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        云南漢族、彝族男性人群MAOA-μVNTR基因多態(tài)性

        2017-10-11 08:33:33姚金勇聶愛婷李佳玨王貴義龐敬博聶勝潔
        食管疾病 2017年3期
        關鍵詞:漢族彝族等位基因

        姚金勇,聶愛婷,李佳玨,王貴義,龐敬博,聶勝潔

        ·法醫(yī)學·

        云南漢族、彝族男性人群MAOA-μVNTR基因多態(tài)性

        姚金勇1,聶愛婷2,李佳玨2,王貴義2,龐敬博2,聶勝潔2

        目的 探討云南漢族、彝族人群MAOA-μVNTR基因的多態(tài)性。方法 以云南地區(qū)1 022名男性個體為研究對象(漢族681例和彝族341例),應用熒光標記引物結合毛細管電泳分型技術基因分型檢測。結果MAOA-μVNTR基因在云南漢族和彝族中均只觀察到基因分型3R和4R,其中云南漢族3R基因頻率為0.548,4R為0.452;云南彝族3R基因頻率為0.478,4R為0.522。云南漢族和彝族人群中的差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。云南漢族與中國北方漢族人群、高加索人群之間分布均有差異(P<0.012 5),而與日本人群之間分布沒有差異(P>0.012 5);云南彝族與中國北方漢族人群、高加索人群之間分布均有差異(P<0.012 5),而與日本人群之間分布沒有差異(P>0.012 5)。結論 云南漢族、彝族人群MAOA-μVNTR基因具有多態(tài)性。

        MAOA-μVNTR;基因;多態(tài)性;云南;漢族;彝族

        Abstract:Objective To study the genetic polymorphism of MAOA-μVNTR in Chinese Han and Yi Population in Yunnan province. Methods A total of 1022 male subjects were from Yunnan province,including 681 cases of Han and 341 cases of Yi people.All the samples were detected using automatic typing method of fluorescent labeled primers combined with capillary electrophoresis. Results The genotypes had 3R and 4R in Yunnan Han and Yi people,and the allele gene frequency of MAOA-μVNTR gene of 3R were 0.548,and that of 4R were 0.452 in Yunnan Han people.Meanwhile,that of 3R were 0.478,and 4R were 0.522 in Yunnan Yi people.The distributions of genotypes in MAOA-μVNTR locus had significant ethnic differences(P<0.05).The MAOA-μVNTR gene and allele distribution in Yunnan Han Population are significantly different from North Chinese Han Population and Caucasian(P<0.012 5),but it was similar Japanese(P>0.012 5).Yunnan Yi Population are significantly different from North Chinese Han Population,Caucasian(P<0.012 5),but similar to Japanese(P>0.012 5). Conclusion MAOA-μVNTR gene show polymorphisms in among Han and Yi population of Yunnan province.

        Key words:MAOA-μVNTR;Gene;Polymorphism;Yunnan;Han Population;Yi Population

        單胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)全名為單胺氧化還原酶,為含硫氨基的黃素蛋白,是一種位于線粒體外膜及突觸前膜的酶類,具有催化單胺類神經遞質降解的作用。根據(jù)底物選擇性和對抑制劑的靈敏度及在不同物種、不同細胞、核團或器官的分布,將MAO分為 A和 B兩種類型[1]。MAO-A主要作用于去甲腎上腺素(norepinephrine,NE)、5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多 巴 胺 (dopamine,DA);MAO-B主要作用于苯乙胺。MAOA基因位于染色體的短臂上,Xp11.23~11.4區(qū)域,全長約 60 kb,由15個外顯子組成[2]。MAOA基因的起始密碼子上游1.2 kb處一段30 bp的可變數(shù)目重復序列(variable number tandem repeat,VNTR),即 MAOA-μVNTR多態(tài)性[3]。該重復序列會影響MAOA基因的轉錄活性[4]。在人群中分別有 2、3、3.5、4和 5次重復,且重復序列主要以3次和4次重復為主,3.5或4個重復單位的等位基因為高表達,MAOA酶活性高,2、3或 5個重復單位的等位基因為低表達,MAOA活性低[5-6]。本文將探討MAOA基因多態(tài)性在云南漢族、彝族人群中的分布,現(xiàn)報道如下。

        1 對象與方法

        1.1 研究對象 MAOA基因位于X染色體上,為了方便觀察,所有研究對象均為男性。隨機選取來自云南地區(qū)三代內無血緣關系的男性個體,其中漢族681例,彝族341例,所有入選者入組前均獲得充分的知情同意,并簽署知情同意書。

        1.2 研究方法

        1.2.1 DNA的提取 用 Chelex-100法提取 DNA,在0.2 mL Eppendorf管中加入5%Chelex-100溶液100μL,混勻,37℃水浴過夜,100℃加熱 10 min,混勻,12 000 r·min-1離心5 min,取上清液進行檢測擴增。

        1.2.2 PCR擴增 ①用 Primer Premier 5.0軟件設計引物,確定引物序列并由上海天昊公司合成。PCR引 物:正 向 引 物:5’-ACAGCCTGACCGTGGAGAAG-3′,反 向 引 物:5′-GAACGGACGCTCCATTCGGA-3’。②PCR反應體系:總體積10μL,DNA模板 1μL,引物 0.8μL,PCR引物混合物 5μL,ddH2O 3.2μL。③PCR反應條件:預變性 95℃ 5 min,94℃變性 30 s,60℃退火 30 s,72℃延伸 30 s,共30個循環(huán),最后72℃延伸5 min。

        1.2.3 電泳及基因分型 應用3130遺傳分析儀進行毛細管電泳:取甲酰胺與 GS-500LIZ分子量標記混合物9 mL,PCR產物1 mL進行電泳。用 Gene-Mapper Idv3.2軟件進行VNTR分型。

        1.3 統(tǒng)計分析 應用 SPSS 22.0軟件進行資料分析,計數(shù)資料采用χ2檢驗。

        2 結果

        2.1 云南漢族、彝族MAOA-μVNTR基因多態(tài)性MAOA基因位于X染色體上,本研究入組的被試者均為男性,因此沒有相應的等位基因,基因型頻率和等位基因頻率一致,基因多態(tài)性結果為:云南漢族和彝族兩個群體的 MAOA-μVNTR基因均只觀察到3R和4R等位基因,其中漢族 MAOA-μVNTR的基因頻率為3R(0.548)、4R(0.452);彝族 MAOA-μVNTR的基因頻率為 3R(0.478)、4R(0.522)。用 SPSS22.0軟件對漢族和彝族MAOA-μVNTR的基因型頻率進行χ2檢驗,漢族和彝族 MAOA-μVNTR位點的基因型分布在兩組間差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表1。

        表1 漢族、彝族MAOA-μVNTR多態(tài)性位點分布

        2.2 與不同地區(qū)人群基因型比較 云南漢族、彝族人群與中國北方漢族人群、高加索人群、中國臺灣漢族人群及日本人群[7-10]進行比較,結果顯示:中國北方漢族人群、高加索人群比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.012 5),與日本人群比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.012 5);云南彝族與中國北方漢族人群、中國臺灣漢族人群、高加索人群比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.012 5),與日本人群比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.012 5);見表 2。

        表2 與不同地區(qū)人群MAOA-μVNTR位點基因型頻率分布

        3 討論

        MAOA基因在體內廣泛表達,調節(jié)腦內眾多的神經遞質,如參與5-HT、NE和DA代謝,而這些神經遞質與暴力攻擊行為有關[11]。研究表明,個體的MAOA的合成減少,影響單胺類神經遞質的代謝分解,造成體內5-HT、NE和DA等濃度升高,個體對緊張的反應增強,表現(xiàn)為沖動、攻擊等暴力行為[12-13]。郭建雄等[9]研究認為MAOA基因可能與攻擊行為有關[14]。Stetler等的研究也表明MAOA基因是暴力犯罪的重要遺傳因素[15]。

        本文對云南漢族、彝族人群血樣進行檢測,發(fā)現(xiàn)MAOA-μVNTR的基因分型以3R和4R的等位基因為主,未觀察到 2R、3.5R和 5R。MAOA-μVNTR的基因型分布在這兩個群體之間分布具有顯著差異(P<0.05),這可能與二者的遺傳背景不同有關。與其他地區(qū)的人群進行比較,發(fā)現(xiàn)云南漢族、云南彝族與中國北方漢族人群、高加索人群之間均有差異(P<0.012 5)。與中國北方漢族人群的差異可能是由于二者有著相對獨立的遺傳背景和文化差異。與高加索人群的差異可能與人種不同有關。彝族人群與中國臺灣漢族人群之間有差異(P<0.012 5),可能是由于遺傳背景不同所致。云南漢族人群與中國臺灣漢族人群之間沒有差異(P>0.012 5),可能是由于二者同為漢族,有著相同的遺傳背景。云南漢族、彝族人群與日本人群之間沒有統(tǒng)計學差異(P>0.012 5),可能是在遺傳分類上同屬東亞人群,變異較保守的緣故[16-17]。這些仍需要進一步擴大樣本量研究以證實。

        云南漢族、彝族人群 MAOA-μVNTR基因存在一定的種族和地區(qū)差異,研究MAOA-μVNTR基因多態(tài)性的分布情況,有助于從基因水平了解某些疾病和行為特征在不同種族、不同地區(qū)間存在的不同遺傳背景差異。

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        Genetic Polymorphism of MAOA-μVNTR in Chinese Han and Yi Population in Yunnan Province

        YAO Jin-yong2,NIE Ai-ting1,LI Jia-jue1,WANG Gui-yi1,PANG Jing-bo1,NIE Sheng-jie1
        (1.Honghe Public Security Bureau,Honghe 661100,China;2.Kunming Medical University,Kunming 650500,China)

        R394.5

        A

        1672-688X(2017)03-0219-03

        10.15926/j.cnki.issn1672-688x.2017.03.017

        1.國家自然科學基金(31660310)

        2.云南省教育廳科學研究基金(2015J052)

        2017-06-22

        1.云南省紅河州公安局刑偵支隊,云南紅河661100

        2.昆明醫(yī)科大學,云南昆明650500

        姚金勇(1972—),男,云南文山人,副主任法醫(yī)師,從事法醫(yī)物證DNA檢驗工作。

        聶勝潔,女,博士,教授,E-mail:879456764@qq.com

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