摘要：利用分光光度計(jì)法測(cè)定穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液活化后的有效二氧化氯含量，比較不同食品級(jí)活化劑的活化效果，并研究不同濃度的二氧化氯活化母液對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的殺菌效果及實(shí)際食品的殺菌效果。結(jié)果顯示：食品添加劑鹽酸是最有效的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液的活化劑；3%以上的二氧化氯母液對(duì)大腸桿菌和沙門氏菌作用30min、6%以上的二氧化氯母液對(duì)金黃色葡萄球菌和白色念珠菌作用30min、9%以上的二氧化氯母液對(duì)黑曲霉作用30min，其殺滅率均可達(dá)99.999%以上；9%的二氧化氯母液可有效殺滅榨菜、卷心菜、花菜和木耳中存在的細(xì)菌，而殺滅泡菜中存在的細(xì)菌則需要12%-15%的濃度， 6%以上濃度的二氧化氯母液可有效殺滅測(cè)試蔬菜和木耳及泡菜食品中存在的霉菌和酵母。

關(guān)鍵詞：穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液 活化劑 作用效果

中圖分類號(hào)：TQ12 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2014）10-0072-02

二氧化氯（ClO2）作為第4代新型消毒劑以其高效、安全的性能廣泛用于醫(yī)療衛(wèi)生、食品保鮮、水質(zhì)及空氣凈化等方面，我國食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)也被允許作為食品防腐劑用于經(jīng)表面處理的新鮮蔬菜、水果及水產(chǎn)品中[1]。因二氧化氯極其不穩(wěn)定，食品添加劑用二氧化氯是將二氧化氯氣體用食品添加劑碳酸鹽吸收制得的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液，使用時(shí)用食品級(jí)酸先進(jìn)行活化[2]，再進(jìn)行稀釋使用，因此，產(chǎn)品的活化率及穩(wěn)定性直接決定著產(chǎn)品的使用效果，本文主要研究食品添加劑穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液的活化工藝及活化后的溶液對(duì)部分微生物及部分食品的作用效果，為產(chǎn)品真正應(yīng)用于食品中提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液，公司自己生產(chǎn)；

食品原料：榨菜、泡菜、卷心菜、花菜、木耳，均為當(dāng)?shù)夭耸袌?chǎng)購買；

菌株：沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉、大腸桿菌；

試劑：無水氯化鈣、六水合硫酸鎂、氯化鈉、硫代硫酸鈉，國藥集團(tuán)購買；TSA瓊脂、PDA瓊脂、平板計(jì)數(shù)瓊脂、孟加拉紅瓊脂，北京陸橋公司購買。

1.2 試驗(yàn)儀器

FA2004N電子天平：上海菁海儀器有限公司；LRH-250生化培養(yǎng)箱：上海一恒科學(xué)儀器有限公司；生物安全柜：南通嘉程儀器有限公司；高壓滅菌器：海三申醫(yī)藥器械有限公司；722可見分光光度計(jì)：上海精密儀器儀表有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 二氧化氯溶液中有效二氧化氯含量的測(cè)定[2]

根據(jù)GB25580-2010中的分光光度法測(cè)定穩(wěn)定態(tài)二氧化氯活化液中有效二氧化氯的含量。

1.3.2 食品添加劑穩(wěn)定態(tài)二氧化氯的活化方法

稱取100g穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液，分別添加4g檸檬酸、4g富馬酸、4g酒石酸以及4g鹽酸，常溫活化兩個(gè)小時(shí)，測(cè)定溶液在430nm處的吸光度，以確定活化后溶液中有效二氧化氯的含量，通過比較不同活化劑活化出的溶液中有效二氧化氯的含量，以選擇最有效的活化劑。

1.3.3 穩(wěn)定態(tài)二氧化氯活化后母液的稀釋

按照1.3.2中的活化方法對(duì)穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液進(jìn)行活化，活化后的溶液稱為母液，試驗(yàn)時(shí)對(duì)母液進(jìn)行系列稀釋，配制成15%、12%、9%、6%、3%和1.5%的稀釋液。

1.3.4 測(cè)試用菌液制備

大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌和黑曲霉菌新鮮培養(yǎng)物，用生理鹽水配制菌懸液，濃度約為1×103cfu/ml～5×103cfu/ml。

1.3.5 穩(wěn)定態(tài)二氧化氯活化后母液對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的殺菌效果

取0.5ml大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌和黑曲霉菌懸液，加入0.5ml有機(jī)干擾物質(zhì)3%BSA溶液混勻，置20℃±1℃水浴中5min后，加入4.0ml不同稀釋濃度的稀釋液，迅速混勻并記時(shí)。試驗(yàn)菌與消毒劑相互作用30min后，分別吸取0.5ml混合液加入4.5ml中和劑混勻，作用30min后，分別取1mL進(jìn)行平板計(jì)數(shù)。

1.3.6 穩(wěn)定態(tài)二氧化氯活化后母液對(duì)食品樣品中微生物殺滅效果測(cè)試

將食品原料按1：1的比例浸入稀釋液中，作用30min后，取1mL進(jìn)行細(xì)菌、霉菌和酵母計(jì)數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 二氧化氯溶液中有效二氧化氯含量的測(cè)定

利用碘量法測(cè)定二氧化氯貯備液中二氧化氯的濃度，以制備二氧化氯標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取0.00mL、10.00mL、20.00mL、40.00mL、60.00mL、80.00mL、100.00mL二氧化氯溶液，置于七個(gè)100mL容量瓶中，用無氯蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。在430nm波長(zhǎng)下，選用1cm比色皿，以無氯蒸餾水調(diào)零，測(cè)量吸光度，如圖1。

碘量法測(cè)定貯備溶液有效二氧化氯含量為246.7mg/L，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得出吸光度為0.1對(duì)應(yīng)的二氧化氯濃度為 44.5mg/L。

2.2 不同活化方法對(duì)穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液的活化效果

食品添加劑穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液使用前需進(jìn)行活化，常用活化劑為酸味劑，食品中常用的酸味劑有有機(jī)酸如檸檬酸、富馬酸、酒石酸等，無機(jī)酸如鹽酸等，有機(jī)酸的酸度低，無機(jī)酸酸度高，比較食品中常用有機(jī)酸味劑和食品級(jí)無機(jī)酸鹽酸對(duì)食品添加劑穩(wěn)定態(tài)二氧化氯的活化作用，如表1。

表中可以看出：有機(jī)酸對(duì)二氧化氯有一定的活化能力，尤其是富馬酸和酒石酸，檸檬酸的作用很弱，無機(jī)酸鹽酸的活化能力明顯高于有機(jī)酸，因此試驗(yàn)選取食品級(jí)的鹽酸作為穩(wěn)定態(tài)二氧化氯的活化劑，考慮到鹽酸濃度高時(shí)的不安全性及活化溶液中二氧化氯濃度高時(shí)容易揮發(fā)造成損耗，因此本實(shí)驗(yàn)活化比例為：穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液：水：鹽酸=2：2：1，鹽酸濃度為5%（V/V）。

2.3 穩(wěn)定態(tài)二氧化氯活化母液對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的殺菌效果測(cè)試

按2.2中的活化方法和1.3.3的稀釋方法對(duì)不同濃度的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯母液的殺菌效果進(jìn)行測(cè)試，如表2。

結(jié)果顯示：3%以上的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯活化母液作用30min對(duì)大腸桿菌和沙門氏菌效殺滅可達(dá)99.999%以上，6%以上的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯活化母液作用30min對(duì)金黃色葡萄球菌和白色念珠菌殺滅率可達(dá)99.999%以上，9%以上的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯活化母液作用30min對(duì)黑曲霉的殺滅率可達(dá)99.999%以上。

2.4 穩(wěn)定態(tài)二氧化氯母液對(duì)食品樣品中微生物殺滅測(cè)試

按1.3.6的方法對(duì)不同濃度的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯活化母液分別對(duì)不同蔬菜中細(xì)菌、酵母菌、霉菌的殺菌效果進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果如表3、表4、表5。

從表3、表4及表5中可以看出：1）9%的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯母液可有效殺滅榨菜、卷心菜、花菜和木耳中存在的細(xì)菌，而殺滅泡菜中存在的細(xì)菌則需要12%-15%的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯母液；2）6%以上濃度的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯母液可有效殺滅測(cè)試蔬菜和木耳及泡菜食品中存在的霉菌和酵母。

3 結(jié)語

（1）食品添加劑鹽酸是最有效的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液的活化劑；（2）3%以上的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯母液作用30min對(duì)大腸桿菌和沙門氏菌效殺滅率可達(dá)99.999%以上，6%以上的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯母液作用30min對(duì)金黃色葡萄球菌和白色念珠菌殺滅率可達(dá)99.999%以上，9%以上的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯母液作用30min對(duì)黑曲霉的殺滅率可達(dá)99.999%以上。（3）9%的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯母液可有效殺滅榨菜、卷心菜、花菜和木耳中存在的細(xì)菌，而殺滅泡菜中存在的細(xì)菌則需要12%-15%的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯母液。6%以上濃度的穩(wěn)定態(tài)二氧化氯母液可有效殺滅測(cè)試蔬菜和木耳及泡菜食品中存在的霉菌和酵母。

參考文獻(xiàn)

[1]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)GB2760-2011.

[2]食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑穩(wěn)定態(tài)二氧化氯溶液GB25580—2010.