黎硯書, 禇 芳, 楊利峰, 趙德明, 周向梅

(1. 江西省藥物研究所, 南昌 330029; 2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院, 北京 100194)

犬乳腺常見腫瘤的組織病理學(xué)觀察

黎硯書1, 禇 芳1, 楊利峰2, 趙德明2, 周向梅2

(1. 江西省藥物研究所, 南昌 330029; 2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院, 北京 100194)

目的 對收集到的犬乳腺腫瘤進(jìn)行病理學(xué)分類及描述，以期為乳腺腫瘤的診斷和治療提供依據(jù)。方法 將手術(shù)治療切除的犬乳腺腫物，制成切片，根據(jù)病理學(xué)觀察結(jié)果，進(jìn)行分類描述。結(jié)果 從良、惡性腫瘤逐一對收集到的腫瘤病理學(xué)形態(tài)進(jìn)行描述，囊括了犬乳腺的常發(fā)腫瘤及不常見的腫瘤。結(jié)論 不同分類的腫瘤其病理學(xué)形態(tài)相差很大，在應(yīng)用犬類進(jìn)行相關(guān)研究時應(yīng)該引起注意。

犬; 乳腺腫瘤; 病理學(xué)

乳腺腫瘤是犬常見的腫瘤, 僅次于皮膚腫瘤[1]，不同類型的腫物其生物學(xué)行為多樣化、病理特點也不盡相同，治療方案和預(yù)后存在很大的差異[2]。因此，本文觀察了犬乳腺常好發(fā)的腫瘤的組織病理學(xué)特征，以期為犬乳腺腫瘤的診斷和治療提供參考，也為應(yīng)用犬進(jìn)行相關(guān)實驗研究提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 病例來源

中國農(nóng)業(yè)大學(xué)教學(xué)動物醫(yī)院進(jìn)行手術(shù)治療的犬乳腺腫物病例。

1.2 組織病理學(xué)檢查

切除的腫物經(jīng)體積分?jǐn)?shù)10%甲醛固定5 d后，修塊，石蠟包埋，切片，HE染色，中性樹膠封片后光學(xué)顯微鏡觀察，采集數(shù)碼圖像。

1.3 分類

根據(jù)文獻(xiàn)[3,4]對動物的腫瘤進(jìn)行分類。

2 結(jié)果

2.1 良性腫瘤

2.1.1 簡單腺瘤 從低倍鏡下看腫瘤形態(tài)簡單，可見腫物由纖維結(jié)締組織包裹，纖維組織往腫物內(nèi)部延伸，將腫物分割成島嶼狀和小葉結(jié)構(gòu); 可見大量腺上皮樣細(xì)胞增多呈管狀和乳頭狀，導(dǎo)管結(jié)構(gòu)大小不等，一些管腔不規(guī)則，一些中也可見粉紅染的蛋白樣物質(zhì); 局部有少量炎性細(xì)胞浸潤(圖1A1)。高倍鏡下可見導(dǎo)管上皮細(xì)胞有單層或多層排列的腺上皮細(xì)胞組成，細(xì)胞呈柱狀或立方形，胞質(zhì)中等，嗜酸性; 核呈圓形或橢圓形，位于中央，核仁較小，細(xì)胞大小較均一，異型性和核分裂相少見; 一些管腔中見分泌性粉色均質(zhì)蛋白樣物質(zhì)(圖1A2)。

2.1.2 復(fù)合性腺瘤 低倍鏡下腫物被纖維結(jié)締組織包裹; 可見增生的腫瘤細(xì)胞呈管腔樣排列，也可見排列紊亂的乳腺上皮細(xì)胞，管腔大小不一，形狀不規(guī)則; 一些乳腺單層上皮排列的腺腔擴張，內(nèi)有紅染的蛋白分泌物; 除此之外還可見呈島狀分布的淡染的細(xì)胞區(qū)域，細(xì)胞呈星形或網(wǎng)狀，還可見染色較淡的黏液樣分泌物(圖1B1)。高倍鏡下可見腺上皮細(xì)胞基本是單層排列，細(xì)胞較大，大小形狀均一，核呈圓形或卵圓形，位于中央，核仁明顯，管腔可見均質(zhì)粉染的蛋白分泌物; 在腺上皮細(xì)胞與基底膜之間有一淡染呈紡錘型或梭型的細(xì)胞, 為增生的肌上皮細(xì)胞，核卵圓形或梭型，細(xì)胞間質(zhì)為淡染的黏液樣物質(zhì)(圖1B2)。

2.1.3 混合瘤 低倍鏡下觀察，可見乳腺組織結(jié)構(gòu)較完整。真皮層的間質(zhì)內(nèi)可見體積大小不一的腺泡被增生的結(jié)締組織包裹成小葉狀; 腺泡形態(tài)呈圓形，橢圓形或不規(guī)則形, 腺泡內(nèi)有多少不等粉染均質(zhì)的分泌物; 部分區(qū)域可見腺上皮的增生和島狀的軟骨樣結(jié)構(gòu), 并伴有炎性細(xì)胞的浸潤(圖1C1)。高倍鏡下增生的腺上皮排列呈乳頭狀或不規(guī)則形, 細(xì)胞1～2層，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，核仁明顯，細(xì)胞質(zhì)淡染;軟骨結(jié)構(gòu)中可見大小不一的軟骨細(xì)胞，細(xì)胞呈圓形或橢圓形，細(xì)胞核藍(lán)染，呈梭形或橢圓形，核仁清晰，細(xì)胞質(zhì)不明顯，形成空泡，軟骨基質(zhì)均質(zhì)淡染(圖1C2)。

2.1.4 纖維腺瘤 低倍鏡視野內(nèi)可見，增生的細(xì)胞呈小葉狀分布，外層均有纖維結(jié)締組織包裹；乳腺腺上皮細(xì)胞染色較深，部分區(qū)域有明顯增生，形成管狀結(jié)構(gòu)，部分管腔內(nèi)有均質(zhì)粉染的蛋白樣分泌物；纖維性間質(zhì)淡染色，呈嗜酸性，呈束狀排列，增生的纖維間質(zhì)圍繞腺管排列，部分區(qū)域纖維性間質(zhì)增多(圖1D1)。高倍鏡下，部分區(qū)域內(nèi)可見腺上皮細(xì)胞增生為兩層或多層，有的形成管狀，有的形成島狀，管腔形狀不規(guī)則，新生的腺上皮細(xì)胞核染色較深，呈圓形或橢圓形，嗜堿性，胞質(zhì)嗜酸性；增生的纖維組織呈束狀排列環(huán)繞于腺管和腺泡周圍，成纖維細(xì)胞呈梭型，細(xì)胞核卵圓形或紡錘形，胞質(zhì)淡染(圖1D2)。

2.2 惡性腫瘤

2.2.1 簡單癌

2.2.1.1 管狀癌 低倍鏡下見腫物被膜完整，由較厚的結(jié)締組織被膜包裹；腫物結(jié)構(gòu)紊亂，無明顯的正常乳腺小葉結(jié)構(gòu)；增生的腫瘤細(xì)胞呈島嶼狀分布，細(xì)胞排列成管腔樣，管腔之間被嗜酸性較強的薄層結(jié)締組織間質(zhì)分隔(圖2E1)。高倍鏡下可見薄層結(jié)締組織基質(zhì)將增生的腺上皮細(xì)胞分割成實質(zhì)性的片管腔樣結(jié)構(gòu)，細(xì)胞排列緊密，1～2層，細(xì)胞間界限模糊；大量增生的腺上皮樣細(xì)胞呈柱狀，形態(tài)變異較大，異型性明顯，核分裂相較多，胞核主要呈橢圓形，部分形狀不規(guī)則，核仁較為明顯(圖2E2)。

2.2.1.2 管狀乳頭狀癌 鏡觀察: 腫瘤組織整體看像“破布樣”，無明顯小葉結(jié)構(gòu)，藍(lán)染的腺管樣增生明顯，增生的腺上皮樣細(xì)胞向管腔內(nèi)突起形成乳頭樣，間質(zhì)中紅染的結(jié)締組織作為支架亦有增生現(xiàn)象，散在分布。腫物一角出現(xiàn)一粉色均染區(qū)域，內(nèi)無明顯細(xì)胞結(jié)構(gòu)(圖2F1)。高倍鏡觀察: 增生的腺上皮樣細(xì)胞與起支撐作用的纖維結(jié)締組織形成分支狀的乳頭突入管腔內(nèi)，腺上皮樣細(xì)胞大小不一，形狀多樣，分界不清，胞質(zhì)呈嗜酸性，胞核圓形或卵圓形，核仁明顯，核分裂相可見；粉染的結(jié)締組織增生明顯，網(wǎng)狀或樹枝狀包繞管腔結(jié)構(gòu)周圍(圖2F2)。

2.2.1.3 實性癌 低倍鏡下觀察，正常的小葉狀腺管結(jié)構(gòu)消失，取而代之的是實質(zhì)性的成片狀、巢狀的大量增生的腺上皮樣細(xì)胞；增生的結(jié)締組織伸入腺上皮樣增生組織間，使之分割成數(shù)個形狀、大小不同的小島樣團塊，類似于小葉狀結(jié)構(gòu)，腫瘤細(xì)胞排列緊密，呈浸潤性生長(圖2G1)。高倍鏡下觀察，大量增生的腺上皮細(xì)胞無規(guī)律聚集成片狀、島狀，細(xì)胞形態(tài)大小不一，邊界不清，呈圓形至多邊形，胞核藍(lán)染透亮，胞核大小不一，異型性較大，核仁清晰，視野中可見普遍存在的核分裂相，胞質(zhì)較少，呈嗜酸性，另有少量的粉染的膠原纖維伸入增生的腺上皮細(xì)胞之間作為腫瘤細(xì)胞的支撐(圖2G2)。

2.2.1.4 篩狀癌 低倍鏡觀察: 正常的腺管結(jié)構(gòu)消失，取而代之的是形成裂篩狀或濾網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的增生腫瘤細(xì)胞，腫瘤組織內(nèi)周圍結(jié)締組織數(shù)量很少，大部分癌細(xì)胞排列呈巢團狀，呈浸潤性生長; 巢團大部分外形不規(guī)則，常形成尖角狀，巢內(nèi)有明顯的圓形空腔使得巢團呈現(xiàn)篩狀結(jié)構(gòu)(圖2H1)。高倍鏡下觀察: 巢狀分布的癌細(xì)胞排列緊密，內(nèi)部形成裂隙及空腔; 癌細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，從卵圓形至多角形，細(xì)胞界限不清晰，胞核異型性大，染色深淺不一，核仁均較明顯，核分裂相較多(圖2H2)。

2.2.2 復(fù)合腺癌 低倍鏡下觀察：腫物外周有完整的被膜包裹; 增生的腫瘤組織呈分葉狀，既可見到增生的不規(guī)則的腺管樣結(jié)構(gòu)，又可見到染色較淡的肌上皮樣增生; 增生的腺上皮細(xì)胞染色深淺不一; 散在有壞死灶、出血灶(圖3I1)。高倍鏡下觀察: 腺上皮和肌上皮樣細(xì)胞均有增生。腺上皮樣細(xì)胞呈實質(zhì)樣排列，細(xì)胞大小形態(tài)不一，胞核大小不一，染色深淺不一, 異型性較大，少見明顯核分裂相; 肌上皮樣的梭形細(xì)胞呈星形和網(wǎng)狀排列于黏液樣的基質(zhì)中，細(xì)胞形態(tài)較一致，胞核呈圓形或卵圓形。癌周的壞死灶內(nèi)含有大量中性粒細(xì)胞(圖3I2)。

2.2.3 梭形細(xì)胞癌 低倍鏡下，乳腺組織外有結(jié)締組織包囊, 乳腺實質(zhì)結(jié)構(gòu)紊亂, 腺泡結(jié)構(gòu)不可見，取而代之的是梭形細(xì)胞束構(gòu)成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)(圖3J1)。

高倍鏡下，梭狀腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)較豐富，呈上皮樣突起，胞核小，細(xì)胞間交織成網(wǎng)，將殘余的腺上皮細(xì)胞團包繞，可見核分裂相(圖3J2)。

圖1 犬良性腫瘤

圖2 犬簡單癌

圖3 犬其他惡性腫瘤

2.2.4 癌肉瘤 低倍鏡下可見腫物由大量增生的乳腺上皮細(xì)胞和軟骨樣結(jié)構(gòu)構(gòu)成，前者是上皮來源，后者是間葉來源; 增生的腺上皮樣癌細(xì)胞與周圍結(jié)締組織之間界限清晰，腺上皮樣癌細(xì)胞呈小葉狀分布，部分呈管腔樣排列，部分管腔內(nèi)可見均質(zhì)粉染的蛋白分泌物; 增生的軟骨細(xì)胞呈團塊狀或島嶼狀分布，軟骨樣細(xì)胞呈串珠樣排列于軟骨樣基質(zhì)中(圖3K1)。高倍鏡下可見腺上皮樣癌細(xì)胞呈管狀排列，管腔不規(guī)則，上皮一至多層，癌細(xì)胞排列緊密，細(xì)胞間界限不清，細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，胞核大小不一，核異型性較大，核分裂相可見; 增生的軟骨樣細(xì)胞形態(tài)大小不規(guī)則，異型性較大(圖3K2)。2.2.4 骨肉瘤 低倍鏡下可見，腫瘤細(xì)胞與纖維組織相見分布，也可見到部分染色的軟骨樣結(jié)構(gòu)存在; 在另一視野還可見到類骨樣基質(zhì)呈團塊狀分布;大量增生的腫瘤骨細(xì)胞呈片層狀，不規(guī)則排列，邊界不清晰，部分區(qū)域呈現(xiàn)淡嗜堿性的軟骨化(圖3L1)。高倍鏡下可見，增生的腫瘤骨細(xì)胞呈交錯聚集，呈條索狀或團塊狀排列，腫瘤細(xì)胞呈多形性，細(xì)胞胞質(zhì)淡嗜酸性，細(xì)胞核呈圓形至多邊形，大小不一，多處可見核分裂相?；能浌菢咏M織成淡嗜堿性，胞質(zhì)較淺，胞核明顯，呈圓形或多角形(圖3L2)。

3 討論

乳腺癌是母犬最常見的惡性腫瘤，年發(fā)生率為0.198%，當(dāng)調(diào)整為人類相同的數(shù)量分布，年齡矯正后犬的發(fā)生率比人類高3倍。

很多腫瘤從外觀上無法分辨其組織學(xué)分型，故無法了解腫瘤的生物學(xué)行為，為治療帶來很大的困難，無法預(yù)估預(yù)后。病理組織學(xué)觀察是診斷乳腺腫瘤的金標(biāo)準(zhǔn)，為腫瘤治療和預(yù)后提供指導(dǎo)意義。腫瘤的病理組織學(xué)形態(tài)和細(xì)胞學(xué)分類是腫瘤分型的依據(jù)，因此，對各型腫瘤的病理組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)描述尤為重要。

基于組織學(xué)和生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，切除的腫瘤中大約30%為惡性腫瘤[4]，其余為良性。判定良惡性一般根據(jù)腫瘤的大小、生長速度、生長方式、細(xì)胞異形性、胞核的異型性和核分裂相。

簡單腺瘤/癌是單純?nèi)橄傧偕掀蛹?xì)胞增生，復(fù)合性腺瘤/癌是腺上皮和肌上皮樣細(xì)胞均有增生，纖維腺瘤是上皮和纖維的增生，混合瘤是除上皮外還有間葉組織(如骨或軟骨)的增生，肉瘤是間葉組織的惡性增生，癌肉瘤是上皮和間葉組織共同的惡性增生腫瘤。

腫瘤一般的治療方式是手術(shù)切除為主，放、化療結(jié)合。對于良性腫瘤如簡單性腺瘤一般局部手術(shù)切除能夠根治，但對于具有向周圍組織和血管/淋巴管浸潤傾向的惡性腫瘤，手術(shù)時需擴大切除范圍的同時清掃其周圍的淋巴結(jié)等，如最常見的惡性腫瘤簡單癌，有50%的傾向向周圍和血管浸潤。復(fù)合腺瘤在母犬中最為常見，腫瘤發(fā)生的末期, 可能發(fā)生轉(zhuǎn)移，因此治療需早期全部切除，包括清楚微小的轉(zhuǎn)移灶。復(fù)合腺癌常見于犬，浸潤性和預(yù)后較簡單性腺癌小。肉瘤為來源于間葉的惡性腫瘤, 一般體積較大, 由于局部復(fù)發(fā)率高并易轉(zhuǎn)移至局部淋巴結(jié)或肺臟，一般預(yù)后不良。癌肉瘤是指癌與肉瘤共同發(fā)生的腫瘤，是一種罕見的侵襲性腫瘤，乳房切除術(shù)是外科治療的根本的首選的方法，隨后按照常規(guī)的乳腺癌的術(shù)后治療、化療和免疫療法進(jìn)行治療。纖維腺瘤通常生長緩慢, 極少惡變, 手術(shù)切除即可?；旌狭霰M管屬于良性腫瘤, 但其增生能力強, 隨時間延長可能向惡性發(fā)展。

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Pathological Observations on Canine Mammary Tumors

LI Yan-shu1, CHU Fang1, YANG Li-feng2, ZHAO De-ming2, ZHOU Xiang-mei2
(1. Institute of Materia Medica of Jiangxi Province, Nanchang 330029, China)
(2. College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing 100194, China)

ObjectiveTo provide a evidence for the diagnosis and treatment of mammary tumors by pathological classification and description of the collected canine mammary tumors. Method The canine mammary tumors were obtained from China Agricultural University Animal hospital by surgical treatment, which were classified described according to Pathological observations.ResultsThe benign and malignant mammary tumors were pathological described one by one, which were including the all common and uncommon canine mammary tumors.ConclusionThere was greatly different pathology in different types of canine mammary tumor, so the treatment was greatly different.

Canine; Mammary tumor; Pathology

Q95-33

A

1674-5817(2016)05-0350-07

10.3969/j.issn.1674-5817.2016.05.005

2016-05-30

國家十二五科技支撐計劃(2015BAI09B01)

黎硯書(1987-), 女, 碩士, 主要從事實驗動物病理學(xué)研究。E-mail: liyanshu0716@163.com

周向梅, 女, 博士, 教授。E-mail: zhouxm@cau.edu.cn