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        紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他汀工藝條件研究

        2014-09-22 04:02:07李晶等
        安徽農(nóng)學(xué)通報(bào) 2014年17期
        關(guān)鍵詞:洛伐他汀

        李晶等

        摘 要:通過對(duì)洛伐他汀生產(chǎn)菌紅曲霉M7固態(tài)發(fā)酵工藝條件的研究,確定了固態(tài)發(fā)酵的最佳工藝條件為:發(fā)酵溫度26~28℃,發(fā)酵時(shí)間18~20d,發(fā)酵基質(zhì)初始含水量50%,發(fā)酵基質(zhì)初始pH值自然。

        關(guān)鍵詞:紅曲霉;洛伐他?。还虘B(tài)發(fā)酵

        中圖分類號(hào) TS201.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731(2014)17-29-02

        Abstract:The fermentation conditions for Lovastatin production by Monascus M7 in solid fermentation were studied.The best solid fermentation conditions were determined:fermentation temperature,26~28℃;fermentation time,18~20d;medium water content,50%;natrual initial pH.

        Key words:Monascus;Solid fermentation;Lovastatin

        洛伐他汀是紅曲霉培養(yǎng)物中具有生理活性功能的產(chǎn)物之一,由于其是膽固醇合成限制酶3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶的抑制劑,可以抑制生物體內(nèi)膽固醇的合成[1-2],所以近年來洛伐他汀類藥物的開發(fā)一直是人們研究功能性紅曲的熱點(diǎn)。紅曲霉生產(chǎn)紅曲一般采用固態(tài)發(fā)酵技術(shù),該方法具有投資少、產(chǎn)量大、生產(chǎn)技術(shù)成熟等優(yōu)點(diǎn),國內(nèi)對(duì)紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他汀的研究多有報(bào)道[3-6]。本實(shí)驗(yàn)采用傳統(tǒng)的紅曲生產(chǎn)方法,利用地域原料優(yōu)質(zhì)資源進(jìn)行紅曲霉固態(tài)發(fā)酵,對(duì)其產(chǎn)洛伐他汀的發(fā)酵工藝條件進(jìn)行了研究和探索。

        1 材料和方法

        1.1 供試材料

        1.1.1 試驗(yàn)菌種 洛伐他汀生產(chǎn)菌紅曲霉M7(由天津科技大學(xué)食品生物技術(shù)研究室提供)。

        1.1.2 培養(yǎng)基 (1)斜面培養(yǎng)基:麥芽汁培養(yǎng)基,121℃滅菌20min。(2)種子液培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖50g,蛋白胨20g,NaNO3 10g,MgSO4·7H2O 5g,KH2PO4 10g,自來水1 000mL,121℃滅菌20min。(3)發(fā)酵培養(yǎng)基:將大米與蒸餾水以

        1(g)∶1(mL)的比例浸泡過夜,瀝干水分,分裝入250mL三角瓶中,每瓶20g原料,20mL蒸餾水,121℃滅菌20min。

        1.2 培養(yǎng)條件及方法 (1)斜面培養(yǎng):挑取一環(huán)菌種接種于斜面培養(yǎng)基中,在32℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6~8d,至菌絲長滿斜面。(2)種子液培養(yǎng):取5mL無菌水加入到新鮮的斜面菌種中,將斜面上的孢子充分刮下,制成菌懸液,接種到裝有50mL種子培養(yǎng)基的三角瓶中,30℃ 180r/min培養(yǎng)36h,得到紅曲霉的種子液。(3)發(fā)酵培養(yǎng):向發(fā)酵培養(yǎng)基中加入已調(diào)好濃度的種子菌懸液5mL,淋勻,置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。18~20d后取出烘干至恒重、粉碎,檢測洛伐他汀含量。

        1.3 樣品處理 發(fā)酵樣品于40℃烘干至恒重,粉碎,過100目篩。準(zhǔn)確稱取0.500 0g紅曲樣品,加入8mL75%乙醇,超聲30min,3 500r/min離心10min。用75%乙醇定容至25mL,經(jīng)0.45μm濾膜過濾后檢測。

        1.4 色譜條件 (1)洛伐他汀標(biāo)樣:酸型和內(nèi)酯型分別制備。(2)色譜柱:Agilent TC-C18(5μm,4.6mm×250mm);流動(dòng)相:乙腈∶水=7∶3;(3)檢測器:紫外檢測器,檢測波長為λ=237nm;(4)柱溫:25℃;流速:1mL/min;進(jìn)樣量:20μL。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同發(fā)酵溫度對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 在實(shí)驗(yàn)中設(shè)計(jì)了5個(gè)發(fā)酵溫度,分別為24℃、26℃、28℃、30℃、32℃,在不同溫度的培養(yǎng)箱中發(fā)酵培養(yǎng)18d,檢測洛伐他汀含量,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。由圖1可以看出,培養(yǎng)溫度對(duì)M7產(chǎn)洛伐他汀十分敏感,在26~28℃時(shí)最為合適,因此確定最佳發(fā)酵溫度為26~28℃。

        2.2 不同發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 由圖2可以看出,洛伐他汀從第二天開始合成,隨著培養(yǎng)時(shí)間增加,產(chǎn)量逐漸增多,直到第18d達(dá)到最大值,隨后產(chǎn)量略有減少,所以確定最佳的發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間為18~20d。

        2.3 不同發(fā)酵基質(zhì)初始含水量對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 水分是保證微生物生長繁殖的重要因素。實(shí)驗(yàn)中對(duì)發(fā)酵基質(zhì)初始含水量進(jìn)行了設(shè)計(jì)研究,選取發(fā)酵基質(zhì)初始含水量分別為30%、40%、50%、60%、70%,考察其對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響,結(jié)果見圖3。由圖3可以看出,當(dāng)基質(zhì)含水量達(dá)到50%時(shí),洛伐他汀的產(chǎn)量達(dá)到最大值;當(dāng)基質(zhì)含水量低于50%時(shí),物料干硬,菌體生長緩慢;當(dāng)含水量超過50%時(shí),洛伐他汀產(chǎn)量下降,過多的水分會(huì)導(dǎo)致基質(zhì)物料黏結(jié)成團(tuán),容易感染雜菌,發(fā)酵進(jìn)行困難,影響菌體的生長。

        2.4 發(fā)酵基質(zhì)初始pH值對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 實(shí)驗(yàn)中設(shè)計(jì)了5個(gè)發(fā)酵起始pH值,分別為4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,在26℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),測定洛伐他汀產(chǎn)量,結(jié)果見表1。從表1可知,起始pH值在4.0~6.0時(shí),洛伐他汀的產(chǎn)量較高,這一pH范圍也是紅曲發(fā)酵的自然pH,所以試驗(yàn)中對(duì)發(fā)酵基質(zhì)的初始pH值沒有作特殊要求,選擇自然pH值。

        3 結(jié)論

        利用紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他汀,在發(fā)酵過程中溫度、培養(yǎng)時(shí)間、基質(zhì)初始含水量和基質(zhì)初始pH的變化對(duì)洛伐他汀的產(chǎn)量有較大的影響。本試驗(yàn)根據(jù)以上因素優(yōu)化了紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他汀的最佳工藝條件為:發(fā)酵溫度26~28℃,發(fā)酵時(shí)間18~20d,發(fā)酵基質(zhì)初始含水量50%,發(fā)酵基質(zhì)初始pH值自然。

        參考文獻(xiàn)

        [1]Seraman S,Rajendran A,Thangavelu V.Statistical optimization of anticholesterolemic drug lovastatin production by the red mold Monascus purpureus[J].Food and bioproducts processing,2010,88(2/3):266-76.

        [2]Chang Y N,Huang J C,Lee C C,et al.Use of response surface methodology to optimize culture medium for production of lovastatin by Monascus rubber[J].Enzyme and microbial technology,2002,30(7):889-894.

        [3]甘鋒,唐建忠,王軒,等.響應(yīng)面法優(yōu)化紅曲霉固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)Monacolin K工藝條件的研究[J].中國食品添加劑,2011(01):131-136.

        [4]殷軍帥,梁秋麗,方佳茂,等.紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)Monacolin K的工藝優(yōu)化[J].食品研究與開發(fā),2013,34(9):79-84.

        [5]董文賓,陶璐,張建華,等.紅曲霉菌固體發(fā)酵產(chǎn) Monacolin K 工藝的優(yōu)化[J].現(xiàn)代食品科技,2007,23(8):32-35.

        [6]楊歡歡,高冰,熊巍,等.紅曲霉固態(tài)發(fā)酵萌芽米條件的研究[J].中國釀造,2011(2):134-136.

        (責(zé)編:張宏民)endprint

        摘 要:通過對(duì)洛伐他汀生產(chǎn)菌紅曲霉M7固態(tài)發(fā)酵工藝條件的研究,確定了固態(tài)發(fā)酵的最佳工藝條件為:發(fā)酵溫度26~28℃,發(fā)酵時(shí)間18~20d,發(fā)酵基質(zhì)初始含水量50%,發(fā)酵基質(zhì)初始pH值自然。

        關(guān)鍵詞:紅曲霉;洛伐他汀;固態(tài)發(fā)酵

        中圖分類號(hào) TS201.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731(2014)17-29-02

        Abstract:The fermentation conditions for Lovastatin production by Monascus M7 in solid fermentation were studied.The best solid fermentation conditions were determined:fermentation temperature,26~28℃;fermentation time,18~20d;medium water content,50%;natrual initial pH.

        Key words:Monascus;Solid fermentation;Lovastatin

        洛伐他汀是紅曲霉培養(yǎng)物中具有生理活性功能的產(chǎn)物之一,由于其是膽固醇合成限制酶3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶的抑制劑,可以抑制生物體內(nèi)膽固醇的合成[1-2],所以近年來洛伐他汀類藥物的開發(fā)一直是人們研究功能性紅曲的熱點(diǎn)。紅曲霉生產(chǎn)紅曲一般采用固態(tài)發(fā)酵技術(shù),該方法具有投資少、產(chǎn)量大、生產(chǎn)技術(shù)成熟等優(yōu)點(diǎn),國內(nèi)對(duì)紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他汀的研究多有報(bào)道[3-6]。本實(shí)驗(yàn)采用傳統(tǒng)的紅曲生產(chǎn)方法,利用地域原料優(yōu)質(zhì)資源進(jìn)行紅曲霉固態(tài)發(fā)酵,對(duì)其產(chǎn)洛伐他汀的發(fā)酵工藝條件進(jìn)行了研究和探索。

        1 材料和方法

        1.1 供試材料

        1.1.1 試驗(yàn)菌種 洛伐他汀生產(chǎn)菌紅曲霉M7(由天津科技大學(xué)食品生物技術(shù)研究室提供)。

        1.1.2 培養(yǎng)基 (1)斜面培養(yǎng)基:麥芽汁培養(yǎng)基,121℃滅菌20min。(2)種子液培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖50g,蛋白胨20g,NaNO3 10g,MgSO4·7H2O 5g,KH2PO4 10g,自來水1 000mL,121℃滅菌20min。(3)發(fā)酵培養(yǎng)基:將大米與蒸餾水以

        1(g)∶1(mL)的比例浸泡過夜,瀝干水分,分裝入250mL三角瓶中,每瓶20g原料,20mL蒸餾水,121℃滅菌20min。

        1.2 培養(yǎng)條件及方法 (1)斜面培養(yǎng):挑取一環(huán)菌種接種于斜面培養(yǎng)基中,在32℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6~8d,至菌絲長滿斜面。(2)種子液培養(yǎng):取5mL無菌水加入到新鮮的斜面菌種中,將斜面上的孢子充分刮下,制成菌懸液,接種到裝有50mL種子培養(yǎng)基的三角瓶中,30℃ 180r/min培養(yǎng)36h,得到紅曲霉的種子液。(3)發(fā)酵培養(yǎng):向發(fā)酵培養(yǎng)基中加入已調(diào)好濃度的種子菌懸液5mL,淋勻,置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。18~20d后取出烘干至恒重、粉碎,檢測洛伐他汀含量。

        1.3 樣品處理 發(fā)酵樣品于40℃烘干至恒重,粉碎,過100目篩。準(zhǔn)確稱取0.500 0g紅曲樣品,加入8mL75%乙醇,超聲30min,3 500r/min離心10min。用75%乙醇定容至25mL,經(jīng)0.45μm濾膜過濾后檢測。

        1.4 色譜條件 (1)洛伐他汀標(biāo)樣:酸型和內(nèi)酯型分別制備。(2)色譜柱:Agilent TC-C18(5μm,4.6mm×250mm);流動(dòng)相:乙腈∶水=7∶3;(3)檢測器:紫外檢測器,檢測波長為λ=237nm;(4)柱溫:25℃;流速:1mL/min;進(jìn)樣量:20μL。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同發(fā)酵溫度對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 在實(shí)驗(yàn)中設(shè)計(jì)了5個(gè)發(fā)酵溫度,分別為24℃、26℃、28℃、30℃、32℃,在不同溫度的培養(yǎng)箱中發(fā)酵培養(yǎng)18d,檢測洛伐他汀含量,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。由圖1可以看出,培養(yǎng)溫度對(duì)M7產(chǎn)洛伐他汀十分敏感,在26~28℃時(shí)最為合適,因此確定最佳發(fā)酵溫度為26~28℃。

        2.2 不同發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 由圖2可以看出,洛伐他汀從第二天開始合成,隨著培養(yǎng)時(shí)間增加,產(chǎn)量逐漸增多,直到第18d達(dá)到最大值,隨后產(chǎn)量略有減少,所以確定最佳的發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間為18~20d。

        2.3 不同發(fā)酵基質(zhì)初始含水量對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 水分是保證微生物生長繁殖的重要因素。實(shí)驗(yàn)中對(duì)發(fā)酵基質(zhì)初始含水量進(jìn)行了設(shè)計(jì)研究,選取發(fā)酵基質(zhì)初始含水量分別為30%、40%、50%、60%、70%,考察其對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響,結(jié)果見圖3。由圖3可以看出,當(dāng)基質(zhì)含水量達(dá)到50%時(shí),洛伐他汀的產(chǎn)量達(dá)到最大值;當(dāng)基質(zhì)含水量低于50%時(shí),物料干硬,菌體生長緩慢;當(dāng)含水量超過50%時(shí),洛伐他汀產(chǎn)量下降,過多的水分會(huì)導(dǎo)致基質(zhì)物料黏結(jié)成團(tuán),容易感染雜菌,發(fā)酵進(jìn)行困難,影響菌體的生長。

        2.4 發(fā)酵基質(zhì)初始pH值對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 實(shí)驗(yàn)中設(shè)計(jì)了5個(gè)發(fā)酵起始pH值,分別為4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,在26℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),測定洛伐他汀產(chǎn)量,結(jié)果見表1。從表1可知,起始pH值在4.0~6.0時(shí),洛伐他汀的產(chǎn)量較高,這一pH范圍也是紅曲發(fā)酵的自然pH,所以試驗(yàn)中對(duì)發(fā)酵基質(zhì)的初始pH值沒有作特殊要求,選擇自然pH值。

        3 結(jié)論

        利用紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他汀,在發(fā)酵過程中溫度、培養(yǎng)時(shí)間、基質(zhì)初始含水量和基質(zhì)初始pH的變化對(duì)洛伐他汀的產(chǎn)量有較大的影響。本試驗(yàn)根據(jù)以上因素優(yōu)化了紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他汀的最佳工藝條件為:發(fā)酵溫度26~28℃,發(fā)酵時(shí)間18~20d,發(fā)酵基質(zhì)初始含水量50%,發(fā)酵基質(zhì)初始pH值自然。

        參考文獻(xiàn)

        [1]Seraman S,Rajendran A,Thangavelu V.Statistical optimization of anticholesterolemic drug lovastatin production by the red mold Monascus purpureus[J].Food and bioproducts processing,2010,88(2/3):266-76.

        [2]Chang Y N,Huang J C,Lee C C,et al.Use of response surface methodology to optimize culture medium for production of lovastatin by Monascus rubber[J].Enzyme and microbial technology,2002,30(7):889-894.

        [3]甘鋒,唐建忠,王軒,等.響應(yīng)面法優(yōu)化紅曲霉固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)Monacolin K工藝條件的研究[J].中國食品添加劑,2011(01):131-136.

        [4]殷軍帥,梁秋麗,方佳茂,等.紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)Monacolin K的工藝優(yōu)化[J].食品研究與開發(fā),2013,34(9):79-84.

        [5]董文賓,陶璐,張建華,等.紅曲霉菌固體發(fā)酵產(chǎn) Monacolin K 工藝的優(yōu)化[J].現(xiàn)代食品科技,2007,23(8):32-35.

        [6]楊歡歡,高冰,熊巍,等.紅曲霉固態(tài)發(fā)酵萌芽米條件的研究[J].中國釀造,2011(2):134-136.

        (責(zé)編:張宏民)endprint

        摘 要:通過對(duì)洛伐他汀生產(chǎn)菌紅曲霉M7固態(tài)發(fā)酵工藝條件的研究,確定了固態(tài)發(fā)酵的最佳工藝條件為:發(fā)酵溫度26~28℃,發(fā)酵時(shí)間18~20d,發(fā)酵基質(zhì)初始含水量50%,發(fā)酵基質(zhì)初始pH值自然。

        關(guān)鍵詞:紅曲霉;洛伐他汀;固態(tài)發(fā)酵

        中圖分類號(hào) TS201.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731(2014)17-29-02

        Abstract:The fermentation conditions for Lovastatin production by Monascus M7 in solid fermentation were studied.The best solid fermentation conditions were determined:fermentation temperature,26~28℃;fermentation time,18~20d;medium water content,50%;natrual initial pH.

        Key words:Monascus;Solid fermentation;Lovastatin

        洛伐他汀是紅曲霉培養(yǎng)物中具有生理活性功能的產(chǎn)物之一,由于其是膽固醇合成限制酶3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶的抑制劑,可以抑制生物體內(nèi)膽固醇的合成[1-2],所以近年來洛伐他汀類藥物的開發(fā)一直是人們研究功能性紅曲的熱點(diǎn)。紅曲霉生產(chǎn)紅曲一般采用固態(tài)發(fā)酵技術(shù),該方法具有投資少、產(chǎn)量大、生產(chǎn)技術(shù)成熟等優(yōu)點(diǎn),國內(nèi)對(duì)紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他汀的研究多有報(bào)道[3-6]。本實(shí)驗(yàn)采用傳統(tǒng)的紅曲生產(chǎn)方法,利用地域原料優(yōu)質(zhì)資源進(jìn)行紅曲霉固態(tài)發(fā)酵,對(duì)其產(chǎn)洛伐他汀的發(fā)酵工藝條件進(jìn)行了研究和探索。

        1 材料和方法

        1.1 供試材料

        1.1.1 試驗(yàn)菌種 洛伐他汀生產(chǎn)菌紅曲霉M7(由天津科技大學(xué)食品生物技術(shù)研究室提供)。

        1.1.2 培養(yǎng)基 (1)斜面培養(yǎng)基:麥芽汁培養(yǎng)基,121℃滅菌20min。(2)種子液培養(yǎng)基(g/L):葡萄糖50g,蛋白胨20g,NaNO3 10g,MgSO4·7H2O 5g,KH2PO4 10g,自來水1 000mL,121℃滅菌20min。(3)發(fā)酵培養(yǎng)基:將大米與蒸餾水以

        1(g)∶1(mL)的比例浸泡過夜,瀝干水分,分裝入250mL三角瓶中,每瓶20g原料,20mL蒸餾水,121℃滅菌20min。

        1.2 培養(yǎng)條件及方法 (1)斜面培養(yǎng):挑取一環(huán)菌種接種于斜面培養(yǎng)基中,在32℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6~8d,至菌絲長滿斜面。(2)種子液培養(yǎng):取5mL無菌水加入到新鮮的斜面菌種中,將斜面上的孢子充分刮下,制成菌懸液,接種到裝有50mL種子培養(yǎng)基的三角瓶中,30℃ 180r/min培養(yǎng)36h,得到紅曲霉的種子液。(3)發(fā)酵培養(yǎng):向發(fā)酵培養(yǎng)基中加入已調(diào)好濃度的種子菌懸液5mL,淋勻,置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。18~20d后取出烘干至恒重、粉碎,檢測洛伐他汀含量。

        1.3 樣品處理 發(fā)酵樣品于40℃烘干至恒重,粉碎,過100目篩。準(zhǔn)確稱取0.500 0g紅曲樣品,加入8mL75%乙醇,超聲30min,3 500r/min離心10min。用75%乙醇定容至25mL,經(jīng)0.45μm濾膜過濾后檢測。

        1.4 色譜條件 (1)洛伐他汀標(biāo)樣:酸型和內(nèi)酯型分別制備。(2)色譜柱:Agilent TC-C18(5μm,4.6mm×250mm);流動(dòng)相:乙腈∶水=7∶3;(3)檢測器:紫外檢測器,檢測波長為λ=237nm;(4)柱溫:25℃;流速:1mL/min;進(jìn)樣量:20μL。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同發(fā)酵溫度對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 在實(shí)驗(yàn)中設(shè)計(jì)了5個(gè)發(fā)酵溫度,分別為24℃、26℃、28℃、30℃、32℃,在不同溫度的培養(yǎng)箱中發(fā)酵培養(yǎng)18d,檢測洛伐他汀含量,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。由圖1可以看出,培養(yǎng)溫度對(duì)M7產(chǎn)洛伐他汀十分敏感,在26~28℃時(shí)最為合適,因此確定最佳發(fā)酵溫度為26~28℃。

        2.2 不同發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 由圖2可以看出,洛伐他汀從第二天開始合成,隨著培養(yǎng)時(shí)間增加,產(chǎn)量逐漸增多,直到第18d達(dá)到最大值,隨后產(chǎn)量略有減少,所以確定最佳的發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間為18~20d。

        2.3 不同發(fā)酵基質(zhì)初始含水量對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 水分是保證微生物生長繁殖的重要因素。實(shí)驗(yàn)中對(duì)發(fā)酵基質(zhì)初始含水量進(jìn)行了設(shè)計(jì)研究,選取發(fā)酵基質(zhì)初始含水量分別為30%、40%、50%、60%、70%,考察其對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響,結(jié)果見圖3。由圖3可以看出,當(dāng)基質(zhì)含水量達(dá)到50%時(shí),洛伐他汀的產(chǎn)量達(dá)到最大值;當(dāng)基質(zhì)含水量低于50%時(shí),物料干硬,菌體生長緩慢;當(dāng)含水量超過50%時(shí),洛伐他汀產(chǎn)量下降,過多的水分會(huì)導(dǎo)致基質(zhì)物料黏結(jié)成團(tuán),容易感染雜菌,發(fā)酵進(jìn)行困難,影響菌體的生長。

        2.4 發(fā)酵基質(zhì)初始pH值對(duì)洛伐他汀產(chǎn)量的影響 實(shí)驗(yàn)中設(shè)計(jì)了5個(gè)發(fā)酵起始pH值,分別為4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,在26℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),測定洛伐他汀產(chǎn)量,結(jié)果見表1。從表1可知,起始pH值在4.0~6.0時(shí),洛伐他汀的產(chǎn)量較高,這一pH范圍也是紅曲發(fā)酵的自然pH,所以試驗(yàn)中對(duì)發(fā)酵基質(zhì)的初始pH值沒有作特殊要求,選擇自然pH值。

        3 結(jié)論

        利用紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他汀,在發(fā)酵過程中溫度、培養(yǎng)時(shí)間、基質(zhì)初始含水量和基質(zhì)初始pH的變化對(duì)洛伐他汀的產(chǎn)量有較大的影響。本試驗(yàn)根據(jù)以上因素優(yōu)化了紅曲霉固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)洛伐他汀的最佳工藝條件為:發(fā)酵溫度26~28℃,發(fā)酵時(shí)間18~20d,發(fā)酵基質(zhì)初始含水量50%,發(fā)酵基質(zhì)初始pH值自然。

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        (責(zé)編:張宏民)endprint

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