高元元++++++牛國(guó)平

[摘要] 目的 探討出血性腦卒中和缺血性腦卒中患者血清中膠原纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）的表達(dá)以及對(duì)預(yù)后的影響。方法 用ELISA方法檢測(cè)出血性腦卒中和缺血性腦卒中患者和健康對(duì)照組外周中GFAP的表達(dá)水平，統(tǒng)計(jì)分析GFAP表達(dá)與腦卒中的進(jìn)展及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果 出血性腦卒中患者外周血GFAP表達(dá)水平顯著高于缺血性腦卒中患者和正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P<0.05）。 結(jié)論 出血性腦卒中患者外周血GFAP表達(dá)水平高于缺血性腦卒中患者和正常對(duì)照組，且預(yù)后更差。

[關(guān)鍵詞] ELISA；腦卒中；GFAP

[中圖分類號(hào)] R446 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2014）12（a）-0038-02

膠原蛋白的一個(gè)重要組成成分就是膠原纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP），同時(shí)GFAP也是膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志性蛋白和主要的骨架成分[1]。GFAP存在于很多星形膠質(zhì)細(xì)胞譜系的亞群中，在現(xiàn)階段，普遍的應(yīng)用于判別病理和正常狀態(tài)下星形膠質(zhì)細(xì)胞來(lái)源的重要物質(zhì)。與此同時(shí)，GFAP還有利于星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)于正常形態(tài)的維持，使得星形膠質(zhì)細(xì)胞的突起更好的生長(zhǎng)和延長(zhǎng)。有研究表明，中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷時(shí)，膠原纖維酸性蛋白可釋放入外周血，特別是腦外傷后外周血中膠原纖維酸性蛋白濃度顯著升高[2]。腦卒中（stoke），也稱為腦血管意外（cerebrovascular accodent）或者中風(fēng)，是一類突發(fā)性急性腦血管疾病，多數(shù)是由于缺少局灶性神經(jīng)功能而引起的，包括腦梗塞、蛛網(wǎng)膜下腦出血、腦出血三類。腦卒中是全球范圍內(nèi)發(fā)病率較高的疾病，它是我們國(guó)家男性第3位死因和女性第2位死因[3]的疾病，每年有100多萬(wàn)人死于腦卒中，是死于缺血性心臟病人數(shù)的3倍多[4]。在老年人中，腦卒中是一類易致殘或死亡的疾病，現(xiàn)今人口逐漸老齡化，腦卒中對(duì)人口的危害也越來(lái)越嚴(yán)重。因此，防治腦卒中就成為醫(yī)院的一個(gè)重要工作，也引起社會(huì)的重視，所以探討GFAP的水平與腦卒中關(guān)系密切，對(duì)臨床有指導(dǎo)腦卒中的類型及其預(yù)后有重要價(jià)值。現(xiàn)分析2012年12月—2013年12月間住院的缺鐵性腦卒中以及出血性腦卒中患者80例的臨床資料，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

在徐州市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科和神經(jīng)外科中，選擇住院的缺血性腦卒中以及出血性腦卒中患者，共80例。所有的患者都滿足在全國(guó)第4屆腦血管學(xué)術(shù)會(huì)議上所制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且均通過(guò)顱腦CT的檢查進(jìn)行確診。80例患者中沒(méi)有繼發(fā)性腦出血等基礎(chǔ)性疾病。其中出血性腦卒中組男26例，女14例；年齡28～79歲。缺血性腦卒中組男22例，女18例；年齡35～82歲。正常對(duì)照組40例，均為來(lái)該院健康體檢者，男20例，女20例；年齡22～70歲。

1.2 主要試劑和儀器

GFAP檢測(cè)的ELISA試劑盒為美國(guó)Milipore公司生產(chǎn)；采集患者外周血5 mL，用3 000 r/min離心進(jìn)行15 min，讓血清分離，在-80 ℃的冰箱中保存以待檢測(cè)。采用瑞士奧斯邦酶免之星全自動(dòng)酶免分析儀。

1.3 方法

ELISA檢測(cè)血漿GFAP水平。腦卒中患者入院后立即采集外周血，正常對(duì)照組為健康體檢時(shí)抽取5 mL靜脈血，血液標(biāo)本置于抗凝管中，在室溫下，3 000 r/min離心15 min，取血漿置-80 ℃保存待檢。采用ELISA檢測(cè)血漿GFAP濃度，用伯樂(lè)酶標(biāo)儀BIO-RAD Model 680檢測(cè)樣品的吸光度值，并參照試劑盒說(shuō)明書(shū)計(jì)算出血漿膠原纖維酸性蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線和濃度，結(jié)果以ng/L表示。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 16.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 缺血性腦卒中患者和出血性腦卒中患者GFAP表達(dá)相關(guān)性分析

出血性腦卒中患者外周血GFAP表達(dá)明顯高于缺血性腦卒中組，同時(shí)大量出血組明顯高于少量出血組，且高于正常對(duì)照組，見(jiàn)表1。

表1 缺血性和出血性腦卒中組GFAP水平與對(duì)照組比較[ng/L，（x±s）]

注：與對(duì)照組相比，△P<0.05；與缺血性腦卒中組相比，□P<0.05。

2.2 GFAP水平與出血量關(guān)系

影像學(xué)顯示出血量越大，血腫體積越大，血清GFAP的水平越高（52.35±5.06）ng/L，比少量出血組的（41.10±7.02）ng/L高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），用Speman等級(jí)進(jìn)行相關(guān)分析，出血性腦卒中患者的出血量與外周血GFAP水平成正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=0.912 3，P<0.01）

3 討論

目前，臨床上腦卒中的診斷主要依靠醫(yī)師的臨床檢查和影像學(xué)技術(shù)（CT 或MRI）進(jìn)一步地證實(shí)。目前，GFAP作為腦卒中的生物標(biāo)志物的研究有很大進(jìn)展，這在急診環(huán)境中對(duì)于腦卒中的診斷、分型或甚至預(yù)后有重要的價(jià)值。

GFAP是一類酸性蛋白，其分子量在50～52 kDa之間。GFAP作為直徑8～10 μm的星形膠質(zhì)細(xì)胞的中間絲，存在于細(xì)胞質(zhì)和核周之間，是星形膠質(zhì)細(xì)胞的特異性分子標(biāo)記物之一，對(duì)神經(jīng)元起支持和營(yíng)養(yǎng)作用。GFAP不僅明顯的影響神經(jīng)系統(tǒng)功能的康復(fù)、突起的再生和受損神經(jīng)元的存活，而且對(duì)于星形細(xì)胞對(duì)損傷的反應(yīng)程度有決定性作用。如果中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損，會(huì)使得突起增長(zhǎng)且增多、細(xì)胞體積增大以及星形細(xì)胞的活化增加，GFAP的合成速度大大提高，因此GFAP的含量增加，是判斷星形膠質(zhì)細(xì)胞激活的主要標(biāo)準(zhǔn)，還可以在一定程度上判斷腦損傷的程度[5～7]。通過(guò)臨床研究知道，腦梗死患者在發(fā)病6 h后，GFAP在血清中的含量增加[8]，2～6 d時(shí)，達(dá)到最高值，腦梗死體積和神經(jīng)缺失癥狀也與GFAP水平是正相關(guān)的，而且還可以判斷癱瘓肢體神經(jīng)功能在3個(gè)月后的恢復(fù)情況[9]。此外，也有研究表明GFAP作為星形細(xì)胞的特異性蛋白，在急性腦損傷時(shí)均有異常表達(dá)，細(xì)胞破壞后其大量釋放，它們?cè)谕庵苎械纳叱潭扰c多種急性腦損傷疾病嚴(yán)重程度及預(yù)后密切相關(guān)，目前被認(rèn)為是判定腦損傷嚴(yán)重水平的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)[10]。endprint

通過(guò)臨床研究可知，出血性腦卒中患者在發(fā)病后，GFAP在血清中的含量明顯增加，且患者的癥狀和GFAP水平明顯相關(guān)，且與預(yù)后密切相關(guān)；缺血性腦卒中組患者的血清GFAP水平升高，但沒(méi)有出血性腦卒中組升高顯著，與之相對(duì)應(yīng)的是出血性腦卒中組的預(yù)后和后遺癥情況較缺血性腦卒中組更為嚴(yán)重，原因可能與出血性腦卒中組神經(jīng)元壞死和腦水腫更為嚴(yán)重，增大了星形膠質(zhì)細(xì)胞的活性，引起星形膠質(zhì)細(xì)胞壞死，大大增加了血腦屏障通透性，從而明顯的提高了GFAP在血漿中的含量。所以，對(duì)于腦卒中患者，應(yīng)該檢查其GFAP在血清中的變化情況，不單單是有利于急性期腦損傷程度的判斷，還可以很好的評(píng)估腦卒中的預(yù)后。此外，有報(bào)道稱動(dòng)脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血后，血漿GFAP濃度明顯升高，與蛛網(wǎng)膜下腔出血后神經(jīng)元壞死及神經(jīng)功能預(yù)后不良顯著相關(guān)[11]。也有報(bào)道稱，腦外傷后，血漿GFAP水平顯著升高[2]，明顯高于健康人群。

GFAP作為診治腦卒中的重要實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)具有較高的敏感性和特異性，有助于鑒別缺血性腦卒中和出血性腦卒中[12]；腦梗塞后能早期釋放且穩(wěn)定，可迅速定量測(cè)定而且價(jià)廉，有助于臨床醫(yī)生診斷和評(píng)估腦卒中進(jìn)展情況，改善病人的預(yù)后。

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（收稿日期：2014-08-24）endprint