田壯

摘 要：在藥物的檢測(cè)方法中，特別是對(duì)于那些含有效芳香成分作為質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的中藥，較為快捷的分析方法是頂空氣相色譜法。本文應(yīng)用色譜及儀器條件，進(jìn)行中藥檢測(cè)中頂空氣相色譜法的研究。提出了頂空氣相色譜法在中藥研究中的應(yīng)用，包括頂空氣相色譜法在藥物溶劑殘留分析中的應(yīng)用與在中藥芳香物質(zhì)分析中的應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：中藥檢測(cè)；頂空氣相色譜法；應(yīng)用

前言

頂空氣相色譜法是一種局限空間內(nèi)的樣品是在系統(tǒng)達(dá)到平衡狀態(tài)時(shí)，蒸汽揮發(fā)性成分的氣相色譜分析技術(shù)，通過氣體在樣品成分的氣相色譜分析，以確定在原始樣品中這些成分的含量。這種方法主要用于氣體采樣，當(dāng)色譜分析在使用該方法時(shí)可以具體收集樣品中的揮發(fā)性組分，可以有效地避免溶劑中揮發(fā)物的去除，而且還減少了提取引起的噪聲問題。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于世界各個(gè)領(lǐng)域。

1.頂空氣相色譜法的工作原理

頂空氣相色譜法主要有三種分析方式，主要是靜態(tài)頂空分析方法、動(dòng)態(tài)頂空分析方法和頂空固相微萃取法。

1.1靜態(tài)頂空分析方法

這種方式主要是將適量的樣品封閉在容器中，在一定的溫度下放置一段時(shí)間后使樣品的氣體和液體達(dá)到平衡，這個(gè)時(shí)候，取這個(gè)封閉容器上方的空氣進(jìn)行分析，就可以分析出容器下方的液體或者固體的成分。但是，這種分析法主要分析沸點(diǎn)在200℃以下的組分，并且較容易揮發(fā)的樣品使用這種方式更合適。而對(duì)于那些不容易揮發(fā)的物質(zhì)，則需要首先進(jìn)行化學(xué)衍生化的處理。

1.2動(dòng)態(tài)頂空分析方法

靜態(tài)頂空分析方法需要在密閉且一定溫度下，氣液達(dá)到一定的平衡狀態(tài)才能進(jìn)行，而動(dòng)態(tài)頂空分析的方法則不需要達(dá)到平衡狀態(tài)，而是在還未達(dá)到平衡狀態(tài)的時(shí)候就多次取樣，直到樣品的揮發(fā)物全部萃取出為止。

1.3頂空固相微萃取法

固相微萃取法是利用待測(cè)物對(duì)活性固體表面有一定的吸附親和力而達(dá)到分離富集的目的，這種方式是將萃取的纖維頭放置在待測(cè)樣品上空，將分析物萃取出。在氣化室中，由于溫度的上升，分析物對(duì)于纖維的親和力下降，分析物被分離出，而它們所處的較小的體積可以保證分析物可以快速地轉(zhuǎn)入色譜柱。

2.資料與方法

2.1色譜及儀器條件

色譜柱：HP—PLOT/Q毛細(xì)管柱（柱長(zhǎng)30m，內(nèi)徑0.32mm，涂層厚度20i.Lm；氣相色譜參數(shù)：程序升溫（初始溫度50℃，1rain的保持度，結(jié)合10°C每分提升到150°C，也要保持5min左右），氮載氣，載氣流速1.5mL/min，分流注射（1∶1），入口溫度為220°C左右。

2.2溶液制備與測(cè)定

二氧化硫的標(biāo)準(zhǔn)溶液被吸收，水被制成10、20，30、50和100料斗G的溶液，該溶液作為控制溶液被搖勻。對(duì)照溶液1mL，這是接近樣品中的二氧化硫殘留量、準(zhǔn)確地吸收。在20mL頂空瓶，0.5mol/L氫氧化鈉溶液5mL時(shí)迅速而準(zhǔn)確地密封。將頂空進(jìn)樣器放入頂部空氣樣品中，取適量2g的微粉（如果實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量是軟的，可以適當(dāng)?shù)販p少）。在20mL頂空瓶中，在0.2mol/L的鹽酸溶液中快速而準(zhǔn)確地加入6mL，密封，在沸水浴中30rain加熱，放入頂空頂空進(jìn)樣器。

2.3方法考察

專屬性試驗(yàn)：中藥湯劑，而用硫磺熏蒸，作為陰性對(duì)照品，按照試驗(yàn)方法進(jìn)行操作，記錄色譜圖。結(jié)果表明，在陰性對(duì)照溶液的色譜圖中沒有發(fā)現(xiàn)色譜峰，沒有雜質(zhì)峰干擾樣品的測(cè)定。

2.4線性關(guān)系考察

采用一系列控制方案，采用頂空氣采樣法記錄峰值面積的積分值。以二氧化硫濃度（g/mL）為水平坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算得回歸方程為Y=2.301+2.229，X=0.9991（n=5）。結(jié)果表明，二氧化硫質(zhì)量濃度在lO～100kg/mL范圍內(nèi)與峰面積積分值呈較好的線性關(guān)系。

3.結(jié)果

二氧化硫平均殘留量為0.027mg/g，RSD=2.1%（n=6）。加樣回收試驗(yàn)：從已知?dú)埩?例，20mL頂空瓶中，分別快速添加二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液（參照GB/t15262-94，校準(zhǔn)后，用亞硫酸鈉碘量法編制的0.050g/L的濃度）和1mL0.2mol/L5mL鹽酸溶液，煮沸30min水浴密封和加熱，在頂空進(jìn)樣器，頂空進(jìn)樣測(cè)定，依照測(cè)定。結(jié)果見表1。

4.頂空氣相色譜法在中藥研究中的應(yīng)用

4.1頂空氣相色譜法在藥物溶劑殘留分析中的應(yīng)用

采用氣相色譜法對(duì)白樂眠膠囊中苯、甲苯、二甲苯、正己烷、苯乙烯和一二乙苯的殘留量進(jìn)行檢測(cè)，氣相色譜條件為：色譜柱HP-5，載氣為高純氮，蒸發(fā)室溫度為200。柱初始溫度60，恒溫5min，以30min的速率升至90，恒溫3.5min；由30min的速率，它上升到140，恒溫4min，最后上升到190在30min內(nèi)，穩(wěn)定在恒定的溫度3min。檢測(cè)器是FID，溫度為220。

4.2頂空氣相色譜在中藥芳香物質(zhì)分析中的應(yīng)用

頂空氣相色譜法進(jìn)行頂空氣體成分對(duì)芳香類中藥的分析RadixCynanchipaniculati和芳香類中藥具有方便、快捷的優(yōu)點(diǎn)，準(zhǔn)確和具體的方法表明，在芳香藥材的質(zhì)量鑒定和質(zhì)量控制，尤其適用于以含有效芳香成分多少作為質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的中藥。魏寧漪等利用GC—MS和頂空進(jìn)樣、固相微萃取進(jìn)樣結(jié)合的技術(shù)，對(duì)麝香中的摻偽物質(zhì)進(jìn)行鑒別。對(duì)其中摻加的苯甲酸、苯酚、樟腦、龍腦和一系列的烷烴用PDMS萃取頭采集后都可以檢測(cè)出來。

4.3頂空氣相色譜在測(cè)定中藥材成分含量中的應(yīng)用

在中草藥成分測(cè)量中，采用頂空氣相色譜法也具有非常好的效果。其實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確性高，并且還具有專屬性強(qiáng)的特點(diǎn)。而中藥中的一些芳香類物質(zhì)的測(cè)定中，更是具有非常準(zhǔn)確和簡(jiǎn)便的測(cè)量效果。在對(duì)中藥中的一些揮發(fā)油的成分檢測(cè)和對(duì)中藥質(zhì)量控制中，頂空氣相色譜法更是得到了廣泛的應(yīng)用，并且，在采用此法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，由于溫度偏低，還能避免中藥中的一些組分由于溫度較高而分解的現(xiàn)象發(fā)生。

這種分析的方法應(yīng)用在中藥的檢測(cè)中，特別是分析具有芳香類物質(zhì)的檢測(cè)中，不但有快速簡(jiǎn)單易于操作的特點(diǎn)，而且其準(zhǔn)確性和專屬性都比較高。

結(jié)語

綜上所述，頂空氣相色譜（GC）可以消除樣品中難揮發(fā)物質(zhì)的干擾，減少對(duì)毛細(xì)管柱的污染，可廣泛應(yīng)用于大孔吸附樹脂殘留物和溶劑殘留等中藥安全檢查，保證人民用藥安全，同時(shí)也為中藥生產(chǎn)企業(yè)和檢驗(yàn)單位的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了理論依據(jù)和確定方法。

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