張露勇，劉　婷，劉師卜

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·臨床醫(yī)學(xué)·

·論著·

一種蘆薈成分為主保健食品通便功效的動(dòng)物試驗(yàn)研究

張露勇，劉婷，劉師卜

目的評(píng)價(jià)以蘆薈全葉凍干粉、小麥膳食纖維、蘋(píng)果醋粉等為主要成分的保健食品通便功能。方法按衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)中潤(rùn)腸通便功能檢驗(yàn)方法開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。經(jīng)口給予小鼠3.0、1.0、0.5 g/kg體質(zhì)量(相當(dāng)人體推薦量的30、10、5倍)劑量的受試物15 d, 采用不同劑量的復(fù)方地芬諾酯制備腸蠕動(dòng)抑制模型和便秘模型。測(cè)定腸蠕動(dòng)抑制模型小鼠小腸墨汁推進(jìn)率、便秘小鼠排便時(shí)間、排糞便粒數(shù)和糞便重量。結(jié)果各劑量組小鼠各周體質(zhì)量、體質(zhì)量增加值未見(jiàn)明顯變化；受試物低、中劑量組的小腸推進(jìn)速度、第一粒黑便排出時(shí)間、6 h排黑便粒數(shù)和黑便總重量與模型對(duì)照組比較變化不明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；受試物高劑量組的小腸墨汁推進(jìn)率和墨汁推進(jìn)轉(zhuǎn)換值則有明顯增加，第一粒黑便排出時(shí)間提前，6 h排黑便粒數(shù)和黑便總重量有明顯增加，與模型對(duì)照組比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)，該受試物具有通便功能。

保健食品；通便功能；蘆薈

蘆薈中含有的蘆薈苷在大腸中被氧化分解為蘆薈大黃素因其具有緩瀉功效，對(duì)便秘有很好的療效。近幾年來(lái)，對(duì)蘆薈的食用安全性存在一些爭(zhēng)議[1]，主要集中在過(guò)量服用易形成依賴(lài)性[2]，但合理的用量下蘆薈的通便功效仍無(wú)可替代。同時(shí)蘆薈全葉和沒(méi)有進(jìn)行分離的原始凝膠的藥用效果具有廣譜性, 其成分的原始組合彼此間相輔相成, 還能發(fā)揮相乘效果。合理的配伍和科學(xué)的工藝是此類(lèi)產(chǎn)品安全性及功效性的保證，本實(shí)驗(yàn)室對(duì)某公司開(kāi)發(fā)的蘆薈成分為主的通便功能保健食品進(jìn)行了研究。本產(chǎn)品的主要組分為小麥膳食纖維、聚葡萄糖、蘆薈全葉凍干粉、蘋(píng)果醋粉等?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1　材料

1.1受試物

6 g/袋，保健功能為通便。樣品為密閉、避光、塑料袋包裝，內(nèi)容物為土黃色粉末，本實(shí)驗(yàn)室室溫保存。

1.2模型劑

復(fù)方地芬諾酯片，每片含量2.5 mg，批號(hào)201102014，由常州康普藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H32022716，購(gòu)于北京醫(yī)院藥房。試驗(yàn)前制成濃度0.25 mg/ml或0.50 mg/ml的混懸液，小鼠按0.2 ml/10 g體質(zhì)量灌胃給藥。

1.3化學(xué)試劑制備

10%阿拉伯膠墨汁；生理鹽水。

1.4動(dòng)物

SPF級(jí)KM種雄性小鼠100只，體質(zhì)量18～20 g，由中國(guó)食品藥品檢定研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源中心提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(京)2009-0017。每籠10只，飼養(yǎng)觀察3 d后用于試驗(yàn)。試驗(yàn)方案經(jīng)中國(guó)食品藥品檢定研究院動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.5實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室

為屏障環(huán)境，全密閉狀態(tài)，3級(jí)過(guò)濾送風(fēng)，溫度22～24℃，相對(duì)濕度40～60%，日光燈12 h照明，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK(京)2011-0008。高壓滅菌木刨花屑為墊料。塑料小鼠盒體積28 cm×17 cm×12 cm，不銹鋼絲頂蓋。SPF級(jí)大小鼠生長(zhǎng)繁殖飼料由北京科澳協(xié)力飼料有限公司生產(chǎn)，飼料生產(chǎn)企業(yè)審查合格證號(hào)：京飼審(2009)06166。本院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室提供純化水自由飲用。

1.6主要儀器和器械

感量1/10動(dòng)物電子天平，感量1/1 000電子天平，電爐，計(jì)時(shí)器，1 m鋼直尺，玻璃板，100 ml乳缽，50 ml燒杯，1.5 ml一次性注射器，小鼠解剖板，止血鉗，醫(yī)用剪刀和鑷子等。

2　方法

2.1小腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)

2.1.1試驗(yàn)分組試驗(yàn)分為溶劑對(duì)照組、模型對(duì)照組、受試物3.0 g/kg高劑量組(人擬用量30倍)、1.0 g/kg中劑量組(人擬用量10倍)和0.5 g/kg低劑量組(人擬用量5倍)5組，每組10只小鼠。

2.1.2模型建立小鼠每天灌胃1次，連續(xù)15 d。第15天在禁食16 h后除溶劑對(duì)照組給蒸餾水外，每只小鼠給予模型劑復(fù)方地芬諾酯5 mg/kg·BW。

2.2排便時(shí)間、糞便粒數(shù)和糞便質(zhì)量的測(cè)定

2.2.1試驗(yàn)分組試驗(yàn)分溶劑對(duì)照組、模型對(duì)照組、受試物3.0 g/kg高劑量組(人擬用量30倍)、1.0 g/kg中劑量組(人擬用量10倍)和0.5 g/kg低劑量組(人擬用量5倍)，每組10只小鼠。

2.2.2模型建立每天灌胃1次， 連續(xù)7 d。第7天在禁食16 h后除溶劑對(duì)照組給蒸餾水外，每只小鼠灌胃給予模型劑復(fù)方地芬諾酯10 mg/kg。

2.2.3指標(biāo)測(cè)定給予模型劑30 min后，溶劑對(duì)照組和模型對(duì)照組給予墨汁糊0.2 ml/10 g體質(zhì)量；受試物各劑量組給予用墨汁糊稀釋的受試物。小鼠單籠放置，恢復(fù)飲食、飲水。給予墨汁糊后開(kāi)始計(jì)時(shí)，連續(xù)6 h，記錄每只小鼠第一粒黑便排出時(shí)間、6 h排黑便粒數(shù)和黑便總重量。

3　結(jié)果

3.1小鼠體質(zhì)量的觀察

小鼠小腸運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)后未見(jiàn)稀便或干便，無(wú)全身性不良反應(yīng)，小鼠各劑量組體質(zhì)量增長(zhǎng)基本正常、體質(zhì)量增加值在14～20 g之間，未見(jiàn)明顯變化，與溶劑對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與模型對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1　小腸運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)后小鼠周體質(zhì)量及體質(zhì)量增加值的觀察(g,x±s，每組n=10)

小鼠排便試驗(yàn)后未見(jiàn)稀便或干便，無(wú)全身性不良反應(yīng)，小鼠各劑量組體質(zhì)量增長(zhǎng)基本正常、體質(zhì)量增加值在6～12 g之間，未見(jiàn)明顯變化，與溶劑對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與模型對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2　排便試驗(yàn)后小鼠周體質(zhì)量及體質(zhì)量增加值的觀察(x±s)

3.2小鼠小腸運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)

模型對(duì)照組和受試物各劑量組的小腸墨汁推進(jìn)率和墨汁推進(jìn)轉(zhuǎn)換值明顯減慢；與溶劑對(duì)照組比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。受試物低、中劑量組的小腸推進(jìn)速度與模型對(duì)照組比較變化不明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；受試物高劑量組的小腸墨汁推進(jìn)率和墨汁推進(jìn)轉(zhuǎn)換值則有明顯增加，與模型對(duì)照組比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3　各組小鼠小腸運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)結(jié)果(x±s)

注：與溶劑對(duì)照組比較aP<0.05； 與模型對(duì)照組比較bP<0.05

3.3各組小鼠排便試驗(yàn)

結(jié)果表明：模型對(duì)照組和受試物各劑量組的第一粒黑便排出時(shí)間延長(zhǎng)，6 h排黑便粒數(shù)減少和黑便總重量減輕明顯；與溶劑對(duì)照組比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。受試物低、中劑量組的第一粒黑便排出時(shí)間、6 h排黑便粒數(shù)和黑便總重量與模型對(duì)照組比較變化不明顯，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；受試物高劑量組的第一粒黑便排出時(shí)間、6 h排黑便粒數(shù)和黑便總重量則有明顯增加，與模型對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4　各組小鼠排便實(shí)驗(yàn)結(jié)果(x±s)

注：與溶劑對(duì)照組比較aP<0.05； 與模型對(duì)照組比較bP<0.05

小鼠連續(xù)灌胃給予受試物7、15 d，受試物各劑量組小鼠各周體質(zhì)量、體質(zhì)量增加值未見(jiàn)明顯變化；受試物高劑量組的小腸墨汁推進(jìn)率和墨汁推進(jìn)轉(zhuǎn)換值則有明顯增加，第一粒黑便排出時(shí)間提前，6 h排黑便粒數(shù)和黑便總重量有明顯增加，與模型對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)，該受試物具有通便功能。

4　討論

功能性便秘(functional constipation，F(xiàn)C)是一種消化道常見(jiàn)疾病 , 與精神心理因素緊密相關(guān)[3]。長(zhǎng)期海上作戰(zhàn)訓(xùn)練產(chǎn)生的精神壓力、狹小空間內(nèi)久坐不動(dòng)及飲食結(jié)構(gòu)的不合理會(huì)都增加艦上指戰(zhàn)員患FC的幾率，進(jìn)而影響戰(zhàn)斗力。因此指導(dǎo)易患人群有針對(duì)性的攝入有通便作用的保健食品對(duì)減少FC的發(fā)生具有重要意義。FC的直接表現(xiàn)為排便動(dòng)力學(xué)異常[4]，目前針對(duì)FC的治療藥物根據(jù)改善排便動(dòng)力學(xué)作用主要分為容積性 、刺激性、滲透性及潤(rùn)滑性4種[5]。容積性如纖維素、歐車(chē)前等，通過(guò)被腸道內(nèi)細(xì)菌酵解，增加腸內(nèi)滲透壓和阻止腸內(nèi)水分被吸收，產(chǎn)生導(dǎo)瀉作用。刺激性例如含蒽醌類(lèi)的植物性瀉藥、酚酞、蓖麻油等，能夠通過(guò)刺激腸壁，使腸蠕動(dòng)增強(qiáng)，促進(jìn)排便。滲透性主要是鹽、糖類(lèi)瀉藥，通過(guò)改變肝內(nèi)滲透壓，刺激腸管蠕動(dòng)而增強(qiáng)排便。鹽類(lèi)如硫酸鎂、硫酸鈉易引起嚴(yán)重的不良反應(yīng)，已很少使用。目前臨床主要使用的為乳果糖、聚乙二醇(poly-ethyleneglycol, PEG)、山梨醇糖漿等。PEG通過(guò)分子中氫鍵固定腸腔內(nèi)水分子增加糞便含水量，軟化糞便。但藥物治療只能作為補(bǔ)救措施，應(yīng)該建立合理的飲食作息習(xí)慣才是減少功能性便秘發(fā)生的根本途徑。限于艦上狹小的空間和特殊的環(huán)境，為指戰(zhàn)員適量搭配保健食品也是一個(gè)有效的預(yù)防手段。

本實(shí)驗(yàn)室對(duì)一種蘆薈成分為主的通便作用保健食品進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。本產(chǎn)品中主要功效成分為蘆薈全葉凍干粉。蘆薈為常用中藥，又稱(chēng)為“老蘆薈”，其來(lái)源于百合科蘆薈屬植物庫(kù)拉索蘆薈Aloe barbadensis Miller葉的汁液濃縮干燥物，收載于2010年版《中國(guó)藥典》中[6]。中醫(yī)認(rèn)為蘆薈味苦、性寒，歸肝、胃、大腸經(jīng)，具有清肝瀉火、瀉下通便、殺蟲(chóng)療疳之功效，用于熱結(jié)便秘、驚癇抽搐、小兒疳積、癬瘡等疾病的治療[6]。蘆薈中主要含糖類(lèi)、蒽醌類(lèi)、萘酮類(lèi)、有機(jī)酸、蛋白質(zhì)、維生素、蛋白質(zhì)、氨基酸、無(wú)機(jī)元素、葉綠素、酶等活性成分[7]。糖類(lèi)主要包括甘露糖、葡萄糖以及由甘露糖和葡萄糖組成的多糖[8]。蘆薈中的羥基蒽醌類(lèi)化合物主要包括蘆薈苷、蘆薈霉素、蘆薈瀉素、蘆薈熊果苷等[8]。羥基蒽醌類(lèi)化合物，能夠通過(guò)促進(jìn)大腸蠕動(dòng)和增加腸腔水分，從而發(fā)揮刺激性瀉下作用[9]。其他組分主要是萘酮類(lèi)、有機(jī)酸、蛋白質(zhì)、維生素、蛋白質(zhì)、氨基酸、無(wú)機(jī)元素、葉綠素、酶等活性成分。從蘆薈中檢出21、種有機(jī)酸(琥珀酸、乳酸、蘋(píng)果酸等)，11種游離氨基酸(谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸等)，18種微量元素(鈣、鎂、鐵、鋁、鋇、磷、鍶、鉀、鈉、鉻、銅、錳、鎳、鋅、鉬、硅、鈦、釩等)，維生素，酚類(lèi)，脂類(lèi)，脂肪酸和甾醇類(lèi)物質(zhì)等成分。新鮮的蘆薈液汁中還含有酶類(lèi)成分(脂肪酶、淀粉酶、氧化酶、纖維素酶等)[8]。

盧智敏等[10]采用復(fù)方地芬諾酯混懸液對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃以建立便秘模型，然后采用蘆薈全汁對(duì)小鼠灌胃，觀察其對(duì)便秘小鼠結(jié)腸肌電生理變化的影響。結(jié)果顯示，蘆薈組小鼠結(jié)腸慢波頻率變異系數(shù)明顯減小，與對(duì)照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；蘆薈組小鼠結(jié)腸慢波振幅升高，與對(duì)照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。雖然研究表明蒽醌類(lèi)物質(zhì)對(duì)結(jié)腸黏膜上皮有不良反應(yīng)，能夠促使上皮細(xì)胞凋亡,可能增加結(jié)直腸癌發(fā)病的危險(xiǎn)性[11]。但是合理的控制其攝入量，是可以在保證安全性前提下發(fā)揮良好通便作用的。相對(duì)于其他治療便秘的選擇，蘆薈制品有不可替代的優(yōu)勢(shì)。因此蘆薈在國(guó)藥總局分類(lèi)屬于“可用于保健食品的物品名單”。本實(shí)驗(yàn)室之前根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)對(duì)本產(chǎn)品進(jìn)行了安全性驗(yàn)證，結(jié)果未見(jiàn)毒性。

本保健食品中除了蘆薈全葉凍干粉外，還加入了大量的小麥膳食纖維(占比50%)。國(guó)際食品法典委員會(huì)(CAC)對(duì)膳食纖維的定義為小腸內(nèi)不能消化吸收，聚合度不小于3的碳水化合物聚合物。通常應(yīng)具備以下幾點(diǎn)：天然存在于所消費(fèi)食物中的可食用的碳水化合物聚合物；可以由食物原料中經(jīng)物理、酶或化學(xué)法獲得的碳水化合物聚合物；膳食纖維通常應(yīng)具有以下特性：降低通過(guò)時(shí)間和增加糞便量；促進(jìn)結(jié)腸發(fā)酵作用；降低血總膽固醇和/或LDL膽固醇水平；降低餐后血糖和/或胰島素水平[12]。膳食纖維根據(jù)物理性質(zhì)主要分為水溶性和不溶性。研究表明[13-14]，水溶性膳食纖維在腸道內(nèi)呈溶液狀態(tài)，有較好的持水力，且易被腸道細(xì)菌酵解，產(chǎn)生丁酸、丙酸、乙酸等短鏈脂肪酸(SCFA)，這些短鏈脂肪酸能降低腸道內(nèi)環(huán)境的pH值，刺激腸黏膜；水溶性膳食纖維被腸道菌群發(fā)酵后產(chǎn)生的終產(chǎn)物二氧化碳、氫氣、甲烷等氣體，亦能刺激腸黏膜，促進(jìn)腸蠕動(dòng)，從而加快糞便的排出速度。不溶性膳食纖維則能填充腸胃腔，刺激腸壁蠕動(dòng)，促進(jìn)糞便的排泄，減少有毒物質(zhì)在腸胃道的停留時(shí)間。兩者雙管齊下，可達(dá)到預(yù)防痔瘡、便秘等疾病[15-16]。

本研究顯示高劑量組小鼠的墨汁推進(jìn)率較模型對(duì)照組增加，高劑量組小鼠的第一粒黑便排出時(shí)間、6 h排黑便粒數(shù)和黑便總重量則有明顯增加，與模型對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。一般觀察顯示本品能顯著改善糞便性狀,而且小鼠未出現(xiàn)瀉便。高劑量組小鼠小腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)和排便試驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)均為陽(yáng)性。

綜上所述，本復(fù)方蘆薈通便產(chǎn)品合理搭配蘆薈全葉凍干粉、小麥膳食纖維、蘋(píng)果醋等組分，經(jīng)小鼠實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，能夠顯著加強(qiáng)小腸運(yùn)動(dòng),增加糞便含水量，具有通便功效。

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(本文編輯：張陣陣)

Experimental animal study on the effect of aloe leave as the main component of the health food on catharsis

ZhangLuyong,LiuTing,LiuShibo

(NationalResearchInstituteforFoodandDrugControl,Beijing100050,China)

ObjectiveTo evaluate the effect of aloe leave freeze-dried powder, wheat food fiber and Pingguocu powder as the main ingredients of health food on catharsis.Methods Experiments were carried out in accordance with the detection methods for loosing the bowel to relieve constipation specified in "the Health Food Inspection and Evaluation Technical Specifications" of the Ministry of Health (2003 Edition). In animal experiments, the KM mice were given the test substance at a dosage of 3.0, 1.0 and 0.5 g / kg BW (roughly equal to 10, 30 and 5 times the recommended amount for humans) for a succession of 15 days. Then, the intestinal peristalsis inhibition model and constipation model were developed by using different doses of compound diphenoxylate. The driving rate of feces, defecation time, the amount of defecation and the total weight of defecation were determined in the mice of the intestinal peristalsis inhibition model.ResultsThe KM mice were given the test substance by gavage at dosages of 3.0g, 1, 0g and 0.5g kg BW, for respectively 7 and 15 days. For the animals given different doses, no obvious changes could be noted in the body weight and rate of weight gain. Significant changes could neither be seen in intestinal driving rate, the defecation time of the first grain of feces, total grains of black feces in 6 hours and total weight of black feces for the low-dose and medium-dose animals, and there was no statistical significance, when comparisons were made between them(P>0.05). The intestinal feces driving rate and feces driving transfer rate of the high-dose animals increased significantly. The first grain of black feces was ahead of time, the total grains of black feces within 6 hours and total discharge of black feces also increased significantly. Significant differences could be noticed, when it was compared with that of the model control group(P<0.05).ConclusionIn accordance with the "Technical Specifications for Health Food Inspection and Evaluation" (2003 Edition), this testing substance seemed to have the function of defecation.

Health food; Defecation function; Aloe

單位]100050北京，中國(guó)食品藥品檢定研究院

R256.3

A

10.3969/j.issn.1009-0754.2016.04.017

2016-03-02)