苗素云 劉淑芳 天津市西青區(qū)結(jié)核病防治所 300112

三種檢測(cè)方法對(duì)結(jié)核病診斷的臨床價(jià)值

苗素云 劉淑芳 天津市西青區(qū)結(jié)核病防治所 300112

目的：比較抗酸染色法、結(jié)核抗體法和結(jié)核菌素試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)核桿菌的靈敏度和特異性，及在臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法：用抗酸染色法、結(jié)核抗體法和結(jié)核菌素試驗(yàn)對(duì)141例臨床確診的結(jié)核病患者和127例非結(jié)核病患者進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)三種檢測(cè)方法的結(jié)果進(jìn)行分析比較。結(jié)果：抗酸染色法、結(jié)核抗體法及結(jié)核菌素試驗(yàn)的靈敏度分別為34.8%，70.2%，75.2%；特異度分別為100%，82.7%，63.8%，結(jié)核抗體法和結(jié)核菌素試驗(yàn)的敏感性明顯高于抗酸染色法，但特異性不及抗酸染色法，結(jié)核抗體法的特異性高于結(jié)核菌素試驗(yàn)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：結(jié)核抗體法具有簡(jiǎn)便、快速、不需貴重儀器設(shè)備、比抗酸染色法具有更高的靈敏度、比結(jié)核菌素試驗(yàn)具有更高的特異性的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)痰涂片陰性肺結(jié)核的診斷具有重要的臨床價(jià)值。

肺結(jié)核 抗酸染色 結(jié)核抗體 結(jié)核菌素試驗(yàn)

結(jié)核病被列為我國(guó)重大傳染病之一，是嚴(yán)重危害人類身體健康和生命安全的呼吸道傳染病，有“白色瘟疫”之稱。2010年，全國(guó)第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查顯示，與2000年相比，全國(guó)肺結(jié)核患病率呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，但結(jié)核病特別是耐藥結(jié)核病負(fù)擔(dān)仍很嚴(yán)重，結(jié)核病防治工作仍面臨諸多挑戰(zhàn)，需要長(zhǎng)期不懈的努力[1］。提高肺結(jié)核的診斷水平對(duì)結(jié)核病的預(yù)防和治療意義重大。目前，肺結(jié)核的診斷通常需要做痰涂片抗酸染色（AFS）、結(jié)核菌素（PPD）試驗(yàn)、血清結(jié)核抗體檢測(cè)TB－Ab等。筆者用上述三種方法對(duì)141例臨床確診的結(jié)核病患者和127例非結(jié)核病患者進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比分析，以評(píng)價(jià)各方法在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年1月－2013年12月由本所確診的肺結(jié)核患者141例，其中男79例，女62例，年齡22～81歲，平均年齡49.8歲。非結(jié)核病患者127例（排除肺癌、糖尿病、陳舊性肺結(jié)核患者），其中男68例，女59例，年齡18～76歲，平均年齡47.4歲。肺結(jié)核根據(jù)病史、體格檢查、胸片及輔助檢查確診。

1.2 試劑 萋－尼氏抗酸染色液，由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供。結(jié)核抗體檢測(cè)采用斑點(diǎn)免疫金滲濾試驗(yàn)（DIGFA），試劑由上海奧普生物醫(yī)藥有限公司提供。PPD試劑，由北京祥瑞生物制品有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 AFS：挑取痰標(biāo)本中干酪樣、膿性或可疑部分約0.05ml于玻片正面右側(cè)23處，均勻涂抹成10mm×20mm的卵圓形痰膜，正面朝上自然干燥；涂片干燥后經(jīng)火焰固定，滴加石碳酸復(fù)紅染液蓋滿玻片，加熱至出現(xiàn)蒸氣后停止加熱，保持染色5min；沖洗后玻片上滴加脫色液，脫色約1min，脫至痰膜無(wú)可視紅色為止；沖洗后滴加亞甲藍(lán)復(fù)染液，染色約30s；沖洗，玻片自然干燥后鏡檢。

1.3.2 DIGFA：將待檢標(biāo)本離心后備用，在檢測(cè)板的反應(yīng)孔中間，加入2滴封閉液，等待薄膜吸入；取40μl新鮮的血清標(biāo)本，加入反應(yīng)孔中間，等待薄膜吸入；加入6滴洗滌液，等待薄膜吸入；加入2滴金標(biāo)液，等待薄膜吸入；加入6滴洗滌液，等待薄膜吸入，目測(cè)結(jié)果。質(zhì)控區(qū)及檢測(cè)區(qū)同時(shí)出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)者為陽(yáng)性，質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)而檢測(cè)區(qū)未顯示紅色斑點(diǎn)者為陰性。

1.3.3 PPD：吸取0.1ml（5IU）皮試液注射于左前臂掌內(nèi)側(cè)皮內(nèi)。72h后檢查注射部位反應(yīng)。測(cè)量以硬結(jié)的橫徑及縱徑的mm數(shù)記錄，反應(yīng)平均直徑不低于5mm為陽(yáng)性反應(yīng)，≥20mm或有水泡、壞死、淋巴管炎者均屬于強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組檢測(cè)結(jié)果分析 141例肺結(jié)核組檢測(cè)結(jié)果表明，AFS、DIGFA、PPD法的陽(yáng)性率分別為34.8%、70.2%、75.2%，其中AFS靈敏度最低，與DIGFA法和PPD法相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝35.55，P＜0.01和χ2＝46.54，P＜0.01）；DIGFA法和PPD法的靈敏度相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。127例非結(jié)核組的檢測(cè)結(jié)果表明，AFS、DIGFA、PPD法試驗(yàn)的特異度分別為100%（1－0127）、82.7%（1－22127）、63.8%（1－46127），AFS的特異性最高，與DIGFA法和PPD法相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝24.09，P＜0.01和χ2＝56.17，P＜0.01）；DIGFA法的特異性高于PPD法，二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝11.57，P＜0.01）。見(jiàn)表1。

表1 結(jié)核組和非結(jié)核組檢測(cè)結(jié)果分析〔n（%）〕

2.2 痰菌陽(yáng)性和陰性患者DIGFA法和PPD法檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果分析 菌陽(yáng)組DIGFA法陽(yáng)性率為71.4%，菌陰組DIGFA法陽(yáng)性率為69.6%，二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；菌陽(yáng)組PPD法陽(yáng)性率為79.6%，菌陰組PPD法陽(yáng)性率為72.8%，二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表2 痰菌陽(yáng)性和陰性患者的結(jié)果分析〔n（%）〕

3 討論

痰涂片抗酸染色陽(yáng)性是診斷肺結(jié)核的“金標(biāo)準(zhǔn)”，該法特異性高，在結(jié)核病控制工作中占有不可或缺的位置，但由于患者少痰、無(wú)痰、痰中含菌量少、標(biāo)本留取方法不當(dāng)、痰液性狀不好以及干擾因素多等原因，致使肺結(jié)核痰涂片抗酸染色陽(yáng)性率較低，一般在20%～40%。抗酸桿菌涂片鏡檢法具有簡(jiǎn)便、快捷、價(jià)格低廉的優(yōu)點(diǎn)，但其敏感性太低，并受送檢標(biāo)本質(zhì)量影響較大[2］，容易造成漏診。培養(yǎng)法雖可以提高檢出率，但耗時(shí)長(zhǎng)，需要6～8周，且對(duì)早期感染者不易檢出，失去了早發(fā)現(xiàn)、早治療的良機(jī)，嚴(yán)重的影響了結(jié)核病的及時(shí)診斷[3］。即使結(jié)核桿菌快速培養(yǎng)可以大大縮短檢測(cè)時(shí)間，但其成本相對(duì)高昂，應(yīng)用受到限制。

本文用斑點(diǎn)免疫金滲濾試驗(yàn)法檢測(cè)結(jié)核抗體，對(duì)結(jié)核病診斷的靈敏度為70.2%，特異度為82.7%，與傳統(tǒng)的涂片和培養(yǎng)法比較，該方法可明顯提高結(jié)核病的陽(yáng)性檢出率，有助于臨床結(jié)核病的診斷和治療，但抗體檢測(cè)作為結(jié)核病的體液免疫檢查尚存在一定的假陽(yáng)性和假陰性的問(wèn)題。受試者接種過(guò)卡介苗、曾經(jīng)得過(guò)結(jié)核均會(huì)使體內(nèi)存在一定水平的結(jié)核抗體，另外血液中存在相關(guān)抗原與抗原決定簇，與結(jié)核抗體產(chǎn)生非特異性結(jié)合等均可造成結(jié)核抗體假陽(yáng)性。不同人群機(jī)體免疫水平存在差異[4］；患者處于臨床感染的初期，結(jié)核抗體的產(chǎn)生處于“窗口期”；血液中免疫抑制因子及免疫復(fù)合物的存在均可造成結(jié)核抗體假陰性。

本文顯示結(jié)核抗體與PPD試驗(yàn)的敏感性相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但結(jié)核抗體的特異性明顯高于PPD試驗(yàn)（P＜0.01），分析原因可能是由于PPD陽(yáng)性僅表示受試者體內(nèi)有結(jié)核感染，并不一定患病。我國(guó)城市成年居民的結(jié)核感染率在60%以上，所以PPD試驗(yàn)在人群中有著極高的假陽(yáng)性率。另外，PPD試驗(yàn)觀察反應(yīng)的時(shí)間為72h，由于測(cè)量者主觀因素的影響，結(jié)果會(huì)有一些誤差?；颊呓臃N過(guò)卡介苗也會(huì)對(duì)試驗(yàn)造成影響。有文獻(xiàn)報(bào)道，感染肺結(jié)核15個(gè)月后，體內(nèi)結(jié)核抗體也已消失[5］，所以人群高感染率對(duì)血清結(jié)核抗體檢測(cè)的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于PPD試驗(yàn)。

本文對(duì)三種檢測(cè)方法的靈敏度和特異性進(jìn)行對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)其各有優(yōu)劣，三者可互相補(bǔ)充，三種方法的聯(lián)合應(yīng)用對(duì)于結(jié)核病的診斷和鑒別診斷具有重要的臨床價(jià)值。尤其是對(duì)于無(wú)痰患者、不易獲得痰標(biāo)本的兒童結(jié)核、痰涂片陰性肺結(jié)核患者及肺外結(jié)核患者，血清結(jié)核抗體檢測(cè)更具有重要的臨床意義，是一種較為理想的輔助檢查方法，值得廣泛推廣和應(yīng)用。

[1]全國(guó)第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查技術(shù)指導(dǎo)組，全國(guó)第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查辦公室.2010年全國(guó)第五次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查報(bào)告〔J〕.中國(guó)防澇雜志，2012，34（8）：485.

[2]葉林德.肺結(jié)核患者痰液性狀對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響〔J〕.浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)，2002，14（7）：80.

[3]施旭東，劉正華，吳曉媛，等.結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)及菌群鑒定快速熒光法的研究〔J〕.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2005，28（8）：790－792.

[4]彭衛(wèi)生，王英年，肖成志.新編結(jié)核病學(xué)〔M〕.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2003：179－180.

[5]趙一紅，黃潤(rùn)堂，曹松，等.結(jié)核病治愈后抗結(jié)核抗體在體內(nèi)持續(xù)時(shí)間的臨床觀察〔J〕.中國(guó)防癆雜志，2001，23（6）：378－381.

（編輯雅文）

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1001－7585（2015）19－2685－03

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