王士娜，王星，王翠芳

（沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院病理科，沈陽 110024）

·論著·

表皮生長因子受體及HER-2/neu蛋白在胃癌中的表達(dá)和意義

王士娜，王星，王翠芳

（沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院病理科，沈陽 110024）

目的探討表皮生長因子受體（EGFR）、HER-2/neu蛋白在胃癌中的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系。方法回顧性分析2006年11月至2013年11月我院收治的90例胃癌患者（觀察組）的臨床資料，另選取正常胃組織50例作為對照組。觀察2組EGFR、HER-2/neu蛋白的表達(dá)情況，分析胃癌組織中EGFR、HER-2/neu蛋白表達(dá)和臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果觀察組EGFR、HER-2/neu蛋白表達(dá)陽性率高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。EGFR、HER-2/neu蛋白表達(dá)和胃癌患者的性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤直徑無相關(guān)性（P＞0.05），而與胃癌分化程度、臨床分期、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。EGFR與HER-2/neu表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論EGFR、HER-2/neu蛋白的表達(dá)與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。EGFR與HER-2/neu的表達(dá)呈正相關(guān)。

表皮生長因子受體；HER-2/neu；蛋白；胃癌；表達(dá)；預(yù)后

表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）及HER-2/neu蛋白對消化道惡性腫瘤的增殖及分化具有重要的調(diào)節(jié)作用。研究表明，EGFR在胃癌組織中呈過表達(dá)，為胃癌的靶向治療提供了依據(jù)［1，2］。而與EGFR同源的HER-2/neu在胃癌中同樣存在過表達(dá)，且HER2/neu的表達(dá)往往提示患者預(yù)后不良［3］。因此，本研究擬應(yīng)用免疫組化方法檢測EGFR和HER-2/neu蛋白在胃癌及正常胃組織（慢性胃炎、胃潰瘍）中的表達(dá)，并探討其與胃癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來源：選取2006年11月至2013年11月我院收治的胃癌患者切除的癌組織90例作為觀察組，男62例，女28例，年齡42～86歲。同時(shí)選取正常胃組織（取自慢性胃炎、胃潰瘍切除胃周邊正常胃黏膜）50例作為對照組，男31例，女19例，年齡18～81歲。

1.1.2 試劑：鼠抗人EGFR單克隆抗體、鼠抗人HER2/neu單克隆抗體、SP試劑盒及AEC顯色劑均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。

1.2 方法

10%甲醛固定標(biāo)本，石蠟包埋，制成4 μm厚切片。按SP免疫組化染色步驟進(jìn)行操作，用已知表達(dá)抗體的組織作陽性對照，PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照，具體步驟按說明書進(jìn)行。

結(jié)果判定：EGFR蛋白定位于細(xì)胞膜，呈棕黃色，細(xì)胞膜未著色或陽性細(xì)胞數(shù)＜10%為（-），≥10%且細(xì)胞膜不完整染色為（+），兩者均判定為陰性；≥10%且細(xì)胞膜完整、輕至中度染色為（++），≥10%且細(xì)胞膜完整、強(qiáng)染色為（+++），EGFR（++～+++）判定為陽性［4］。HER2/neu染色主要定位于細(xì)胞膜，其結(jié)果判定采用修訂后的HercepTest評分標(biāo)準(zhǔn)［5］：（-），無著色或＜10%的細(xì)胞有細(xì)胞膜著色；（+），＞10%的細(xì)胞有輕微膜著色，（++），＞10%的細(xì)胞有弱的膜著色，（+++），＞10%的細(xì)胞有中到強(qiáng)度的完全膜著色；（-）和（+）為低表達(dá)，（++）和（+++）為過表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對計(jì)數(shù)資料通過χ2檢驗(yàn)比較分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 胃癌與正常胃組織中EGFR、HER-2/neu的表達(dá)

EGFR、HER-2/neu在胃癌中的陽性表達(dá)率分別為40%及30%，而在正常胃組織中陽性表達(dá)率均為0，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）（表1）。

2.2 EGFR、HER-2/neu在胃癌中的表達(dá)和臨床病理指標(biāo)間的關(guān)系

表1 2組EGFR、HER-2/neu蛋白陽性表達(dá)情況Tab.1 The expression of EGFR and HER-2/neu in the two groups

EGFR、HER-2/neu表達(dá)和胃癌患者的性別、年齡、腫瘤大小、部位及直徑均無關(guān)（P＞0.05），但與胃癌分化程度、臨床分期、漿膜浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移均密切相關(guān)（P＜0.05）（表2）。

2.3 胃癌中EGFR和HER2/neu蛋白表達(dá)的相關(guān)性

相關(guān)性分析結(jié)果顯示：在胃癌中，EGFR和HER2/neu蛋白表達(dá)水平呈正相關(guān)（表3）。

3 討論

EGFR和HER2/neu均為受體酪氨酸激酶超家族成員，結(jié)構(gòu)上均為含有細(xì)胞外的配體結(jié)合區(qū)、跨膜區(qū)及胞質(zhì)內(nèi)的酪氨酸激酶區(qū)這3個主要功能區(qū)的跨膜糖蛋白，其胞質(zhì)內(nèi)區(qū)為具有酪氨酸激酶活性區(qū)［6］。EGFR廣泛存在于表皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞、部分神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞，主要發(fā)揮調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和組織修復(fù)的作用。研究表明，EGFR的異?；罨c腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移、血管形成及凋亡抑制密切相關(guān)［7］。EGFR在肺癌、胃癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤中均存在高表達(dá)，且表達(dá)程度越高，腫瘤的惡性程度越高，預(yù)后也越差［8］。在胃癌中，EGFR的表達(dá)率基本為40%～65%，有研究顯示，EGFR表達(dá)和胃癌的分化程度、浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等相關(guān)［9，10］。Kim等［4］也認(rèn)為，胃癌中EGFR的過表達(dá)與患者的不良預(yù)后顯著相關(guān)。

HER2/neu在正常狀態(tài)下處于一種非激活的狀態(tài)，通常只在胎兒期表達(dá)，成年后僅于極少數(shù)組織內(nèi)呈弱表達(dá)。HER2/neu的過表達(dá)主要是由于原癌基因擴(kuò)增或轉(zhuǎn)錄異常，因此，在人類許多惡性腫瘤中，如乳腺癌、卵巢癌、胃癌等均檢測到HER2/neu不同程度的表達(dá)［11］。研究表明，在有HER2/neu過表達(dá)的腫瘤中，其惡性程度越高，患者的無病生存期和總生存期越短［12］。多數(shù)免疫組化檢測數(shù)據(jù)顯示：HER-2/neu在胃癌中的陽性表達(dá)率介于10%～55%之間［5］；Docea等［13］的研究表明，在HER-2/neu過表達(dá)的胃癌患者中，腹膜轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率均高于HER-2/neu陰性患者，提示HER-2/neu過表達(dá)與患者的預(yù)后不良有關(guān)。本研究結(jié)果顯示：EGFR與HER2/neu在胃癌中的陽性表達(dá)率分別為40%、30%，且二者的表達(dá)均與胃癌的分化程度、臨床分期、漿膜浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。研究表明，EGFR與HER2/neu在胃癌組織中的表達(dá)具有顯著相關(guān)性，因此推測這2種蛋白在腫瘤的生物學(xué)行為方面可能存在某種協(xié)同作用［14］。

由于HER2/neu無相應(yīng)配體結(jié)合區(qū)，通常配體首先與EGFR家族其他成員相結(jié)合，進(jìn)而可導(dǎo)致受體形成同源或異源二聚體，而HER2/neu可作為同源或異源二聚體的首選結(jié)合體，由HER2/neu參與形成的同源或異源二聚體可介導(dǎo)更強(qiáng)的細(xì)胞增殖信號，進(jìn)而引起細(xì)胞無節(jié)制生長，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生［15］。Xia等［16］認(rèn)為，乳腺癌中，HER-2/neu與其同源家族成員ErbB-3（HER3）形成二聚體，此二聚體中ErbB-3（HER3）的磷酸化需要再與EGFR相結(jié)合，在細(xì)胞內(nèi)形成EGFR-HER-2/neu-ErbB-3（HER3）三聚體，激活下游PI3K-Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，從而發(fā)揮其促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖、分化及轉(zhuǎn)移的能力。在本研究的90例胃癌中，EGFR與HER2均存在過表達(dá)，且二者的表達(dá)呈明顯正相關(guān)（r=0.653，χ2=38.413，P＜0.05），與已有報(bào)道一致，因此推測HER-2/neu可能通過與其家族成員EGFR、ErbB-3（HER3）相作用而激活下游相應(yīng)PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、分化及侵襲。

表2 胃癌組織中的EGFR、HER-2/neu蛋白表達(dá)和臨床病理特征的關(guān)系Tab.2 The correlation of EGFR and HER-2/neu proteins and the clinical features of gastric cancer

表3 EGFR、HER2/neu在胃癌中表達(dá)的相關(guān)性分析Tab.3 The correlation of EGFR and HER2/neu expression in gastric cancer

研究表明，在胃癌中，EGFR與HER-2/neu可作為腫瘤新輔助化療的預(yù)測因子及靶向治療因子［13］。本研究結(jié)果提示，EGFR、HER-2/neu作為具有跨膜酪氨酸激酶活性的蛋白，可以促進(jìn)胃癌的發(fā)生和發(fā)展，其過度表達(dá)和胃癌的轉(zhuǎn)移和預(yù)后均有密切關(guān)系，可以作為預(yù)后不良的一個參考指標(biāo)，并可為臨床靶向治療胃癌提供理論基礎(chǔ)。

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（編輯 王又冬）

Signification and Expression ofEGFRand HER-2/neu Proteinsin Gastric Cancer

WANGShi-na，WANGXing，WANGCui-fang
（DeaprtmentofPathology，Centerofthe Affiliated HospitalofShenyang MedicalCollege，Shenyang 110024，China）

ObjectiveTo study the expressions of EGFR and HER-2/neu proteins in gastric carcinoma and the conditions of prognosis.MethodsThe clinical data of 90 gastric cancer patients during November 2006 to November 2013 were chosen as the observation group，and 50 cases of normalgastric tissueswere chosen as the controlgroup.The expressions ofEGFRand HER-2/neu proteinsin the two groupswere measured by immunohistochemical staining to analyze the relationship of their expression with clinical features.ResultsThe positive rate of EGFR and HER-2/neu expressions in the observation group was higher than the control group，with statistical significance（P＜0.05）.The expressions of EGFR and HER-2/ neu proteins were closely related with differentiation，clinical stages，mucosa invasion depth，lymphatic metastasis，distant metastasis of gastric cancer，with statisticalsignificance（P＜0.05），however，no relationswere detected with gender，age，tumorsize and tumorsite（P＞0.05）.The expression of EGFR showed a positive correlation with HER-2/neu.ConclusionThere was a close relationship of EGFR and HER-2/neu expressions with the onsetand progression ofgastric cancer.The expression ofEGFR showed a positive correlation with HER-2/neu.

epidermal growth factor receptor；HER-2/neu；protein；gastric cancer；expression；prognosis

R735.2

A

0258-4646（2015）09-0829-04

王士娜（1979-），女，主治醫(yī)師，碩士.

王翠芳，E-mail：sywcf321@sohu.com

2014-12-24

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