曾伯石，周青山

血清Afamin在冠心病中臨床意義

曾伯石，周青山

目的檢測冠心病(CHD)患者血清Afamin濃度水平，并探討Afamin在冠心病中的臨床意義。方法酶聯(lián)免疫反應(yīng)方法檢測167例CHD患者（CHD組）及127例健康對照者（對照組）血清Afamin水平，同時收集所有受試者血糖、血脂等臨床資料。結(jié)果CHD組血清Afamin濃度明顯高于對照組 (417.78±55.87vs231.67±71.71,P＜0.01)。相關(guān)分析表明，CHD組血清Afamin水平與MDA(r=0.271，P=0.011)、hs-CRP(r=0.191，P=0.021)、TNF-α(r=0.212,P=0.034)、HOMA-IR(r=0.161，P=0.021)水平呈正相關(guān)，但與HDL-C(r=-0.191，P=0.029)、GSH(r=-0.376，P＜0.01)水平呈負相關(guān)；多重線性回歸分析提示，MDA和HOMA-IR是影響Afamin水平的獨立相關(guān)因素；血清Afamin診斷冠心病ROC曲線下面積為0.957，最佳截斷點為460.11 ng/ml。結(jié)論血清Afamin與胰島素抵抗、氧化應(yīng)激密切相關(guān)，有助于冠心病診斷以及病情檢測。

Afamin；冠心?。灰葝u素抵抗；丙二醛

冠心病(coronary heart disease，CHD)主要是一種由于冠狀動脈粥樣硬化導(dǎo)致心肌供血不足的臨床代謝綜合征[1]。冠心病發(fā)病率高，危害大，嚴(yán)重影響廣大人民的身心健康。冠心病的確切發(fā)病機制至今尚未明了，國內(nèi)學(xué)者現(xiàn)一致認為內(nèi)皮細胞損傷是冠心病發(fā)生發(fā)展的中心環(huán)節(jié)[1-2]，而其損傷與內(nèi)皮細胞氧化應(yīng)激以及機體胰島素抵抗密切相關(guān)[1-2]。Afamin又稱維生素E結(jié)合蛋白，是一種主要由肝臟分泌的具有多種生物學(xué)效應(yīng)的糖蛋白[3]。既往研究發(fā)現(xiàn)，Afamin廣泛參與免疫、炎癥反應(yīng)[4]。近年研究發(fā)現(xiàn)，Afamin能夠與硫氧還蛋白結(jié)合，導(dǎo)致氧化應(yīng)激[5]；Afamin表達水平增強會導(dǎo)致胰島素抵抗相關(guān)[6]。鑒于氧化應(yīng)激和胰島素抵抗在冠心病發(fā)生發(fā)展中的重要作用[7]，本研究通過檢測血清Afamin在冠心病患者中的表達水平，以探討其在冠心病中的臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 收集2014年1月～2015年8月在我院心內(nèi)科導(dǎo)管室經(jīng)過冠狀動脈造影明確診斷為CHD患者167例為CHD組，其中男86例，女81例，平均年齡（48.12±13.23）歲。選取同期健康體檢正常的127例為對照組，其中男65例，女62例，平均年齡（49.35±14.12）歲。所有操作和測量均征得受試者同意，并簽署知情同意書。

1.2 檢測指標(biāo)

1.2.1 人體生理指標(biāo) 包括身高、體重、腰圍，按相關(guān)公式計算人體質(zhì)量指數(shù)(BMI)。其中體重指數(shù)=體重/身高的平方。

1.2.2 血生化指標(biāo) 清晨抽取受試者空腹靜脈血，按照常規(guī)經(jīng)典方法檢測空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-c)、低密度脂蛋白(LDL-c)及超敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)水平以及空腹血糖水平(FBG)；采用南京建成生物公司相關(guān)試劑盒檢測丙二醛(MDA)水平；采用武漢谷歌生物有限公司相關(guān)試劑盒檢測血清Afamin和還原型谷胱甘肽(GSH)水平。利用放射免疫法檢測血清胰島素水平(FINS)，計算胰島素指數(shù)(HOMA-IR)。HOMAIR=FBG×FINS/22.5）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以±s表示，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料采用χ2檢驗。Afamin與血生化指標(biāo)之間的關(guān)系采用Pearson相關(guān)法分析；多元線性回歸探討影響血清Afamin因素。Logistic回歸分析冠心病發(fā)病的危險因素；進行受試者Afamin對CHD診斷工作特征(ROC)曲線分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 CHD組和對照組在年齡、性別比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），而兩組的BMI、腰圍、MDA、LDL-C、TG、TC、hs-CRP、HOMA-IR、HDL-C和GSH均有統(tǒng)計學(xué)差異 （P＜0.05或P＜0.01）。見表1。

表1 兩組一般資料比較

2.2 兩組血清Afamin水平比較 CHD組血清Afamin濃度明顯高于對照組 (417.78±55.87vs231.67± 71.71,P=0.000)。

2.3 相關(guān)分析以及多元線性回歸分析 CHD組血清 Afamin與年齡 (r=0.404，P=0.123)，BMI(r= 0.323，P=0.389)、腰圍(r=0.378，P=0.312)、LDL-C(r= 0.245，P=0.212)、TG(r=0.451，P=0.131)、TC(r=0.537，P=0.271)無相關(guān)性，而與HDL-C(r=-0.191，P=0.029)、GSH(r=-0.376，P=0.000)負相關(guān)，與MDA(r=0.271，P= 0.011)、hs-CRP(r=0.191，P=0.021)、TNF-α(r=0.212,P= 0.034)、HOMA-IR(r=0.161，P=0.021)正相關(guān)。以Afamin為因變量，上述與之呈顯著性關(guān)系的指標(biāo)作為自變量，進行多元線性逐步回歸分析，結(jié)果顯示MDA、HOMA-IR是影響Afamin水平的重要因素。相關(guān)回歸方程YAfamin=321.36－12.26XMDA-9.25XHOMA-IR（R2=0.812, F=40.36，P=0.020）。

2.4 Logistic回歸分析冠心病診斷的危險因素將表1中兩組間有差異的相關(guān)因素——BMI、腰圍、MDA、LDL-C、TG、TC、hs-CRP、HOMA-IR、HDL-C和GSH進行Logisticc回歸分析，結(jié)果表明Afamin (OR=1.012，95%CI：1.007～1.102，P=0.034)，腰圍(OR= 1.213，95%CI：1.131～1.412，P=0.021)，hs-CRP（OR= 1.022，95%CI：1.013～1.125，P=0.041)是CHD發(fā)病的危險因素。

2.5 血清Afamin冠心病診斷的ROC曲線 血清Afamin對冠心病診斷ROC曲線下面積為0.957，95%CI：0.933～0.980，最佳截點為460.11 ng/ml(敏感度為71.4%，特異度89.1%，P=0.039)，約登指數(shù)為0.606。見圖1。

圖1 血清Afam in診斷CHD的ROC曲線

3 討論

在冠心病發(fā)生發(fā)展過程中，存在諸多的病理生理方面的改變，其中氧化應(yīng)激在冠心病的發(fā)生發(fā)展進程中起著至關(guān)重要的作用[1]。生理情況下，機體氧化應(yīng)激和抗氧化應(yīng)激系統(tǒng)處于穩(wěn)態(tài)平衡狀態(tài)，即機體內(nèi)產(chǎn)生氧自由基形成與脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的終末產(chǎn)物和保護性抗氧化物質(zhì)處于動態(tài)平衡狀態(tài)。在冠心病發(fā)展過程中這種平衡被打亂，導(dǎo)致內(nèi)皮細胞出現(xiàn)氧化損傷，從而促使冠心病的發(fā)生發(fā)展[7]。

Afamin的基因位于人染色體1q21-22，包含8個外顯子，長4174 bp。在冠心病模型大鼠中，Afamin表達降低，會導(dǎo)致氧化損傷發(fā)生，提示Afamin可以調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激[8]。既往已對Afamin在腫瘤、炎性腸疾病、糖尿病等疾病臨床意義進行大量的研究[9-11]，然而Afamin在冠心病患者血清表達水平以及臨床意義鮮見報道。本研究發(fā)現(xiàn)，冠心病組患者血清Afamin濃度明顯高于健康對照組；相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，Afamin與HDL-C、GSH呈負相關(guān)，與MDA、hs-CRP、HOMA-IR呈正相關(guān)。Koninger在對Afamin在多囊卵巢綜合癥臨床意義進行研究時亦發(fā)現(xiàn)，多囊卵巢綜合癥患者Afamin血清水平明顯高于正常對照組人群，Afamin與胰島素敏感性亦成正比，但同時發(fā)現(xiàn)Afamin與體重指數(shù)成正比[9]。Dieplinger等[10]發(fā)現(xiàn)，剔除Afamin基因時，增強大鼠胰島素敏感性。上述研究提示，血清Afamin濃度增高可能是導(dǎo)致胰島素抵抗的原因之一。其機制可能是Afamin可以激活NLRP3炎癥體，促使無活性的caspase-1前體轉(zhuǎn)化為活性caspase-1，后者介導(dǎo)IL-1β的釋放。Zhou研究發(fā)現(xiàn)，Afamin在多囊卵巢綜合癥患者炎癥調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮重要作用，這可能是Afamin與hs-CRP呈正比的原因[11]。綜上所述，在血清Afamin增高時，可介導(dǎo)氧化應(yīng)激、胰島素抵抗以及炎癥的發(fā)生，最終導(dǎo)致冠心病發(fā)生發(fā)展。然而，血清Afamin在冠心病發(fā)病中的作用分子機制并未見明確報道。

目前在冠心病診斷方面問題比較突出。雖然冠脈造影檢查是冠心病診斷以及病情檢測的 “金標(biāo)準(zhǔn)”，但因存在有創(chuàng)性、取樣標(biāo)本穿刺偏移、價格高昂、具有一定的風(fēng)險等缺陷，嚴(yán)重制約著其在臨床中的廣泛應(yīng)用[12]。臨床迫切需要操作簡單、且重復(fù)性好的無創(chuàng)診斷方法，既便于冠心病診斷，又利于病情監(jiān)測。血清生物標(biāo)志物診斷因其重復(fù)性好、取樣創(chuàng)傷小，近年來來在臨床CHD病情檢測方面得到廣泛應(yīng)用[13]。本研究通過繪制ROC曲線分析，發(fā)現(xiàn)血清 Afamin對冠心病檢驗ROC曲線下面積為0.957，最佳截點460.11 ng/ml(敏感度為71.4%，特異度89.1%，P=0.039)，約登指數(shù)分別為0.606。提示血清Afamin用于冠心病疾病診斷以及病情監(jiān)測方面檢驗效能良好，值得進一步深入研究。

綜上所述，Afamin與冠心病發(fā)生發(fā)展中的氧化應(yīng)激、炎癥、胰島素抵抗緊密相關(guān)，Afamin在CHD的診斷和檢測方面具有重要的臨床意義和良好的研究前景。

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Clinical significance of serum Afamin in CHD

Zeng Boshi,Zhou Qingshan ICU,Renmin Hospital of Wuhan University,Wuhan,Hubei,430060,China

Objective To detect the levels of serum Afamin in patients with coronary heart disease (CHD),and to analyze the clinical significance of Afamin in CHD.MethodsEnzyme linked immunosorbent assay (ELISA)was used to detect the levels of serum Afamin in CHD patients(the CHD group,n=167)and healthy persons(the control group,n=127).Such clinical data as blood glucose and blood lipid of all subjects were collected.ResultsThe concentration of serum Afamin in the CHD group was much higher than that in the control group(417.78±55.87 vs 231.67±71.71;P＜0.01).As indicated by relevant analysis,the levels of serum Afamin in the CHD group was positively correlated to the levels of MDA(r=0.271,P=0.011),hs-CRP(r=0.191,P=0.021),TNF-α (r=0.212,P=0.034)and HOMA-IR(r=0.161,P=0.021)but negatively correlated to the levels of HDL-C(r=-0.191,P=0.029) and GSH(r=-0.376,P＜0.01);multiple linear regression analysis indicated that MDA and HOMA-IR were independent related factors affecting the levels of Afamin;the area under the ROC curve for the diagnosis of CHD with Afamin was 0.957,and the best cut-off point was 460.11 ng/m l.ConclusionSerum Afamin is closely related to oxidative stress,inflammation and insulin resistance in CHD.It is useful for the diagnosis and disease surveillance of CHD.

Afamin;CHD;insulin resistance;MDA

R 541

A

1004-0188（2016）12-1437-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2016.12.025

2015-11-10）

430060武漢，武漢大學(xué)人民醫(yī)院重癥監(jiān)護科

周青山，E-mail：zhouqingshano6@medmail.com.cn