劉敏　郭曉英　曹艷菲

摘要：白細(xì)胞分類計數(shù)方法（DLC）包括手工法白細(xì)胞分類計數(shù)、血細(xì)胞儀三分群法白細(xì)胞分類計數(shù)、血細(xì)胞儀五分類法白細(xì)胞分類計數(shù)的操作方法及臨床意義進(jìn)行分析。白細(xì)胞分類計數(shù)（DLC）主要用于血液造血系疾病、感染性疾病、過敏性和嗜酸細(xì)胞增多性疾病診斷、輔助診斷和篩查，非特異性防御功能和感染性疾病預(yù)后評價。

關(guān)鍵詞：白細(xì)胞分類計數(shù)；臨床意義

【中圖分類號】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1672-8602（2015）06-0116-01

白細(xì)胞分類計數(shù)是把血液制成薄血涂片，按照形態(tài)特征分類計數(shù)白細(xì)胞，得出相對比值（百分率），以觀察數(shù)量、形態(tài)和質(zhì)量的變化，對疾病有輔助診斷意義[1]。

1標(biāo)本來源

均為我院門診患者及健康體檢者50例，其男27例，女23例，年齡最小4歲，最大63歲。

2 計數(shù)方法

2.1手工法白細(xì)胞分類計數(shù)

2.1.1標(biāo)本采集 可使用毛細(xì)血管采血法所取的樣本或靜脈血EDTA·K2抗凝樣本。

2.1.2試劑 瑞氏染液。

2.1.3操作 將血液滴加在潔凈的玻片上，用推片將其推成薄血涂片。自然干燥后用蠟筆在血涂片兩頭劃線以防染液溢出，然后將血涂片平放在染色架上。加瑞氏染液于血涂片上，使之覆蓋整個血涂片，固定0.5～1min。滴加等量的緩沖液與染液混勻，染色5～10min。用清水沖去染液，待自然干燥后或用吸水紙吸干即可鏡檢。

2.1.4參考值 中性粒細(xì)胞，桿狀核0.01～0.05（1%～5%）分葉核0.50～0.70（50%～70%）。嗜酸性粒細(xì)胞0.005～0.05（0.5%～5%）。嗜堿性粒細(xì)胞0～0.01（0%～1%）。淋巴細(xì)胞0.20～0.40（20%～40%）。單核細(xì)胞0.03～0.08（3%～8%）。

2.2血細(xì)胞儀三分群法白細(xì)胞分類計數(shù)

2.2.1標(biāo)本采集 靜脈血EDTA·K2抗凝樣本1～2ml。

2.2.2試劑操作 根據(jù)儀器不同使用其配套試劑。按儀器操作說明書進(jìn)行操作。

2.2.3參考值 儀器的報告方式為小細(xì)胞、中間細(xì)胞及大細(xì)胞。小-細(xì)胞代表淋巴細(xì)胞，中間細(xì)胞包括單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胸及在病理情況下出現(xiàn)的原始及幼稚細(xì)胞，大細(xì)胞代表中性分葉核以及桿狀核和晚幼粒細(xì)胞[2]。小細(xì)胞群（1.0～3.3）×109/L。中間細(xì)胞群（0.2～0.，7）×109/L。大細(xì)胞群 （1.8～6.4）×109/L。

2.3血細(xì)胞儀五分類法白細(xì)胞分類計數(shù)

2.3.1標(biāo)本采集 靜脈血EDTA·K2抗凝樣本1～2ml。

2.3.2試劑方法 根據(jù)儀器不同使用其配套試劑。操作按儀器操作說明書進(jìn)行操作。

2.3.3參考值 五分類法白細(xì)胞分類計數(shù)的報告方式同手工法，有淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞，故參考范圍如手工法白細(xì)胞分類。雖然儀器法白細(xì)胞五分類采用了多種技術(shù)來保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，但由于儀器是依靠細(xì)胞的各種物理化學(xué)特性來進(jìn)行細(xì)胞分類，與手工方法利用細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分類不同，故在各種病理情況下準(zhǔn)確性不如手工方法。手工方法仍然是白細(xì)胞分類計數(shù)的金標(biāo)準(zhǔn)。

3 白細(xì)胞分類計數(shù)的意義

3.1中性粒細(xì)胞 具有吞噬和激活補(bǔ)體功能，能吞噬細(xì)菌和組織細(xì)胞碎片，激活的補(bǔ)體成分（C3a、C5a、C567）具有粒細(xì)胞趨化作用。

3.1.1增多 ①反應(yīng)性增多 見于：a.感染，細(xì)菌、病毒、真菌、螺旋體、立克次體、寄生蟲，特別是化膿性細(xì)菌全身性或嚴(yán)重局部感染如敗血癥、肺炎、腦膜炎、闌尾炎、急性腎盂炎或腎盂腎炎、丹毒、蜂窩組織炎等。b.炎癥，化學(xué)性如腐蝕性或刺激性化學(xué)品損傷、急性胰腺炎、化學(xué)性腹膜炎；免疫性如風(fēng)濕熱、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、結(jié)節(jié)性動脈周圍炎、脈管炎等。c.急性中毒，化學(xué)品或藥物中毒，自身代謝性中毒如尿毒癥、酮癥酸中毒或乳酸性酸中毒。d.急性失血，尤以內(nèi)臟出血如肝、脾、宮外孕破裂出血；1～2小時開始升高，2～5小時達(dá)高峰。e.組織損傷或壞死，如心、肺、腎、腦等臟器梗死，肌肉挫傷、大手術(shù)后。f.排異反應(yīng)。g.惡性腫瘤，尤其合并感染、壞死或骨髓轉(zhuǎn)移時。②腫瘤性增多 見于骨髓增生性疾病如白血病特別是慢性粒細(xì)胞白血病、骨髓纖維化、原發(fā)性血小板增多癥。

3.1.2減少 ①感染 某些病毒或桿菌感染如流感、傷寒、副傷寒、布魯菌病，機(jī)體反應(yīng)性降低時的嚴(yán)重感染。②造血功能障礙 缺乏造血組織如再生障礙性貧血、缺乏造血原料如巨幼細(xì)胞性貧血。③骨髓病 非白血性白血病、惡性組織細(xì)胞病、腫瘤骨轉(zhuǎn)移、苯中毒、輻射損傷。④破壞過多 自身抗體如免疫性粒細(xì)胞減少癥、脾功能亢進(jìn)癥等。⑤藥物 多種抗腫瘤藥物、氯霉素、頭孢菌素、磺胺類、奎諾酮類、萬古霉素、磺脲類、氨基比林、非那西汀、保太松、硫氧嘧啶和甲巰咪唑類、氯丙嗪、奎寧等藥物使用。⑥特發(fā)性粒細(xì)胞減少癥、Felty綜合征。

3.2嗜酸性粒細(xì)胞 與過敏反應(yīng)密切相關(guān)，受嗜酸細(xì)胞趨化因子調(diào)節(jié)，吞噬免疫復(fù)合物和異體蛋白。

3.2.1增多 ①變態(tài)反應(yīng)性疾病，如支氣管哮喘、血管神經(jīng)性水腫、血清病、蕁麻疹、藥物過敏反應(yīng)。②寄生蟲病，尤其是腸道外感染如華支睪吸蟲、血吸蟲、肺吸蟲、絲蟲、包囊蟲病。③某些皮膚病，如濕疹、剝脫性皮炎、天皰瘡、銀屑病等。④腫瘤性疾病，如腫瘤轉(zhuǎn)移壞死時、肺癌、惡性淋巴瘤、慢性粒細(xì)胞白血病、真性紅細(xì)胞增多癥[3]。⑤內(nèi)分泌疾病，如垂體前葉功能減退癥、腎上腺皮質(zhì)功能減退癥。⑥酸細(xì)胞浸潤性疾病，如嗜酸細(xì)胞增多綜合征、伴有肺浸潤的嗜酸細(xì)胞增多癥如L0f. fler綜合征、嗜酸細(xì)胞性肺炎、熱帶嗜酸細(xì)胞增多癥以及嗜酸細(xì)胞性心內(nèi)膜炎、嗜酸細(xì)胞性肉芽腫等。⑦某些感染性疾病，如猩紅熱、傳染病恢復(fù)期。⑧某些結(jié)締組織病，如皮肌炎、結(jié)節(jié)性動脈周圍炎。

3.2.2減少 見于急性嚴(yán)重感染如傷寒、肺炎、敗血癥，各種急性應(yīng)激如創(chuàng)傷、大手術(shù)后，皮質(zhì)醇增多癥或皮質(zhì)激素治療，巨幼細(xì)胞性貧血等。

3.3嗜堿性粒細(xì)胞 表面有IgE的Fc受體，與IgE結(jié)合即被致敏，再受相應(yīng)抗原攻擊時發(fā)生顆粒釋放反應(yīng)，顆粒含有組胺、慢反應(yīng)物、肝素、嗜酸細(xì)胞趨化因子、血小板活化因子。

3.3.1增多 見于骨髓增殖性疾病如慢性粒細(xì)胞白血病、骨髓纖維化，也見于慢性溶血、脾切除術(shù)后、淋巴瘤、骨髓轉(zhuǎn)移癌、鉛中毒、過敏反應(yīng)。

3.3.2減少 未見有臨床意義。

3.4淋巴細(xì)胞 免疫細(xì)胞，合成和釋放淋巴因子，參與細(xì)胞免疫和體液免疫。

3.4.1增多 ①生理性增多，6歲前兒童期伴隨免疫功能成熟過程。②感染，病毒感染如麻疹、風(fēng)疹、水痘、流行性腮腺炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥、傳染性淋巴細(xì)胞增多癥、病毒性肝炎、流行性出血熱等；細(xì)菌感染如百日咳、結(jié)核病、布魯菌??；螺旋體感染如梅毒。病毒感染可見胞體大、核不規(guī)則、胞漿豐富或泡沫樣的異型淋巴細(xì)胞。異型淋巴細(xì)胞增多有時也見于藥物過敏、血液透析或體外循環(huán)。③急性傳染病恢復(fù)期。④自身免疫性疾病、器官移植排異反應(yīng)前。⑤淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤。

3.4.2減少 主要見于皮質(zhì)醇或烷化劑治療，輻射損傷、免疫缺陷綜合征、先天性免疫球蛋白缺乏癥。

3.5單核細(xì)胞 吞噬細(xì)胞，具有吞噬細(xì)菌、清除壞死細(xì)胞和異物、向T細(xì)胞傳遞免疫信息功能。

3.5.1增多 ①病毒、立克次體感染，如麻疹、水痘、風(fēng)疹、傳染性單核細(xì)胞增多癥、病毒性肝炎、斑疹傷寒。②慢性細(xì)菌、螺旋體或寄生蟲感染，如結(jié)核病、麻風(fēng)病、亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎（SBE）、梅毒、瘧疾、黑熱病等。③急性傳染病或急性感染恢復(fù)期。④惡性淋巴瘤、惡性組織細(xì)胞病、單核細(xì)胞白血病。

3.5.2減少 未見有臨床意義。

參考文獻(xiàn)

[1] 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜，主編.全國臨床檢驗操作規(guī)程.第3版.武漢：東南大學(xué)出版社，2006：132-133，137-138.

[2] 唐滬強(qiáng)，許凱聲，吳敏良，等.庫爾特STKS血細(xì)胞分析儀對白細(xì)胞分類異常提示的可信性[J].臨床檢驗雜志，2000，18（3）：176-177.

[3] 李筱梅，楊玉寶，李承文，等.白細(xì)胞分類計數(shù)方法學(xué)比較[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2004，19（2）：100-103.