羅北照　趙天珍

摘要 [目的] 更好地提高測定食品樣品中抗氧化劑時(shí)的前處理質(zhì)量。 [方法] 考察了用毛細(xì)管柱氣相色譜法同時(shí)測定含油脂食品中的抗氧化劑BHA、BHT、TBHQ的前處理方法的研究與改進(jìn)。[結(jié)果]樣品經(jīng)過甲醇渦旋振蕩提取、冷凍過濾凈化的方法處理后能有效去除油脂及各類雜質(zhì)，試驗(yàn)回收率在95%～101%，檢出限均為 1 mg/kg。[結(jié)論] 試驗(yàn)前處理方法具有快速、高效、精密度高、回收率高等優(yōu)點(diǎn)，適合開展大批量產(chǎn)品檢驗(yàn)工作。

關(guān)鍵詞 BHA；BHT；TBHQ；氣相色譜

中圖分類號 S-03 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 0517-6611（2015）19-266-02

丁基羥基茴香醚（BHA）、二丁基羥基甲苯（BHT）、特丁基對苯二酚（TBHQ）是常用的加于植物油中的抗氧化劑。其能有效地延緩油脂的氧化過程，提高食品的穩(wěn)定性，顯著地延長油脂及富脂食品的貨架期。TBHQ更能抑制幾乎所有細(xì)菌和酵母菌生長，對黃曲霉等危害人體健康的霉菌有很好的抑制作用。

抗氧化劑在當(dāng)今食品行業(yè)中普遍應(yīng)用。在GB/T5009.30-2003中的BHA、BHT的檢測方法中，樣品要經(jīng)過層析柱過濾[1]。溶劑選用不合理（二硫化碳毒性大，極易揮發(fā)），檢測工作量大，接觸毒物多，處理過程除油脂效果差，回收率低，色譜柱也會(huì)很快報(bào)廢。而在GB/T 23373-2009 《食品中抗氧化劑丁基羥基茴香醚（BHA）、二丁基羥基甲苯（BHT）與特丁基對苯二酚（TBHQ）的測定》中[2]，樣品提取油脂后，要先過0.45 mm濾膜，然后經(jīng)過凝膠滲透色譜裝置凈化，才能進(jìn)行檢驗(yàn)。樣品處理過程繁復(fù)，試劑多且毒性大。凝膠滲透色譜裝置在各實(shí)驗(yàn)室中不普及且一次處理樣品量不多，不適合大批量開展檢測工作。

為了更好地提高樣品的前處理的質(zhì)量，筆者結(jié)合實(shí)際中的抗氧化劑的添加使用情況，特對其前處理方法進(jìn)行研究與改進(jìn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)原理

甲醇提取樣品中的BHA、BHT、TBHQ。處理（渦旋提取、冷凍分離、過濾等）定容后經(jīng)氣相色譜氫火焰檢測器檢測，外標(biāo)法定量。

1.2 材料 供試樣品：月餅、花生油、調(diào)和油、人造奶油，市售。主要試劑：乙醚，分析純；甲醇，分析純；BHA標(biāo)準(zhǔn)品，純度≥99.0%；BHT標(biāo)準(zhǔn)品，純度≥99.3%；TBHQ標(biāo)準(zhǔn)品，純度≥99.0%。BHA、BHT、TBHQ標(biāo)準(zhǔn)儲備液（1 mg/ml）：準(zhǔn)確稱取BHA、BHT、TBHQ各100 mg于100 ml容量瓶中，用甲醇定容，4 ℃冰箱中避光保存。

BHA、BHT、TBHQ標(biāo)準(zhǔn)使用液：分別吸取標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、5.0 ml于一組10 ml容量瓶中，用甲醇定容。此標(biāo)準(zhǔn)系列濃度為50、100、150、200、250、500 mg/L?，F(xiàn)用現(xiàn)配。

主要儀器：氣相色譜儀，附FID檢測器；渦旋振蕩器；冰箱。

1.3 樣品前處理 脂肪提?。悍Q取樣品200 g，置于250 ml具塞錐形瓶中，加入無水乙醚至浸泡完全，放置過夜，快速濾紙過濾后，減壓回收溶劑，殘留脂肪備用。稱取2.00～5.00 g 脂肪于50 ml離心管中，加入10～20 ml甲醇，渦旋振蕩混合3 min后置于冰箱中冷凍分層。冷凍分層后（1～2 h），溶液用中速濾紙過濾，濾液轉(zhuǎn)移到25 ml容量瓶中，用少量冷凍甲醇分?jǐn)?shù)次沖洗，定容（此過程一定要保證在低溫時(shí)過濾完成，除油脂效果最為有效）。

1.4 色譜條件

[3] 色譜柱：毛細(xì)管柱 19091J-413 HP-5，內(nèi)徑0.320 mm，長度30 m，膜厚0.25 μm。柱溫：100 ℃（不保留），20 ℃/min到200 ℃（不保留），然后2.5 ℃/min到210 ℃（不保留），最后30 ℃/min到300 ℃（保留1 min）。不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣口溫度和檢測器溫度：250 ℃。 氣流條件：流速1.0 ml/min，H2：30 ml/min，空氣：400 ml/min，尾吹：25 ml/min。

1.5 測定 進(jìn)樣1 μl標(biāo)準(zhǔn)系列中各濃度標(biāo)準(zhǔn)使用液于氣相色譜儀中，測定不同濃度BHA、BHT、TBHQ的峰高，以濃度為橫坐標(biāo)，峰高為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同時(shí)進(jìn)樣1 μl試樣溶液，測定峰高與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。

1.6 結(jié)果計(jì)算 按下式計(jì)算：

X=A×50m×1 000

式中，

X為試樣中BHA、BHT、TBHQ含量（mg/kg）；

A為待測試樣中BHA、BHT、TBHQ含量（mg/L）；

m為試樣質(zhì)量（g）。

計(jì)算結(jié)果保留2位有效數(shù)字。其中100 mg/L的BHA、BHT、TBHQ標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖見圖1。

2 結(jié)果與分析

試驗(yàn)結(jié)果表明，BHA、BHT、TBHQ在10～500 mg/kg范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，其線性回歸方程分別為BHA：y=1.241 1x+0.347 2，相關(guān)系數(shù)r=0.999 95；BHT：y=1.307 8x+0.154 7，相關(guān)系數(shù)r=0.999 96；TBHQ：y=1.229 3x+0.225 8，相關(guān)系數(shù)r=0.999 92。

分別用月餅、花生油、調(diào)和油、人造奶油進(jìn)行試驗(yàn)，其結(jié)果及加標(biāo)回收率如表1所示。

由表1可見，各供試樣品的試驗(yàn)回收率在95%～101%，證明此方法精密度高，加標(biāo)回收率高，具有可操作性。

3 結(jié)論

樣品經(jīng)處理后上機(jī)測定具有精密度高、快速、干凈、回收率高等優(yōu)點(diǎn)，該方法適合開展大批量檢測工作。

參考文獻(xiàn)

[1] 北京市衛(wèi)生防疫站.GB/T 5009.30-2003 食品中叔丁基羥基茴香醚（BHA）與2，6-二叔丁基對甲酚（BHT）的測定[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003.

[2] 國家食品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)中心.GB/T 23373-2009 食品中抗氧化劑丁基羥基茴香醚（BHA）、二丁基羥基甲苯（BHT）與特丁基對苯二酚（TBHQ）的測定[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2009.

[3] 葉堅(jiān)，余濤.氣相色譜法同時(shí)測定食品中的BHA、BHT、TBHQ[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008，18（6）：1082-1084.