黃傳政，朱海波，鄧建平

(黃石市愛康醫(yī)院檢驗科，湖北 黃石435000)

ACCESS全自動微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析儀由美國BECKMAN COULTE公司和法國PASTURE研究院合作設(shè)計生產(chǎn)，具有高靈敏度、高準(zhǔn)確度、檢測速度快等優(yōu)點，可進(jìn)行內(nèi)分泌激素、腫瘤標(biāo)志物、心血管疾病標(biāo)志物、病毒標(biāo)志物等項目的檢測，但其試劑不開放，原裝進(jìn)口試劑、耗材、質(zhì)控物價格昂貴，有少數(shù)實驗室為了降低成本，僅憑對每一批號試劑定標(biāo)和保養(yǎng)儀器來保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。為了保證室內(nèi)質(zhì)控正常開展，同時又降低儀器耗材的使用成本，本實驗室嘗試自配ACCESS化學(xué)發(fā)光儀的質(zhì)控血清進(jìn)行常規(guī)項目的室內(nèi)質(zhì)量控制，并對其精密度和穩(wěn)定性進(jìn)行了驗證，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 ACCESS化學(xué)發(fā)光儀和BECKMAN COULTE公司提供的原裝進(jìn)口試劑：FT3、FT4、TSH、CEA、AFP、CA125、CA199。

1.2 方法 從我院體檢科2011年體檢人群中抽取374份(經(jīng)內(nèi)外科、心電圖、B超、胸透、化驗等檢查各項指征均在正常范圍)健康無黃疸、無溶血、無脂血的血清標(biāo)本制配成混合血清約200ml，不添加任何防腐劑，每支0.5ml分裝密封后置-70℃保存[1]。每天取出一支復(fù)溶，隨日常標(biāo)本一同測定上述7個項目(計量單位：FT3：pmol/L FT4： pmol/L TSH：μIU/ml AFP：ng/ml CEA：ng/ml CA125：U/ml CA199：U/ml)。

1.2.1 精密度試驗 隨機(jī)抽取20支質(zhì)控血清，室溫下復(fù)溶后，在同一批次對該20支質(zhì)控血清檢測上述7個項目，結(jié)果以均值標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，統(tǒng)計出各個項目的變異系數(shù)CV%，數(shù)據(jù)見表1。

表1 自制質(zhì)控物的均勻性和精密度(±s)

表1 自制質(zhì)控物的均勻性和精密度(±s)

注：CV%*是質(zhì)量規(guī)范表提供的對應(yīng)項目不精密度的CV值。

項目 n ±s CV% CV%*FT3 FT4 TSH AFP CEA CA125 CA199 20 20 20 20 20 20 20 6.41±0.15 11.28±0.35 2.39±0.06 2.97±0.11 1.63±0.081 15.38±0.76 9.24±0.45 2.38 3.3 2.61 3.78 4.98 5.04 4.97 4.0*3.8*9.9*5.0 4.7*6.8*12.3*

1.2.2 穩(wěn)定性試驗(批間差異) 抽取2012年1月、3月、6月、9月、12月該質(zhì)控物7個項目的檢測數(shù)據(jù)，每月以均值標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，數(shù)據(jù)見表2。

表2 2012年1月、3月、6月、9月、12月的各項目均值和標(biāo)準(zhǔn)差

1.3 數(shù)據(jù)處理 采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS12.0建立數(shù)據(jù)庫進(jìn)行統(tǒng)計，通過卡方檢驗，以P＜0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 7個項目CV%與質(zhì)量規(guī)范表[2]提供的對應(yīng)項目不精密度的 CV 值進(jìn)行比較，F(xiàn)T3、FT4、TSH、CA125、CA199 5個項目CV%均小于質(zhì)量規(guī)范表的不精密度，CEA的CV%略大于質(zhì)量規(guī)范的CV%，AFP的CV%小于標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布在μ±1.96σ兩點間曲線外面積的5%[2]。

2.2 7個項目 2012年 1月、3月、6月、9月、12月均值標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行組間方差檢驗，結(jié)果均為P＞0.05，均無顯著性差異。

3 討論

室內(nèi)質(zhì)量控制是實驗室質(zhì)量保證體系中的重要組成部分[3]，目前絕大多數(shù)化學(xué)發(fā)光儀都采用封閉系統(tǒng)，使用廠家提供的配套質(zhì)控物固然較好，但這些液體材料的基質(zhì)對于某些分析方法和儀器具有潛在的影響[3]，理想情況下，質(zhì)控品應(yīng)具有與所檢測標(biāo)本相同的基質(zhì)，這樣它們的行為就與實際的標(biāo)本一樣[2]。其次商品化定值質(zhì)控物價格比較昂貴，成本較高。我科使用健康人群混合血清作室內(nèi)質(zhì)控物，不添加任何其它成分，使質(zhì)控物基質(zhì)與日常檢測樣本最為接近。表1中是隨機(jī)取出的20支自制質(zhì)控物在同一批次測量7個項目的均值、標(biāo)準(zhǔn)差，7個項目CV%與質(zhì)量規(guī)范表提供的對應(yīng)項目不精密度CV值進(jìn)行比較，F(xiàn)T3、FT4、TSH、CA125、CA1995個項目的CV%均小于質(zhì)量規(guī)范表的不精密度，CEA的CV%略大于質(zhì)量規(guī)范的不精密度，但分析質(zhì)量規(guī)范對某些檢測項目要求太高，目前技術(shù)水平難以達(dá)到[4]，所以大于質(zhì)量規(guī)范不精密度0.28%的CV%偏差基本可忽略不計。由于質(zhì)量規(guī)范表中無AFP不精密度的CV值，AFP的CV%只能與標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布在μ±1.96σ兩點間曲線外面積的5%比較，AFP的CV%小于5%，證明自制質(zhì)控物精密度良好；抽取2012年該質(zhì)控物1月、3月、6月、9、12月7個項目的均值和標(biāo)準(zhǔn)差數(shù)據(jù) (表2)，各個項目進(jìn)行組間方差檢驗，均為P＞0.05，均無顯著性差異，可見自制質(zhì)控物在-70℃環(huán)境里一年內(nèi)穩(wěn)定性較好。通過1年來對我科自制室內(nèi)質(zhì)控血清的檢測與評價，說明該質(zhì)控物可對ACCESS化學(xué)發(fā)光檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性和檢測項目日間精密度起到很好的監(jiān)測和指示作用，其性能基本符合質(zhì)控物要求，可用于化學(xué)發(fā)光檢測的室內(nèi)質(zhì)量控制，并且成本低廉，制備簡單。由于我們采用正常人群的混合血清做質(zhì)控物，對于趨于正態(tài)分布的檢測項目如FT3、FT4、TSH可以驗證本實驗室的參考區(qū)間。值得提出的是以上幾個項目的測定均值都在正常范圍，只對健康人群起到很好的監(jiān)控作用，但對于疾病情況下出現(xiàn)的高值尚不能很好的反映檢測系統(tǒng)測定的穩(wěn)定性，因此在上述自配混合血清的基礎(chǔ)上用標(biāo)準(zhǔn)加入法(加入較高濃度的校準(zhǔn)品)或加入某些病人的高值血清，將混合血清調(diào)制成高值室內(nèi)質(zhì)控血清，同時進(jìn)行兩個水平的室內(nèi)質(zhì)控檢測，值得進(jìn)一步探索。

[1]王蘭蘭,吳健民.臨床免疫學(xué)與檢驗[M].第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:30.

[2]王治國.臨床檢驗質(zhì)量控制技術(shù)[M].第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:457-460,238,25.

[3]葉應(yīng)嫵,王毓三 ,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:82,87.

[4]申子瑜,李萍.臨床實驗室管理學(xué)[M].第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:43.