秦彥強，孫忠人，魏慶雙，姜 凡，劉尚策，張亞娟

(黑龍江中醫(yī)藥大學，黑龍江 哈爾濱150040)

隨著社會的發(fā)展，老齡化的進一步加重，腦血管疾病逐漸成為目前我國三大致死性疾病之一［1］。而在腦血管疾病譜中，腦血栓形成發(fā)病率占到1/3。由于中樞神經(jīng)元損傷的不可逆性，無法自然恢復，往往形成殘疾，重則危機生命。因此，積極開展腦梗死的預防工作，對于降低缺血性腦血管疾病尤其是腦梗死的發(fā)病率、致殘率、致死率等顯得尤為重要。

臨床中發(fā)現(xiàn)，針刺風池穴可以改善腦供血不足所引發(fā)的各種癥狀，包括眩暈、一過性黑蒙等，尤其對椎-基底動脈系統(tǒng)TIA 具有良好的改善作用。而有研究表明TIA 可誘發(fā)腦缺血耐受，并且有學者證實針刺風池穴對椎-基底動脈系統(tǒng)血流速度具有“雙相、良性”調節(jié)作用［2］。筆者臨床中總結發(fā)現(xiàn)，曾經(jīng)因后循環(huán)缺血而采用針刺風池穴治療的患者，發(fā)生腦血栓形成性腦梗死的病灶面積通常較小，經(jīng)康復訓練后，后遺癥較少。因此，推測針刺風池穴可能存在激活大腦的缺血耐受現(xiàn)象。為進一步證實此推斷，設計實驗研究，探討針刺風池穴預處理對缺血性腦血管疾病的預防及治療作用。

1 材料及方法

1.1 實驗動物

選用健康成年的Wistar 雄性大鼠32 只，由黑龍江中醫(yī)藥大學內的實驗動物中心提供，所有實驗大鼠體重約為(330 ±10)g。

1.2 分組方法

所有實驗用Wistar 大鼠，應用隨機數(shù)字表法，分為4 個小組，各組大鼠分布情況如下:正常組8 只，腦梗死組8 只，缺血預處理組8 只，針刺預處理組8 只。

1.3 模型制備

線拴法制備大鼠大腦中動脈閉塞的動物模型:采用改良Zea Longa［3］方法制備左側大腦中動脈閉塞腦梗死模型。

1.4 缺血預處理方法

動物麻醉，經(jīng)頸外動脈插入自制尼龍線栓，栓塞大腦中動脈后，間斷缺血30 min(3 次10 min，每個10 min后將線栓退至頸內動脈內恢復血流10 min)，術后拔出線栓，結扎頸外動脈的殘端。常規(guī)飼養(yǎng)24 h后，采用改良Zea Longa 法制備大鼠大腦中動脈閉塞(MCAO)動物模型。

1.5 針刺方法

針刺大鼠雙側風池穴，每日針刺l 次，每次30 min。連續(xù)針刺7 天。針刺結束后行MCAO 動物模型制備。

1.6 指標檢測及方法

指標檢測由不了解實驗分組及治療情況的研究人員負責，并進行指標評估與記錄。

1.6.1 神經(jīng)功能評定 實驗動物麻醉清醒后，將其放回鼠籠，自由飲食，分別于MCAO 后24 h、72 h 和7 天分別進行神經(jīng)功能評分。評分采用Longar5 分制標準。評分標準如表1。

表1 大鼠神經(jīng)功能評分標準

1.6.2 平衡試驗(Beam Balanee Test) 各組大鼠分別于實驗周期的第24 h、72 h 和7 天3 個時間點分別進行平衡功能評測。評分方法:將一根寬1.5 cm、長150 cm 的木條一端懸空，另一端固定。觀察1 min 內大鼠的行為反應，按表2 標準進行評分。在每個評測日進行4 次測試，兩次間歇2 min。4 次測試結果取平均值進行統(tǒng)計分析。

表2 大鼠平衡實驗評測標準

1.6. 3 Morris 水迷宮試驗 定位航行實驗(Place Navigation Test):定位航行實驗是用來測量大鼠對水迷宮學習和記憶的獲得能力。將4 組大鼠于實驗周期開始后第4 天開始進行學習訓練。歷時4 天。每天進行4 次訓練，每次訓練間隔為30 s。

空間探索實驗:于定位航行實驗第7 天下午撤除平臺，大鼠于原平臺對側象限放入水池，觀察實驗大鼠在120 s 內在原平臺所在象限巡游時間的總和，記錄為空間探索時間。

1.7 統(tǒng)計分析

2 實驗結果

2.1 各組大鼠的神經(jīng)功能學評分

正常組神經(jīng)功能評分為0 分，腦梗死組、缺血預處理組和針刺預處理組神經(jīng)功能評分均有不同程度的缺損，重復測量數(shù)據(jù)分析顯示，各組間存在差異，有統(tǒng)計學意義，P ＜0.05。各組不同時間點神經(jīng)功能評分差異有統(tǒng)計學意義，P ＜0.05。其中缺血預處理組和針刺預處理組神經(jīng)功能評分改善情況優(yōu)于腦梗死組，差異有統(tǒng)計學意義，P ＜0.05。而針刺預處理組和缺血預處理組比較，差異無統(tǒng)計學意義，P ＞0.05。4 組大鼠神經(jīng)功能評分結果見表3。

表3 各組大鼠神經(jīng)功能學評分比較 (±s)

表3 各組大鼠神經(jīng)功能學評分比較 (±s)

注:與腦梗死組比較，▲P ＜0.05;與缺血預處理組比較，★P ＞0.05。

組 別 n 1 天 3 天 7天正常組8 0.00 ±0.00 0.00 ±0.00 0.00 ±0.00腦梗死組 8 2.63 ±0.74 2.38 ±0.52 1.63 ±0.52缺血預處理組 8 2.75 ±0.71 1.50 ±0.54 0.75 ±0.71▲針刺預處理組 8 2.50 ±0.93 1.38 ±0.52 0.88 ±0.99▲★

2.2 各組大鼠平衡試驗結果

各組大鼠分別于實驗周期的第24 h、72 h 和7 天3 個時間點進行平衡功能評測。采用重復測量數(shù)據(jù)方差分析顯示，各組間總體差異有統(tǒng)計學意義，P ＜0.05，缺血預處理組和針刺預處理組平衡功能改善情況優(yōu)于腦梗死組，差異有統(tǒng)計學意義，P ＜0.05。而針刺預處理組和缺血預處理組比較，差異無統(tǒng)計學意義，P ＞0.05。各組平衡實驗結果見表4。

表4 各組大鼠平衡試驗結果比較 (±s)

表4 各組大鼠平衡試驗結果比較 (±s)

注:與腦梗死組比較，▲P ＜0.05;與缺血預處理組比較，★P ＞0.05。

組 別 1 天 3 天 7天正常組1.28 ±0.21 1.25 ±0.13 1.31 ±0.11腦梗死組 4.38 ±0.74 3.75 ±0.71 3.13 ±0.99缺血預處理組 4.25 ±0.89 3.13 ±0.84 2.00 ±0.76▲針刺預處理組 4.13 ±0.84 2.75 ±0.71 2.25 ±1.04▲★

2.3 Morris 水迷宮學習記憶能力比較

2.3.1 定位航行試驗結果 4 組大鼠于實驗周期開始后第4 天開始學習訓練，記錄第7 天4 次訓練所用時間的平均值作為逃避潛伏期指標。采用單因素方差分析顯示，各組間差異有統(tǒng)計學意義，P ＜0.05。腦梗死組、缺血預處理組和針刺預處理組潛伏期時間明顯延長，與正常組比較差異有統(tǒng)計學意義，P ＜0.05。而缺血預處理組和針刺預處理組與腦梗死組比較，潛伏期時間減小，差異有統(tǒng)計學意義P ＜0.01。針刺預處理組和缺血預處理組比較，差異無統(tǒng)計學意義，P ＞0.05。各組定位航行逃避潛伏期時間見表5。

表5 各組大鼠定位航行逃避潛伏期時間比較 (s，±s)

表5 各組大鼠定位航行逃避潛伏期時間比較 (s，±s)

注:與腦梗死組比較，△P ＜0.01;與缺血預處理組比較，★P ＞0.05。

組 別 7天正常組22.38 ±3.02腦梗死組 41.63 ±11.08缺血預處理組 25.00 ±5.61△針刺預處理組 27.75 ±7.57△★

2.3.2 空間探索試驗結果 4 組大鼠空間探索試驗評定結果采用單因素方差分析，結果顯示各組間差異有統(tǒng)計學意義，P ＜0.05。腦梗死組、缺血預處理組和針刺預處理組大鼠120 s 內在原平臺所在象限巡游時間明顯少于正常組，差異有統(tǒng)計學意義，P ＜0.05。提示記憶功能存在缺損。而缺血預處理組和針刺預處理組與腦梗死組比較，空間探索時間增加，差異有統(tǒng)計學意義，P ＜0.01。針刺預處理組和缺血預處理組比較，差異無統(tǒng)計學意義，P ＞0.05。各組空間探索時間見表6。

表6 各組大鼠空間探索時間比較 (±s)

表6 各組大鼠空間探索時間比較 (±s)

注:與腦梗死組比較，△P ＜0.01;與缺血預處理組比較，★P ＞0.05。

組 別 時間(s)正常組60.25 ±6.84腦梗死組 34.63 ±5.40缺血預處理組 46.88 ±5.97△針刺預處理組 45.63 ±4.37△★

3 討論

缺血性腦血管疾病是一組以動脈硬化為基礎，以腦組織發(fā)生缺血缺氧性損傷為主要病理改變的疾病。在損傷早期，存在多種機制包括局部炎癥反應［4-5］、血腦屏障破壞［6］、自由基損傷［7］、興奮性氨基酸毒性反應［8］、細胞內鈣超載［9］、細胞凋亡［10］等。因損傷區(qū)域不同，臨床變現(xiàn)通常不一。

Kitagawa 等［11］于1990 年報導在沙土鼠大腦內存在缺血耐受現(xiàn)象。缺血耐受現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)為腦梗死的防治提供了新的思路，開辟了新途徑，最近實驗研究發(fā)現(xiàn)除缺血之外，包括低氧［12］、高氧［13-14］、低溫［15］、藥物［16］、艾灸［17-18］等其他多種預處理方式均可以引起大腦對再次缺血的耐受。并且實驗證實針刺預處理也可誘導腦缺血耐受，從而對腦組織起保護作用［19-20］。

文獻研究發(fā)現(xiàn)，針刺風池穴可以調節(jié)椎基底動脈血流［21］，臨床中也發(fā)現(xiàn)，針刺風池穴可以改善腦供血情況，改善腦血流，擅長治療因腦供血不足引起的眩暈。《銅人腧穴針灸圖經(jīng)》中指出:風池主“目眩，苦頭痛，頸項痛不得回顧，目淚出，欠氣多?！憋L池穴位于斜方肌兩側與胸鎖乳突肌上端匯合處，上項線直下凹陷處發(fā)際內。與頸交感神經(jīng)聯(lián)系密切。臨床中筆者發(fā)現(xiàn)，針刺風池穴，可以起到降低交感神經(jīng)緊張度、興奮迷走神經(jīng)的作用。所以，筆者采用風池穴預處理，實驗結果證實，缺血預處理組、針刺預處理組與梗死組神經(jīng)功能學評分、平衡實驗評分比較，均有顯著性差異(P ＜0.05)，針刺預處理組定位航行試驗逃避潛伏期(27.75 ±7.57)s，空間探索時間(45.63 ±4.37)s，與腦梗死組比較有顯著性差異(P ＜0.05)。提示針刺風池穴預處理，可以改善腦梗死大鼠神經(jīng)功能，恢復平衡功能，提高學習、記憶能力，可以導致缺血性腦卒中的缺血性耐受。由于針刺無毒副作用、簡單易行、安全可靠、患者易于接受，值得在臨床中推廣使用。

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