覃杰 單鴻

近年來使用干細(xì)胞移植治療心肌梗死已取得可喜的成績，但對(duì)干細(xì)胞移植治療后干細(xì)胞的分布、歸巢及分化等所知甚少[1-2]。若不能進(jìn)一步了解移植后干細(xì)胞的分布、歸巢及分化，將不能揭示干細(xì)胞治療心肌梗死的機(jī)制，阻礙干細(xì)胞移植治療在臨床的應(yīng)用。了解干細(xì)胞分布、歸巢及分化的最好方法是通過分子影像技術(shù)活體示蹤干細(xì)胞[2]。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，分子影像技術(shù)也得到了不斷發(fā)展。活體示蹤干細(xì)胞的分子影像技術(shù)已成為干細(xì)胞移植治療的研究熱點(diǎn)。本文將詳細(xì)介紹示蹤干細(xì)胞治療心肌梗死的多種分子影像技術(shù)的最新進(jìn)展，探討其優(yōu)缺點(diǎn)以及臨床適用性。

一、示蹤干細(xì)胞的分子影像技術(shù)

活體示蹤移植干細(xì)胞分布及分化將有助于干細(xì)胞移植治療心肌梗死的實(shí)驗(yàn)及臨床研究的發(fā)展。示蹤干細(xì)胞的分子影像技術(shù)有MRI、放射性核素成像、報(bào)告基因成像、光學(xué)成像以及高效有機(jī)整合幾種成像技術(shù)為一體的多模態(tài)成像。

1.MRI

MRI是通過使用順磁性對(duì)比劑來評(píng)價(jià)心臟結(jié)構(gòu)和功能的最好技術(shù)[3]。MRI具有良好的空間 [10～100 μm(小動(dòng)物磁共振)，500～1 500 μm(臨床)]和時(shí)間分辨率，可示蹤標(biāo)記超順磁和順磁性對(duì)比劑的干細(xì)胞[3]。磁共振光譜成像(如19F MRI)亦可示蹤移植心肌的干細(xì)胞[4]。

1.1超順磁性氧化鐵納米顆粒

Arbab等[6]報(bào)道SPIO不影響細(xì)胞的活力、增殖、分化和遷移。然而,Schafer等[7]卻發(fā)現(xiàn)SPIO會(huì)減少間充質(zhì)干細(xì)胞移植和增殖能力以及干擾細(xì)胞功能等問題。SPIO可存在標(biāo)記的干細(xì)胞內(nèi),亦可存在吞噬死亡干細(xì)胞的單核細(xì)胞內(nèi)，因此無法根據(jù)MRI低信號(hào)來判斷SPIO位于干細(xì)胞內(nèi)還是單核細(xì)胞內(nèi)[8]。此外,SPIO引起的低信號(hào)亦無法與含鐵血黃素等血液衍生物引起的低信號(hào)相鑒別[9]。Winter等[10]報(bào)道MRI不能區(qū)別心肌內(nèi)存活的干細(xì)胞及被巨噬細(xì)胞吞噬的死亡的干細(xì)胞。同樣, Terrovitis等[11]認(rèn)為MRI高估了SPIO標(biāo)記的移植心臟的干細(xì)胞的存活情況。

1.2順磁離子

釓(Gd)螯合物和錳(Mn)氯化合物等陽性對(duì)比劑標(biāo)記的細(xì)胞在T1上表現(xiàn)為低信號(hào)。相對(duì)于SPIO，MRI對(duì)Gd標(biāo)記的細(xì)胞的敏感度較低，因?yàn)镚d降低細(xì)胞內(nèi)易與離子螯合的水濃度而降低弛豫效能[12]。此外,在溶酶體和內(nèi)涵體內(nèi)低pH的環(huán)境下，釓螯合物可能迅速去螯合而游離出可引起生物安全問題的Gd3+離子[12]。

氯化錳(MnCl2)和SPIO一樣可標(biāo)記和示蹤干細(xì)胞，并有望提高M(jìn)RI活體示蹤干細(xì)胞的敏感性[13-14]。Yamada等[13]指出MRI可示蹤亞毫摩爾濃度MnCl2標(biāo)記的干細(xì)胞及活體評(píng)價(jià)MnCl2標(biāo)記的干細(xì)胞活性。已有新型納米對(duì)比劑如碳釓納米管(Gadonanotubes)用于示蹤干細(xì)胞,其降低T1弛豫效能好于目前已知的對(duì)比劑(為Gd對(duì)比劑40倍)[15]。若這些納米對(duì)比劑被證實(shí)無毒，其定會(huì)在將來的分子影像中發(fā)揮重要作用。

1.319F MRI

雖然19F MRI尚未廣泛應(yīng)用于臨床,但19F的一些特性可使19F MRI成為示蹤干細(xì)胞治療心肌梗死的較好方法之一；由于正常生物體內(nèi)不含有19F，故19F MRI信號(hào)均來自外源對(duì)比劑,如全氟化碳粒子或氟化核苷；由于19F和1H旋比率僅差6%，故19F MRI可使用現(xiàn)有的1H MRI成像硬件[16]。

除了能像1H高選擇性、高分辨率示蹤移植干細(xì)胞外，19F還可定量檢測(cè)細(xì)胞。Partlow等[17]已證實(shí)19F MRI能特異性識(shí)別、定位和定量干細(xì)胞。雖然19F示蹤細(xì)胞已成為研究熱點(diǎn),但其仍處于發(fā)展的初期階段，具有敏感度低、成像時(shí)間長的缺點(diǎn)。Srinivas等[16]試圖通過完善成像硬件、成像序列及標(biāo)記方法等來克服19F MRI的缺點(diǎn)，使其在示蹤干細(xì)胞中發(fā)揮越來越重要的作用。

2.放射性核素成像

放射性核素成像包括正電子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層顯像(PET)及單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層成像術(shù)(SPECT)。放射性核素成像具有靈敏度高(10-10～10-12mol/L vs 10-3～10-5mol/L MRI)及定量測(cè)量干細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)，但也有一些缺點(diǎn)[18]：①空間分辨率(1～2 mm)低于MRI[18]。②僅適用于短期示蹤干細(xì)胞，因?yàn)橛糜跇?biāo)記干細(xì)胞的放射性物質(zhì)的半衰期較短[如：18F:110 min；111In(銦):2.8天；99 mTc(锝):6 h][19]。③核素的輻射會(huì)減弱細(xì)胞活力及增殖。如111In可發(fā)射引起生物副反應(yīng)的Auger 電子。Brenner等[20]報(bào)道在移植干細(xì)胞術(shù)后48 h內(nèi)盡管干細(xì)胞能進(jìn)入梗死區(qū)域，但111In標(biāo)記的干細(xì)胞的活性、增殖及分化明顯受到抑制。Nowak等[21]報(bào)道小鼠造血祖細(xì)胞即使暴露于較低水平的放射性物質(zhì)亦受到損害。

PET比SPECT具有更高的靈敏度(2到3個(gè)數(shù)量級(jí))和更好的空間和時(shí)間分辨率。18F脫氧葡萄糖(18F-FDG)已用于標(biāo)記細(xì)胞以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究的短期示蹤干細(xì)胞。不管經(jīng)過冠狀動(dòng)脈注射何種類型的干細(xì)胞及數(shù)量多少的干細(xì)胞，PET觀察到的移植效果都不理想，在所有經(jīng)過靜脈注射干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中，PET均沒能在心肌內(nèi)檢測(cè)到標(biāo)記的細(xì)胞[22-23]。

PET-CT具有更高的靈敏性,可非侵襲性顯示冠狀動(dòng)脈解剖結(jié)構(gòu)及示蹤干細(xì)胞。這種多模態(tài)成像可解決18F短半衰期問題。Lang等[24]建議使用半衰期更長的同位素,如64Cu(12.7 h)。

3.報(bào)告基因成像

報(bào)告基因是一種編碼可被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因。報(bào)告基因成像將報(bào)告基因與探針(光學(xué)、核素、磁共振)結(jié)合在一起,通過探針顯像報(bào)告基因產(chǎn)物的活性水平從而間接提供報(bào)告基因表達(dá)水平及驅(qū)動(dòng)報(bào)告基因表達(dá)的內(nèi)源性信號(hào)或轉(zhuǎn)錄因子水平的信息[25]。報(bào)告基因成像具有特異性識(shí)別存活細(xì)胞(包含基因產(chǎn)物)和中長期示蹤干細(xì)胞(解決了探針隨細(xì)胞增殖而被稀釋的問題)的優(yōu)點(diǎn)[25-26]。

報(bào)告基因成像已廣泛應(yīng)用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中。單純皰疹病毒1型胸苷激酶 (HSV1-tk)及其突變體(HSV1-sr39tk)是目前使用最廣泛的放射性核素成像示蹤報(bào)告基因[25-26]。單純皰疹病毒的tk與哺乳動(dòng)物的不同,其通過高效磷酸化嘌呤及嘧啶核苷酸捕獲配體。常用的HSV1-tk底物有：尿嘧啶核苷衍生物，如FIAU和FEAU；無環(huán)鳥苷類衍生物，如18F-羥甲基丁基鳥嘌呤(FHBG)和18F-羥丙基甲基鳥嘌呤(FHPG)。HSV1-sr39tk能更有效地利用無環(huán)鳥苷衍生物，標(biāo)記探針的Vmax/Km值更高，成像效果更佳。因此，HSV1-sr39tk-18F-FHBG是目前最有效的PET報(bào)告基因。

Wu等[27]首先使用報(bào)告基因成像示蹤移植心臟的干細(xì)胞。他們用18F-FHBG PET或生物發(fā)光成像(BLI)活體示蹤治療心肌梗死的干細(xì)胞(表達(dá)HSV1-sr39tk或熒光素酶)2周[27]。此外,Cao等[28]報(bào)道使用PET、BLI和熒光成像的三融合報(bào)告基因可觀察小鼠胚胎干細(xì)胞(ESC)的生存和增殖。

雖然HSV-tk基因成像敏感性高，但由于免疫原性可能會(huì)限制其應(yīng)用于人類。 Ponomarev等[29]提出使用人類線粒體胸苷激酶2型(hTK2)可克服免疫原性的問題。此外，人鈉/碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)體(hNIS)與124I 或99mTc合用可分別作為PET或SPECT報(bào)告基因[13,25]。 由于hNIS可在除心臟以外的器官(如甲狀腺、胃、唾腺和脈絡(luò)叢等)表達(dá)，因此hNIS無免疫原性，hNIS成像不需要合成復(fù)雜的探針[13,25]。

β-半乳糖苷酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白受體、鐵蛋白及高賴氨酸蛋白等均可作為MRI報(bào)告基因[30]。Naumova等[31]用MRI示蹤表達(dá)鐵蛋白的成肌細(xì)胞，但信號(hào)衰減高達(dá)25%，第3周后MRI已無法檢測(cè)到信號(hào)。因此，目前活體MRI基因成像尚無法長期示蹤干細(xì)胞。

報(bào)告基因成像示蹤干細(xì)胞治療心肌梗死尚存一些問題[32-33]。首先,報(bào)告基因表達(dá)的蛋白質(zhì)可能會(huì)影響干細(xì)胞的一些細(xì)胞功能和治療效果。其次,報(bào)告基因與宿主細(xì)胞染色質(zhì)融合是否會(huì)導(dǎo)致基因突變而存在致瘤風(fēng)險(xiǎn)，仍存在爭(zhēng)議。

4.光學(xué)成像

4.1BLI

BLI是熒光素酶基因標(biāo)記的細(xì)胞或DNA在ATP及氧氣存在的條件下表達(dá)熒光素酶, 熒光素酶氧化探針(D熒光素)發(fā)光,從而能夠直接檢測(cè)活體內(nèi)的細(xì)胞活動(dòng)和基因行為[27]。BLI已廣泛應(yīng)用于示蹤干細(xì)胞移植治療的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[27-28]。BLI的優(yōu)點(diǎn)是無創(chuàng)、靈敏度高、可定量分析、操作簡單等，缺點(diǎn)是信號(hào)較弱、檢測(cè)時(shí)間較長、實(shí)驗(yàn)設(shè)備成本高及細(xì)胞或基因需要轉(zhuǎn)基因標(biāo)記等[18,27]。

4.2熒光成像

熒光成像是通過激發(fā)光激發(fā)熒光報(bào)告基團(tuán)(GFP、RFP, Cyt及dyes等)到達(dá)高能量狀態(tài)后發(fā)光而成像[34]。近紅外成像的出現(xiàn)促進(jìn)了活體及離體監(jiān)測(cè)干細(xì)胞的發(fā)展[27,34]。近紅外成像通過減少光吸收和組織散射來增強(qiáng)信號(hào)穿透能力，因此其可斷層成像。目前近紅外成像限用于表淺器官成像及示蹤干細(xì)胞的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，將來其有可能應(yīng)用于臨床。Ly等[34]已成功在豬心肌梗死模型中示蹤近紅外染料IR-786標(biāo)記的MSC，靈敏度可達(dá)10 000細(xì)胞。量子點(diǎn)是一種無機(jī)的熒光納米粒子,已成功用于標(biāo)記干細(xì)胞[35]。MSC的體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)已證明量子點(diǎn)具有較低生物相容性，不影響細(xì)胞活性、增殖或分化[35-36]。量子點(diǎn)可標(biāo)記干細(xì)胞分化過程中的多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，因此量子點(diǎn)有助于系統(tǒng)、深入地研究MSC的分化機(jī)制及調(diào)控干細(xì)胞的分化。Muller-Borer等[35]利用磁性/熒光量子點(diǎn)雙功能納米粒子成功標(biāo)記大鼠干細(xì)胞,標(biāo)記效率達(dá)90%以上。量子點(diǎn)對(duì)干細(xì)胞功能的長期影響尚不為人知,應(yīng)關(guān)注其金屬芯[鉛、鎘(Cd)和硒(Se)等]的暴露或溶解可能會(huì)導(dǎo)致的中毒[37]。

5.多模態(tài)成像

多模態(tài)成像是將敏感度高的光學(xué)成像和放射性核素成像以及解剖分辨率高的MRI等分子影像技術(shù)高效地整合成一體的成像技術(shù)。越來越多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已應(yīng)用多模態(tài)成像技術(shù)，并取得較好成績。Qiao等[38]將已傳染HSV1-sr39tk及標(biāo)記SPIO的小鼠ESC注入健康或梗死心肌4周后，通過多模態(tài)成像可評(píng)估移植細(xì)胞的生存和增殖。Qiao等[38]發(fā)現(xiàn)ESC的存活及增殖在PET表現(xiàn)為18F-FHBG攝取增加，在MRI上由于SPIO被稀釋表現(xiàn)為低信號(hào)區(qū)縮小，4周后多數(shù)SPIO存在于局部浸潤的巨噬細(xì)胞內(nèi)而非ESC內(nèi)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示ESC移植能略改善左心功能，但改善心功能的機(jī)制是旁分泌作用而非心肌細(xì)胞的增多,因?yàn)橹挥猩儆?.5%的ESC分化為心肌細(xì)胞[38-39]。Higuchi等[40]用已傳染hNIS報(bào)告基因及標(biāo)記SPIO的人臍帶血內(nèi)皮祖細(xì)胞移植治療心肌梗死3天后，PET未能檢測(cè)到124I，但MRI低信號(hào)可持續(xù)存在，說明移植細(xì)胞在短期內(nèi)大量死亡，巨噬細(xì)胞吞噬死亡的SPIO標(biāo)記的移植細(xì)胞。多模態(tài)成像的研究熱點(diǎn)及重點(diǎn)是如何更有效地有機(jī)整合各種分子影像技術(shù)，使其在未來活體示蹤干細(xì)胞的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床研究中發(fā)揮重要的作用。

二、總 結(jié)

雖然已有不少較好的示蹤干細(xì)胞的分子影像技術(shù)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用,但仍需不斷完善才能應(yīng)用于臨床。除了具有爭(zhēng)議的安全和倫理問題外,尚有以下懸而未決的關(guān)鍵問題：“最好的移植路徑是什么?”“用何種細(xì)胞和用多少細(xì)胞移植?”及“何時(shí)移植?”。

顯然,目前無單一的最佳分子影像技術(shù)示蹤干細(xì)胞，因此最好能將具有靈敏度高(光學(xué)成像)、空間分辨率高(MRI)和功能成像(PET)的各種分子影像技術(shù)高效有機(jī)地整合為一體，構(gòu)建多模態(tài)成像。未來分子影像技術(shù)應(yīng)具有更高敏感度及特異度，更少免疫原性和致瘤性，以及更好藥代動(dòng)力學(xué)特性。

[1] Latham N, Ye B, Jackson R, et al.Human blood and cardiac stem cells synergize to enhance cardiac repair when cotransplanted into ischemicmyocardium. Circulation，2013，128:S105-112.

[2] Traverse JH, Henry TD, Pepine CJ, et al.One-year follow-up of intracoronary stem cell delivery on left ventricular function following ST-elevationmyocardial infarction. JAMA，2014，311:301-302.

[3] Chen IY, Wu JC.Cardiovascular molecular imaging: focus on clinical translation. Circulation，2011，123:425-443.

[4] Magnitsky S, Walton RM, Wolfe JH, et al.Magnetic resonance imaging detects differences in migration between primary and immortalized neural stemcells. Acad Radiol，2008，15:1269-1281.

[5] Yang JX, Tang WL, Wang XX.Superparamagnetic iron oxide nanoparticles may affect endothelial progenitor cell migration ability andadhesion capacity. Cytotherapy，2010，12:251-259.

[6] Arbab AS, Pandit SD, Anderson SA, et al.Magnetic resonance imaging and confocal microscopy studies of magnetically labeled endothelial progenitorcells trafficking to sites of tumor angiogenesis. Stem Cells，2006，24:671-678.

[7] Sch?fer R, Kehlbach R, Müller M, et al.Labeling of human mesenchymal stromal cells with superparamagnetic iron oxide leads to a decrease inmigration capacity and colony formation ability. Cytotherapy，2009，11:68-78.

[8] Hatt CR, Jain AK, Parthasarathy V, et al.MRI-3D ultrasound-X-ray image fusion with electromagnetic tracking for transendocardial therapeutic injections:in-vitro validation and in-vivo feasibility. Comput Med Imaging Graph，2013，37:162-173.

[9] van den Bos EJ, Baks T, Moelker AD, et al.Magnetic resonance imaging of haemorrhage within reperfused myocardial infarcts: possible interference withiron oxide-labelled cell tracking? Eur Heart J，2006，27:1620-1626.

[10] Winter EM, Hogers B, van der Graaf LM, et al.Cell tracking using iron oxide fails to distinguish dead from living transplanted cells in the infarcted heart. Magn Reson Med，2010，63:817-821.

[11] Terrovitis J, Stuber M, Youssef A, et al.Magnetic resonance imaging overestimates ferumoxide-labeled stem cell survival after transplantation in theheart. Circulation，2008，117:1555-1562.

[12] Bulte JW.In vivo MRI cell tracking: clinical studies. AJR Am J Roentgenol，2009，193:314-325.

[13] Yamada M, Gurney PT, Chung J, et al.Manganese-guided cellular MRI of human embryonic stem cell and human bone marrow stromal cell viability. Magn Reson Med，2009，62:1047-1054.

[14] Gilad AA, Walczak P, McMahon MT, et al.MR tracking of transplanted cells with "positive contrast" using manganese oxide nanoparticles. Magn Reson Med，2008，60:1-7.

[15] Tran LA, Krishnamurthy R, Muthupillai R, et al. Gadonanotubes as magnetic nanolabels for stem cell detection. Biomaterials，2010，31:9482-9491.

[16] Srinivas M, Heerschap A, Ahrens ET, et al. (19)F MRI for quantitative in vivo cell tracking. Trends Biotechnol，2010，28:363-370.

[17] Partlow KC, Chen J, Brant JA, et al.19F magnetic resonance imaging for stem/progenitor cell tracking with multiple unique perfluorocarbonnanobeacons. FASEB J，2007，21:1647-1654.

[18] Massoud TF, Gambhir SS.Molecular imaging in living subjects: seeing fundamental biological processes in a new light. Genes Dev，2003，17:545-580.

[19] Vaquero JJ, Gao DW, García-Villaba C, et al. Approach to assessing myocardial perfusion in rats using static [13N]-ammonia images and a small-animal PET. Mol Imaging Biol，2012，14:541-545.

[20] Brenner W, Aicher A, Eckey T, et al.111In-labeled CD34+hematopoietic progenitor cells in a rat myocardial infarction model. J Nucl Med，2004，45:512-518.

[21] Nowak B, Weber C, Schober A, et al.Indium-111oxine labelling affects the cellular integrity of haematopoietic progenitor cells. Eur J Nucl Med Mol Imaging，2007，34:715-721.

[22] Rahmim A, Zaidi H.PET versus SPECT: strengths, limitations and challenges. Nucl Med Commun，2008，29:193-207.

[23] Sheikh AY, Huber BC, Narsinh KH, et al.In vivo functional and transcriptional profiling of bone marrow stem cells after transplantation into ischemicmyocardium. Arterioscler Thromb Vasc Biol，2012，32:92-102.

[24] Lang C, Lehner S, Todica A, et al.Positron emission tomography based in-vivo imaging of early phase stem cell retention after intramyocardialdelivery in the mouse model. Eur J Nucl Med Mol Imaging，2013，40:1730-1738.

[25] Rischpler C, Nekolla SG, Dregely I, et al.Hybrid PET/MR imaging of the heart: potential, initial experiences, and future prospects. J Nucl Med，2013，54:402-415.

[26] Ruggiero A, Brader P, Serganova I, et al.Different strategies for reducing intestinal background radioactivity associated with imaging HSV1-tk expressionusing established radionucleoside probes. Mol Imaging，2010，9:47-58.

[27] Wu JC, Chen IY, Sundaresan G, et al.Molecular imaging of cardiac cell transplantation in living animals using optical bioluminescence and positronemission tomography. Circulation，2003，108:1302-1305.

[28] Cao F, Lin S, Xie X, et al.In vivo visualization of embryonic stem cell survival, proliferation, and migration after cardiac delivery. Circulation，2006，113:1005-1014.

[29] Ponomarev V, Doubrovin M, Shavrin A, et al.A human-derived reporter gene for noninvasive imaging in humans: mitochondrial thymidine kinase type 2. J Nucl Med，2007，48:819-826.

[30] Zurkiya O, Chan AW, Hu X.MagA is sufficient for producing magnetic nanoparticles in mammalian cells, making it an MRI reporter. Magn Reson Med，2008，59:1225-1231.

[31] Naumova AV, Reinecke H, Yarnykh V, et al.Ferritin overexpression for noninvasive magnetic resonance imaging-based tracking of stem cells transplantedinto the heart. Mol Imaging，2010，9:201-210.

[32] Toelen J, Deroose CM, Gijsbers R, et al.Fetal gene transfer with lentiviral vectors: long-term in vivo follow-up evaluation in a rat model. Am J Obstet Gynecol，2007，196:352.

[33] Mikkers H, Berns A.Retroviral insertional mutagenesis: tagging cancer pathways. Adv Cancer Res，2003，88:53-99.

[34] Ly HQ, Hoshino K, Pomerantseva I, et al.In vivo myocardial distribution of multipotent progenitor cells following intracoronary delivery in a swine modelof myocardial infarction. Eur Heart J，2009，30:2861-2868.

[35] Muller-Borer BJ, Collins MC, Gunst PR, et al. Quantum dot labeling of mesenchymal stem cells. J Nanobiotechnology，2007，5:9.

[36] Lin S, Xie X, Patel MR, et al.Quantum dot imaging for embryonic stem cells. BMC Biotechnol，2007，7:67.

[38] Qiao H, Zhang H, Zheng Y, et al.Embryonic stem cell grafting in normal and infarcted myocardium: serial assessment with MR imaging and PETdual detection. Radiology，2009，250:821-829.

[39] Higuchi T, Anton M, Dumler K, et al.Combined reporter gene PET and iron oxide MRI for monitoring survival and localization of transplanted cells in the rat heart. J Nucl Med，2009，50:1088-1094.

[40] Wang J, Najjar A, Zhang S, et al.Molecular imaging of mesenchymal stem cell: mechanistic insight into cardiac repair after experimentalmyocardial infarction. Circ Cardiovasc Imaging，2012，5:94-101.