江蘇省鄭集中學　李秋影

糖類脂肪蛋白質鑒定實驗考點剖析

江蘇省鄭集中學李秋影

近幾年高考中實驗考查所占的比例逐漸增加，生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質鑒定實驗是高中生物必修一學生最先接觸的實驗，也包含一些實驗思想，是高中生物教學的重點，本文想通過例題分析歸納“還原糖、脂肪、蛋白質鑒定”的重要考點。

高考實驗考查鑒定實驗

例1：某校生物興趣小組進行了生物組織中還原糖檢測的實驗（如圖），下列敘述正確的是（ ）

A.由于斐林試劑不穩(wěn)定，在使用斐林試劑時要先加0.1 g/mL的NaOH溶液，后加入 0.05g/mL的CuSO4溶液。

B.在制備生物組織樣液時，加入石英砂的主要目的是促進還原糖的溶解。

C.用于該實驗檢測的斐林試劑也可用于檢測蛋白質，只是添加試劑的順序不同。

D.在實驗材料選擇方面，用蘋果比用植物葉片的效果要好。

解析：本題考查葉綠體中色素的提取和分離實驗、還原性糖和蛋白質的鑒定等，對于此類試題，需要考生掌握的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗選擇的材料是否合理、實驗采用的試劑及試劑的作用、實驗操作等，需要考生在平時的學習過程中注意積累。

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解答：A.斐林試劑的成分是質量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05 g/mL的硫酸銅溶液，要現(xiàn)配現(xiàn)用，A錯誤；

B.在制備生物組織樣液時，加入石英砂的主要目的是研磨充分，B錯誤；

C.斐林試劑和雙縮脲試劑的成分相同，濃度不同，用于該實驗檢測的斐林試劑不可用于檢測蛋白質，C錯誤；

D.蘋果糖量高、顏色淺，適于做還原糖鑒定的實驗，植物葉片可能含有還原糖，但是顏色較深，最終出現(xiàn)的磚紅色沉淀不易觀察，D正確。

故選：D。

知識鏈接1常用染色劑及其作用

染色劑或指示劑　作用對象　顏色變化斐林試劑（或班氏試劑） 還原糖　磚紅色（50-65℃水浴加熱）蘇丹Ⅲ（蘇丹Ⅳ）　脂肪　橘黃色（紅色）雙縮脲試劑　蛋白質　紫色甲基綠　D N A　綠色吡羅紅（派洛寧）　RN A　紅色健那綠（鐵蘇木精）　線粒體　藍綠色（藍色）重鉻酸鉀　乙醇　灰綠色溴麝香草酚藍　CO2　由藍變綠再變黃二苯胺試劑　D N A　藍色（沸水浴加熱）

知識鏈接2實驗材料選材

（1）在還原糖的鑒定實驗中，最理想的實驗材料是含還原糖量較高的生物組織（或器官），而且組織顏色較淺，或近于白色的蘋果、梨等材料。另外，由于甘蔗、甜菜中含有的蔗糖是非還原糖，不宜選用。

（2）在脂肪的鑒定實驗中，實驗材料最好選擇富含脂肪的種子。

（3）在蛋白質的鑒定實驗中，最好選用富含蛋白質的生物組織，植物材料常用的是大豆，動物材料常用的是稀釋的雞蛋清。

知識鏈接3雙縮脲試劑與斐林試劑的異同點

斐林試劑　雙縮脲試劑用途　鑒定可溶性還原糖的存在；　鑒定蛋白質、二肽及多肽成分　0.1g/mL氫氧化鈉溶液0.05g/mL硫酸銅溶液發(fā)生的反應0.1g/mL的氫氧化鈉溶液（A液）0.01g/mL的硫酸銅溶液（B液）雙縮脲（H2N O C-N H-CO N H2）能與銅離子作用，形成紫色或紫紅色的絡合物，這個反應叫做雙縮脲反應使用方法現(xiàn)配現(xiàn)用；混合均勻；隔水加熱；Cu(O H)2被還原為磚紅色的Cu2O先加A液，與樣液混勻后滴加B液顏色反應　呈磚紅色　呈紫色

例2（多選）關于生物組織中還原糖的鑒定，下列敘述正確的是（ ）

A.量取2mL斐林試劑時應優(yōu)先選用5mL量筒而不用10mL量筒。

B.隔水加熱時，試管中液體的液面應低于燒杯中水的液面。

C.在組織樣液中加入斐林試劑后試管內液體呈現(xiàn)無色，加熱后變成磚紅色。

D.實驗結束時將剩余的斐林試劑裝入棕色瓶，以便長期保存?zhèn)溆谩?/p>

解析：本題考查生物組織中可溶性還原糖的鑒定的實驗，意在考查學生能獨立完成“生物知識內容表”所列的生物實驗，理解實驗目的、原理、方法和操作步驟，掌握相關的操作技能，能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用；并對實驗現(xiàn)象和結果進行解釋、分析、處理。

解答：A.量取2mL斐林試劑時應優(yōu)先選用5mL量筒而不用10mL量筒，這樣量取更準確，故A選項正確；B.隔水加熱時，試管中液體的液面應低于燒杯中水的液面，有利于試管中液體的快速升溫，故B選項正確；C.在組織樣液中加入斐林試劑后試管內液體呈現(xiàn)藍色，斐林試劑的顏色為藍色，故C選項錯誤；D.斐林試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配，不能長期保存，故D選項錯誤。故選：A B。

知識鏈接4實驗設計步驟中模式化語言

①取若干支潔凈的試管編號為A、B、C……或1、2、3……備用。

②分別向各試管中加入等量的實驗物質1、實驗物質2等。（通常為稀釋溶液）

③分別向各試管中加入等量的鑒定物質，并給以適宜的條件。

④觀察并記錄實驗結果。（通常以表格的形式對實驗結果進行記錄）

知識鏈接5實驗結果誤差分析

對于結果的誤差分析要準確掌握每個實驗的規(guī)范操作，注意事項及目的要求。例如：在做蛋白質鑒定實驗時，在2 mL蛋白質溶液中加入2 mL雙縮脲試劑A液后，又加入2 mL雙縮腺試劑B液，振蕩均勻，溶液顏色呈藍色，最可能原因是：加入雙縮脲試劑B液過量。