趙家有 宋春生

【摘要】精索靜脈曲張（varicocele，VC）是男科常見(jiàn)病之一。近年來(lái)，VC致不育癥成為研究的焦點(diǎn)和熱點(diǎn)之一。選擇合適的動(dòng)物和科學(xué)的方法建立符合人類VC病理過(guò)程的動(dòng)物模型是開(kāi)展發(fā)病機(jī)制和藥物作用機(jī)理研究的基礎(chǔ)。本文主要針對(duì)VC動(dòng)物模型作一概述，由于大鼠精索靜脈解剖結(jié)構(gòu)變異，影響了部分結(jié)扎左腎靜脈方法建立大鼠VC模型的穩(wěn)定性。選擇近交系Wistar大鼠亞株或結(jié)扎精索靜脈不規(guī)律側(cè)支是解決上述問(wèn)題的有效方案。

【關(guān)鍵詞】精索靜脈曲張；動(dòng)物模型；男性不育癥

【中圖分類號(hào)】R-332，R697+24【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【中圖分類號(hào)】R-332，R697+.24【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

精索靜脈曲張（varicocele，VC）是指精索蔓狀靜脈叢，由于各種原因引起回流不暢或因靜脈瓣損壞引起血液倒流，導(dǎo)致局部靜脈擴(kuò)張、迂曲和伸長(zhǎng)的病理改變，是引起男性不育癥的常見(jiàn)病因?！稓W洲泌尿外科學(xué)會(huì)男性不育癥指南（2014年版）》指出男性不育癥患者致病因素調(diào)查表明，在已知的致病因素中，VC所占比例達(dá)148%。近年來(lái)，VC致不育癥成為研究的焦點(diǎn)和熱點(diǎn)之一。優(yōu)選一種重現(xiàn)性好、科學(xué)的動(dòng)物模型，是得到的更科學(xué)可靠結(jié)果的基礎(chǔ)。對(duì)近年來(lái)VC模型的研究情況，綜述如下，供同道參考借鑒。

1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇，直接影響實(shí)驗(yàn)的成敗、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性[1]。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇主要依據(jù)：與人類似程度、造模成效、倫理、資金等因素。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，VC的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究所選用的動(dòng)物主要有犬、兔、大鼠。

Shafik A等[2]采用犬制作VC模型，研究結(jié)果表明成功建立犬精索靜脈曲張模型，模型組犬陰囊溫度升高，睪丸發(fā)生退行性病變，血清睪酮降低，催乳素升高。但是，Laven JS等[3]研究表明血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)證實(shí)縮窄犬左側(cè)腎靜脈未能模擬出人VC的病理變化。

息金波等[4]采用結(jié)扎左側(cè)精索靜脈主干制作日本大耳白兔VC模型，模型組白兔睪丸組織脂質(zhì)過(guò)氧化物濃度均顯著增高，直接損傷睪丸生殖細(xì)胞致使睪丸生精功能減弱。Snydle FE等[5]采用結(jié)扎左側(cè)腰部睪丸干靜脈制作兔VC模型，結(jié)果表明兔VC模型與人VC所致生精功能障礙和精子質(zhì)量下降情況類似。

學(xué)者用犬和兔制作VC模型主要集中在20世紀(jì)80～90年代。由于大鼠成本低，飼養(yǎng)方便，近10年多采用部分縮窄左腎靜脈方法制作大鼠VC模型。但是，大鼠左側(cè)精索靜脈存在相當(dāng)大解剖變異，有兩條走行方向，1條走向髂總靜脈，1條走向左腎靜脈，這個(gè)變異似乎存在各個(gè)種系的大鼠包括Wistar和SD大鼠[6]。王潤(rùn)等[7]認(rèn)為由于大鼠睪丸靜脈系統(tǒng)血液回流主要是通過(guò)精索靜脈主干，左腎靜脈部分結(jié)扎導(dǎo)致睪丸靜脈回流受阻，但可以通過(guò)精索靜脈主干分流得以完全代償，這可能是一些左腎靜脈部分結(jié)扎模型失敗的主要原因。即便有睪丸靜脈曲張，也未必一定對(duì)睪丸功能有明顯影響。Zhang Y等[8]推薦采用近交系Wistar大鼠亞株（inbred Wistar rat substrain），該鼠睪丸靜脈直接匯入左腎靜脈，無(wú)明顯側(cè)支到達(dá)髂總靜脈。這一獨(dú)特的解剖結(jié)構(gòu)適合用于制作VC模型，并且研究成果易于應(yīng)用到臨床。Zhang Y等采用該大鼠制作VC模型，造模一個(gè)月后，兩側(cè)睪丸均發(fā)生生精停滯，左側(cè)睪丸較右側(cè)睪丸嚴(yán)重，間質(zhì)細(xì)胞和Sertoli細(xì)胞出現(xiàn)空泡。

2造模方法

采用科學(xué)方法，建立符合人類VC病理過(guò)程的動(dòng)物模型，有助于更好地開(kāi)展VC機(jī)制及藥物療效的研究。近年來(lái)，研究者以縮窄左腎靜脈方法構(gòu)建了大鼠VC動(dòng)物模型，并研究了優(yōu)化方法。

左側(cè)精索靜脈呈直角進(jìn)入左腎靜脈等一系列因素致臨床上以左側(cè)VC最為常見(jiàn)。查詢近年文獻(xiàn)，國(guó)內(nèi)學(xué)者多采用部分縮窄左腎靜脈方法建立VC大鼠模型，其關(guān)鍵步驟是在左腎上腺靜脈和精索靜脈內(nèi)側(cè)、下腔靜脈外側(cè)的左腎靜脈下分離出一通道，在通道內(nèi)穿出一根3/0絲線，置一根直徑約為05mm的金屬桿，與左腎靜脈一起結(jié)扎，抽出金屬桿，使左腎靜脈復(fù)通，造成左腎靜脈的部分狹窄，借此使左腎靜脈直徑縮小約一半。

楊棟等[9]采用左腎靜脈部分結(jié)扎法制作大鼠VC模型，觀察大鼠睪丸-精索靜脈脈管系統(tǒng)解剖及變異情況，結(jié)果表明SD大鼠左側(cè)精索靜脈走行存在多種類型的變異情況，VC大鼠的睪丸血流由常規(guī)的經(jīng)精索靜脈流入下腔靜脈變?yōu)榻?jīng)3～4個(gè)靜脈側(cè)枝經(jīng)膀胱前列腺周圍靜脈叢流入髂靜脈。因此大鼠VC模型的制作需要考慮靜脈變異情況。

堯冰等[6]將30只雄性青春期SD大鼠隨機(jī)分成三組，每組10只。A組縮窄左腎靜脈并結(jié)扎左側(cè)精索靜脈側(cè)支，B組僅縮窄左腎靜脈，C組為假手術(shù)組。結(jié)果表明術(shù)后左側(cè)精索靜脈直徑A組明顯大于B組（P<001）。A組左側(cè)精索靜脈曲張誘導(dǎo)成功率為100%，B組為10%（僅1只左側(cè)精索靜脈無(wú)側(cè)支的大鼠造模成功），C組未見(jiàn)曲張。據(jù)此他們認(rèn)為認(rèn)清左側(cè)精索靜脈解剖回流，并結(jié)扎其不規(guī)律出現(xiàn)的側(cè)支是建立穩(wěn)定一致的左側(cè)精索靜脈曲張模型的關(guān)鍵。

學(xué)者采用顯微外科技術(shù)部分縮窄左腎靜脈，與傳統(tǒng)方法比較，該方法具有簡(jiǎn)單易行、成功率高、并發(fā)癥少的優(yōu)點(diǎn)[10]。Najari BB等[11]采用顯微外科技術(shù)部分縮窄左腎靜脈同時(shí)，結(jié)扎睪丸靜脈側(cè)支循環(huán)，提高了制作大鼠VC模型的成效。

此外，Wang R等[12]應(yīng)用結(jié)扎左側(cè)精索靜脈主干與部分縮窄左腎靜脈分別制備大鼠VC模型，對(duì)兩種方法制備的模型進(jìn)行比較，結(jié)果表明兩種方法導(dǎo)致的睪丸損害和陰囊溫度升高類似。

3小結(jié)

不論何種原因所致的精索靜脈曲張，其結(jié)果都是精索靜脈內(nèi)血液增多，這正是建立動(dòng)物模型的理論基礎(chǔ)[7]。無(wú)論何種制備VC模型方法，均是基于VC病理，即造成精索靜脈回流不暢，導(dǎo)致局部靜脈擴(kuò)張、迂曲和伸長(zhǎng)，從而引起睪丸、附睪等一系列病理變化。制備模型過(guò)程中需注意動(dòng)物與人類精索靜脈解剖結(jié)構(gòu)的吻合度。

VC是男性不育癥的重要致病因素，中醫(yī)發(fā)揮整體觀和辨證論治的優(yōu)勢(shì)，在治療VC性不育癥中有一定的特色，為了推進(jìn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化和使中醫(yī)藥惠及廣大患者，開(kāi)展中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)研究勢(shì)在必行，為了科學(xué)闡釋中藥治療精索靜脈曲張的機(jī)制，揭示中藥提高VC患者生育能力的機(jī)理，建立科學(xué)合理的動(dòng)物模型是前提。

臨床根據(jù)“異病同治”理論，采用婦科名方完帶湯和桂枝茯苓丸加減組成通脈方，該方由炒白術(shù)、柴胡、茯苓、陳皮、炒白芍、桂枝、牡丹皮、荊芥、覆盆子、枸杞子組成。臨床實(shí)踐采用該方治療VC性不育癥，療效滿意，顯著改善VC局部陰囊潮濕墜脹疼痛等癥狀的同時(shí)，還可提高患者精子活力，提高生育能力。采用縮窄左腎靜脈并結(jié)扎左側(cè)精索靜脈側(cè)支的方法建立大鼠VC模型，對(duì)該方治療經(jīng)索靜脈曲張性不育癥的機(jī)制研究進(jìn)行了預(yù)實(shí)驗(yàn)，給藥干預(yù)4周后，通脈方組大鼠附睪精子活力顯著高于模型組大鼠附睪精子活力；模型組大鼠附睪α-糖苷酶與L-肉毒堿含量低下，與模型組比較，通脈方組α-糖苷酶與L-肉毒堿含量明顯增高。但今后，尚需開(kāi)展廣泛而深入的研究，以揭示該方治療VC性不育癥的藥效學(xué)，為開(kāi)發(fā)中藥新藥治療VC奠定基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

[1]宋春生，趙家有.良性前列腺增生動(dòng)物模型研究進(jìn)展.中國(guó)性科學(xué)，2013，22（1）：13-15.

[2]Shafik A， Wali MA， Abdel Azis YE， et al. Experimental model of varicocele.Eur Urol， 1989，16（4）：298-303.

[3]Laven JS， Wensing CJ. Induction of varicocele in the dog： I. Partial ligation of the left renal vein does not induce a varicocele in the dog. J Androl， 1989，10（1）：9-16.

[4]息金波，高軍中，陳曉. 實(shí)驗(yàn)性精索靜脈曲張睪丸生精功能障礙的研究.首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，24（2）：169-171.

[5]Snydle FE， Cameron DF. Surgical induction of varicocele in the rabbit. J Urol， 1983，130（5）：1005-1009.

[6]堯冰，韓大愚，鄧春華，等. 青春期大鼠左側(cè)精索靜脈的解剖變異及其在實(shí)驗(yàn)性左側(cè)精索靜脈曲張模型中的運(yùn)用.中華男科學(xué)雜志，2014，20（6）：505-509.

[7]王潤(rùn)，康建設(shè)，周性明，等. 人工誘導(dǎo)大鼠精索靜脈曲張的新方法. 鐵道醫(yī)學(xué)，1986，14（3）：133-135.

[8]Zhang Y， Gao X， Liu X，et al. A new experimental inbred Wistar rat varicocele model： anatomy of the left spermatic vein and the effect on histology. Andrologia， 2008 ，40（1）：13-17.

[9]楊棟，海波，汪隆旺，等. 大鼠精索靜脈曲張模型的制作及變異分析.臨床泌尿外科雜志，2012，27（10）：782-784.

[10]Zhou T， Cao H， Chen G .Outcomes of experimental rat varicocele with and without microsurgery. BMC Urol， 2015（17）：15-19.

[11]Najari BB， Li PS，Ramasamy R， et al.Microsurgical rat varicocele model J Urol， 2014，191（2）：548-553.

[12]Wang R， Chang JS， Zhou XM，et al. Varicocele in the rat： a new experimental model. Effect on histology， ultrastructure and temperature of the testis and the epididymis. Urol Res， 1991，19（5）：319-322.

（收稿日期：2015-10-10）