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        生長相關(guān)蛋白-43影響神經(jīng)細(xì)胞分裂方向作用的研究

        2015-01-23 09:22:01黃蕊文玉軍鞠莉莉
        中國卒中雜志 2015年2期
        關(guān)鍵詞:胎鼠細(xì)胞分裂切片

        黃蕊,文玉軍,鞠莉莉

        卒中嚴(yán)重威脅人類健康,高發(fā)病率、高病死率、高致殘率給全球帶來沉重的疾病負(fù)擔(dān)[1]。國外研究者在應(yīng)用運(yùn)動皮層電刺激的方法治療卒中后慢性神經(jīng)疼痛的過程中,發(fā)現(xiàn)患者在治療后,同時伴有的肢體運(yùn)動功能障礙有了明顯的恢復(fù)[2]?,F(xiàn)研究表明,應(yīng)用皮層電刺激聯(lián)合功能鍛煉的大鼠腦梗死灶周圍皮層運(yùn)動區(qū)的生長相關(guān)蛋白-43(growth associated protein-43,GAP-43)明顯多于單純功能鍛煉組,這與突觸可塑性相關(guān)[3-4]。GAP-43是神經(jīng)組織特異性表達(dá)的蛋白,與神經(jīng)發(fā)育、軸突再生、突觸重建密切相關(guān),被認(rèn)為是神經(jīng)發(fā)育和再生的內(nèi)在決定因子[5-8]。在哺乳動物的前腦中,水平分裂的神經(jīng)祖細(xì)胞中高表達(dá)GAP-43[9];它與中心體相關(guān)且為中心體定位所必需[10]。由此可知,GAP-43可能是一種與細(xì)胞極性和細(xì)胞分裂相關(guān)的細(xì)胞命運(yùn)決定子。然而,人們至今還不清楚GAP-43在細(xì)胞極性和細(xì)胞分裂方式調(diào)控的過程中究竟行使什么功能。為了闡明這個問題,我們對GAP-43是通過何種方式參與神經(jīng)細(xì)胞分裂方向調(diào)控的進(jìn)行探討,希望以此對GAP-43在神經(jīng)發(fā)育及卒中等神經(jīng)損傷修復(fù)突觸重建中的作用有新的認(rèn)識。

        1 材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)材料

        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物 實(shí)驗(yàn)動物SPF級C57BL/6J GAP-43高表達(dá)轉(zhuǎn)基因孕鼠6只,野生型C57BL/6J孕鼠6只,中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供,實(shí)驗(yàn)動物許可證號SCXK(京)2009-0007。所有實(shí)驗(yàn)用小鼠均在SPF級動物房飼養(yǎng)和繁殖。溫度控制在22℃,濕度70%,自動光控(12 h明/12 h暗),自由采食和飲水。

        1.1.2 主要試劑 十二烷基硫酸鈉、聚氧乙烯單月桂酸酯、丙烯酰胺、N,N’-亞甲雙丙烯酰胺以及兔抗小鼠actin抗體、羊抗小鼠GAP-43抗體均購自Sigma公司,山羊抗兔Gαi抗體購自Santa公司;過硫酸氨、N,N,N’,N’-四甲基乙二胺為Gibco公司產(chǎn)品,辣根過氧化物酶標(biāo)記山羊抗兔或山羊抗小鼠IgG為北京中山生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品,BCA蛋白定量試劑盒購自Pierce公司,Kodak BioMax MR X-光片來自Kodak公司,封閉用正常山羊血清購自武漢博士德生物技術(shù)有限公司,Alexa flour 488/594標(biāo)記的山羊抗小鼠/抗兔IgG熒光二抗和TritonX-100則分別購自Moleculor Probe公司和Sigma公司。免疫共沉淀試劑盒(Immunoprecipitation Kit)與G蛋白珠子(Protein-G-agarose)均購自瑞士Roche公司。其他常用試劑均屬于國產(chǎn)或進(jìn)口的分析純試劑。

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1 免疫熒光技術(shù)定性明確GAP-43的表達(dá)位置 分別取E13.5 d GAP-43轉(zhuǎn)基因陽性胎鼠和對照野生型胎鼠各3只,冷凍切片機(jī)腦室區(qū)(ventricular zone,VZ)免疫熒光染色連續(xù)切片,切片厚度為40 ?m,全部貼片。切片入0.01 mol/L磷酸緩沖液和吐溫-20(phosphate buffer solution and Tween-20,PBST)中浸洗3次(每次5 min)后,入5%正常血清及0.1%牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)混合封閉液中室溫封閉抗原;傾去血清后直接置入用0.01 mol/L PBST按1∶1000稀釋的GAP-43的抗體和用0.01 mol/L PBST按1∶500稀釋的Gαi的抗體中,4℃過夜;切片再入PBST中浸洗3次(每次5 min),后放入用0.01 mol/L PBST稀釋好的熒光二抗(1∶500稀釋)中,室溫1 h;0.01 mol/L PBS浸洗3次(每次5 min)后,用1∶3000的Hochest33258染核,15 min,室溫避光;將切片最后用PBS浸洗2次(每次5 min),70%甘油封片。共聚焦顯微鏡下觀察照相。

        1.2.2 Western blot技術(shù)檢測定量明確GAP-43的表達(dá)位置及表達(dá)量 4℃條件下,在E13.5 d12只實(shí)驗(yàn)組及對照組鼠腦中加入裂解液分別提取膜蛋白和細(xì)胞質(zhì)蛋白,用BCA Protein Assay Kit測定GAP-43樣品蛋白含量。每個樣本取10 μg蛋白進(jìn)行十二烷基硫酸鈉(sodium dodecyl sulfate,SDS)聚丙烯酰胺凝膠電泳并轉(zhuǎn)至聚偏二氟乙烯(polyvinylidene fluoride,PVDF)膜上,5%脫脂奶粉封閉液,室溫下置搖床上封閉1 h,再用Tris-HCl緩沖鹽溶液和吐溫-20(tris buffered saline and Tween-20,TBST)稀釋的羊抗小鼠源重組的GAP-43單克隆抗體(1∶3000稀釋),4℃搖床雜交過夜;待恢復(fù)室溫后,TBST洗3次,每次10 min置入TBST稀釋的辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗小鼠抗體(1∶5000稀釋)室溫雜交1 h,洗3次,每次10 min,將膜置于化學(xué)發(fā)光液中,X線膠片曝光,顯影及定影。

        1.2.3 免疫共沉淀技術(shù)檢測GAP-43與Gαi間的相互作用 4℃條件下,在E17.5 d9只實(shí)驗(yàn)組及對照組鼠腦中加入裂解液分別提取蛋白,將提取到的蛋白分為3組(實(shí)驗(yàn)組、陽性對照組和陰性對照組),4℃離心,12 000×g,45 min;取上清,各加入Protein-G-agarose 25 μl,4℃搖床3 h;4℃離心,12 000×g,5 min;取上清,各加入10 μl兔源Gαi抗體(1∶50稀釋),4℃搖床過夜;4℃離心,12 000×g,5 min,去上清后,加入500 μl 洗脫緩沖液1,4℃搖床,20 min,重復(fù)1次;4℃離心,12 000×g,5 min,去上清后,加入500 μl 洗脫緩沖液2,4℃搖床,20 min,重復(fù)1次;4℃離心,12 000×g,5 min,去上清后,加入500 μl 洗脫緩沖液3,4℃搖床,20 min;4℃離心,12 000×g,5 min,去上清后加入5×蛋白上樣緩沖液(1∶4稀釋);95℃加熱3 min;4℃離心,12 000×g,5 min,取上清。每個樣本取10 μg蛋白進(jìn)行SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳并轉(zhuǎn)至PVDF膜上,5%脫脂奶粉封閉液,室溫下置搖床上封閉1 h,再用TBST稀釋的羊抗小鼠源重組的GAP-43單克隆抗體(1∶3000稀釋),4℃搖床雜交過夜;待恢復(fù)室溫后,TBST洗3次,每次10 min置入TBST稀釋的辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗小鼠抗體(1∶5000稀釋)室溫雜交1 h,洗3次,每次10 min,將膜置于化學(xué)發(fā)光液中,X線膠片曝光,顯影及定影。

        1.2.4 細(xì)胞分裂的計數(shù) 分別取E13.5 d和E17.5 d的9只實(shí)驗(yàn)組及對照組胎鼠VZ區(qū)腦切片計數(shù)轉(zhuǎn)基因胚胎鼠腦中神經(jīng)前體細(xì)胞中沿水平和垂直不同方向分裂的細(xì)胞數(shù)量。根據(jù)細(xì)胞分裂平面與VZ面的夾角不同分為3種分裂方式:平行(0°~30°)、中間(30°~60°)、垂直(60°~90°)分裂。沿胚胎鼠腦的VZ面畫一條長直線,沿細(xì)胞的分裂平面畫一條直線,測量兩條直線間的夾角,即為神經(jīng)前體細(xì)胞分裂平面與腦室面的夾角。統(tǒng)計分析VZ區(qū)各種分裂角度的細(xì)胞數(shù)量,E13.5 d轉(zhuǎn)基因組和野生型組的分裂細(xì)胞數(shù)量為168例;E17.5 d轉(zhuǎn)基因組和野生型組的分裂細(xì)胞數(shù)量為105例。

        1.2.5 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 13.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,計量資料經(jīng)檢驗(yàn)后符合正態(tài)分布,用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。轉(zhuǎn)基因組和野生型組細(xì)胞分裂方向比較采用卡方檢驗(yàn)。P<0.05為差異有顯著性。

        2 結(jié)果

        2.1 GAP-43表達(dá)在細(xì)胞膜上 E13.5 d高表達(dá)GAP-43轉(zhuǎn)基因陽性胎鼠和對照野生型胎鼠腦區(qū)免疫熒光染色切片,可見GAP-43陽性反應(yīng)。蛋白免疫印跡檢測E13.5 d GAP-43表達(dá)的結(jié)果顯示,GAP-43高表達(dá)轉(zhuǎn)基因組的小鼠其GAP-43蛋白的表達(dá)量高于對照組的小鼠(P<0.05)(圖1),且GAP-43特異性表達(dá)于細(xì)胞膜上(圖2)。

        2.2 GAP-43和Gαi間存在相互作用 取E17.5 d高表達(dá)GAP-43轉(zhuǎn)基因陽性胎鼠腦組織,經(jīng)冷凍切片后免疫熒光共染色,共聚焦顯微鏡觀察單層胎鼠腦區(qū)免疫熒光染色切片,結(jié)果顯示GAP-43與Gαi存在免疫熒光共定位(圖3D中箭頭所示)。為了進(jìn)一步證明GAP-43與Gαi間是否存在相互作用,取E17.5 d高表達(dá)GAP-43轉(zhuǎn)基因陽性胎鼠腦組織進(jìn)行co-IP作用,結(jié)果顯示GAP-43和Gαi相互結(jié)合(圖3E中箭頭所示)。

        2.3 GAP-43高表達(dá)影響細(xì)胞的分裂平面 測量E13.5 d及E17.5 d轉(zhuǎn)基因組和野生型組神經(jīng)前體細(xì)胞分裂平面與VZ面的夾角(圖4)。統(tǒng)計分析VZ區(qū)各種分裂角度的細(xì)胞數(shù)量。E13.5 d時,轉(zhuǎn)基因組與對照組相比,細(xì)胞沿水平、中間和垂直角度分裂的細(xì)胞數(shù)量差異有顯著性(P<0.05)(表1);而E17.5 d時,轉(zhuǎn)基因組與對照組相比,以不同角度(水平、中間、垂直)分裂的細(xì)胞數(shù)量差異無顯著性(P>0.05)(表2)。

        圖1 轉(zhuǎn)基因組和野生型組GAP-43表達(dá)量比較(Volume=像素信號強(qiáng)度總和INT×像素面積mm2)注:GAP-43:生長相關(guān)蛋白-43

        圖2 GAP-43表達(dá)的檢測注:Western blot結(jié)果顯示GAP-43表達(dá)位置在細(xì)胞膜上;其中β-actin作為GAP-43的陽性對照;GAP-43:生長相關(guān)蛋白-43

        圖3 檢測GAP-43和Gαi間的作用注:圖A~D為E17.5 d鼠腦免疫熒光染色切片,共聚焦顯微鏡下觀察照相,其中綠色為GAP-43;紅色為Gαi;藍(lán)色為細(xì)胞核;黃色為GAP-43和G蛋白免疫熒光共定位,標(biāo)尺為250 μm。圖E示在胎鼠腦蛋白提取液中加入Gαi的一抗與G蛋白,其中Gαi的一抗與G蛋白連接,然后用Western blot的方法檢測與Gαi相互作用的GAP-43。在蛋白提取液中加入IgG的一抗與G蛋白,其中IgG的一抗與G蛋白連接作為陰性對照。胎鼠腦蛋白提取液行免疫印跡作為陽性對照。IB:免疫印跡,IP:免疫沉淀;GAP-43:生長相關(guān)蛋白-43

        圖4 GAP-43高表達(dá)影響神經(jīng)細(xì)胞分裂方向注:圖A~H為E13.5 d轉(zhuǎn)基因組和野生型組鼠腦免疫熒光染色切片,共聚焦顯微鏡下觀察照相,圖中綠色為GAP-43;藍(lán)色為細(xì)胞核。圖A為胚胎E13.5 d胎鼠全腦染色,標(biāo)尺為250 μm。圖B~E為轉(zhuǎn)基因組,沿腦室區(qū)畫一條黃色長線,在表達(dá)GAP-43的細(xì)胞中黃色短線代表細(xì)胞分裂平面(細(xì)胞分裂后期),白色箭頭所示為水平分裂的細(xì)胞(細(xì)胞分裂平面與腦室區(qū)的夾角為25°);圖E為圖D中箭頭所示分裂細(xì)胞3倍放大圖。圖F~H為對照組,沿腦室區(qū)畫一條黃色長線,黃色短線代表細(xì)胞分裂平面(細(xì)胞分裂后期);白色箭頭所示為豎直分裂的細(xì)胞(細(xì)胞分裂平面與腦室區(qū)的夾角為73°),標(biāo)尺為50 μm。GAP-43:生長相關(guān)蛋白-43

        表1 胚胎E13.5 d轉(zhuǎn)基因組與野生型組細(xì)胞分裂方向比較

        3 討論

        GAP-43是神經(jīng)發(fā)育和再生的內(nèi)在決定因子[5-8],通過電鏡對大鼠腦梗死灶周圍皮層突觸的超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)GAP-43參與了腦梗死灶周圍皮層的突觸重建[3-4]。目前研究發(fā)現(xiàn)GAP-43不僅存在于已分化定型、有軸突生長的神經(jīng)元中,而且在NPC中就有表達(dá)[11-12],參與神經(jīng)發(fā)生過程。且體內(nèi)研究顯示GAP-43與細(xì)胞中心體共定位且與中心體定位有關(guān)[6],提示GAP-43可能是一種與細(xì)胞極性相關(guān)的細(xì)胞命運(yùn)決定子。

        為了進(jìn)一步揭示GAP-43參與神經(jīng)發(fā)育的機(jī)制,本課題組前期建立了GAP-43高表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠[13]。通過免疫熒光法和蛋白免疫印跡法測定GAP-43在實(shí)驗(yàn)組和對照組細(xì)胞內(nèi)的定位,因?yàn)镚AP-43是膜相關(guān)蛋白,其表達(dá)位置是在細(xì)胞膜上[14],結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因組中GAP-43的表達(dá)位置并沒有改變(圖2);而且轉(zhuǎn)基因組的GAP-43蛋白表達(dá)量高于野生型組(圖1)。Gαi可以和Gβγ組成G蛋白復(fù)合體,Gβγ蛋白可以調(diào)控紡錘體的旋轉(zhuǎn),使細(xì)胞發(fā)生不對稱的分裂[15],而GAP-43又與G蛋白有密切關(guān)系,即G蛋白與其受體反應(yīng)位點(diǎn)與GAP-43有交叉性[16]。以往的研究表明GAP-43不僅可以聚集細(xì)胞骨架肌動蛋白[17],而且可以招募包括G蛋白家族在內(nèi)的信號蛋白[18-21]。我們前期的結(jié)果已經(jīng)證明了GAP-43與細(xì)胞中心體不存在共定位[22],本研究表明,GAP-43與Gαi共定位(圖3)。G0蛋白可以通過作用于GAP-43抑制GAP-43的活性[19],我們免疫共沉淀的結(jié)果進(jìn)一步明確了GAP-43與Gαi間存在作用(圖3箭頭所示),這與以上的研究結(jié)果一致。

        表2 胚胎E17.5 d轉(zhuǎn)基因組與野生型組細(xì)胞分裂方向比較

        近期研究表明,在哺乳動物的前腦中,GAP-43在水平分裂的神經(jīng)祖細(xì)胞中有高表達(dá),并與水平分裂的細(xì)胞密切相關(guān)[11]。細(xì)胞分裂平面與VZ面的夾角不同產(chǎn)生的分裂方式也不同:當(dāng)夾角是垂直時,發(fā)生對稱分裂,可以形成兩個相同的子代;當(dāng)夾角是平行時,發(fā)生不對稱分裂,可以產(chǎn)生兩個不同的子代[23]。為了進(jìn)一步揭示GAP-43在細(xì)胞分裂方向中的作用機(jī)制,本課題組對轉(zhuǎn)基因組胚胎鼠腦內(nèi)神經(jīng)前體細(xì)胞沿水平、中間角度和垂直方向分裂的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù),并與對照組胎腦進(jìn)行對照。結(jié)果顯示E13.5 d時轉(zhuǎn)基因組與對照組相比,細(xì)胞沿水平、中間和垂直角度分裂的細(xì)胞數(shù)量差異有顯著性(表1)。抑制GAP-43表達(dá)可以改變神經(jīng)前體細(xì)胞分化[11-12],根據(jù)神經(jīng)發(fā)生的分裂平面理論[23],GAP-43參與神經(jīng)前體細(xì)胞分化的機(jī)制可能是參與調(diào)控細(xì)胞分裂平面[11-12],并且G蛋白可以調(diào)控紡錘體的旋轉(zhuǎn)使細(xì)胞發(fā)生不對稱分裂[15],所以說GAP-43參與神經(jīng)發(fā)生的機(jī)制很可能是通過G蛋白改變神經(jīng)前體細(xì)胞的分裂方向來實(shí)現(xiàn)的,這與前人的研究成果一致。但是,本研究對于GAP-43與G蛋白作用的分子機(jī)制了解非常有限,接下來可以通過對Gαi的N端氨基酸作用位點(diǎn)的點(diǎn)突變及使用相應(yīng)的蛋白抑制劑來進(jìn)一步明確二者間作用對紡錘體旋轉(zhuǎn)的影響。另外,GAP-43高表達(dá)改變了NPC的分裂方向,這勢必會引起分化成神經(jīng)元的數(shù)量改變[24],GAP-43對于神經(jīng)元數(shù)量改變的影響本研究并未涉及有待于進(jìn)一步的研究。

        對于GAP-43通過G蛋白參與細(xì)胞分裂平面調(diào)控這一問題的探討,對進(jìn)一步探索NPC分化的分子機(jī)制有重要意義,有助于對GAP-43在神經(jīng)發(fā)育及卒中等神經(jīng)損傷修復(fù)突觸重建中的作用有新的認(rèn)識。

        1 張潤華, 劉改芬, 潘岳松, 等. 世界卒中流行趨勢概況[J].中國卒中雜志, 2014, 9:768-773.

        2 Brown JA, Lutsep HL, Weinand M, et al. Motor cortex stimulation for the enhancement of recovery from stroke:A prospective, multicenter safety study[J].Neurosurgery, 2008, 62 Suppl 2:853-862.

        3 鄭建, 楊力軍, 謝瑞祿, 等. 皮層電刺激聯(lián)合康復(fù)鍛煉大鼠局灶性腦缺血模型前肢運(yùn)動功能及運(yùn)動區(qū)突觸可塑性相關(guān)蛋白表的影響[J]. 中國卒中雜志, 2011, 5:388-394.4 謝瑞祿, 孫異臨, 鄭健, 等. 皮層電刺激聯(lián)合康復(fù)治療對大鼠腦缺血皮層運(yùn)動區(qū)突觸超微結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)參數(shù)的影響[J]. 中國卒中雜志, 2011, 6:864-868.

        5 Benowitz LI, Routtenberg A. GAP-43:an intrinsic determinant of neuronal development and plasticity[J].Trends Neurosci, 1997, 20:84-91.

        6 Esdar C, Oehrlein SA, Reinhardt S, et al. The protein kinase C (PKC) substrate GAP-43 is already expressed in neural precursor cells, colocalizes with PKCeta and binds calmodulin[J]. Eur J Neurosci, 1999, 11:503-516.

        7 Nakamura F, Strittmatter P, Strittmatter SM. GAP-43 augmentation of G protein-mediated signal transduction is regulated by both phosphorylation and palmitoylation[J]. J Neurochem, 1998, 70:983-992.

        8 Palacios G, Mengod G, Sarasa M, et al.Denovosynthesis of GAP-43:in situ hybridization histochemistry and light and electron microscopy immunocytochemical studies in regenerating motor neurons of cranial nerve nuclei in the rat brain[J]. Brain Res, 1994, 24:107-117.

        9 Stricker SH, Meiri K, Gotz M. P-GAP-43 is enriched in horizontal cell divisions throughout rat cortical development[J]. Cereb Cortex, 2006, 16:121-131.

        10 Rashmi M, Shailesh KG. GAP-43 is key to mitotic spindle control and centrosome-based polarization in neurons[J]. Cell Cycle, 2008, 7:348-357.

        11 Mani S, Shen Y, Schaefer J, et al. Failure to express GAP-43 during neurogenesis affects cell cycle regulation and differentiation of neural precursors and stimulates apoptosis of neurons[J]. Mol Cell Neurosci,2001, 17:54-66.

        12 Shen Y, Mani S, Meiri KF. Failure to express GAP-43 leads to disruption of a multipotent precursor and inhibits astrocyte differentiation[J]. Mol Cell Neurosci,2004, 26:390-405.

        13 黃蕊, 趙君朋, 文玉軍, 等. GAP-43高表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠的建立[J]. 首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2013, 34:105-109.

        14 Skene JH, Virag I. Posttranslational membrane attachment and dynamic fatty acylation of a neuronal growth cone protein, GAP-43[J]. J Cell Biol, 1989,108:613-624.

        15 Sanada K, Tsai LH. G protein beta-gamma subunits and AGS3 control spindle orientation and asymmetric cell fate of cerebral cortical progenitors[J]. Cell, 2005,122:119-131.

        16 Strittmatter SM, Vartanian T, Fishman MC. GAP-43 as a plasticity protein in neuronal form and repair[J]. J Neurobiol, 1992, 23:507- 520.

        17 Ollom CM, Denny JB. A crosslinking analysis of GAP-43 interactions with other proteins in differentiated N1E-115 cells[J]. Int J Mol Sci, 2008, 9:1753-1771.

        18 Denny JB. Molecular mechanisms, biological actions,and neuropharmacology of the growth-associated protein GAP-43[J]. Curr Neuropharmacol, 2006,4:293-304.

        19 Yang H, Wan L, Song F, et al. Palmitoylation modification of Galpha(o) depresses its susceptibility to GAP-43 activation[J]. Int J Biochem Cell Biol, 2009,41:1495-1501.

        20 Arni S, Keilbaugh SA, Ostermeyer AG, et al.Association of GAP-43 with detergent-resistant membranes requires two palmitoylated cysteine residues[J]. J Biochem, 1998, 273:28478-28485.

        21 Chakravarthy B, Rashid A, Brown L, et al. Association of GAP-43 (neuromodulin) with microtubuleassociated protein MAP-2 in neuronal cells[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2008, 371:679-683.

        22 Zhao J, Yao Y, Xu Q, et al. Expression of GAP-43 in fibroblast cell Lines influences the orientation of cell division[J]. Int J Dev Neurosci, 2011, 29:469-74.

        23 Miyata T, KawaguchiA, Okano H, et al. Asymmetric inheritance of radial glial fibers by cortical neurons[J].Neuron, 2001, 31 :727 - 741.

        24 Zhong WM, Chia W. Neurogenesis and asymmetric cell division[J]. Curr Opin Cell Biol, 2008, 18 :4211-4231.

        【點(diǎn)睛】

        在GAP-43高表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠中,發(fā)現(xiàn)GAP-43與G蛋白相互作用,并可以改變細(xì)胞分裂平面。

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