□ 金慧慧 王曉紅 姜 嫻 溫州市龍灣區(qū)疾病預(yù)防控制中心

食品中黃曲霉毒素（AF）的危害一直是一個(gè)比較突出的問題。人體攝入黃曲霉毒素的途徑主要有兩種：吸入空氣中含黃曲霉毒素分子的粉塵和攝入被黃曲霉毒素污染的食品，其中膳食攝入是主要的途徑[1]。黃曲霉毒素很穩(wěn)定，一般的蒸煮過程很難破壞，易溶于有機(jī)溶劑[2]。它可通過多種途徑污染食品和飼料，直接或間接進(jìn)入人類食物鏈，誘發(fā)肝癌，還會(huì)引起腎中毒、肝中毒、生殖異常以及抑制免疫反應(yīng)，威脅人類健康和生命安全。為了避免黃曲霉毒素對(duì)人體健康造成危害，國內(nèi)外必須制定更為嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)，這同時(shí)也對(duì)食品中黃曲霉毒素的檢測(cè)技術(shù)提出了更高的要求[3]。

1 監(jiān)測(cè)對(duì)象與采樣要求

1.1 監(jiān)測(cè)對(duì)象

監(jiān)測(cè)對(duì)象為超市、食品店、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)等場(chǎng)所的大米、玉米、花生、花生醬、芝麻、植物油等市售食品，共448份。

1.2 采樣對(duì)象及要求

谷物及其制品（120份）：大米、玉米粉、小麥粉等市售食品。

豆類及其制品（80份）：黃豆、紅豆、黑豆等。

堅(jiān)果及其籽類（80份）：花生、瓜子、芝麻等。

油脂及其制品（80份）：花生油、玉米油、大豆油等。

調(diào)味品（88份）：花生醬、豆瓣醬、辣椒醬等。

采樣要求：樣品隨機(jī)抽樣，每份不能少于250 g。每份樣品經(jīng)防水密封袋包裝，樣品經(jīng)充分碾磨打勻，凈化提取后經(jīng)高效液相檢測(cè)，剩余樣品放置在-20 ℃冰柜保存。采樣均需要編號(hào)，并且登記生產(chǎn)日期、生產(chǎn)地址、重量、廠家等相關(guān)信息。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

Waters I Class型高效液相色譜儀（熒光檢測(cè)器2475）；AL204電子天平（d=0.1 mg）；德國IKA公司的T25型均質(zhì)器。

2.2 試劑

黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2混標(biāo)（46300-U SUPELCO， 含 量 為98%～99%，黃曲霉毒素B1和G1分別 為 0.932 μg/mL 和 0.876 μg/mL，黃曲霉毒素B2和G2分別為0.309 mg/L和0.265 mg/L，規(guī)格為每支1 mL）；免 疫 親 和 柱（Af l a StarTMR，Romer Labs公司）；甲醇為色譜純（莫克公司）；水為超純水；碘為分析純；樣品來源于本科室所抽樣品。

3 檢測(cè)方法

3.1 色譜條件

色 譜 柱： Waters Carbamate Analysis柱（150 mm×3.9 mm）；【甲醇+乙腈（1:1）】：水（35:65）；激發(fā)波長：360 nm；發(fā)射波長：440 nm；流量：1.0 mL/min；柱溫：35 ℃；進(jìn)樣量：10 μL；衍生溶液：0.02%碘溶液。

3.2 樣品前處理方法

采取免疫親和層析法，該方法特異性強(qiáng)、凈化效果出色、操作簡(jiǎn)單[4]。

3.3 色譜分析

高效液相色譜法結(jié)合熒光檢測(cè)器檢測(cè)黃曲霉毒素是國際上比較流行的方法[5]。分別將標(biāo)準(zhǔn)溶液及處理后的樣品進(jìn)行熒光分析，峰面積外標(biāo)法定量。

4 結(jié)果

4.1 線性關(guān)系考察

以樣品黃曲霉毒素含量為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)，回歸方程見表1。標(biāo)準(zhǔn)曲線std1點(diǎn)色譜圖見圖1。

4.2 監(jiān)測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

谷物及其制品：30份玉米粉中黃曲霉毒素總量的檢出率為23.33%，最高為17.458 μg/kg，且有3.33%的玉米粉樣品中黃曲霉毒素B1含量超出國家及國際食品法典限量標(biāo)準(zhǔn)。超限量玉米粉檢測(cè)結(jié)果見表2。剩下大米和小麥粉等樣品90份，檢出值均在檢出限之下（方法檢出限：B1為0.4 ng/mL，B2為 0.2 ng/mL，G1為 0.4 ng/mL，G2為0.2 ng/mL）。

表1 黃曲霉毒素線性回歸方程（單位：ng/mL）

圖1 標(biāo)準(zhǔn)曲線std1點(diǎn)色譜圖

表2 超限量玉米粉檢測(cè)結(jié)果

表3 黃曲霉毒素總量最高的花生的檢測(cè)結(jié)果

表4 黃曲霉毒素總量最高的花生醬的檢測(cè)結(jié)果

豆類及其制品：黃豆、紅豆、黑豆等。80份該類樣品中未檢出黃曲霉毒素總量。

堅(jiān)果及其籽類：花生、瓜子、芝麻等共80份，其中瓜子、芝麻等樣品未檢出黃曲霉毒素總量。50份花生中黃曲霉毒素總量的檢出率為54.0%，最高為 5.383 μg/kg，見表 3。

油脂及其制品：花生油、玉米油等80份樣品檢出率較低，檢出的值均在檢出限以下。

調(diào)味品：醬類樣品污染較嚴(yán)重的主要為花生醬，50份花生醬中黃曲霉毒素總量的檢出率為84.0%，最高為39.392 μg/kg，并有12.0%的花生醬樣品中黃曲霉毒素B1含量超出國家限量標(biāo)準(zhǔn)，見表4。

5 結(jié)論

在上述五大類樣品中，被AF污染較嚴(yán)重的分別是玉米粉、花生、花生醬。其中花生醬不僅污染率高（84.0%），而且污染含量也高（最高含量39.392μg/kg）。這對(duì)龍灣區(qū)接下來縮小黃曲霉毒素監(jiān)測(cè)范圍有重要意義，可以把食品種類具體縮小到花生、花生醬、玉米粉等食品上，甚至細(xì)化到某個(gè)生產(chǎn)品牌上。同時(shí)，每次監(jiān)測(cè)得到的結(jié)果，可以為國家制定食品限量標(biāo)準(zhǔn)及國際相應(yīng)控制規(guī)范提供重要的參考。

[1]丁小霞.中國產(chǎn)后花生黃曲霉毒素污染與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估辦法研究[D].北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2011:19.

[2]胡玲玲.食品中黃曲霉毒素檢測(cè)方法研究與評(píng)估[D].杭州:浙江工業(yè)大學(xué),2014:1.

[3]李少暉,任丹丹,謝云峰,等.食品中黃曲霉毒素檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2015,6(4):1112.

[4]李少暉,任丹丹,謝云峰,等.食品中黃曲霉毒素檢測(cè)方法研究進(jìn)展食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)[J].2015,6(4):1108-1109.

[5]胡一晨,萬麗,范成杰,等.免疫親和柱凈化HPLC柱后光化學(xué)衍生化法檢測(cè)中藥及染菌中藥制劑中間體的黃曲霉毒素[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2012,18(10):117.