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        三種方案行冷凍囊胚移植臨床結(jié)局分析

        2015-03-08 07:04:08李銳聶玉林張艷霞趙雪峰李梅清廖宏慶
        關(guān)鍵詞:囊胚胚胎激素

        李銳 聶玉林 張艷霞 趙雪峰 李梅清 廖宏慶

        三種方案行冷凍囊胚移植臨床結(jié)局分析

        李銳 聶玉林 張艷霞 趙雪峰 李梅清 廖宏慶

        目的比較三種方案行冷凍囊胚移植的臨床結(jié)局。方法回顧分析409個冷凍囊胚移植周期, 比較其與妊娠結(jié)果的關(guān)系。結(jié)果3種方案中患者的年齡、不孕年限、移植胚胎數(shù)目、移植前平均內(nèi)膜厚度差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。三組移植周期臨床妊娠率分別為61.1%,55.7%和61.0%, 胚胎著床率為46%、43.5%和37.1%, 早期流產(chǎn)率為8.1%、10.2%和13.9%, 宮外孕發(fā)生率1.3%、2%和2.8%,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論在冷凍囊胚移植中, 采用自然周期、激素替代周期、GnRH-a激素替代周期三者在臨床結(jié)局上差異均無統(tǒng)計學(xué)意義, 但是其適應(yīng)證各有不同, 對每位患者應(yīng)該酌情選擇最適合的方案。

        冷凍囊胚移植;三種方案;臨床結(jié)局

        隨著輔助生殖技術(shù)的發(fā)展, 冷凍胚胎移植使用越來越廣泛, 它可以有效的提高新鮮周期的累及妊娠率, 有效的避免卵巢過度刺激綜合征的發(fā)生、反復(fù)的促排卵、穿刺卵巢對患者的創(chuàng)傷, 并減輕患者的經(jīng)濟負擔(dān)及多胎風(fēng)險, 其越來越在輔助生殖技術(shù)中的發(fā)揮著重要作用。其中影響冷凍胚胎移植成功率的因素主要有患者年齡、胚胎質(zhì)量、胚胎發(fā)育潛能、子宮內(nèi)膜厚度以及子宮內(nèi)膜容受性等。本院目前采用三種方案來準備內(nèi)膜, 即自然周期、激素替代周期、GnRH-a激素替代周期。本文對本院409個冷凍囊胚周期的妊娠結(jié)局進行分析, 報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料2011年7月~2014年10月本院開展冷凍胚胎移植技術(shù), 其中大多數(shù)患者采用冷凍囊胚進行移植。行冷凍囊胚移植周期為409例, 冷凍的囊胚均為取卵術(shù)后第5或者第6天形成的囊胚, 患者平均年齡(31.3±4.72)歲, 不孕年限(4.27±3.44)年。三組患者年齡、不孕年限、移植胚胎數(shù)目及內(nèi)膜厚度差異等一般資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05), 具有可比性。見表1。

        表1 三組患者一般情況比較(±s)

        表1 三組患者一般情況比較(±s)

        項目 自然周期組(n=262) 激素替代周期組(n=88) GnRH-a激素替代周期組(n=59) P年齡(歲) 31.8±4.73 30.1±4.70 31±4.73 >0.05不孕年限 (年) 4.5±3.79 4.0±2.80 3.5±2.48 >0.05移植胚胎數(shù)(個) 1.9±0.45 1.9±0.38 2.0±0.44 >0.05內(nèi)膜厚度(mm) 10.5±1.72 9.8±2.15 10.2±1.5 >0.05

        1.2 三種子宮內(nèi)膜準備方案及分組 取卵周期未孕或因其他原因未行鮮胚移植的患者于取卵后2~3個月經(jīng)周期行冷凍囊胚移植。三種方法如下:①自然周期組262例患者, 根據(jù)月經(jīng)周期的長短, 通常在月經(jīng)周期第8~10天起行B超開始監(jiān)測卵泡發(fā)育, 當卵泡直徑達到16 mm時開始監(jiān)測LH峰的出現(xiàn), B 超提示卵泡消失或內(nèi)膜轉(zhuǎn)換第2天加用地屈孕酮片20~40 mg/d, 第4天解凍患者冷凍的囊胚。②激素替代周期組88例患者, 從月經(jīng)第3天開始服用戊酸雌二醇片6 mg/d,14 d后檢查B超及抽血查E2、P, 根據(jù)內(nèi)膜的厚度決定藥物劑量的增減, 當內(nèi)膜厚度≥8.0 mm, E2>150 pg/ml, P<1.5 ng/ml后,使用黃體酮陰道緩釋凝膠90 mg/d進行黃體支持, 黃體支持第5天解凍冷凍的囊胚。③GnRH-a激素替代周期組59例患者, 在患者排卵后第5~7天或從月經(jīng)第4天開始服用炔雌醇環(huán)丙孕酮片1粒/d吃到第18~20粒注射一次長效曲普瑞林1.50~3.75 mg, 注射后第14天當天加用戊酸雌二醇片, 戊酸雌二醇的用法同激素替代周期。

        1.3 胚胎評級標準及冷凍方式 本院采用常規(guī)控制性超排卵方案, 進行取卵、受精, 受精后第3天將胚胎情況告知患者, 詳細告知囊胚培養(yǎng)的利弊及風(fēng)險, 征得患者同意后, 行囊胚培養(yǎng)。培養(yǎng)后第2天或第3天, 本院對囊胚進行評分, 采用Gardner[1]提出的方法, 根據(jù)囊胚擴張或孵出的程度分為6期:1期為囊胚不足胚胎體積的50%;2期為超過50%;3期為占滿整個胚胎;4期為囊胚擴張、透明帶變??;5期為囊胚開始從透明帶孵出;6期為囊胚完全孵出。對處于3~6期的囊胚,再按照內(nèi)細胞團和滋養(yǎng)細胞層的細胞數(shù)量和形態(tài)分級。

        根據(jù)內(nèi)細胞團表現(xiàn)分為三級:A級為細胞數(shù)目多, 排列緊密;B級為細胞數(shù)目較少, 排列松散;C級為細胞數(shù)目很少。

        根據(jù)滋養(yǎng)細胞層表現(xiàn)分為三級:A級為細胞數(shù)目多, 囊腔四周均有細胞, 排列緊密;B級為細胞數(shù)目較少, 排列松散;C級為細胞數(shù)目很少。

        本院對發(fā)育為囊胚≥3期, 僅有需內(nèi)細胞團或滋養(yǎng)細胞中任何一項評分達到B級, 進行分批、分管行快速玻璃化冷凍。行冷凍囊胚移植當天行解凍, 培養(yǎng)(4±2)h候行移植手術(shù)。

        1.4 妊娠判斷標準 移植后第12天監(jiān)測血HCG陽性者繼續(xù)黃體支持, 移植第28、45天行B超監(jiān)測, 宮內(nèi)見孕囊、胚芽和心管搏動即確定為臨床妊娠。

        1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示, 采用t檢驗;計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        三組患者用藥方案臨床結(jié)局比較, 臨床妊娠率、胚胎著床率、早期流產(chǎn)率、宮外孕發(fā)生率方面, 差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

        表2 三組患者用藥方案的臨床結(jié)局比較[n(%)]

        3 討論

        隨著輔助生殖技術(shù)水平的不斷提高, 進行冷凍胚胎移植越來越廣泛。在我國冷凍胚胚移植中, 大多數(shù)生殖中心采用取卵后第3天的有發(fā)育潛能的卵裂期胚胎, 進行冷凍胚胎移植[2,3]。隨著胚胎體外囊胚培養(yǎng)系統(tǒng)的不斷完善, 有部分生殖中心開始嘗試將胚胎培養(yǎng)至囊胚后進行冷凍, 再行冷凍囊胚移植, 本院采用冷凍囊胚移植, 目前妊娠率達到59.9%。主要考慮到移植囊胚較卵裂期可以獲得更高的臨床妊娠率,其通過囊胚培養(yǎng)系統(tǒng)可以篩選出更具有發(fā)育潛力的胚胎, 同時縮短了胚胎植入子宮腔后進一步發(fā)育與著床之間的時間,有利于胚胎著床[4,5]。囊胚的形成經(jīng)歷細胞融合、囊胚腔出現(xiàn)及囊胚腔擴張的變化, 在基因水平上經(jīng)歷了由母型調(diào)節(jié)向胚胎調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)變。而且囊胚其抗冷凍損傷能力強、解凍復(fù)蘇率高的特點, 比卵裂期胚胎更具有優(yōu)勢。有學(xué)者對凍融胚胎和冷凍囊胚移植進行比較, 發(fā)現(xiàn)囊胚解凍移植能獲得更好的妊娠率和種植率, 且兩者有顯著性差異[6]。

        本院目前采用三種方案進行冷凍囊胚移植。其中自然周期是本院使用最多的方案, 適應(yīng)證為既往月經(jīng)規(guī)則且排卵正常的患者, 其最為接近胚胎著床的生理狀態(tài), 而且患者使用藥物少, 治療時間短, 費用低, 患者依從性較高。但是在監(jiān)測過程中發(fā)現(xiàn)有部分患者出現(xiàn)卵泡發(fā)育不良, 從而導(dǎo)致周期取消率較高。激素替代周期主要用于既往各種原因?qū)е碌呐怕颜系K、黃體功能不全、自然周期內(nèi)膜薄或者宮腔粘連分離術(shù)后的患者。該方案在月經(jīng)期使用大劑量戊酸雌二醇片促進子宮內(nèi)膜的生長, 當內(nèi)膜厚度≥8.0 mm, E2>150 pg/ml后,立即添加黃體酮陰道緩釋凝膠使內(nèi)膜轉(zhuǎn)化為分泌期, 為囊胚移植做好準備。該方案的缺點有時候患者會出現(xiàn)自發(fā)性排卵的現(xiàn)象。GnRH-a激素替代周期適用于子宮內(nèi)膜異位癥、子宮腺肌病、子宮肌瘤或者多次移植均未妊娠的患者。該方案費用較高, 周期取消率較低, 可以避免出現(xiàn)自發(fā)性排卵的現(xiàn)象。其與激素替代周期的區(qū)別在于注射長效曲普瑞林進行降調(diào)節(jié)后, 再使用戊酸雌二醇進行激素替代。注射后容易出現(xiàn)低雌激素現(xiàn)象, 且戊酸雌二醇片用量明顯加大, 容易增加性激素依賴性疾病及生殖器腫瘤的風(fēng)險。目前, GnRH-a激素替代周期已獲得較好的臨床妊娠率, 且稍高于激素替代周期。主要考慮:GnRH-a的應(yīng)用可以抑制炎性因子的釋放或抑制胚胎毒性自身抗體的產(chǎn)生, 增加子宮內(nèi)膜細胞粘附分子整合素的表達, 使異位的子宮內(nèi)膜萎縮, 同時可以抑制自身內(nèi)源性LH峰出現(xiàn), 提高子宮內(nèi)膜容受性[7]。

        三種內(nèi)膜準備方案對冷凍復(fù)蘇胚胎移植妊娠結(jié)局的影響各家觀點不同, EL-Toukhy等[8]認為激素替代周期的臨床妊娠率明顯低于GnRH-a激素替代周期, 其原因可能為未給予GnRH-a降調(diào)節(jié), 其后期可能由于體內(nèi)雌激素水平升高對下丘腦-垂體產(chǎn)生正反饋作用而出現(xiàn)內(nèi)源性LH峰, 從而影響胚胎著床的內(nèi)環(huán)境。Morozev等[9]認為自然周期與激素替代周期的患者相比內(nèi)膜厚, 在年齡、胚胎質(zhì)量等同的條件下,自然周期妊娠率高于激素替代周期。吳曉燕等[10]認為多次移植失敗的患者采用GnRH-a激素替代周期和激素替代周期,比較臨床妊娠率、胚胎著床率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),而對于內(nèi)膜形態(tài)欠佳的患者可考慮GnRH-a激素替代周期。在本研究中, 作者采用冷凍移植的胚胎均為優(yōu)質(zhì)的囊胚, 且三種方案在臨床妊娠率和胚胎著床率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。但是對于其三者各有其適應(yīng)證, 對于多次移植失敗的患者, 作者還是主張采用GnRH-a激素替代周期。在早期流產(chǎn)率、宮外孕發(fā)生率方面, 本研究顯示三組數(shù)據(jù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05), 與國內(nèi)其他學(xué)者的研究結(jié)果相似[3,10,11]。其中GnRH-a激素替代周期中較另兩組樣本量偏少, 早期流產(chǎn)率方面稍高于其他兩組, 比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

        綜上所述, 這三種方案中患者年齡、不孕年限、移植胚胎數(shù)目及內(nèi)膜厚度差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05), 進行移植的胚胎均為優(yōu)質(zhì)囊胚, 而上述這些都是制約冷凍囊胚移植妊娠的重要因素。排除了這些因素的影響下, 這三種方案在這409例患者中對其臨床妊娠率、胚胎著床率、早期流產(chǎn)率、宮外孕發(fā)生率方面差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。這三種方案中其適應(yīng)證和利弊方面各有不相同, 但是在冷凍囊胚移植中均取得良好的臨床結(jié)局, 臨床醫(yī)生要根據(jù)每位患者的情況制定最適合治療的方案。

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        [10]吳曉燕, 李志凌, 林虹, 等.多次胚胎移植失敗患者采用凍融胚胎移植3種內(nèi)膜準備方案結(jié)局分析.中國計劃生育學(xué)雜志,2014,22(4):248-251.

        [11]郭慧, 龔斐, 羅克麗, 等.兩種雌孕激素替代法內(nèi)膜準備對多囊卵巢綜合征冷凍胚胎移植臨床效果的比較.中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2013,23(2):74-77.

        10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.06.073

        2014-12-12]

        421001 衡陽市南華星輝生殖健康??漆t(yī)院

        廖宏慶

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