陳峰，龐繼恩，劉志濤，楊志宏，孫強，盛斌，甄玉改，崔靜

線粒體偶聯(lián)因子-6（mitochondrial coupling factor-6，CF6）是由76個氨基酸殘基組成的ATP合酶的亞單位，主要參與能量轉(zhuǎn)運過程[1]，在急性心肌梗死、肺動脈高壓、睡眠呼吸暫停綜合征患者體內(nèi)均有明顯增高[2]，在心肌缺血、血管內(nèi)皮損傷等細(xì)胞壞死和凋亡的情況下，CF6可大量釋放進(jìn)入血液循環(huán)[3]。由于心力衰竭（CHF）患者也存在嚴(yán)重的心肌和內(nèi)皮細(xì)胞受損以及神經(jīng)體液因子的激活，因此本研究將重點分析CF6在心力衰竭患者體內(nèi)的變化。

1 資料與方法

1.1 研究對象與分組 納入2009年3月～2012年

10月青島解放軍401醫(yī)院冠心?。–HD）合并CHF者53例納入CHF組，所有患者左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）＜50%，其中男38例，女15例，年齡56歲～84歲，平均（63±12）歲，進(jìn)一步按照美國心臟病協(xié)會（NYHA）標(biāo)準(zhǔn)分級，分為心功能Ⅱ級（n=28），Ⅲ級（n=15），Ⅳ級（n=10）三個亞組；另納入30例心功能正?；颊咦鳛閷φ战M，其中男22例，女8例，年齡56歲～77歲，平均（61±10）歲，LVEF＞50%。兩組年齡、性別、危險因素、主要病史、血管病變情況等差異無統(tǒng)計學(xué)意義。排除標(biāo)準(zhǔn)：風(fēng)濕性心臟瓣膜病、心肌炎、擴張性心肌病、心包疾病、感染性疾病、活動性風(fēng)濕免疫疾病、嚴(yán)重肝腎功能不全、其他臟器炎癥性疾病、惡性腫瘤等。

1.2 檢測方法 所有患者均于入院后次日空腹采集靜脈血3 ml，血樣本加10%EDTA（1mg/ml），抑肽酶 500 ku/ml，3000 r/min 、4℃離心后，血漿標(biāo)本置入-70℃冰箱中保存。

采用放免分析法測定CF6：試劑盒由美國Phoenix Pharmaceuticals Inc提供。CF6多克隆抗體與人CF6交叉反應(yīng)性為100%，與人內(nèi)皮素-1、血管緊張素Ⅱ、C-型腦鈉肽-22等均無交叉反應(yīng)。CF6放免的半數(shù)抑制濃度（IC50）為8pg/tube，敏感性為（10～100）pg/tube，待測樣本經(jīng)酸化后，按照試劑說明書操作要求及儀器操作規(guī)程進(jìn)行樣本檢測。

電化學(xué)發(fā)光免疫分析法測定BNP：采用上海羅氏公司的E2010電化學(xué)發(fā)光儀，試劑購自羅氏公司，嚴(yán)格按照試劑操作要求進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用q檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

與對照組相比，CHF組血清BNP和CF-6濃度明顯升高，且隨心衰程度加重而增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05，表1）。

表1 CHF組與對照組血清BNP、CF6濃度濃度比較

3 討論

CHF是一種以神經(jīng)內(nèi)分泌激活為主要特征的復(fù)雜臨床綜合征，而造成CHF最常見的原因是CHD，而且近年來在我國的發(fā)病率和病死率呈逐年上升態(tài)勢。

BNP是一種主要由心室合成和分泌的心臟神經(jīng)內(nèi)分泌激素，心力衰竭時隨著室壁張力增加，心肌細(xì)胞受到牽拉刺激，BNP合成釋放增加，因此可用來觀察心力衰竭的變化[4]；同時，血漿BNP還與肺毛細(xì)血管楔嵌壓呈正相關(guān)，與LVEF呈負(fù)相關(guān)[5]，是左室收縮功能不全的最強標(biāo)志物，可作為心力衰竭的早期指標(biāo)，且與NYHA心功能分級相關(guān)，即心力衰竭程度越重，血漿BNP的水平越高。

CF6是線粒體ATP合酶（又稱H+-ATP合酶）的一個亞單位[6]，普遍存在于體內(nèi)各種細(xì)胞線粒體中，但含量最高的是心肌，其次為肝臟、腎臟、腦、肺等[7]。日本學(xué)者Osanai等[7]2001年發(fā)現(xiàn)CF6亦存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞膜，并且能釋放進(jìn)入血液循環(huán)。循環(huán)中的CF6具有強烈的血管收縮效應(yīng)，能夠抑制磷脂酶A2的活性，減少質(zhì)膜花生四烯酸釋放，從而影響前列腺素（prostacyclin，PGI2）合成，是迄今所知的體內(nèi)唯一的內(nèi)源性PGI2合成抑制因子[8,9]?，F(xiàn)已明確CF6受腫瘤壞死因子和剪切力調(diào)控，CF6不僅能夠?qū)е录?xì)胞內(nèi)酸中毒，還可通過增加二甲基精氨酸和減少血小板及內(nèi)皮粘附分子抑制一氧化氮合成酶的活性[10]。

近年來發(fā)現(xiàn)，CF6也同時存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿中（非活性形式），而血管內(nèi)皮細(xì)胞在剪切力的作用下也可分泌和釋放CF6，且與剪切力的強度和作用時間正相關(guān)[11]，推測可能是循環(huán)中CF6的主要來源之一。另外，組織損傷（缺血、缺氧及內(nèi)皮細(xì)胞損傷）以及細(xì)胞凋亡[12]也可引起CF6釋放入血。

本研究發(fā)現(xiàn)CF6濃度隨CHF程度的加重而明顯升高，其機制可能是缺氧導(dǎo)致心肌細(xì)胞內(nèi)酸中毒和血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，細(xì)胞膜通透性增加，引起全身多系統(tǒng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，導(dǎo)致CF6釋放入血。因此，我們認(rèn)為CHF患者體內(nèi)產(chǎn)生的CF6，很有可能作為一種內(nèi)源性損傷因子參與心衰發(fā)生發(fā)展過程，提示CF6與BNP一樣，可作為心衰嚴(yán)重程度的評價指標(biāo)用于CHF的診斷、治療及預(yù)后分析。

綜上所述，本研究證實了CHF時血漿CF6、BNP濃度升高，提示兩者在冠心病心力衰竭的病理生理改變中具有一定意義，其峰值高低主要決定于心衰的嚴(yán)重程度[13]，心力衰竭程度愈重，神經(jīng)體液激活愈久、愈明顯，但CF6的產(chǎn)生是以血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放為主，還是以心肌細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p傷后漏出為主，目前尚無文獻(xiàn)可借鑒，值得進(jìn)一步深入研究。

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