晏廷亮+張帆+崔道林+方杰+龔蕾

【摘要】 目的：觀察美沙拉嗪聯(lián)合益生菌對(duì)炎癥性腸病大鼠血清中L-6、TNF-α和IFN-γ含量的影響，并初步探討該方法治療炎癥性腸病的作用機(jī)制。方法：將40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為四組，即正常對(duì)照組、模型組、美沙拉嗪組和美沙拉嗪益生菌聯(lián)合組，最后各組大鼠取血，應(yīng)用ELISA法檢測(cè)血清中IL-6、TNF-α和IFN-γ含量。結(jié)果：美沙拉嗪聯(lián)合益生菌組IL-6、TNF-α和IFN-γ含量的表達(dá)均明顯低于模型組（P<0.05）。結(jié)論：美沙拉嗪聯(lián)合益生菌在緩解腸道炎癥中發(fā)揮著重要作用。

【關(guān)鍵詞】 益生菌； 美沙拉嗪； 炎癥性腸病

炎癥性腸?。↖BD）一詞特指病因尚不明了的炎癥性腸病，主要包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病。IBD的病因尚未完全明確，目前認(rèn)為其發(fā)病機(jī)制可以概括為免疫反應(yīng)引發(fā)的炎性病理過(guò)程[1]。氨基水楊酸類藥物、免疫抑制劑和糖皮質(zhì)激素等藥物是目前治療該疾病的主要方法，但這類藥物停藥后容易復(fù)發(fā)，并且長(zhǎng)期應(yīng)用會(huì)帶來(lái)較多不良反應(yīng)[2]。近年來(lái)隨著對(duì)IBD的深入研究，生物制劑尤其是益生菌在IBD的治療領(lǐng)域受到醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與主要試劑 雄性SD大鼠40只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、美沙拉嗪組和美沙拉嗪益生菌聯(lián)合組，每組10只。葡聚糖硫酸鈉（DSS），美沙拉嗪片，益生菌：雙歧三聯(lián)活菌（含雙歧桿菌、乳酸桿菌、腸球菌），小鼠ELISA試劑盒。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 造模與灌胃 根據(jù)每日實(shí)際飲用量新鮮配制5%DSS溶液。隨機(jī)選取的30只大鼠給予含5%DSS的飲用水10 d建立炎癥性腸病動(dòng)物模型。第11天開始模型組常規(guī)飼養(yǎng)觀察14 d；美沙拉嗪組給予150 mg/（kg·d）的劑量應(yīng)用美沙拉嗪灌胃治療14 d，聯(lián)合組則除給予美沙拉嗪組同等治療外，同時(shí)還應(yīng)用雙歧三聯(lián)活菌按照500 mg/（kg·d）的劑量灌胃治療14 d，在此治療期間正常對(duì)照組和模型組都給予等量生理鹽水灌胃；正常對(duì)照組不予DSS干預(yù)，僅同步常規(guī)飼養(yǎng)觀察。

1.2.2 觀察指標(biāo) 所有大鼠于灌胃結(jié)束后處死并取血分離血清，應(yīng)用ELISA試劑盒測(cè)定大鼠血清中IL-6、TNF-α和IFN-γ含量，具體步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

模型組的各類炎癥因子含量均明顯高于正常對(duì)照組（P<0.05）；而美沙拉嗪組和聯(lián)合組的IL-6、TNF-α和IFN-γ含量的表達(dá)均明顯低于模型組，（P<0.05）；而聯(lián)合組相比美沙拉嗪組在IL-6的表達(dá)上也是明顯下降（P<0.05），雖然TNF-α和IFN-γ含量也是有所下降，但是差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。具體見表1。

3 討論

近年來(lái)我國(guó)的炎癥性腸病患病率逐年增加，而目前該病的發(fā)病因素及致病機(jī)制尚未明確，是多種因素導(dǎo)致的病變，一般主要考慮與外界環(huán)境、基因遺傳、免疫力以及感染等多方面綜合因素相關(guān)[3]。該病的主要臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、黏性血便等，如并發(fā)潰瘍必須及時(shí)治療，否則極易引發(fā)腸穿孔，威脅患者的生命安全[4]。傳統(tǒng)西醫(yī)臨床治療IBD的手段主要是通過(guò)抑制腸黏膜釋放前列腺素E和白三烯，進(jìn)而抑制巨噬細(xì)胞向炎癥中心移動(dòng)，從而達(dá)到有效抗炎的目的[5]。近年來(lái)有相關(guān)研究報(bào)道，IBD與腸道菌群失調(diào)有密切關(guān)系[6]，人體腸道有大量的微生物，不完全統(tǒng)計(jì)，數(shù)量高達(dá)400種以上，其中就以雙歧桿菌與嗜酸乳桿菌為主，大約占到微生物總量的98%以上，通常人體在正常情況下，腸道內(nèi)的微生物處于相對(duì)平衡狀態(tài)，可一旦失衡，菌群失調(diào)可導(dǎo)致相關(guān)疾病的發(fā)生[7]。IBD的患者腸黏膜表面的有益菌如乳酸桿菌和雙歧桿菌是缺失的，而大腸桿菌、變形桿菌和擬桿菌等革蘭氏陰性菌在腸黏膜表面的濃度反而增加，可以認(rèn)為腸道菌群失調(diào)可能是IBD誘發(fā)及復(fù)發(fā)的關(guān)鍵因素，因此應(yīng)用益生菌治療IBD成為一種新的臨床治療思維方式。

美沙拉嗪是一種5-氨基水楊酸制劑，在腸道釋放后主要通過(guò)抑制白三烯等炎性物質(zhì)的釋放，從而減少炎癥反應(yīng)[8]，同時(shí)該藥物還能清除腸道的自由基，較少引發(fā)不良反應(yīng)，患者能夠持續(xù)治療[9]?？梢娒郎忱耗芎芎玫匾种苹颊吣c黏膜的炎性反應(yīng)，促進(jìn)損傷腸壁愈合。在應(yīng)用美沙拉嗪治療IBD的同時(shí)適當(dāng)補(bǔ)充益生菌能夠平衡IBD患者的腸道菌群，不僅更加有效地抑制了IBD的炎癥反應(yīng)，而且可以明顯改變腸道的微生物環(huán)境[10]，這是基于腸道天然免疫與正常菌群間的異常免疫反應(yīng)，最終都表現(xiàn)在細(xì)胞因子的表達(dá)異常[11]。

從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，單用美沙拉嗪能夠明顯抑制大鼠模型血清中的炎癥因子，這也說(shuō)明這一藥物治療IBD的有效性，但是同時(shí)也可以看出，在于模型組存在明顯區(qū)別的同時(shí)，該組與正常對(duì)照組的炎癥因子的表達(dá)也是明顯存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。當(dāng)益生菌與美沙拉嗪聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，可以發(fā)現(xiàn)大鼠血清中三種炎癥的含量的表達(dá)繼續(xù)下降，不僅三項(xiàng)內(nèi)容都與模型組存在明顯差異，同時(shí)與正常對(duì)照組在TNF-α和IFN-γ這兩項(xiàng)已無(wú)明顯差異，這可能是源于益生菌通過(guò)上調(diào)腸道局部的免疫功能，促進(jìn)機(jī)體免疫恢復(fù)，從而有效糾正了抑炎和抗炎動(dòng)態(tài)失衡，降低炎癥反應(yīng)，并最終下調(diào)白細(xì)胞的計(jì)數(shù)，減少了炎性因子的釋放[12]。總之，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)中充分體現(xiàn)出了兩種藥物聯(lián)用的優(yōu)勢(shì)。

參考文獻(xiàn)

[1]闕雪梅，黃玉紅，孫明軍.益生菌對(duì)炎癥性腸病的作用及機(jī)制[J].國(guó)際消化病雜志，2013，33（5）：325-328.

[2]楊世權(quán)，彭良太，向軍等.中藥竹醫(yī)灌注Ⅰ號(hào)保留灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎54例療效觀察[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2013，10（6）：62-63.

[3]高山.潰瘍性結(jié)腸炎臨床療效對(duì)比觀察[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2013，11（15）： 29-30.

[4]石玉花.美沙拉嗪及柳氮磺砒啶在治療潰瘍性結(jié)腸炎中的對(duì)比分析[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2013，10（24）： 42-44.

[5]曾慶國(guó).美沙拉嗪聯(lián)合康復(fù)新液治療潰瘍性結(jié)腸炎的療效觀察[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2013，11（4）：52-53.

[6]曹艷菊.益生菌對(duì)實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠腸黏膜TLR2、TLR4表達(dá)及NF-κB活性的影響[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志， 2012， 21（8）： 760-763.

[7]韓蕘.益生菌配伍黛力新治療腸易激綜合征的安全性及療效分析[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2012，9（26）：16-17.

[8] 程華，肖源，劉治智，等.美沙拉嗪口服聯(lián)合錫類散改良保留灌腸治療老年潰瘍性結(jié)腸炎的療效[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，40（12）：1142-1144.

[9]袁曉虹.美沙拉嗪和柳氮磺胺吡啶治療潰瘍性結(jié)腸炎的療效對(duì)比研究[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2012，9（2）：25-26.

[10] Jacobi C A，Schulz C，Malfertheiner P.Treating critically ill patients with probiotics： Beneficial or dangerous？[J].Gut Pathog，2011，3（1）：2.

[11]趙德會(huì)，張麗，戴聰，等.益生菌VSL#3治療大鼠實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎的效果觀察及對(duì)STAT1/Tbet的影響[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2013，22（7）：672-676.

[12]熊小偉，周已焰，董荔，等.益生菌聯(lián)合早期腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)對(duì)重型顱腦損傷患者感染的影響[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，35（6）：536-539.

（收稿日期：2014-03-31） （本文編輯：陳丹云）endprint

【摘要】 目的：觀察美沙拉嗪聯(lián)合益生菌對(duì)炎癥性腸病大鼠血清中L-6、TNF-α和IFN-γ含量的影響，并初步探討該方法治療炎癥性腸病的作用機(jī)制。方法：將40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為四組，即正常對(duì)照組、模型組、美沙拉嗪組和美沙拉嗪益生菌聯(lián)合組，最后各組大鼠取血，應(yīng)用ELISA法檢測(cè)血清中IL-6、TNF-α和IFN-γ含量。結(jié)果：美沙拉嗪聯(lián)合益生菌組IL-6、TNF-α和IFN-γ含量的表達(dá)均明顯低于模型組（P<0.05）。結(jié)論：美沙拉嗪聯(lián)合益生菌在緩解腸道炎癥中發(fā)揮著重要作用。

【關(guān)鍵詞】 益生菌； 美沙拉嗪； 炎癥性腸病

炎癥性腸?。↖BD）一詞特指病因尚不明了的炎癥性腸病，主要包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病。IBD的病因尚未完全明確，目前認(rèn)為其發(fā)病機(jī)制可以概括為免疫反應(yīng)引發(fā)的炎性病理過(guò)程[1]。氨基水楊酸類藥物、免疫抑制劑和糖皮質(zhì)激素等藥物是目前治療該疾病的主要方法，但這類藥物停藥后容易復(fù)發(fā)，并且長(zhǎng)期應(yīng)用會(huì)帶來(lái)較多不良反應(yīng)[2]。近年來(lái)隨著對(duì)IBD的深入研究，生物制劑尤其是益生菌在IBD的治療領(lǐng)域受到醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與主要試劑 雄性SD大鼠40只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、美沙拉嗪組和美沙拉嗪益生菌聯(lián)合組，每組10只。葡聚糖硫酸鈉（DSS），美沙拉嗪片，益生菌：雙歧三聯(lián)活菌（含雙歧桿菌、乳酸桿菌、腸球菌），小鼠ELISA試劑盒。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 造模與灌胃 根據(jù)每日實(shí)際飲用量新鮮配制5%DSS溶液。隨機(jī)選取的30只大鼠給予含5%DSS的飲用水10 d建立炎癥性腸病動(dòng)物模型。第11天開始模型組常規(guī)飼養(yǎng)觀察14 d；美沙拉嗪組給予150 mg/（kg·d）的劑量應(yīng)用美沙拉嗪灌胃治療14 d，聯(lián)合組則除給予美沙拉嗪組同等治療外，同時(shí)還應(yīng)用雙歧三聯(lián)活菌按照500 mg/（kg·d）的劑量灌胃治療14 d，在此治療期間正常對(duì)照組和模型組都給予等量生理鹽水灌胃；正常對(duì)照組不予DSS干預(yù)，僅同步常規(guī)飼養(yǎng)觀察。

1.2.2 觀察指標(biāo) 所有大鼠于灌胃結(jié)束后處死并取血分離血清，應(yīng)用ELISA試劑盒測(cè)定大鼠血清中IL-6、TNF-α和IFN-γ含量，具體步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

模型組的各類炎癥因子含量均明顯高于正常對(duì)照組（P<0.05）；而美沙拉嗪組和聯(lián)合組的IL-6、TNF-α和IFN-γ含量的表達(dá)均明顯低于模型組，（P<0.05）；而聯(lián)合組相比美沙拉嗪組在IL-6的表達(dá)上也是明顯下降（P<0.05），雖然TNF-α和IFN-γ含量也是有所下降，但是差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。具體見表1。

3 討論

近年來(lái)我國(guó)的炎癥性腸病患病率逐年增加，而目前該病的發(fā)病因素及致病機(jī)制尚未明確，是多種因素導(dǎo)致的病變，一般主要考慮與外界環(huán)境、基因遺傳、免疫力以及感染等多方面綜合因素相關(guān)[3]。該病的主要臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、黏性血便等，如并發(fā)潰瘍必須及時(shí)治療，否則極易引發(fā)腸穿孔，威脅患者的生命安全[4]。傳統(tǒng)西醫(yī)臨床治療IBD的手段主要是通過(guò)抑制腸黏膜釋放前列腺素E和白三烯，進(jìn)而抑制巨噬細(xì)胞向炎癥中心移動(dòng)，從而達(dá)到有效抗炎的目的[5]。近年來(lái)有相關(guān)研究報(bào)道，IBD與腸道菌群失調(diào)有密切關(guān)系[6]，人體腸道有大量的微生物，不完全統(tǒng)計(jì)，數(shù)量高達(dá)400種以上，其中就以雙歧桿菌與嗜酸乳桿菌為主，大約占到微生物總量的98%以上，通常人體在正常情況下，腸道內(nèi)的微生物處于相對(duì)平衡狀態(tài)，可一旦失衡，菌群失調(diào)可導(dǎo)致相關(guān)疾病的發(fā)生[7]。IBD的患者腸黏膜表面的有益菌如乳酸桿菌和雙歧桿菌是缺失的，而大腸桿菌、變形桿菌和擬桿菌等革蘭氏陰性菌在腸黏膜表面的濃度反而增加，可以認(rèn)為腸道菌群失調(diào)可能是IBD誘發(fā)及復(fù)發(fā)的關(guān)鍵因素，因此應(yīng)用益生菌治療IBD成為一種新的臨床治療思維方式。

美沙拉嗪是一種5-氨基水楊酸制劑，在腸道釋放后主要通過(guò)抑制白三烯等炎性物質(zhì)的釋放，從而減少炎癥反應(yīng)[8]，同時(shí)該藥物還能清除腸道的自由基，較少引發(fā)不良反應(yīng)，患者能夠持續(xù)治療[9]?？梢娒郎忱耗芎芎玫匾种苹颊吣c黏膜的炎性反應(yīng)，促進(jìn)損傷腸壁愈合。在應(yīng)用美沙拉嗪治療IBD的同時(shí)適當(dāng)補(bǔ)充益生菌能夠平衡IBD患者的腸道菌群，不僅更加有效地抑制了IBD的炎癥反應(yīng)，而且可以明顯改變腸道的微生物環(huán)境[10]，這是基于腸道天然免疫與正常菌群間的異常免疫反應(yīng)，最終都表現(xiàn)在細(xì)胞因子的表達(dá)異常[11]。

從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，單用美沙拉嗪能夠明顯抑制大鼠模型血清中的炎癥因子，這也說(shuō)明這一藥物治療IBD的有效性，但是同時(shí)也可以看出，在于模型組存在明顯區(qū)別的同時(shí)，該組與正常對(duì)照組的炎癥因子的表達(dá)也是明顯存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。當(dāng)益生菌與美沙拉嗪聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，可以發(fā)現(xiàn)大鼠血清中三種炎癥的含量的表達(dá)繼續(xù)下降，不僅三項(xiàng)內(nèi)容都與模型組存在明顯差異，同時(shí)與正常對(duì)照組在TNF-α和IFN-γ這兩項(xiàng)已無(wú)明顯差異，這可能是源于益生菌通過(guò)上調(diào)腸道局部的免疫功能，促進(jìn)機(jī)體免疫恢復(fù)，從而有效糾正了抑炎和抗炎動(dòng)態(tài)失衡，降低炎癥反應(yīng)，并最終下調(diào)白細(xì)胞的計(jì)數(shù)，減少了炎性因子的釋放[12]?？傊?，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)中充分體現(xiàn)出了兩種藥物聯(lián)用的優(yōu)勢(shì)。

參考文獻(xiàn)

[1]闕雪梅，黃玉紅，孫明軍.益生菌對(duì)炎癥性腸病的作用及機(jī)制[J].國(guó)際消化病雜志，2013，33（5）：325-328.

[2]楊世權(quán)，彭良太，向軍等.中藥竹醫(yī)灌注Ⅰ號(hào)保留灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎54例療效觀察[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2013，10（6）：62-63.

[3]高山.潰瘍性結(jié)腸炎臨床療效對(duì)比觀察[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2013，11（15）： 29-30.

[4]石玉花.美沙拉嗪及柳氮磺砒啶在治療潰瘍性結(jié)腸炎中的對(duì)比分析[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2013，10（24）： 42-44.

[5]曾慶國(guó).美沙拉嗪聯(lián)合康復(fù)新液治療潰瘍性結(jié)腸炎的療效觀察[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2013，11（4）：52-53.

[6]曹艷菊.益生菌對(duì)實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎大鼠腸黏膜TLR2、TLR4表達(dá)及NF-κB活性的影響[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志， 2012， 21（8）： 760-763.

[7]韓蕘.益生菌配伍黛力新治療腸易激綜合征的安全性及療效分析[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2012，9（26）：16-17.

[8] 程華，肖源，劉治智，等.美沙拉嗪口服聯(lián)合錫類散改良保留灌腸治療老年潰瘍性結(jié)腸炎的療效[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，40（12）：1142-1144.

[9]袁曉虹.美沙拉嗪和柳氮磺胺吡啶治療潰瘍性結(jié)腸炎的療效對(duì)比研究[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2012，9（2）：25-26.

[10] Jacobi C A，Schulz C，Malfertheiner P.Treating critically ill patients with probiotics： Beneficial or dangerous？[J].Gut Pathog，2011，3（1）：2.

[11]趙德會(huì)，張麗，戴聰，等.益生菌VSL#3治療大鼠實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎的效果觀察及對(duì)STAT1/Tbet的影響[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2013，22（7）：672-676.

[12]熊小偉，周已焰，董荔，等.益生菌聯(lián)合早期腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)對(duì)重型顱腦損傷患者感染的影響[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，35（6）：536-539.

（收稿日期：2014-03-31） （本文編輯：陳丹云）endprint

【摘要】 目的：觀察美沙拉嗪聯(lián)合益生菌對(duì)炎癥性腸病大鼠血清中L-6、TNF-α和IFN-γ含量的影響，并初步探討該方法治療炎癥性腸病的作用機(jī)制。方法：將40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為四組，即正常對(duì)照組、模型組、美沙拉嗪組和美沙拉嗪益生菌聯(lián)合組，最后各組大鼠取血，應(yīng)用ELISA法檢測(cè)血清中IL-6、TNF-α和IFN-γ含量。結(jié)果：美沙拉嗪聯(lián)合益生菌組IL-6、TNF-α和IFN-γ含量的表達(dá)均明顯低于模型組（P<0.05）。結(jié)論：美沙拉嗪聯(lián)合益生菌在緩解腸道炎癥中發(fā)揮著重要作用。

【關(guān)鍵詞】 益生菌； 美沙拉嗪； 炎癥性腸病

炎癥性腸病（IBD）一詞特指病因尚不明了的炎癥性腸病，主要包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病。IBD的病因尚未完全明確，目前認(rèn)為其發(fā)病機(jī)制可以概括為免疫反應(yīng)引發(fā)的炎性病理過(guò)程[1]。氨基水楊酸類藥物、免疫抑制劑和糖皮質(zhì)激素等藥物是目前治療該疾病的主要方法，但這類藥物停藥后容易復(fù)發(fā)，并且長(zhǎng)期應(yīng)用會(huì)帶來(lái)較多不良反應(yīng)[2]。近年來(lái)隨著對(duì)IBD的深入研究，生物制劑尤其是益生菌在IBD的治療領(lǐng)域受到醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與主要試劑 雄性SD大鼠40只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、美沙拉嗪組和美沙拉嗪益生菌聯(lián)合組，每組10只。葡聚糖硫酸鈉（DSS），美沙拉嗪片，益生菌：雙歧三聯(lián)活菌（含雙歧桿菌、乳酸桿菌、腸球菌），小鼠ELISA試劑盒。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 造模與灌胃 根據(jù)每日實(shí)際飲用量新鮮配制5%DSS溶液。隨機(jī)選取的30只大鼠給予含5%DSS的飲用水10 d建立炎癥性腸病動(dòng)物模型。第11天開始模型組常規(guī)飼養(yǎng)觀察14 d；美沙拉嗪組給予150 mg/（kg·d）的劑量應(yīng)用美沙拉嗪灌胃治療14 d，聯(lián)合組則除給予美沙拉嗪組同等治療外，同時(shí)還應(yīng)用雙歧三聯(lián)活菌按照500 mg/（kg·d）的劑量灌胃治療14 d，在此治療期間正常對(duì)照組和模型組都給予等量生理鹽水灌胃；正常對(duì)照組不予DSS干預(yù)，僅同步常規(guī)飼養(yǎng)觀察。

1.2.2 觀察指標(biāo) 所有大鼠于灌胃結(jié)束后處死并取血分離血清，應(yīng)用ELISA試劑盒測(cè)定大鼠血清中IL-6、TNF-α和IFN-γ含量，具體步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

模型組的各類炎癥因子含量均明顯高于正常對(duì)照組（P<0.05）；而美沙拉嗪組和聯(lián)合組的IL-6、TNF-α和IFN-γ含量的表達(dá)均明顯低于模型組，（P<0.05）；而聯(lián)合組相比美沙拉嗪組在IL-6的表達(dá)上也是明顯下降（P<0.05），雖然TNF-α和IFN-γ含量也是有所下降，但是差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。具體見表1。

3 討論

近年來(lái)我國(guó)的炎癥性腸病患病率逐年增加，而目前該病的發(fā)病因素及致病機(jī)制尚未明確，是多種因素導(dǎo)致的病變，一般主要考慮與外界環(huán)境、基因遺傳、免疫力以及感染等多方面綜合因素相關(guān)[3]。該病的主要臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、黏性血便等，如并發(fā)潰瘍必須及時(shí)治療，否則極易引發(fā)腸穿孔，威脅患者的生命安全[4]。傳統(tǒng)西醫(yī)臨床治療IBD的手段主要是通過(guò)抑制腸黏膜釋放前列腺素E和白三烯，進(jìn)而抑制巨噬細(xì)胞向炎癥中心移動(dòng)，從而達(dá)到有效抗炎的目的[5]。近年來(lái)有相關(guān)研究報(bào)道，IBD與腸道菌群失調(diào)有密切關(guān)系[6]，人體腸道有大量的微生物，不完全統(tǒng)計(jì)，數(shù)量高達(dá)400種以上，其中就以雙歧桿菌與嗜酸乳桿菌為主，大約占到微生物總量的98%以上，通常人體在正常情況下，腸道內(nèi)的微生物處于相對(duì)平衡狀態(tài)，可一旦失衡，菌群失調(diào)可導(dǎo)致相關(guān)疾病的發(fā)生[7]。IBD的患者腸黏膜表面的有益菌如乳酸桿菌和雙歧桿菌是缺失的，而大腸桿菌、變形桿菌和擬桿菌等革蘭氏陰性菌在腸黏膜表面的濃度反而增加，可以認(rèn)為腸道菌群失調(diào)可能是IBD誘發(fā)及復(fù)發(fā)的關(guān)鍵因素，因此應(yīng)用益生菌治療IBD成為一種新的臨床治療思維方式。

美沙拉嗪是一種5-氨基水楊酸制劑，在腸道釋放后主要通過(guò)抑制白三烯等炎性物質(zhì)的釋放，從而減少炎癥反應(yīng)[8]，同時(shí)該藥物還能清除腸道的自由基，較少引發(fā)不良反應(yīng)，患者能夠持續(xù)治療[9]?？梢娒郎忱耗芎芎玫匾种苹颊吣c黏膜的炎性反應(yīng)，促進(jìn)損傷腸壁愈合。在應(yīng)用美沙拉嗪治療IBD的同時(shí)適當(dāng)補(bǔ)充益生菌能夠平衡IBD患者的腸道菌群，不僅更加有效地抑制了IBD的炎癥反應(yīng)，而且可以明顯改變腸道的微生物環(huán)境[10]，這是基于腸道天然免疫與正常菌群間的異常免疫反應(yīng)，最終都表現(xiàn)在細(xì)胞因子的表達(dá)異常[11]。

從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，單用美沙拉嗪能夠明顯抑制大鼠模型血清中的炎癥因子，這也說(shuō)明這一藥物治療IBD的有效性，但是同時(shí)也可以看出，在于模型組存在明顯區(qū)別的同時(shí)，該組與正常對(duì)照組的炎癥因子的表達(dá)也是明顯存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。當(dāng)益生菌與美沙拉嗪聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，可以發(fā)現(xiàn)大鼠血清中三種炎癥的含量的表達(dá)繼續(xù)下降，不僅三項(xiàng)內(nèi)容都與模型組存在明顯差異，同時(shí)與正常對(duì)照組在TNF-α和IFN-γ這兩項(xiàng)已無(wú)明顯差異，這可能是源于益生菌通過(guò)上調(diào)腸道局部的免疫功能，促進(jìn)機(jī)體免疫恢復(fù)，從而有效糾正了抑炎和抗炎動(dòng)態(tài)失衡，降低炎癥反應(yīng)，并最終下調(diào)白細(xì)胞的計(jì)數(shù)，減少了炎性因子的釋放[12]?？傊瑥膶?shí)驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)中充分體現(xiàn)出了兩種藥物聯(lián)用的優(yōu)勢(shì)。

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（收稿日期：2014-03-31） （本文編輯：陳丹云）endprint