楊新鳳 張?jiān)路?李悅豐

(寧夏中衛(wèi)市疾病預(yù)防控制中心 寧夏 中衛(wèi) 755000)

2014 年7 月29 日，中衛(wèi)市某涼皮店發(fā)生一起食物中毒事件，經(jīng)過流行病學(xué)調(diào)查及實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢驗(yàn)，證明該起食物中毒是由蠟樣芽孢桿菌污染引起的，現(xiàn)將調(diào)查分析結(jié)果報(bào)告如下:

1.流行病學(xué)調(diào)查

1.1 基本情況

7 月29 日下午18 時(shí)，接市醫(yī)院急診科報(bào)告，急診科陸續(xù)有病人就診，主訴惡心、嘔吐、胃不適、腹痛等相同的胃腸炎癥狀，發(fā)病人員的進(jìn)餐史是下午16 時(shí)左右在商業(yè)北街一家涼皮店食用了本店提供的涼拌大米皮。首例病人于下午18 時(shí)發(fā)病，末例病人于21 時(shí)發(fā)病，潛伏期最短為1h，最長(zhǎng)為4h，平均2.5h。

1.2 臨床表現(xiàn)

發(fā)病人員均有惡心、嘔吐、胃不適、腹痛等胃腸炎癥狀。所有病人全部治愈，無死亡病例。

2.實(shí)驗(yàn)室檢查

2.1 樣品采集

大米皮1 份，釀皮1 份，面筋1 份，韭菜1 份，豆芽菜1 份，涼粉1 份，黃瓜1 份，嘔吐物3 份，剩余食物物1 份，案板、刀具、抹布、涂抹物各1 份，餐具涂抹物2 份

2.2 方法

根據(jù)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T4789 -2003《食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)》［1］GB/T4789 -2010 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)2010 年最新食品安全檢驗(yàn)方法及生產(chǎn)規(guī)范方法［2］進(jìn)行增菌、分離、鑒定。

2.3 試劑來源

分離用培養(yǎng)基、微量生化管均購(gòu)于杭州天和微生物試劑有限公司，且在有效期內(nèi)使用。

3.檢驗(yàn)結(jié)果

采集的16 份樣品中，5 份(黃瓜、嘔吐物、剩余食物)檢出蠟樣芽孢桿菌，2 份餐具大腸菌群陽(yáng)性，所有樣品均未檢出金黃色葡萄球菌。

3.1 蠟樣芽孢桿菌鑒定結(jié)果

3.1.1 菌數(shù)測(cè)定

無菌操作稱取檢樣25g，至滅菌生理鹽水中，稀釋10-1-10-5，取各稀釋液0.1ml 在MYP(甘露醇卵黃多粘菌素)瓊脂培養(yǎng)基上，用L 棒涂布于整個(gè)表面置36℃20h 后，該菌在此培養(yǎng)基上的菌落為粉紅色(表示不發(fā)酵甘露醇)周圍有粉紅色的暈(表示產(chǎn)生卵磷脂酶)，從兩個(gè)10 -4MYP瓊脂平板上5 個(gè)單個(gè)卵磷脂酶陽(yáng)性的菌落，移種到肉湯和營(yíng)養(yǎng)瓊脂上，置36℃培養(yǎng)24h。取培養(yǎng)物作證實(shí)試驗(yàn)，結(jié)果5 個(gè)菌落均證實(shí)為蠟樣芽孢桿菌，則1g 檢樣中所含蠟樣芽孢桿菌數(shù)為38 ×5/5 ×104×10。黃瓜中蠟樣芽孢桿菌計(jì)數(shù)為6.2 ×106，剩余食物中蠟樣芽孢桿菌計(jì)數(shù)為6.1 ×107，嘔吐物中蠟樣芽孢桿菌計(jì)數(shù)為7.0 ×107。

3.1.2 培養(yǎng)特性

在肉湯中呈均勻混濁生長(zhǎng)，在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上生長(zhǎng)良好，菌落呈灰白色，不透明，似毛玻璃狀，有異臭味，邊緣不整齊，放置第二天，邊緣擴(kuò)散明顯大于第一天，將證實(shí)蠟樣芽孢桿菌劃線到血平板上，菌落呈灰白色，且有草綠色溶血環(huán)。

3.1.3 形態(tài)與染色

革蘭氏陽(yáng)性大桿菌，芽孢呈卵園形，不突出菌體，位于菌體中央或稍偏于一端

3.1.4 生化結(jié)果

葡萄糖 乳糖 麥芽糖 甘露醇 木糖 VP 硫化氫 卵磷脂酶 液化明膠 動(dòng)力+ - - - - - - + + +

經(jīng)生化反應(yīng)證實(shí)此菌為蠟樣芽孢桿菌

4.討論

蠟樣芽孢桿菌在自然界廣泛存在，最適合社長(zhǎng)溫度為28℃-35℃，屬條件致病菌，可引起食物中毒，由此菌引起的食物中毒多發(fā)生在夏秋季節(jié)，引起中毒的食品常因放置時(shí)間過長(zhǎng)或沒有清洗干凈，保存溫度過高，而使殘存的芽孢得以繁殖產(chǎn)毒。其產(chǎn)生的毒素分嘔吐型和腹瀉性，嘔吐型腸毒素耐熱，加熱不易被滅活，食用后可引起食物中毒。菌體達(dá)到一百萬就可以引起食物中毒的暴發(fā)［3］。此次中毒的食物含菌量均在十萬以上，并且血清學(xué)檢驗(yàn)也證明蠟樣芽孢桿菌是引起此次食物中毒的原因。在所有患者個(gè)案調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，他們均在下午16 時(shí)以后有進(jìn)食(大米皮)史，本次所采集的樣品中，黃瓜的菌數(shù)為6.2 ×106cfu/g，為其它樣品之首，且大米皮、涼粉、面筋、韭菜、豆芽菜等這些食物中均未檢出蠟樣芽孢桿菌，說明黃瓜是被蠟樣芽孢桿菌所污染，后經(jīng)監(jiān)督所的監(jiān)督員詢問店主得知，涼皮店整天的食物只有下午16 時(shí)左右更換了新買回來的黃瓜，由于工作人員衛(wèi)生意識(shí)差，把買回來的5 斤彎頭黃瓜放在一盆水中沒有徹底清洗既被撈出切絲裝盤，隨即出現(xiàn)所有進(jìn)食人員均發(fā)病的情況。這也是導(dǎo)致這次食物中毒發(fā)生的主要原因，故加強(qiáng)餐飲業(yè)的衛(wèi)生監(jiān)督、檢測(cè)工作尤為重要

［1］ GB/T4789 -2003《食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)》［S］

［2］ GB/T4789 -2010 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)2010 年最新食品安全檢驗(yàn)方法及生產(chǎn)規(guī)范方法［S］

［3］ 孟昭赫 食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法注解-微生物部分［M］第一版、北京:人民衛(wèi)生出版社1990 .408