葉遠(yuǎn)青??羅文沈??黃華??梁紅梅??陳群??楊聯(lián)君??鮑紅霞

[摘要]目的 分析乙型肝炎病毒前S1蛋白抗原（pre S1）、乙肝兩對(duì)半、乙肝病毒基因（HBV DNA）聯(lián)合檢測(cè)在乙肝患者臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值。 方法 選取2011年4月～2014年4月我院住院及門診收治的160例乙肝患者作為研究對(duì)象，于清晨空腹條件下取其血清標(biāo)本，采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清pre S1及乙肝兩對(duì)半水平，同時(shí)采用熒光定量擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)血清內(nèi)HBV-DNA水平。 結(jié)果 大三陽(yáng)組患者前S1抗原與乙肝HBV DNA陽(yáng)性率均明顯高于其他HBV-M模式，組間對(duì)比差異顯著（P<0.05），HBsAg陽(yáng)性HBcAb陽(yáng)性組前S1抗原陽(yáng)性率明顯高于小三陽(yáng)組（P<0.05）；前S1抗原陽(yáng)性組HBV DNA陽(yáng)性率明顯高于對(duì)應(yīng)前S1抗原陰性組，其中以HBsAg+HBeAg+HBcAb+pre S1+組HBV DNA陽(yáng)性率最高，且其HBV DNA含量水平同樣最高；146例HBsAg陽(yáng)性患者中，137例HbeAg陽(yáng)性，陽(yáng)性率為93.8%，且其中HBeAg+組，前S1抗原陽(yáng)性率為88.9%，明顯高于HBeAg-組，組間對(duì)比差異顯著（P<0.05）；HBsAg陽(yáng)性患者HBV DNA陽(yáng)性100例，陽(yáng)性率68.5%。且HBV DNA陽(yáng)性組前S1抗原陽(yáng)性率為85.0%，明顯高于HBV DNA-組，提示HBsAg陽(yáng)性患者血清中pre S1與HBV DNA相關(guān)性較強(qiáng)（P<0.05）。結(jié)論 采取三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)，可在盡早時(shí)間內(nèi)發(fā)現(xiàn)乙肝患者病毒感染情況，為患者的診斷與治療提供指導(dǎo)。

[關(guān)鍵詞]乙型肝炎病毒；前S1抗原；HBV DNA；聯(lián)合檢測(cè)；價(jià)值

[中圖分類號(hào)] R512.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2015）17-146-04

Clinical value analysis of combined detection of Hepatitis B Virus pre S1 protein antigen， five indexes of Hepatitis B and HBV DNA of patients with Hepatitis B in clinical diagnosis

YE Yuanqing LUO Wenshen HUANG Hua LIANG Hongmei CHEN Qun YANG Lianjun BAO Hongxia

Department of Laboratory， Second People's Hospital， Longgang District， Shenzhen 518112， China

[Abstract] Objective To analyze the application value of combined detection of Hepatitis B Virus（HBV） pre S1 protein antigen， five indexes of Hepatitis B and HBV DNA of Patients with Hepatitis B in Clinical Diagnosis. Methods 160 patients with Hepatitis B who were admitted to our hospital from April 2011 to April 2014 were selected as research subjects. Patients serum samples in fasting condition were collected in the morning. Serum pre S1 and five indexes of Hepatitis B were detected by enzyme linked immunoassay and level of HBV DNA in serum was detected by fluorescent quantitative PCR at the same time. Results Positive rates of pre S1 antigen and HBV DNA of patients in the great three positive group was all significantly higher than other HBV-M models. The compared groups have significantly differences （P<0.05）. Positive rates of pre S1 antigen in the HBeAg and HBcAb positive group was significantly higher than that in the small three positive group （P<0.05）. Positive rate of HBV DNA in positive pre S1 antigen group was significantly higher than that in the negative pre S1 antigen group， of which， positive rate of HBV DNA in HBsAg+HBe Ag+HBcAb+pre S1+ group was highest and level of HBV DNA in this group was also highest. Among 146 HBsAg positive patients， 137 were positive HBe Ag patients and positive rate of it was 93.8%. Positive rate of pre S1 antigen was 88.9% in HBeAg+ group which was significantly higher than that of HBeAg-group. These compared groups have significantly differences（P<0.05）. 100 HBV DNA cases were in positive HBsAg patients and the positive rate was 68.5%. Positive rate of pre S1 antigen in positive HBV DNA group was 85.0% which was significantly than that of HBV DNA- group. It suggested that there was a strong correlation between serum pre S1 and HBV DNA in positive HBsAg patients（P<0.05）. Conclusion Combined detection of the three items can discover infection situation of Hepatitis B Virus as soon as possible to give instructions for diagnosis and treatment of patients.endprint

[Key words] Hepatitis B Virus； Pre S1 antigen； HBV DNA； Combined detection； Value

乙肝兩對(duì)半，即乙肝五項(xiàng)是具有代表性的傳統(tǒng)乙肝病毒血清標(biāo)志物，當(dāng)前依然作為臨床判別乙肝患者病情嚴(yán)重程度及傳染性的關(guān)鍵指標(biāo)，其組合模式較為復(fù)雜[1]。有文獻(xiàn)提示，其可能受到乙肝病毒變異及藥物治療方案的影響，在反饋乙肝病毒復(fù)制及傳染性方面有一定的局限性，可能引起誤診與漏診[2]?；诖?，為分析診斷、檢測(cè)乙肝病毒，提高診斷準(zhǔn)確性，降低漏檢率的有效方案，我院對(duì)收治的160例患者進(jìn)行了整合研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2011年4月～2014年4月我院住院及門診收治的160例乙肝患者作為研究對(duì)象。所有納入對(duì)象均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)頒布的乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男90例，女70例；年齡22～70歲，平均（41.2±1.3）歲。

1.2 方法

所有患者均于清晨空腹條件下采集其血液標(biāo)本，保存待測(cè)。前S1抗原及乙肝兩對(duì)半應(yīng)用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)于上海阿爾法生物技術(shù)及上?？迫A生物工程有限公司，按照參照試劑使用說(shuō)明操作。對(duì)HBV DNA的檢測(cè)則應(yīng)用熒光定量檢測(cè)技術(shù)，選用PCR擴(kuò)增儀實(shí)施檢測(cè)。檢測(cè)值≥5×102 copies/mL則視為HBV DNA陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料進(jìn)行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料進(jìn)行x2檢驗(yàn)，相關(guān)性則行Pearson分析，以r表示，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 常見(jiàn)HBV-M模式中HBV DNA及前S1抗原檢測(cè)結(jié)果

大三陽(yáng)組患者前S1抗原與乙肝HBV DNA陽(yáng)性率均明顯高于其他HBV-M模式，組間對(duì)比差異顯著（x2=16.8016、12.6227、10.2874、16.2146，P<0.05），HBsAg陽(yáng)性、HBcAb陽(yáng)性組前S1抗原陽(yáng)性率明顯高于小三陽(yáng)組（x2=9.3854，P<0.05）。見(jiàn)表1。

表1 常見(jiàn)HBV-M模式中HBV DNA及前s1抗原檢測(cè)結(jié)果[n（%）]

HBV-M模式 n Pre S1

陽(yáng)性 HBV DNA

陽(yáng)性

HBsAg+HBeAg+HBcAb+（大三陽(yáng)） 26 24（92.3） 21（80.8）

HBsAg+HBeAb+HBcAb+（小三陽(yáng)） 102 60（58.8） 32（31.4）

HBsAg+HBcAb+ 18 14（77.8） 7（38.9）

HBsAb+HBcAb+ 2 0 0

HBsAb+HBeAb+HBcAb+ 6 0 1（16.7）

HBeAb+HBeAb+ 3 0 0

HBV-M全陰 3 0 0

總計(jì) 160 98（61.3） 61（38.1）

2.2 HBsAg陽(yáng)性3組模式中前S1抗原與HBV DNA的含量的關(guān)系

前S1抗原陽(yáng)性組HBV DNA陽(yáng)性率明顯高于對(duì)應(yīng)前S1抗原陰性組，兩組對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=4.0929、47195，P<0.05），后一組HBV DNA陽(yáng)性率高于前S1抗原陰性組，但對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=0.0198，P>0.05），其中以HBsAg+HBeAg+HBcAb+pre S1+組HBV DNA陽(yáng)性率最高，且其HBV DNA含量水平同樣最高。見(jiàn)表2。

2.3 HBsAg陽(yáng)性患者血清pre S1與HBeAg相關(guān)性

146例HBsAg陽(yáng)性患者中，137例為HbeAg-，占93.8%，9例HBeAg+，占6.2%，且其中HBeAg+組，PreS1+8例，占88.9%，明顯高于HBeAg-組的62.0%，組間對(duì)比差異顯著（x2=10.8899，P<0.05），提示HBsAg陽(yáng)性患者血清中pre S1抗原與HBeAg有較強(qiáng)的相關(guān)性（r=0.98，P<0.05）。見(jiàn)表3。

表2 HBsAg陽(yáng)性3組模式中前S1抗原與HBV DNA的含量的關(guān)系 [n（%）]

HBV-M模式 n HBV DNA（copies/mL） 陽(yáng)性率（%）

<5×102 5×102～1×103 103～104 105～106 >107

HBsAg+HBe Ag+HBcAb+pre S1+ 24 4（16.7） 1（4.2） 3（12.5） 8（33.3）* 9（37.5）* 83.3*

HBsAg+HBe Ag+HBcAb+pre S1- 2 1（50.0） 0 1（50.0）* 0 0 50.0

HBsAg+HBeAb+HBcAb+pre S1+ 60 35（58.3） 3（5.0） 17（28.3） 3（5.0） 0 33.3

HBsAg+HBeAb+HBcAb+pre S1- 42 35（83.3）* 2（4.8） 6（10.0） 1（2.4） 0 16.7

HBsAb+HBcAb+pre S1+ 14 9（64.3） 1（7.1）* 3（21.4） 1（7.1） 0 28.6

HBsAb+HBcAb+pre S1- 4 3（75.0） 0 1（25.0） 0 0 25.0

總計(jì) 146 87（59.6） 7（4.8） 31（21.2） 13（8.9） 9（6.2） 36.3

注：與其他HBV-M模式比較，*P<0.05

表3 HBsAg陽(yáng)性患者血清pre S1與HBeAg相關(guān)性

HbeAg n Pre S1- Pre S1+ rendprint

HBeAg- 137 52（38.0） 85（62.0） 0.51

HBeAg+ 9 1（11.1） 8（88.9） 0.98

2.4 HBsAg陽(yáng)性患者血清pre S1與HBV DNA相關(guān)性

HBsAg陽(yáng)性患者HBV DNA陽(yáng)性100例，陽(yáng)性率68.5%。且相關(guān)性分析提示，PreS1在HBV DNA+中陽(yáng)性率為85.0%，顯著高于HBV DNA-組的56.5%（x2=14.0200，P<0.05），提示HBsAg陽(yáng)性患者血清中pre S1與HBV DNA相關(guān)性較強(qiáng)（r=0.69，P<0.05）。見(jiàn)表4。

表4 HBsAg陽(yáng)性患者血清pre S1與HBV DNA相關(guān)性

HBV DNA n Pre S1- Pre S1+ r

HBV DNA- 46 20（43.5） 26（56.5） 0.16

HBV DNA+ 100 15（15.0） 85（85.0） 0.69

3 討論

大量研究報(bào)道證實(shí)，乙肝屬于我國(guó)發(fā)病率最高的傳染性疾病的范疇[3]，目前已成為全球公共衛(wèi)生問(wèn)題，且不同地區(qū)流行強(qiáng)度有一定的差異。據(jù)世衛(wèi)組織數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球范圍內(nèi)乙肝病毒攜帶者已逾3.5億，占5%[4]。我國(guó)則為較具代表性的肝炎大國(guó)，病毒攜帶率超過(guò)10%，全國(guó)超過(guò)1.2億人攜帶乙肝病毒，因而必須重視對(duì)乙肝的預(yù)防及診斷、治療[5]。

乙型肝炎病毒為雙鏈環(huán)狀DNA病毒，其基因組長(zhǎng)度在3.1kb左右，含四個(gè)不同的開(kāi)放讀碼框，即X、S、P、C區(qū)[6]。S區(qū)由前S1抗原與前S2抗原基因構(gòu)成，編碼表示為preS1、preS2蛋白及HBsAg，是構(gòu)成HBV外膜蛋白的重要構(gòu)成部分[7]。前S1抗原蛋白由氨基酸殘基構(gòu)成，依附于管型顆粒與Dane顆粒上，在乙肝病毒的裝配、復(fù)制過(guò)程中產(chǎn)生著重要的作用，前S1抗原是乙型肝炎病毒附著于人體肝細(xì)胞的關(guān)鍵中樞部位，可與肝細(xì)胞膜受體結(jié)合，同時(shí)亦可與宿主細(xì)胞膜識(shí)別點(diǎn)位進(jìn)行結(jié)合，使得變異病毒產(chǎn)生傳染性[8]。前S1抗原富含肝細(xì)胞膜受體，有其較高的免疫原性，與乙型肝炎病毒的入侵與復(fù)制存在較強(qiáng)的相關(guān)性[9-10]。

本組研究中，通過(guò)對(duì)160例患者血清樣本實(shí)施乙肝病毒pre S1、乙肝兩對(duì)半與HBV DNA檢測(cè)，提示其中146例HBsAg陽(yáng)性患者中前S1抗原與HBV DNA檢出率比較高，且大三陽(yáng)組患者前S1抗原與乙肝HBV DNA陽(yáng)性率均明顯高于其他HBV-M模式，HBsAg陽(yáng)性HBcAb陽(yáng)性組前S1抗原陽(yáng)性率明顯高于小三陽(yáng)組，同時(shí)顯示HBV preS1可反饋乙型肝炎病毒患者體內(nèi)乙肝病毒的復(fù)制情況，同時(shí)也可將其作為診斷乙肝病毒感染的關(guān)鍵指標(biāo)。

傳統(tǒng)臨床研究對(duì)血清標(biāo)志物兩對(duì)半的識(shí)別與判別研究中，顯示HBeAg為乙型肝炎病毒是否在患者體內(nèi)傳染與復(fù)制的關(guān)鍵指標(biāo)，其反饋病毒復(fù)制的傳染性與復(fù)制[11-12]，而其中HBeAb的產(chǎn)生則是對(duì)病毒復(fù)制降低的反饋，提示乙肝病毒傳染性減弱[13]。本組研究結(jié)果提示，血清前S1抗原與乙肝患者HBV DNA水平有較強(qiáng)的聯(lián)系，兩者有較強(qiáng)的相關(guān)性。

綜上，血清兩對(duì)半是反饋乙肝患者機(jī)體感染乙型肝炎病毒后免疫狀態(tài)的重要標(biāo)志，但在反映病毒復(fù)制方面并不確切。另外，可將HBV DNA含量作為反饋患者乙肝病毒感染與復(fù)制的重要指標(biāo)，但其價(jià)格相對(duì)昂貴，臨床推廣存在一定的困難。而血清前S1抗原則即可顯示HBV的復(fù)制狀況，同時(shí)免受病毒變異的影響，且操作簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉，可推廣。總之，采取三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)，可在盡早時(shí)間內(nèi)發(fā)現(xiàn)乙肝患者病毒感染情況，為患者的診斷與治療提供指導(dǎo)。

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（收稿日期：2015-05-17）endprint