王玉霞　郭興科　李圓圓　吳李娜　郭春麗　岳　旺　張繼國(guó)

(1.青島黃海學(xué)院護(hù)理與健康學(xué)院，山東青島　266011；　2.泰山醫(yī)學(xué)院藥理教研室，山東泰安　271016)

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高良姜與生姜組合物的抗腫瘤止嘔作用*

王玉霞1#郭興科1#李圓圓1吳李娜1郭春麗1岳旺1張繼國(guó)2

(1.青島黃海學(xué)院護(hù)理與健康學(xué)院，山東青島266011；2.泰山醫(yī)學(xué)院藥理教研室，山東泰安271016)

摘要：目的研究生姜與高良姜的天然藥物組合物在用于制備減少癌癥放、化療引起的嘔吐副作用并對(duì)治療癌癥起增效作用的藥物中的用途。方法用經(jīng)典的水貂嘔吐模型觀(guān)察組合物的止吐作用；在小鼠腫瘤模型上探索了組合物的抑制腫瘤作用。結(jié)果證明該雙姜組合物對(duì)于順鉑所致水貂的嘔吐反應(yīng)有對(duì)抗作用(P<0.01)；并證明該組合物對(duì)于小鼠體內(nèi)S180肉瘤、艾氏腹水瘤(EAC)也有抑制作用(P<0.01)。結(jié)論雙姜組合物有抗腫瘤作用并減少抗癌藥順鉑引起的嘔吐作用。

關(guān)鍵詞：雙姜組合物；止嘔；減毒；抗腫瘤

嘔吐是一種反射動(dòng)作，由前庭、外周和中樞神經(jīng)系統(tǒng)這幾個(gè)系統(tǒng)中的不同部位的多種機(jī)制共同起作用而發(fā)生的動(dòng)作。嘔吐時(shí)胃內(nèi)容物或一部分小腸內(nèi)容物通過(guò)食道逆流，讓人難以忍受，往往伴隨著很多疾病發(fā)生，如運(yùn)動(dòng)病、術(shù)后疼痛、妊娠、前庭系統(tǒng)失衡、內(nèi)源性致嘔因子釋放以及多種消化道疾病等等。目前癌癥患者常規(guī)治療采用放、化療，雖有效果但毒副反應(yīng)嚴(yán)重，常見(jiàn)惡心、嘔吐等胃腸道反應(yīng)，導(dǎo)致消化液大量丟失，水、電解質(zhì)、酸堿平衡紊亂，不僅會(huì)影響到療效，甚至還會(huì)使病人難以忍受而中斷治療，嚴(yán)重影響病人的生存質(zhì)量。另外，妊娠嘔吐可能還會(huì)危及胎兒。日前臨床常用的止吐藥物吩噻嗪類(lèi)、多巴胺拮抗劑、抗組胺藥、抗膽堿能藥、抑制5羥色胺(5-HT3)類(lèi)藥及NK1受體拮抗藥、激素等，雖然有良好的止吐效果，但是價(jià)格昂貴，使用范圍窄且毒副反應(yīng)大[1]，臨床多需聯(lián)合用藥，且未見(jiàn)抗癌減毒增效作用，因此迫切需要開(kāi)發(fā)天然的減毒增效抗嘔吐藥物。

高良姜(Alpinia of ficinarum Hance)為多年生草本，姜科山姜屬植物。入心與膻中、脾、胃四經(jīng)，味辛、大溫，《本草綱目》中將高良姜定為噫逆胃寒者的要藥，對(duì)脘腹冷痛、嘔吐、噫氣有良好功效，能夠溫中散寒、理氣止痛[5-6]。姜辣素是從生姜(zingiber)中提取的活性成份[3]，可對(duì)抗抗癌藥順鉑所致嘔吐，并抑制腸道嗜鉻細(xì)胞釋放致吐因子5-HT和P物質(zhì)，姜辣素作用于化療嘔吐最相關(guān)的NK1和5-HT3等受體，為多靶點(diǎn)、天然低毒止吐藥[4]。本研究擬證明高良姜與生姜組合物(以下簡(jiǎn)稱(chēng)“雙姜組合物”)對(duì)癌癥放、化療引起的嘔吐具有抗腫瘤和止嘔作用。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 (1)昆明種小鼠，體重(20±2)g，由青島市藥檢所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)前自由進(jìn)食飲水，24h自然光照射。(2)健康成年水貂，體重1.3～1.8 kg，雄性，由青島特種養(yǎng)殖動(dòng)物飼養(yǎng)中心提供，每只動(dòng)物單獨(dú)置于75cm×50 cm×50 cm的鐵籠中，24h自然光照射，實(shí)驗(yàn)前自由進(jìn)食飲水。

1.2主要試劑 (1)高良姜，由青島眾生大藥房購(gòu)買(mǎi)。生姜，購(gòu)于山東平度，由本學(xué)院技術(shù)室鑒定為姜科植物姜的塊莖。(2)順鉑(cisplatin)，山東齊魯制藥廠(chǎng)生產(chǎn)，批號(hào)：903005CE，20 mg/支。(3)鹽酸昂丹司瓊注射液，奧賽康制藥，批號(hào)：090102，2ml:4mg。(4)環(huán)磷酰胺，江蘇恒瑞醫(yī)藥制藥股份有限公司產(chǎn)品。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1雙姜組合物治療嘔吐作用的藥效學(xué)研究 水貂隨機(jī)分為4組，每組6只：A組為順鉑模型對(duì)照組，B組為昂丹司瓊陽(yáng)性藥物組，C組為姜辣素組，D組為雙姜組合物組(高良姜提取物、生姜提取物按1∶1比例混合)。A組給予生理鹽水預(yù)處理；B組給予昂丹司瓊7.5mg·kg-1預(yù)處理；C組給予以姜辣素10 g·kg-1(相當(dāng)于含生藥量)ig預(yù)處理；D組給予雙姜組合物10 g·kg-1(相當(dāng)于含生藥量)ig預(yù)處理，各組均在給藥30 min后給予順鉑7.5mg·kg-1,ip。觀(guān)察水貂在給藥后6 h內(nèi)的嘔吐反應(yīng)，記錄其嘔吐潛伏期，干嘔及嘔吐次數(shù)。

1.3.2雙姜組合物抗腫瘤作用的藥效學(xué)研究 (1)對(duì)小鼠S180肉瘤生長(zhǎng)的抑制實(shí)驗(yàn)：采用傳代5～7天，生長(zhǎng)良好的乳白色腹水，以適量無(wú)菌生理鹽水稀釋成瘤細(xì)胞懸液，細(xì)胞數(shù)為107ml-1，每組12只，每鼠右腋窩皮下接種0.2ml(含瘤細(xì)胞2×106個(gè))。接種次日隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)組將本發(fā)明的雙姜組合物分為(200，100 mg·ml-1)兩個(gè)劑量組，每鼠灌胃0.5ml；陰性對(duì)照組給予0.5ml蒸餾水；陽(yáng)性藥物組給予環(huán)磷酰胺20g·kg-1·d-1，連續(xù)給藥10 d。常規(guī)飼養(yǎng)，飲水，食物不限。停藥次日，小鼠全部脫頸處死，取皮下實(shí)體瘤瘤塊，稱(chēng)重，按下列公式計(jì)算腫瘤抑制率(%)：腫瘤抑制率=[對(duì)照組平均瘤重(C)-實(shí)驗(yàn)組平均瘤重(T)]/對(duì)照組平均瘤重(C)。(2)對(duì)小鼠艾氏腹水瘤(實(shí)體瘤)的抑制實(shí)驗(yàn)：分組、劑量、給藥方式、實(shí)驗(yàn)時(shí)間與S180肉瘤株相同。

2結(jié)果

2.1雙姜組合物對(duì)順鉑致嘔作用的影響 與對(duì)照組比較，各治療組均能明顯減輕干嘔及嘔吐次數(shù)并延長(zhǎng)嘔吐潛伏期(P<0.01)。其中姜辣素組較昂丹司瓊組致嘔率略高；而雙姜組合物組致嘔率低于昂丹司瓊組。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2雙姜組合物抗腫瘤作用的藥效學(xué)研究 S180肉瘤和艾氏腹水瘤(EAC)是研究藥物抗腫瘤作用的常用動(dòng)物模型。本雙姜組合物的兩個(gè)劑量組對(duì)S180、EAC與陰性對(duì)照組比較，均有不同程度抑制作用，尤其以高劑量組對(duì)腫瘤的抑制率最高(如表2,3)。

表1　雙姜組合物對(duì)順鉑致吐的影響(n=6)

注：a相當(dāng)于含生藥量，與對(duì)照組比較，cP<0.01。

表2　雙姜組合物膠囊劑對(duì)S180小鼠的腫瘤抑制作用

注：與對(duì)照組比較，cP<0.01。

表3　雙姜組合物膠囊劑對(duì)EAC小鼠的腫瘤抑制作用

注：與對(duì)照組相比，cP<0.01。

3討論

本研究采用新型水貂嘔吐模型[8]，其嘔吐行為與雪貂極為相似，雪貂(ferret)[7]是公認(rèn)的理想嘔吐動(dòng)物模型，在國(guó)外被廣泛應(yīng)用于嘔吐的研究，但國(guó)內(nèi)少見(jiàn)，水貂的免疫組化結(jié)果與雪貂一致，也具有惡心、干嘔和嘔吐的特征行為，因雌性水貂周期性分泌雌性激素，而雌性激素對(duì)嘔吐反應(yīng)有影響，所以本研究選用雄性水貂來(lái)驗(yàn)證組合物的抗嘔吐作用。

腫瘤化療性惡心與嘔吐(chemotherapy-induced nausea and vomiting，CINV)是患者最常見(jiàn)的嚴(yán)重不良反應(yīng)。CINV的發(fā)生機(jī)制非常復(fù)雜，主要是細(xì)胞毒性藥物或化療藥物和其在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物產(chǎn)生的刺激，通過(guò)5-HT3受體、多巴胺受體、組胺受體、毒蕈堿受體等一系列受體起作用，并將信號(hào)傳遞到嘔吐中樞引發(fā)嘔吐。目前使用的化療藥物中順鉑所致的惡心嘔吐反應(yīng)最為嚴(yán)重，達(dá)90%～100%[9]，所以本實(shí)驗(yàn)采用順鉑作為致嘔藥物。根據(jù)嘔吐反射發(fā)生機(jī)制，臨床常用止吐劑為5-HT3受體阻滯劑(昂丹司瓊等)，對(duì)急性化療嘔吐雖有效率可達(dá)85%，但僅作用于單一受體，具有眩暈、頭痛、便秘及消化不良等不良反應(yīng)，且其價(jià)格昂貴。

姜辣素(gingerols)[3]是生姜中具有抗嘔吐活性的主要特有的辛辣活性成分，已有研究報(bào)道，姜辣素可對(duì)抗無(wú)機(jī)及有機(jī)毒物硫酸銅和順鉑所致嘔吐，并抑制腸道嗜鉻細(xì)胞釋放致吐因子5-HT3和P物質(zhì)，姜辣素作用于化療嘔吐相關(guān)的NK1和5-HT3受體，為多靶點(diǎn)、天然低毒止嘔藥物[2]。

高良姜入藥是為姜科植物高良姜(Alpinia officinarum Hance)的干燥根莖，其根莖中含揮發(fā)油0.5%～1.5%，其中主要成分是1，8-桉葉素和桂皮酸甲酯，尚有丁香油酚、蒎烯、畢澄茄烯等。根莖尚含黃酮類(lèi)高良姜素、山柰素、山奈酚、槲皮素、異鼠李素等和一種辛辣成分，稱(chēng)高良姜酚。由于其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的特殊，抗氧化性很強(qiáng)，具有清除生物體內(nèi)自由基的作用和增強(qiáng)肝細(xì)胞抗損傷能力，降低損傷組肝臟內(nèi)毒物的含量[6]。目前，高良姜主要用于解熱和抗炎的作用，對(duì)其抗嘔吐作用的研究較少。本研究將姜辣素和高良姜配伍制成雙姜組合物用于抗嘔吐研究，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，該雙姜組合物展示出良好的抗嘔吐能力，效果比單用姜辣素更強(qiáng)，是理想的抗嘔吐藥物。

姜的抗腫瘤作用已有報(bào)道，但對(duì)高良姜的研究較少，Moon等人[5]報(bào)道了其抗癌作用，證明高良姜素能有效降低甲基亞硝基脲(MNU)對(duì)小鼠肺細(xì)胞染色體的致畸作用,并且高良姜提取物能抑制7,12-二甲基苯并蒽引起的小鼠細(xì)胞畸變作用,抑制率為57.1%。本實(shí)驗(yàn)研究了雙姜組合物的抗腫瘤作用，在S180和EAC兩種動(dòng)物模型下，本結(jié)果表明高劑量雙姜組合物對(duì)腫瘤的抑制作用與廣譜抗腫瘤藥物環(huán)磷酰胺相似。

綜上所述，雙姜組合物具有良好的止嘔抗腫瘤效果，為創(chuàng)制天然、低毒、多靶點(diǎn)的理想抗腫瘤止吐藥提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

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*作者簡(jiǎn)介：王玉霞(1952—)，女，副教授。郭興科(1981—)，男，講師。 通訊作者：張繼國(guó)(1971—)，男，教授。注：#并列第一作者。

中圖分類(lèi)號(hào)：R969

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1004-7115(2016)07-0735-03

doi:10.3969/j.issn.1004-7115.2016.07.005

(收稿日期2016-03-19)

The antitumor and antiemetic effect of zingiber and rhizoma composite

WANG Yu-xia1GUO Xing-ke1LI Yuan-yuan1WU Li-na1GUO Chun-li1YUE Wang1ZHANG Ji-guo2

(1.Qingdao Huanghai University, Qingdao 266011, China; 2.Taishan Medical University, Taian 271016, China)

Abstract:Objective: To study the detoxification and synergistic effect of zingiber and galangala composite in radiotherapy and chemotherapy.Methods: The classic mink vomiting model was used to observe the antiemetic effect of the composition. And the mice tumor model was used to observe the antitumor effect of the composition.Results: The results showed that the volatility of OPA was lower than glutaraldehyde, and the health impact was also less than glutaraldehyde.Conclusion: The composition can reduce vomiting side effects caused by radiotherapy and chemotherapy for cancer, and have synergistic effect in the treatment of tumor.

Key words:zingiber and galangala composition;vomit;detoxification;anti-tumor