種植區(qū)域的冰葡萄，經(jīng)壓榨成汁、發(fā)酵成酒后，口感偏酸、有后苦[2-3]。因直接對(duì)冰酒進(jìn)行降酸、脫苦處理后無法再對(duì)其成分進(jìn)行調(diào)整，因此可以通過對(duì)冰葡萄汁進(jìn)行降酸、脫苦處理后，經(jīng)過發(fā)酵等工藝，提升冰酒品質(zhì)，促進(jìn)中國(guó)冰葡萄酒產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。所以，建立針對(duì)此類冰酒降酸、脫苦的方法是很有必要的。

國(guó)內(nèi)外有很多關(guān)于對(duì)果汁和果酒進(jìn)行降酸、脫除苦味的研究報(bào)道。張瑞鋒等[4-5]利用碳酸鈣降低葡萄酒中酒石酸含量，當(dāng)碳酸鈣添加量為0.5 g/L，有效降低了葡萄酒酸度并最大程度保持了葡萄酒風(fēng)味及顏色特征；BENITO A等[6-7]利用prombe酵母菌將葡萄酒中全部的蘋果酸轉(zhuǎn)化為乙醇和二氧化碳；趙玉平等[8-9]采用D301G樹脂將山楂汁中有機(jī)酸降低至原汁的60%左右；郝雅蘭等[10-11]分別利用化學(xué)降酸、生物降酸、離子交換與吸附等降酸方法將獼猴桃干酒和刺葡萄酒的總酸含量降低了22%～35%，并保持了原酒的口感和穩(wěn)定性；GAO Z P等[12]研究了AB-8樹脂對(duì)獼猴桃汁中的酚類成分的吸附動(dòng)力學(xué)、熱力學(xué)和等溫線機(jī)理，有效降低了獼猴桃汁的苦味；JOHNSON R L等[13]利用吸附劑Amberlite XAD-7使葡萄柚汁中檸檬苦素降低了85%、可滴定酸降低了23%。對(duì)比諸多對(duì)果汁和果酒降酸、脫除苦味的研究發(fā)現(xiàn)，利用離子交換樹脂可以同時(shí)降低果汁和果酒中總酸和總酚含量，可以達(dá)到同時(shí)解決冰葡萄汁口感偏酸、有后苦的問題。

根據(jù)對(duì)遼寧桓仁某地區(qū)的冰葡萄汁樣品分析，其冰葡萄汁糖度與其他種植區(qū)域的冰葡萄汁相似，酸度約為其他種植區(qū)域冰葡萄汁的1.3～2.0倍，達(dá)20 g/L；其總酚含量約為其他種植區(qū)域冰葡萄汁的1.5～1.8倍，達(dá)421 mg/L。本研究使用多年來篩選的降酸和吸附酚類物質(zhì)效果顯著的D354樹脂（弱堿性陰離子交換樹脂），對(duì)含量高的冰葡萄汁中總酸和總酚靜態(tài)共同吸附過程進(jìn)行研究，并對(duì)吸附過程進(jìn)行4種動(dòng)力學(xué)模型分析，通過確定最佳的靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)模型，為建立D354樹脂對(duì)冰葡萄汁降酸、脫苦的工藝提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

威代爾冰葡萄汁：遼寧張?jiān)１凭魄f。

D354樹脂：浙江爭(zhēng)光實(shí)業(yè)股份有限公司；福林酚試劑（分析純）：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；鹽酸、氫氧化鈉、酚酞、鄰苯二甲酸氫鉀、碳酸鈉、沒食子酸（均為分析純）：天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備CP64電子天平：上海庚庚

儀器設(shè)備有限公司；THZ-82A恒溫水浴搖床：常州澳華儀器有限公司；CX-BX-120低溫冷藏箱：深圳市長(zhǎng)旭機(jī)械設(shè)備有限公司；TDL-80-2B臺(tái)式低速離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠；722E可見分光光度計(jì)：杭州科曉化工儀器設(shè)備有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樹脂預(yù)處理

用無水乙醇浸泡適量樹脂12 h；用蒸餾水反洗樹脂至出水清澈、無味；用兩倍樹脂體積1 mol/L的NaOH溶液和兩倍樹脂體積1 mol/L的HCl溶液，交替浸泡樹脂4 h，在酸堿交替前需將用蒸餾水洗至中性；最后用1 mol/L的NaOH溶液處理樹脂，將樹脂轉(zhuǎn)為-OH型，用蒸餾水將樹脂洗滌至中性，得到活化樹脂。

1.3.2 樹脂靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)

向9個(gè)250 mL具塞三角瓶中分別加入100 mL冰葡萄汁樣品，置于恒定溫度的恒溫水浴搖床上；準(zhǔn)確稱取9份離心至干的活化樹脂5.0 g，分別加入9個(gè)具塞三角瓶中，搖床設(shè)定150r/min轉(zhuǎn)速振搖。分別在振搖5min、15min、30min、60 min、120 min、150 min、180 min、240 min、720 min 后將三角瓶依次從搖床中取出；將冰葡萄汁樣品與樹脂分離，收集冰葡萄汁樣品，分別測(cè)定各冰葡萄汁樣品中總酸、總酚含量，計(jì)算樹脂對(duì)冰葡萄汁中總酸和總酚的吸附量，樹脂對(duì)冰葡萄汁中總酸和總酚的吸附量按照公式（1）計(jì)算。最后對(duì)靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行吸附動(dòng)力學(xué)模型擬合分析。

式中：Qe為平衡狀態(tài)下樹脂對(duì)總酸、總酚的吸附量，mg/g；C0、Ce分別為樣液中總酸、總酚的初始濃度及平衡質(zhì)量濃度，g/L；V為吸附過程中的冰葡萄汁體積，L；M為樹脂質(zhì)量，g；1 000為質(zhì)量轉(zhuǎn)換系數(shù)。

1.3.3 總酸及總酚含量測(cè)定

總酸含量的測(cè)定按照國(guó)標(biāo)GB/T15038—2006《葡萄酒、果酒通用分析方法測(cè)定》[14]；總酚標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制、冰葡萄汁中總酚含量測(cè)定參照徐國(guó)前等[15]測(cè)定葡萄酒總酚的方法。

1.3.4 樹脂吸附動(dòng)力學(xué)模型

為找到最符合D354弱堿性陰離子交換樹脂吸附冰葡萄汁總酸和總酚的動(dòng)力學(xué)模型，本研究分別采用擬一階動(dòng)力學(xué)模型、擬二階動(dòng)力學(xué)模型、Elovich動(dòng)力學(xué)模型、W-M（Weber與Morris粒內(nèi)擴(kuò)散）動(dòng)力學(xué)模型對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行模型擬合。擬一階動(dòng)力學(xué)模型、擬二階動(dòng)力學(xué)模型基本包含了吸附的所有過程，采用這兩個(gè)吸附模型擬合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，可以顯示樹脂對(duì)冰葡萄汁中總酸和總酚的吸附機(jī)理，為進(jìn)一步了解吸附動(dòng)力學(xué)的可能過程，采用Elovich動(dòng)力學(xué)模型進(jìn)行校驗(yàn)，采用W-M動(dòng)力學(xué)模型了解吸附過程的速度控制步驟[16-20]。

擬一階、擬二階、W-M、Elovich動(dòng)力學(xué)模型的方程分別是[18-20]：

式中：k1為擬一階吸附速率常數(shù)，min-1；k2為擬二階吸附速率常數(shù)，g/（mg·min）；k3為粒內(nèi)擴(kuò)散速率常數(shù)，mg/（g·min1/2）；α是Elovich速率常數(shù)，mg/（g·min）；β也是Elovich速率常數(shù)，g/mg；C為常數(shù)；Qt為吸附時(shí)間t時(shí)樹脂對(duì)吸附質(zhì)（總酸和總酚）的吸附量，mg/g。

對(duì)擬一階、擬二階、W-M、Elovich動(dòng)力學(xué)模型進(jìn)行積分轉(zhuǎn)化處理，得到其線性公式如下[18-20]：

其中，A=[ln（αβ）]/β，mg/（g·min）；B=1/β，mg/g。

2 結(jié)果與分析

2.1 D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸、總酚的靜態(tài)吸附曲線

根據(jù)冰葡萄壓榨溫度和冰葡萄酒的發(fā)酵溫度，D354樹脂在0℃、10℃和20℃條件下對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚的靜態(tài)吸附曲線見圖1。

圖1 D354樹脂對(duì)冰葡萄汁中總酸(A)和總酚(B)的靜態(tài)吸附曲線Fig.1 Static adsorption curves of total acid(A)and total phenol(B)in ice grape juice by D354 resin

由圖1可知，在吸附進(jìn)行的最初120min，D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸及總酚吸附的吸附量變化比較明顯，吸附速度較快；在120～240min，吸附速度逐漸減緩；在240～720min，趨于平穩(wěn)，達(dá)到吸附平衡。D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚的吸附規(guī)律與井麗麗等[9，21]關(guān)于樹脂對(duì)山楂汁總酸和沙苑子總酚的吸附規(guī)律一致。在0℃、10℃和20℃條件下，D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸的最大吸附量分別為151.69 mg/g、190.09mg/g、222.16mg/g；對(duì)冰葡萄汁總酚的吸附量分別為3.65 mg/g、4.20 mg/g、4.67 mg/g。在吸附初期，吸附過程處于液膜擴(kuò)散階段，冰葡萄汁中的有機(jī)酸根離子和總酚被快速吸附在樹脂表面；隨著吸附時(shí)間的增加，吸附進(jìn)入膜擴(kuò)散和粒內(nèi)擴(kuò)散階段，冰葡萄汁中有機(jī)酸根離子和總酚受到樹脂表面以及樹脂孔隙產(chǎn)生的阻力增加，擴(kuò)散速度逐漸降低；隨著冰葡萄汁中有機(jī)酸根離子及總酚在樹脂活性位點(diǎn)上不斷積累，樹脂上可利用的活性位點(diǎn)逐漸減少，吸附速率趨于平穩(wěn)，最終到達(dá)吸附平衡。

2.2 D354樹脂靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)模型擬合分析

2.2.1 擬一階動(dòng)力學(xué)模型擬合分析

擬一階動(dòng)力學(xué)模型是指吸附過程中吸附質(zhì)的吸附速率與溶液中吸附質(zhì)的含量成正比，該模型假定吸附過程的吸附速率受擴(kuò)散步驟控制。擬一階動(dòng)力學(xué)模型可以評(píng)估許多不同的吸附情況，包括（1）接近平衡的系統(tǒng)；（2）溶質(zhì)濃度不依賴時(shí)間的線性平衡吸附等溫線系統(tǒng)；（3）更為復(fù)雜的特殊系統(tǒng)[16]。根據(jù)擬一階動(dòng)力學(xué)模型，將D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚的吸附數(shù)據(jù)進(jìn)行模型擬合分析，利用Origin 9.0繪制擬一階模型擬合曲線見圖2。

圖2 D354樹脂靜態(tài)吸附冰葡萄汁總酸(A)和總酚(B)的擬一階動(dòng)力學(xué)模型曲線Fig.2 Pseudo first-order kinetics model curves of total acid(A)and total phenol(B)in ice grape juice by D354 resin static adsorption

利用擬一階動(dòng)力學(xué)模型擬合曲線，得出擬一階動(dòng)力學(xué)模型擬合參數(shù)見表1。

表1 D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚擬一階動(dòng)力學(xué)參數(shù)Table 1 Pseudo first-order kinetics parameters of total acid and total phenol in ice grape juice by D354 resin

由圖2和表1可知，通過擬一階動(dòng)力學(xué)模型對(duì)于冰葡萄汁中總酸和總酚在D354樹脂上的吸附動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)得到的擬合曲線，其線性相關(guān)系數(shù)R2＞0.980 0，說明利用擬一階動(dòng)力學(xué)模型對(duì)D354樹脂吸附冰葡萄汁中總酸和總酚的數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合是可行的。但通過對(duì)比擬一階動(dòng)力學(xué)吸附模型中D354樹脂對(duì)冰葡萄汁中總酸和總酚的理論平衡吸附量和實(shí)際平衡吸附量發(fā)現(xiàn)二者相差較大。因此，擬一階吸附動(dòng)力學(xué)模型是否完全符合D354樹脂吸附冰葡萄汁中總酸和總酚的吸附動(dòng)力過程還有待進(jìn)一步探討。

2.2.2 擬二階動(dòng)力學(xué)模型擬合

擬二階動(dòng)力學(xué)模型是指吸附過程中吸附質(zhì)的吸附速率與溶液中吸附質(zhì)含量的二次方成正比，該模型表示吸附受化學(xué)吸附控制[20]。將D354樹脂對(duì)冰葡萄汁中總酸和總酚的吸附數(shù)據(jù)進(jìn)行擬二階動(dòng)力學(xué)模型擬合分析，利用Origin 9.0繪制擬二階模型擬合曲線見圖3。

圖3 D354樹脂靜態(tài)吸附冰葡萄汁總酸(A)和總酚(B)的擬二階動(dòng)力學(xué)模型曲線Fig.3 Pseudo second-order kinetics model curves of total acid(A)and total phenol(B)in ice grape juice by D354 resin static adsorption

利用擬二階動(dòng)力學(xué)模型擬合曲線，計(jì)算得出擬二階動(dòng)力學(xué)模型擬合參數(shù)見表2。

表2 D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚擬二階動(dòng)力學(xué)參數(shù)Table 2 Pseudo second-order kinetics parameters of total acid and total phenol in ice grape juice by D354 resin

由圖3和表2可知，擬二階動(dòng)力學(xué)模型對(duì)冰葡萄汁中總酸和總酚的擬合曲線的線性相關(guān)系數(shù)R2＞0.998 0，均大于擬一階動(dòng)力學(xué)模型對(duì)冰葡萄汁中總酸和總酚的擬合曲線的線性相關(guān)系數(shù)。同時(shí)，擬二階動(dòng)力學(xué)模型的理論平衡吸附量與實(shí)際平衡吸附量非常接近，擬二階動(dòng)力學(xué)模型的吸附速率常數(shù)k2隨溫度的升高逐漸變大，與靜態(tài)吸附曲線顯示規(guī)律相同。因此，擬二階吸附動(dòng)力學(xué)模型更符合D354樹脂吸附冰葡萄汁中總酸和總酚的吸附動(dòng)力過程，亦說明D354樹脂對(duì)于冰葡萄汁中總酸和總酚的吸附過程受化學(xué)吸附控制。

2.2.3 Elovich動(dòng)力學(xué)模型擬合分析

Elovich動(dòng)力學(xué)模型適用于反應(yīng)過程中活化能變化較大的過程，適用于具有非均質(zhì)吸附表面體系的化學(xué)吸附過程。在沒有解吸產(chǎn)物的固體表面化學(xué)吸附反應(yīng)中，由于表面覆蓋度的增加，反應(yīng)速率會(huì)隨著時(shí)間的增加而減小，描述這種化學(xué)吸附最有用的模型之一是Elovich動(dòng)力學(xué)模型[22]，利用Origin 9.0繪制Elovich動(dòng)力學(xué)模型曲線見圖4。

圖4 D354樹脂靜態(tài)吸附冰葡萄汁總酸(A)和總酚(B)的Elovich動(dòng)力學(xué)模型曲線Fig.4 Elovich kinetics model curves of total acid(A)and total phenol(B)in ice grape juice by D354 resin static adsorption

利用Elovich動(dòng)力學(xué)模型擬合曲線，計(jì)算得出Elovich動(dòng)力學(xué)模型擬合參數(shù)見表3。

由圖4和表3可知，利用Elovich動(dòng)力學(xué)模型將D354樹脂對(duì)冰葡萄汁中總酸和總酚的吸附實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行模型擬合。Elovich動(dòng)力學(xué)模型擬合的線性相關(guān)系數(shù)R2＞0.970 0，擬合效果較好，進(jìn)一步驗(yàn)證了擬二階動(dòng)力學(xué)模型的擬合結(jié)果，表明D354樹脂對(duì)冰葡萄汁中總酸和總酚的吸附過程以化學(xué)吸附為主。

表3 D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚Elovich動(dòng)力學(xué)參數(shù)Table 3 Elovich kinetics parameters of total acid and total phenol in ice grape juice by D354 resin

2.2.4 W-M動(dòng)力學(xué)模型擬合分析

樹脂的離子交換與吸附過程一般分為4個(gè)連續(xù)的階段：（1）液膜擴(kuò)散階段；（2）膜擴(kuò)散階段；（3）粒內(nèi)擴(kuò)散階段；（4）吸附反應(yīng)階段[18]。速度最慢的反應(yīng)階段就是樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚的離子交換與吸附階段的速度控制步驟。通過W-M動(dòng)力學(xué)模型對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行模型擬合，可以了解D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚的離子交換與吸附過程的速度控制步驟。利用Origin 9.0繪制W-M動(dòng)力學(xué)模型曲線見圖5。

圖5 D354樹脂靜態(tài)吸附冰葡萄汁總酸(A)和總酚(B)的W-M動(dòng)力學(xué)模型曲線Fig.5 W-M kinetics model curves of total acid(A)and total phenol(B)in ice grape juice by D354 resin static adsorption

利用W-M動(dòng)力學(xué)模型擬合曲線，計(jì)算得出W-M動(dòng)力學(xué)模型擬合參數(shù)見表4。

表4 D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚W-M動(dòng)力學(xué)參數(shù)Table 4 W-M kinetics parameters of total acid and total phenol in ice grape juice by D354 resin

由圖5和表4可知，利用W-M動(dòng)力學(xué)模型擬合曲線的線性相關(guān)系數(shù)R2＞0.930 0，擬合效果較好；W-M吸附速率常數(shù)k3隨溫度的變化規(guī)律與前面得到的結(jié)論一致。在不同溫度下，W-M動(dòng)力學(xué)模型對(duì)冰葡萄汁中總酸和總酚的擬合曲線被分成兩段，而且第一線性部分的外推不能通過原點(diǎn)，所以D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚的吸附過程受液膜擴(kuò)散和粒內(nèi)擴(kuò)散過程的共同控制。

2.3 D354樹脂吸附動(dòng)力學(xué)公式[23]

將表2中的擬二階動(dòng)力學(xué)模型中Qe和k2對(duì)溫度T進(jìn)行擬合，得到總酸和總酚理論平衡吸附量Qe、吸附速率常數(shù)k2對(duì)吸附溫度T的擬合方程為：

總酸：

總酚：

將公式Qe和k2的擬合方程帶入擬二階動(dòng)力學(xué)線性方程，可得擬二階吸附動(dòng)力學(xué)模型下在t時(shí)刻溫度T條件下D354樹脂吸附冰葡萄汁總酸和總酚的動(dòng)力學(xué)公式：

總酸：

總酚：

3 結(jié)論

在相同吸附時(shí)間內(nèi)，D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚的平衡吸附量受溫度影響較大，溫度越高平衡吸附量越大；在相同溫度下，D354樹脂的吸附速率會(huì)隨著吸附時(shí)間的增加而逐漸減小，且D354樹脂對(duì)冰葡萄汁中總酸的吸附速率明顯大于對(duì)總酚的吸附速率。在0℃、10℃和20℃條件下，D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸的最大吸附量分別為151.69mg/g、190.09mg/g及222.16mg/g；對(duì)冰葡萄汁總酚的吸附量分別為3.65 mg/g、4.20 mg/g及4.67 mg/g。

對(duì)比4種動(dòng)力學(xué)模型對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚的擬合結(jié)果，D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚的吸附動(dòng)力學(xué)符合擬二階動(dòng)力學(xué)模型，其吸附過程主要以化學(xué)吸附為主，受液膜擴(kuò)散和粒內(nèi)擴(kuò)散過程共同控制。

根據(jù)擬二階動(dòng)力學(xué)模型以及擬二階動(dòng)力學(xué)參數(shù)與溫度T的相關(guān)性方程，得到D354樹脂吸附冰葡萄汁總酸和總酚的動(dòng)力學(xué)公式分別為：Qt=t/（1/（（1.99×10-6T2-1.10×10-3T+0.15）（3.42T-777.98）2+t/（3.42T-777.98）））、Qt=t/（1/（（1.3×10-3T2-6×10-3T+0.02）（0.05T-9.43）2+t/（0.05T-9.43）））

根據(jù)D354樹脂對(duì)冰葡萄汁總酸和總酚的吸附規(guī)律，可以對(duì)壓榨出的部分冰葡萄汁在特定的溫度下利用D354樹脂吸附總酸和總酚含量，將處理冰葡萄汁與未處理冰葡萄汁按一定比例混合，即可達(dá)到對(duì)冰葡萄汁降酸、脫苦的目標(biāo)。

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