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        三七丹參片功能學實驗研究

        2020-03-27 03:59:28張興城高明海游曉蕾董勇波張維清
        人參研究 2020年1期
        關鍵詞:試物原始數據紅細胞

        張興城,高明海 ,游曉蕾 ,董勇波 ,張維清 ,趙 愛

        (1.文山華信三七股份有限公司,文山663099;2.文山學院文山三七研究院,文山663099)

        三七[Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen]為五加科植物,全株可入藥,臨床應用廣泛。三七具有止血消炎、對中樞神經抑制、增強免疫力等的功效作用[1]。丹參為唇形科鼠尾草屬多年生草本植物,現代研究認為,丹參具有較好的活血化瘀作用,廣泛用于心血管系統疾病,具有改善微循環(huán)、抗菌等作用[2]。本文通過經口給予小鼠不同劑量的三七丹參片實驗,研究三七丹參片的增強免疫力功能,為進一步開發(fā)產品提供幫助。

        1 材料、實驗動物、實驗條件

        1.1 樣品

        由文山華信三七股份有限公司出品 (北京御生堂保健食品有限公司生產),批號:20170801。送檢樣品為片劑,實驗前將樣品用粉碎機粉碎,以1%羧甲基纖維素鈉為溶媒配制成不同濃度的樣品液供實驗用。

        1.2 實驗動物

        實驗用ICR小鼠由選浙江省實驗動物中心提供,實驗動物生產許可證號為SCXK (浙)2014-0001,SPF級,雄性,體重為18~22g。實驗動物使用許可證號為SYXK(浙)2014-0008。

        1.3 實驗環(huán)境條件

        實驗條件為:室溫20~25℃,相對濕度40%~70%。

        2 實驗方法

        2.1 劑量設計

        實驗設三個劑量組和陰性對照組(1%羧甲基纖維素鈉)。 低、中、高三個劑量分別為 0.43、0.86、2060g/kg BW,相當于人體推薦攝入量的5、10、30倍。分別取樣品 8.6、17.2、52.0g加1%羧甲基纖維素鈉至 200mL,灌胃給予受試物,灌胃體積為0.1mL/10g BW,對照組予以等體積的溶劑,每天灌胃一次,連續(xù)一個月。

        2.2 實驗方法

        2.2.1 ConA誘導小鼠淋巴細胞轉化實驗(MTT法)

        2.2.2 綿羊紅細胞(SRBC)誘導小鼠DTH實驗(足跖增厚法)

        2.2.3 抗體生成細胞檢測(Jerne改良玻片法)

        2.2.4 小鼠血清溶血素測定(血凝法)

        2.2.5 小鼠碳廓清實驗

        2.2.6 小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗(滴片法)

        2.2.7 NK細胞活性測定(LDH測定法)

        2.2.8臟器/體重比值

        2.3 數據處理

        采用SPSS統計軟件分析。

        3 實驗結果

        3.1 受試物對ConA誘導的小鼠淋巴細胞增殖能力的影響,結果見表1。原始數據符合方差齊性要求 (P>0.05)。各劑量組ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞增值能力實驗光密度差值與陰性對照組比較,差異均無顯著意義(P>0.05)。

        表1 受試物對ConA誘導的小鼠淋巴細胞增值能力的影響(x±s)

        3.2 受試物對綿羊紅細胞(SRBC)誘導小鼠DTH的影響,結果見表2。原始數據符合方差齊性要求(P>0.05)。各劑量組小鼠左足后跖部24h和0h厚度差值與陰性對照組比較,差異均無顯著性意義(P>0.05)。

        表2 受試物對綿羊紅細胞誘導小鼠DTH的影響(x±s)

        3.3 受試物對小鼠抗體生成細胞的影響,結果見表3。原始數據符合方差齊性要求(P>0.05)。各劑量組溶血空斑數與陰性對照組比較,差異均無顯著性意義(P>0.05)。

        表3 受試物對小鼠抗體生成細胞的影響(x±s)

        3.4 受試物對小鼠血清溶血素影響,結果見表4。原始數據符合方差齊性要求(P>0.05)。與陰性對照組比較,三個劑量組小鼠血清溶血素抗體積數值均升高,差異均有顯著性意義(P>0.01)

        表4 受試物對小鼠血清溶血素的影響(x±s)

        3.5 受試物對小鼠碳廓清實驗吞噬指數的影響,結果見表5。原始數據符合方差齊性要求(P>0.05)。各劑量組小鼠的吞噬指數與陰性對照組比較,差異均無顯著性意義(P>0.05)。

        表5 受試物對小鼠碳廓清實驗吞噬指數的影響(x±s)

        3.6 受試物對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞的影響,結果見表6。吞噬百分率通過X=Sin-1P1/2進行數據轉換,轉換后的數據符合方差齊性要求(P>0.05),吞噬指數的原始數據符合方差齊性要求(P>0.05),與陰性對照組比較,中、高劑量小組腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞的吞噬率、吞噬指數均升高,差異均有顯著性意義(P>0.05,P>0.01)

        表6 受試物對小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞的影響(x±s)

        3.7 受試物對小鼠NK細胞活性的影響,結果見表7.NK細胞活性X=Sin-1P1/2進行數據轉換,轉換后的數據符合方差齊性的要求(P>0.05)。劑量組小鼠NK細胞活性與陰性對照組比較,差異均無顯著性意義(P>0.05)。

        表7 受試物對小鼠NK細胞活性的影響(x±s)

        3.8 受試物對小鼠臟器/體重比值的影響,結果見表8。原始數據符合方差齊性要求(P>0.05)。與陰性對照組比較,三個劑量組小鼠胸腺/體重比值及脾臟/體重比值的差異均無顯著性意義(P>0.05)。

        表8 受試物對小鼠臟器/體重比值的影響(x±s)

        3.9 受試物對小鼠體重的影響,結果見表9a-9e。為ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化實驗和NK細胞活性測定實驗小鼠體重;表9b為綿羊紅細胞(SRBC)誘導小鼠DTH、小鼠血清溶血素測定、抗體生成細胞檢測小鼠體重;表9c為小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗小鼠體重;表9d為小鼠碳廓清實驗小鼠體重,表9e為臟器/體重比值測定小鼠體重。實驗原始數據符合方差齊性要求(P>0.05),三劑量組小鼠體重在實驗的初期、中期及終期分別與陰性對照組比較,差異均無顯著性意義(P>0.05)。

        表9 a受試物對小鼠體重的影響(x±s)

        表9 b受試物對小鼠體重的影響(x±s)

        表9 c受試物對小鼠體重的影響(x±s)

        表9 e受試物對小鼠體重的影響(x±s)

        4 結論

        實驗結果表明,與陰性對照組比較,三個劑量組對小鼠血清溶血素抗體積數值均升高;中、高劑量組小鼠小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞的吞噬率、吞噬指數均升高;以上差異均有顯著性意義(P>0.05,P>0.01)。三七丹參片具有增強免疫力功能。

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