孫建永 伏 輝

(長(zhǎng)沙醫(yī)學(xué)院形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)室,長(zhǎng)沙 410219)

四氧化三鉛是解剖學(xué)技術(shù)中用于血管灌注造影最常用的造影劑之一。郝麗文[1]、漆光平[2]、樓新法[3]、唐茂林[4]等已經(jīng)對(duì)材料、技術(shù)、方法等方面進(jìn)行了較為深入的探究。郝麗文等[1]指出應(yīng)用乳膠-四氧化三鉛懸濁液用于大動(dòng)物造影研究還有待探討。查閱國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)未見(jiàn)應(yīng)用血管造影劑乳膠-四氧化三鉛懸濁液進(jìn)行羊動(dòng)脈灌注的方法和影像學(xué)效果的相關(guān)報(bào)道。為此,筆者使用乳膠-四氧化三鉛懸濁液對(duì)山羊動(dòng)脈灌注的方法和影像學(xué)效果進(jìn)行了探究。

1 材料和方法

1.1 器材

天平、500ml量杯、細(xì)濾網(wǎng)、玻璃棒、20ml注射器、止血鉗、手術(shù)刀、剪刀、7號(hào)外科手術(shù)線、玻璃插管、帶閥門(mén)的導(dǎo)管、橡膠管、數(shù)碼相機(jī)等。

1.2 使用藥品及準(zhǔn)備

1000ml生理鹽水、5ml肝素、紅色乳膠2L、四氧化三鉛(Pb3O4,衡陽(yáng)市凱信化工試劑有限公司,橙紅色粉末狀) 500 g、氨水500 ml。將灌注所需的玻璃插管和注射器等物品用氨水浸泡,以防止使用時(shí)乳膠液凝固[2]。血管沖洗液的準(zhǔn)備,1000ml生理鹽水中加入5ml肝素,充分混勻。

1.3 灌注液的配置

填充劑采用市場(chǎng)直接購(gòu)得的紅色乳膠,經(jīng)細(xì)濾網(wǎng)3次過(guò)濾后,用500ml量杯量取1000ml過(guò)濾后乳膠。用托盤(pán)天平稱(chēng)取1000g Pb3O4,緩慢加入乳膠中,用玻璃棒充分?jǐn)嚢杈鶆?制成灌注所需的乳膠-四氧化三鉛懸濁液。

1.4 山羊準(zhǔn)備

成年黑山羊3只,雌雄不拘,宰殺,切開(kāi)頸總動(dòng)脈放血,觀察動(dòng)脈無(wú)血液流出之后,沿腹前壁正中縱行切開(kāi)腹壁,將腸管等腹腔內(nèi)容物用手掏出,顯露腎以下腹主動(dòng)脈,同時(shí)鈍性分離腸系膜下動(dòng)脈和直腸上部并結(jié)扎。剪斷腸系膜上動(dòng)脈和直腸上部結(jié)扎處以上的部分。于第1～2或第2～3腰椎椎間隙處截?cái)嗌窖蜓?同時(shí)將腹主動(dòng)脈和下腔靜脈一并離斷。留取山羊腹主動(dòng)脈下段及后肢血管行動(dòng)脈灌注。

1.5 插管

玻璃插管一端插入腹主動(dòng)脈,一端與橡膠管連接。分離腹主動(dòng)脈,用7號(hào)外科手術(shù)線將插管固定在腹主動(dòng)脈上。將含有5ml 肝素的1000ml生理鹽水懸吊于1.5m高度處,用帶有閥門(mén)的導(dǎo)管將生理鹽水通過(guò)玻璃導(dǎo)管的橡膠端與山羊連接。打開(kāi)閥門(mén),釋放生理鹽水沖洗動(dòng)脈,同時(shí)按摩山羊的大腿部肌肉,觀察其下腔靜脈斷端處流出液體顏色。待流出的液體顏色由紅色變?yōu)榍宄簳r(shí),關(guān)閉導(dǎo)管閥門(mén),沖洗完畢。將導(dǎo)管與玻璃插管的橡膠端分離,懸吊羊腿,使血管內(nèi)的液體完全流出。

1.6 乳膠-四氧化三鉛懸濁液灌注方法

充分混勻制備好的乳膠-四氧化三鉛懸濁液,過(guò)濾至500ml燒杯中。將羊腿平放,取20ml去針頭空注射器,抽取10ml氨水現(xiàn)行注入山羊動(dòng)脈,再將其活塞推至注射器前端,連接玻璃插管橡膠后,抽出管內(nèi)的部分氣體,形成負(fù)壓,助手持止血鉗夾閉玻璃插管的橡膠頭處,然后拔出注射器,并抽取20ml乳膠-四氧化三鉛懸濁液,隨即接入玻璃插管橡膠端,同時(shí)助手放開(kāi)止血鉗,緩慢推入乳膠-四氧化三鉛懸濁液,直至玻璃插管的橡膠端由于壓力變?yōu)榍驙睢４藭r(shí)可見(jiàn)腹主動(dòng)脈及左右髂血管已經(jīng)完全充盈。助手持止血鉗夾閉玻璃插管的橡膠端,在緊貼夾閉處止血鉗的上下端分別用7號(hào)外科手術(shù)線結(jié)扎,放開(kāi)止血鉗。

灌注量視個(gè)體差異而定,雙側(cè)羊腿注射乳膠-四氧化三鉛懸濁液灌注量為30～50ml。

灌注完成后靜置10～15min,觀察有無(wú)漏液現(xiàn)象。隨即將標(biāo)本置于充滿(mǎn)冰塊的儲(chǔ)物箱內(nèi),運(yùn)往醫(yī)院影像科進(jìn)行X線、CT血管拍攝并重建血管。冷藏保存2～3d待乳膠-四氧化三鉛懸濁液凝固化后,再行解剖山羊觀察血管灌注情況。

2 結(jié)果

造影劑乳膠-四氧化三鉛懸濁液顯影明顯,X線攝片(圖1)及CT(圖2)可清晰觀察山羊髂血管及股動(dòng)脈分支分布。解剖可肉眼觀察到穿支血管及其細(xì)小分支(圖3)。

圖1 X線圖像. 圖2 CT重建圖像. 圖3 山羊后肢標(biāo)本解剖效果.

3 討論

3.1 乳膠-四氧化三鉛懸濁液灌注試劑的選擇

3.1.1 乳膠的使用特點(diǎn) (1) 使用方便,不易沉降,有利于標(biāo)本的灌注;(2) 乳膠對(duì)溫度要求不高,常溫下即可制備乳膠-四氧化三鉛懸濁液,同時(shí)也降低了鉛中毒的風(fēng)險(xiǎn)。由于不需要特殊設(shè)備,操作過(guò)程簡(jiǎn)單,用時(shí)較短;(3) 灌注速度可操控,2～3d即可固化,解剖時(shí)觀察血管不易斷裂。缺點(diǎn)是由于乳膠顆粒大的特性,灌注前需搖勻,需要進(jìn)行3次過(guò)濾,方能獲得較為滿(mǎn)意的溶劑;灌注液搖勻后放置時(shí)間不可太久,最好在1～2min 內(nèi)實(shí)行灌注。

3.1.2 明膠與四氧化三鉛的配方 樓新法等[3]于2006年實(shí)驗(yàn)得出明膠與四氧化三鉛的最佳配方為300 Bloom的明膠5g,40℃ 蒸餾水100ml,四氧化三鉛100g,灌注量為20～30ml/kg。但是明膠屬熱填充劑,操作不易控制。本次實(shí)驗(yàn)使用乳膠和四氧化三鉛的比例為100ml：100g,經(jīng)腹主動(dòng)脈至0.2mm之間的血管顯影效果滿(mǎn)意。

3.2 注意事項(xiàng)

實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所的選取要求遠(yuǎn)離食品生產(chǎn)銷(xiāo)售場(chǎng)所,需在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,減少環(huán)境污染。通風(fēng)良好,環(huán)境空曠,實(shí)驗(yàn)操作中注意操作人員的個(gè)人安全防護(hù),采取實(shí)驗(yàn)材料及時(shí)回收,專(zhuān)門(mén)處理等措施。

3.3 經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

在加壓灌注中,若發(fā)現(xiàn)乳膠滲出,用止血鉗及時(shí)夾住導(dǎo)管,停止灌注,及時(shí)進(jìn)行結(jié)扎處理后繼續(xù)加壓灌注,直至玻璃插管的橡膠端由于壓力變?yōu)榍驙?。?shí)驗(yàn)中可見(jiàn),模擬生理?xiàng)l件的大劑量含有肝素的生理鹽水以恒定速度沖洗血管,并按摩大腿肌肉,效果較為滿(mǎn)意。在推注乳膠-四氧化三鉛懸濁液時(shí)一定要緩慢勻速進(jìn)行。在解剖中顯示,此配比濃度下的乳膠-四氧化三鉛懸濁液對(duì)0.2mm以下的部分細(xì)小動(dòng)脈未能完全灌注,有待改進(jìn)溶液的濃度。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 郝麗文,段永壯,王增濤,等.氧化鉛懸濁液灌注法在血管研究中的應(yīng)用[J].中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志,2007,25(6)：721-723.

[2] 漆光平,杜亞政,潘愛(ài)華,等.乳膠血管灌注的技術(shù)探討[J].湖南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2000,25(4)：411-412.

[3] 樓新法,梅勁,Christopher R,等.明膠-氧化鉛血管造影術(shù)的優(yōu)化[J].中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志,2006,24(2)：259-262.

[4] Tang M,Yin Z,Morris S F.A pilot study on three-dimensional visualization of perforator flaps by using angiography in cadavers[J].Plast Reconstr Rurg,2008,122(2)：429-437.