馬寶山++周麗紅

摘 要：現代科學技術的不斷創(chuàng)新和進步，為植物組織培養(yǎng)技術的不斷發(fā)展提供了良好的前提條件，有效促進了果樹育種事業(yè)的良好發(fā)展。原生質體培養(yǎng)在當前果樹育種事業(yè)方面發(fā)揮了十分重要的作用，且具有良好的應用前景。本文主要從原生質體培養(yǎng)所需要的材料入手，對原生質體的具體培養(yǎng)工作進行細致的分析和說明，并詳細介紹了原生質體培養(yǎng)在果樹育種中的實際應用情況。

關鍵詞：原生質體；培養(yǎng)；果樹育種；應用

中圖分類號：S66 文獻標識碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20160832046

原生質體，主要是指那些去除了細胞壁被質膜所包圍的、具有生活力的“裸露細胞”，植物體中的這些細胞能在適當的條件下進行植株的再生，從而促進作物的生長。原生質體因為其不受細胞壁的影響，因而在進行外源DNA和一些遺傳物質、細胞器等方面能量的攝取過程中，能夠更加高效，同時這些細胞還能夠和一些其他物種的細胞進行融合，重新形成不同的品種。

1 原生質體培養(yǎng)情況

1.1 原生質體培養(yǎng)所需要的材料

在進行原生質體的培養(yǎng)工作時，需要選擇合適的材料，將原生質進行有效的分離。原生質體使用分離材料的類型、基因型和生理狀態(tài)有所不同，從而產生的分離培養(yǎng)效果也是有所不同的。植物的組織、細胞和各類器官都是可以進行外植體培養(yǎng)的重要原料，想要培養(yǎng)出不同的物種，就需要選擇不同的外植體。對植物體進行材料分離前的事先處理，能有效保持原生物質的完整性，同時還能夠有效保證和提高原生質體的產量。在實際進行植物體原生質體的分離工作時，需要使用到果膠酶、離析酶、纖維素酶以及半纖維素酶等物質，其中纖維素酶和果膠酶是常用的分離物質，這2種物質直接作用的方向是不同的。植物體在確定具體使用的酶液類型時，需要根據試驗得出相應的結論。同時還需要對滲透壓穩(wěn)定劑的使用進行重視，這種試劑能夠在維持植物體的穩(wěn)定方面發(fā)揮重要作用，并且還能夠影響到原生質體后期的培養(yǎng)和細胞分裂[1]。

1.2 原生質體的具體培養(yǎng)工作

影響原生質體分裂頻率最為重要的影響因素之一就是培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的主要成分是激素、有機物和無機物等。當前原生質體培養(yǎng)基中主要使用的是NT培養(yǎng)基和Km8T培養(yǎng)基，這些培養(yǎng)基在原生質體的實際培養(yǎng)工作中具有十分重要的意義，能夠全面有效地促進培養(yǎng)基中植物體的良好生長。培養(yǎng)基中的附加物，是能夠隨著植物體培養(yǎng)物生長情況進行改變和添加的，且培養(yǎng)器官也會對實際的培養(yǎng)基附加物造成影響。滲透壓在原生質體的發(fā)育中起著重要作用，因而在進行原生質體的培養(yǎng)過程中，需要對于摻加滲透壓調節(jié)劑的培養(yǎng)基進行調整，將滲透壓逐漸進行減少，減少細胞因受傷害而無法生長的情況出現。原生質體在前期的培養(yǎng)工作中，需要使用一些高質量高水平的細胞分裂素和生長素，只有這樣才能夠保證細胞壁的再生、細胞的分裂順利進行，原生質體初始的密度對于后期的植版效果具有十分重要的影響，如果密度過于大，將會不利于細胞的再生和分裂，影響到最終的培植效果?，F如今進行原生質體的培養(yǎng)工作時，通常使用的方法有固液結合培養(yǎng)的方法、液體淺層培養(yǎng)的方法、瓊脂島培養(yǎng)的方法以及看護培養(yǎng)的方法等。選擇合適的方法進行原生質體的培養(yǎng)，具有不同的實際作用，在進行原生質體培養(yǎng)工作的時候，需要給予足夠的重視[2]。

2 原生質體培養(yǎng)在果樹育種中的實際應用

原生質體的體積較小，但是實際的群體卻十分大，培養(yǎng)體系中的理化因素對原生質體的影響十分之大，因而在進行原生質體的培養(yǎng)工作時，產生的無性變異率要比一般細胞的效果好。使用非載體遺傳進行相關操作時，原生質體具有良好效果，它能獲取到外源物質且不需要一些其他手段的輔助。將原生質體培養(yǎng)技術積極應用到現代果樹育種事業(yè)之中，需要進行的重要工作是胚培育種，也就是常用的胚搶救，將一些因為缺乏營養(yǎng)或者生理原因造成的成活率較低的樹苗進行培養(yǎng)，對樹苗中的胚進行早期的離體培養(yǎng)工作。很多核果類的果樹因為生長期發(fā)育期較短，一些胚胎在沒有完全成熟的情況下就被培育，影響到了后期的萌芽率，因而需要進行相應的胚培育種工作。胚培育種工作在實際實施的時候，能夠有效解決早熟品種繁育、三倍體育種和遠緣雜交不育的情況。通過原生質體獲取到相應的外源基因，并做好相應的轉移工作。在將外源基因進行有效的轉移之后，能夠將原生質體培養(yǎng)和細胞進行充分的融合，從而增強細胞的實際培育效果。一般在進行這項工作的時候，都是使用人為的方法，將遺傳性狀不同的細胞重新融合，這對于提高樹種的多樣性具有良好的意義[3]。

3 結語

原生質體培養(yǎng)是當前進行果樹育種的重要培養(yǎng)技術，對于發(fā)展果樹物種多樣性，促進育種事業(yè)的有效發(fā)展提供了積極的作用。將原生質體培養(yǎng)技術積極應用在果樹育種的事業(yè)之中，將能夠起到有效的促進作用。因而在進行果樹育種工作時，需要做好原生物質的培養(yǎng)工作，保證其培養(yǎng)效果。

參考文獻

[1]戴雪梅，黃天帶，孫愛花，等.植物原生質體融合研究進展及其在育種中的應用[J].熱帶作物學報，2012，33（8）：1516-1521.

[2]石慶華，劉平，劉孟軍.果樹倍性育種研究進展[J].園藝學報，2012，39（9）：1639-1654.

[3]高敏霞，葉新福.植物組織培養(yǎng)在核果類果樹上的應用研究進展[J].中國熱帶農業(yè)，2015（3）：107-108.