摘 要: 雞蛋已成為人們餐桌上的必需食品,造假者在利益驅(qū)動下,利用一些成本低廉的化學(xué)原料制作人造雞蛋,假雞蛋外觀與真雞蛋很難區(qū)分,為了鑒別雞蛋的真假,可以利用科學(xué)的方法進行鑒定,首先通過外觀進行初步鑒定;然后通過蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)鑒定雞蛋中是否含有蛋白質(zhì);最后再通過采用鹽析方法進一步證明蛋白主要是球蛋白和清蛋白。
關(guān)鍵詞: 雞蛋;科學(xué);鑒定;方法
隨著經(jīng)濟的發(fā)展,人們的養(yǎng)生意識不斷加強,雞蛋對于很多家庭來說,已成為大人孩子攝取營養(yǎng)的主要食品,但現(xiàn)在造假者在利益驅(qū)動下,利用一些成本低廉的化學(xué)原料,主要有海藻酸鈉、食用明膠、葡萄糖酸內(nèi)脂、賴氨酸樹脂、淀粉、凝固劑、色素等化學(xué)物質(zhì),有些不法商當(dāng)良心發(fā)現(xiàn)時,摻些奶粉。假雞蛋不但沒營養(yǎng),而且吃多了還容易變得癡呆,傷害人們的健康。
一、 實驗材料
在市場上隨意買來新鮮雞蛋作為實驗材料。
二、 鑒定方法
(一) 首先從外觀進行初步鑒定
一般通過雞蛋外觀辨別真假雞蛋。一般真雞蛋外殼有一些帶有不規(guī)則的糞便、血絲,蛋殼不光滑,面比較粗糙,而假雞蛋外殼較光滑,潔凈。
(二) 其次利用下面準確、可靠、簡單、快速生化方法再進一步鑒定。
方法一:雙縮脲呈色反應(yīng)鑒定:將新鮮雞蛋皮磕一個小孔,取蛋清,蛋清∶水=1∶9的比例將其混合,注意一定用玻璃棒攪拌均勻,取其溶液20滴置于一個燒杯中,再加百分之十NaOH 40滴,百分之一Cu2SO42滴搖勻,溶液呈現(xiàn)紫玫瑰色,說明溶液中含有蛋白質(zhì),因為含有兩個肽鍵及兩個肽鍵以上有機化合物,在堿性環(huán)境中,與Cu2+結(jié)合生成紫紅色化合物,蛋白質(zhì)是具有多個肽鍵的有機大分子,可以和氫氧化鈉,硫酸銅生成紫紅色化合物。
方法二:茚三酮呈色反應(yīng)鑒定:將新鮮雞蛋皮磕一個小孔,取蛋清,按蛋清∶水=1∶9的比例將其混合,注意一定用玻璃棒攪拌均勻,取其溶液20滴置于一個燒杯中,再加百分之零點一茚三酮水溶液10滴,搖勻,放在沸水浴中加熱,溶液的顏色發(fā)生粉色——紫紅色——變藍的變化,說明溶液中含有蛋白質(zhì)。因為蛋白質(zhì)在pH 5~7弱酸條件下,首先蛋白質(zhì)中的氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛,水合茚三酮被還原成還原型茚三酮,然后還原型茚三酮、另一個水合茚三酮、NH3生成藍紫色縮合物有色物質(zhì)。
方法三:濃硝酸呈色反應(yīng)鑒定:將新鮮雞蛋皮磕一個小孔,取蛋清,按蛋清∶水=1∶20的比例將其混合,注意一定用玻璃棒攪拌均勻,然后用6層紗布過濾,取其濾液4滴置于一個燒杯中,再加2滴濃硝酸,溶液顯黃色,如果無色,可在沸水浴中加熱,出現(xiàn)黃色后,逐滴加入百分之十的氫氧化鈉,中和濃硝酸,使溶液至堿性,溶液由黃色變成橙黃色,說明溶液中含有蛋白質(zhì),因為含有苯環(huán)結(jié)構(gòu)的有機化合物,與濃硝酸發(fā)生硝化反應(yīng)生成黃色的硝基酚,該化合物在堿性溶液中進一步氧化成橙黃色的鄰硝基醌酸鈉,卵清蛋白中含酪氨酸和色氨酸,這兩種氨基酸是含有苯環(huán)的氨基酸,因此有此反應(yīng)。
方法四:考馬斯亮藍呈色反應(yīng)鑒定:將新鮮雞蛋皮磕一個小孔,取蛋清,按蛋清∶水=1∶20的比例將其混合,注意一定用玻璃棒攪拌均勻,取其溶液2滴置于一個燒杯中,再加18滴蒸餾水,百分之零點零一考馬斯亮藍染液,溶液由紅色變成藍色,說明溶液中含有蛋白質(zhì)。因為考馬斯亮藍G250和蛋白質(zhì)通過疏水作用結(jié)合后變?yōu)樗{色的化合物。
方法五:蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng)鑒定:將新鮮雞蛋皮磕一個小孔,取蛋清,按蛋清∶水=1∶9的比例將其混合,注意一定用玻璃棒攪拌均勻,然后用6層紗布過濾,取濾液40滴置于一個試管中,然后加2滴百分之三的硝酸銀重金屬溶液,搖勻出現(xiàn)沉淀。放置片刻,傾出上清液,向沉淀中加入少量的蒸餾水,沉淀不溶解,說明溶液中含蛋白質(zhì),因為蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì),可以解離的基團除肽鏈末端的a-氨基和a-羧基外,主要還有肽鏈氨基酸殘基上的側(cè)鏈基團如咪唑基、胍基、酚基、巰基、氨基、羧基等,在一定的pH條件下,這些基團能解離為帶電基團從而使蛋白質(zhì)帶電,在酸性環(huán)境中各堿性基團與質(zhì)子結(jié)合,蛋白質(zhì)帶正電荷,在堿性環(huán)境中各酸性基團解離出質(zhì)子,與環(huán)境中氫氧根離子結(jié)合成水,蛋白質(zhì)帶負電荷的。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液加入重金屬溶液時,如氯化高汞、硝酸銀、醋酸鉛、三氯化鐵、氯化鋇等這些重金屬,溶液顯堿性,蛋白質(zhì)帶負電荷,與這些帶正電的重金屬離子反應(yīng)生成不溶解的鹽而沉淀;當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液加苦味酸、單寧酸、三氯乙酸等酸類,溶液呈酸性,蛋白質(zhì)帶正電荷,和這些帶負電的酸類生成不溶性的蛋白鹽而沉淀。
(三) 最后采用鹽析方法,鑒定蛋清中的蛋白質(zhì)是否為球蛋白和清蛋白。
將新鮮雞蛋皮磕一個小孔,取蛋清,按蛋清∶水=1∶9的比例將其混合,注意一定用玻璃棒攪拌均勻,用紗布過濾,取兩支試管,每支試管中加入一定量的濾液,其中一支試管加等量的飽和硫酸銨,混勻后靜置幾分鐘,沉淀析出,再加水后沉淀又溶解,說明溶液中含有球蛋白;將另盛有一定量濾液試管,加硫酸銨粉末到不再溶解為止,有沉淀析出,再加水后,沉淀又溶解,說明溶液中含有清蛋白。因為蛋白質(zhì)相對分子量較大,在水溶液中形成的顆粒直徑在1~100nm之間,蛋白質(zhì)顆粒表面帶有許多極性基團,如巰基、氨基、羧基等和水具有高度親和性,在溶液中,蛋白質(zhì)顆粒周圍吸附大量水,形成水化膜,比較穩(wěn)定,使蛋白質(zhì)顆粒不易聚集成大顆粒而沉淀;另一方面蛋白質(zhì)顆粒在非等電點狀態(tài)下,帶有相同的電荷,顆粒之間相互排斥,不知相互凝集沉淀,當(dāng)加入高濃度鹽類,如硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等中性無機鹽濃能析出蛋白質(zhì),鹽的濃度不同,析出的蛋白質(zhì)也不同,球蛋白可在半飽和硫酸銨溶液中析出,而清蛋白則在飽和硫酸銨溶液中才能析出。
(四) 結(jié)論
首先通過外觀進行初步鑒定;然后通過上面準確、可靠、簡單、快速生化方法中的任意一種方法鑒定雞蛋中是否含有蛋白質(zhì);最后再通過采用鹽析方法進一步證明蛋白主要是球蛋白和清蛋白。這樣從外觀到內(nèi)部蛋白質(zhì)以及蛋白質(zhì)種類都符合要求的才是真雞蛋,否則即為假雞蛋,即便人造雞蛋外觀和真雞蛋相似,并含有蛋白,但球蛋白和清蛋白不容易滿足。
參考文獻:
[1]張麗萍楊建雄主編.生物化學(xué)簡明教程(第四版)[M].高等教育出版社,2009,(7):54.
[2]王秀奇,秦淑媛,高天慧,等主編.基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗(第二版)[M].高等教育出版社,1999,(6):125-133.
作者簡介:
孫煥頃,河北省衡水學(xué)院生命科學(xué)院。endprint