張強(qiáng) 劉江 陳暉 畢磊

河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院口腔科，河北唐山063000

不同分型的涎腺多形性腺瘤組織中
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、核轉(zhuǎn)錄因子p50的表達(dá)及意義

張強(qiáng) 劉江 陳暉 畢磊

河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院口腔科，河北唐山063000

目的探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、核轉(zhuǎn)錄因子(NF.κB)p50在不同分型涎腺多形性腺瘤中的表達(dá)及意義。方法本研究收集河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院和開(kāi)灤總醫(yī)院2007年3月～2012年6月50例涎腺多形性腺瘤組織石蠟標(biāo)本，采用免疫組化染色方法SP法檢測(cè)50例涎腺多形性腺瘤(基質(zhì)豐富型25例為A組、細(xì)胞豐富型25例為B組)中VEGF、NF.κB p50的表達(dá)情況，并與瘤旁涎腺組織(對(duì)照組)25例的表達(dá)情況做對(duì)比分析。結(jié)果VEGF在A組的積分光密度(IOD)值為(153.13±60.81)；B組的IOD值為(954.65±305.79)；對(duì)照組的IOD值為(52.46± 9.76)，A、B組均較對(duì)照組增高，B組較A組增高，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＜0.05)。NF.κB p50在A組的IOD值為(43.40±5.56)；B組為(529.79±163.81)；對(duì)照組為(6.83±1.90)，A、B組均較對(duì)照組增高，B組較A組增高，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＜0.05)。結(jié)論細(xì)胞豐富型涎腺多形性腺瘤組織中VEGF、NF.κB p50較基質(zhì)豐富型涎腺多形性腺瘤均有更高的表達(dá)，VEGF、NF.κB p50的檢測(cè)對(duì)鑒別涎腺多形性腺瘤的不同分型及指導(dǎo)臨床診斷和治療均有幫助。

VEGF；NF-κB p50；聯(lián)合檢測(cè)；涎腺多形性腺瘤

人類(lèi)許多疾病的發(fā)生和發(fā)展都可以歸因于某些基因的異常表達(dá)，從而導(dǎo)致疾病的發(fā)生。其中一部分基因是在核轉(zhuǎn)錄因子kappa B(nuclear factor.kappa B，NF.κB)調(diào)控下進(jìn)行［1］。涎腺腫瘤是口腔頜面部常見(jiàn)的腫瘤，而多形性腺瘤(pleomorphic adenoma，PA)則是涎腺腫瘤中最常見(jiàn)的一種，占涎腺腫瘤的60%～70%。腫瘤中不僅含有腫瘤性上皮組織，還含有黏液樣組織或軟骨樣組織，組織學(xué)形態(tài)呈顯著的多形性及混合性。由于其位置的特殊性，患者術(shù)后美容及心理都會(huì)受到一定的影響；并且由于其還具有侵襲性生長(zhǎng)的生物學(xué)特性，使得術(shù)后容易復(fù)發(fā)，且多次復(fù)發(fā)或病史較長(zhǎng)者會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)閻盒远嘈涡韵倭龌蚍Q(chēng)之為癌在多形性腺瘤中［2］。隨著研究的深入，后來(lái)為簡(jiǎn)便起見(jiàn)，學(xué)者們將多形性腺瘤合并為兩型，即基質(zhì)豐富型和細(xì)胞豐富型［3］。本研究通過(guò)檢測(cè)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、核轉(zhuǎn)錄因子(NF.κB)p50在基質(zhì)豐富型和細(xì)胞豐富型多形性腺瘤以及瘤旁正常涎腺組織中的表達(dá)，以探討VEGF、NF.κB p50在涎腺多形性腺瘤不同分型中的表達(dá)及意義，以便對(duì)涎腺多形性腺瘤不同分型的鑒別診斷和治療提供幫助。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

收集河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院和開(kāi)灤總醫(yī)院2007年3月～2012年6月80例涎腺多形性腺瘤組織石蠟標(biāo)本，選取術(shù)前均無(wú)放療或化療史，具有完整病歷資料，無(wú)嚴(yán)重的心腦疾病、糖尿病等及石蠟包埋組織完整的50例患者的臨床資料，其中男23例，女27例；年齡20～79歲，平均(45.38±3.63)歲。據(jù)參考文獻(xiàn)［3］的判定標(biāo)準(zhǔn)，80例涎腺多形性腺瘤患者分為25例基質(zhì)豐富型多形性腺瘤(A組)；25例細(xì)胞豐富型多形性腺瘤(B組)；采集涎腺多形性腺瘤旁涎腺組織(距腫瘤5 cm以外的涎腺組織)25例作為對(duì)照組。A組患者中男12例，女13例；年齡(44.76±2.83)歲。B組患者中男14例，女11例；年齡(46.06±1.83)歲。對(duì)照組患者中男13例，女12例；年齡(45.46±2.03)歲。3組患者的年齡、性別比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)通過(guò)，患者均知情同意并簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

對(duì)所收集的標(biāo)本切片后行HE染色，經(jīng)有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師進(jìn)行在鏡下分型，分為細(xì)胞豐富型和基質(zhì)豐富型兩類(lèi)。VEGF和NF.κB p50的檢測(cè)采用SP免疫組化法，染色程序按SP試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行［4］。用PBS取代一抗作為陰性對(duì)照，用已知陽(yáng)性切片(惡性多形腺瘤)作陽(yáng)性對(duì)照［5］。行鏡下觀察，計(jì)算腫瘤組織積分光密度(IOD)值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0軟件包對(duì)所得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

三組患者中，與對(duì)照組比較，A、B組患者VEGF、NF.κB p50 IOD值均增高(P＜0.01)；與A組比較，B組患者VEGF、NF.κB p50 IOD值均增高(P＜0.01)。見(jiàn)表1。

表1 三組患者各指標(biāo)IOD值的比較

表1 三組患者各指標(biāo)IOD值的比較

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.01；與B組比較，bP＜0.01；VEGF：血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；NF.κB：核轉(zhuǎn)錄因子；IOD：積分光密度

組別例數(shù)VEGFNF.κB p50 A組B組對(duì)照組25 25 25 153.13±60.81ab954.65±305.79a52.46±9.76 43.40±5.56ab529.79±163.81a6.83±1.90

3 討論

VEGF是Ferrara等［6］1989年在牛垂體濾泡的星狀細(xì)胞體外培養(yǎng)液中首先純化出血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子，是一類(lèi)具有高度特異性的血管內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂素，具有特異性促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用。近來(lái)，以探討涎腺多形性腺瘤組織中VEGF的表達(dá)及其在腮腺多形性腺瘤細(xì)胞增殖活性中的價(jià)值逐漸成為熱點(diǎn)［7］，并有研究發(fā)現(xiàn)NF.κB p50除了在免疫炎性反應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮重要作用外，還參與多種細(xì)胞增殖和凋亡相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和調(diào)控，目前研究顯示NF.κB p50在卵巢癌、乳腺癌、口咽部鱗癌等惡性腫瘤中表達(dá)顯著增加［8］。但國(guó)內(nèi)外目前對(duì)VEGF、NF.κB p50聯(lián)合檢測(cè)在涎腺多形性腺瘤良惡性判定及預(yù)后評(píng)估的應(yīng)用價(jià)值和意義尚未見(jiàn)報(bào)道［9.10］。

VEGF是一種作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的多功能細(xì)胞因子，僅表達(dá)與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面，能引起血管通透性增加，引起細(xì)胞外基質(zhì)成分改變，誘導(dǎo)血管形成。而NF.κB是一種重要的細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子，主要由p65和p50組成，激活后參與多種細(xì)胞增殖，凋亡相關(guān)基因和癌基因等的轉(zhuǎn)錄調(diào)控，在涎腺多形性腺瘤發(fā)生、發(fā)展以至惡變中起著重要的作用。

本研究結(jié)果顯示，VEGF在A組的IOD值為(153.13±60.81)；B組的IOD值為(954.65±305.79)；瘤旁正常涎腺組織對(duì)照組的IOD值為(52.46±9.76)，A、B兩組明顯高于對(duì)照組(均P＜0.01)，B組明顯高于A組(P＜0.01)，表示B組細(xì)胞豐富型PA中存在著豐富的新生血管形成，為腫瘤細(xì)胞的增殖供給了營(yíng)養(yǎng)基礎(chǔ)，和國(guó)內(nèi)外研究結(jié)論基本一致［11］。另外，NF.κB p50在A組的IOD值為(43.40±5.56)；B組的IOD值為(529.79±163.81)；對(duì)照組的IOD值為(6.83±1.90)，A、B兩組明顯高于對(duì)照組(均P＜0.05)，B組明顯高于A組(P＜0.05)，表示B組細(xì)胞豐富型PA中存在顯著的NF.κB p50異?；罨?，和國(guó)外研究結(jié)論基本一致［12］。

綜上所述，細(xì)胞豐富型涎腺多形性腺瘤與基質(zhì)豐富型涎腺多形性腺瘤組織中VEGF、NF.κB p50均有較高表達(dá)，細(xì)胞豐富型較基質(zhì)豐富型均有更高的表達(dá)，腺瘤組織中VEGF、NF.κB p50的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)涎腺多形性腺瘤的不同分型的鑒別診斷和治療均有幫助。

［1］張強(qiáng)，李金源，王曉波，等.血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、核轉(zhuǎn)錄因子p50在多形性腺瘤中的表達(dá)及意義［J］.中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，8(16)：19.20.

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VEGF and NF-kappa B/p50 joint detection in benign and malignant salivary gland pleomorphic adenoma determination and prognosis evaluation of application value and significance

ZHANG QiangLIU JiangCHEN HuiBI LeiDepartment of Stomatology,the Affiliated Hospital of Hebei United University,Hebei Province,Tangshan063000, China

Objective To study the expression and it significance of VEGF and NF.κB/p50 in cell.rich and matrix. rich polymorphous adenomas of salivary gland.Methods 50 cases of salivary gland pleomorphic adenoma tissue paraffin specimens were collected in the Affiliated Hospital of Hebei United University and Kailuan General Hospital from March 2007 to June 2012,and were detected by the method of immunohistochemical staining SP（25 cases of matrix rich type were in group A,25 cases of cell type were in group B）in the expression of VEGF and the nf.kappa B/p50 situation,and peritumoral were compared and analyzed with 25 cases of normal salivary gland tissue expression in the control group.Results The IOD value of VEGF in group A was（153.13±60.81）;the IOD value of group B was（954.65±305.79）;IOD value of control group was（52.46±9.76）,the differences between the three groups had statistical significance（P＜0.05）.The NF.kappa B p50 IOD values in group A was（43.40±5.56）;the IOD value of group B was（529.79±163.81）;IOD value of control group was（6.83±1.90）,the differences between the three groups had statistical significance（all P＜0.05）.Conclusion VEGF,the NF.kappa B p50 joint detection in benign and malignant salivary gland pleomorphic adenoma judgement has practical application value,better for the treatment of pleomorphic adenoma and prognosis judgement,can identify different classification of the salivary gland pleomorphic adenoma and to guide clinical diagnosis and treatment with helpful.

VEGF;NF.κB p50;The joint detection;Salivary gland pleomorphic adenoma

R781.1

A

1673-7210（2014）02（a）-0041-03

2013.10.30本文編輯：衛(wèi)軻)

河北省科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào)11276135)；河北省唐山市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃衛(wèi)生臨床研究項(xiàng)目任務(wù)分解計(jì)劃(編號(hào)11150205A.9)。

張強(qiáng)(1975.)，男，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事口腔疾病防治研究。