亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        采用組織芯片技術(shù)進(jìn)行蘇木精-伊紅(HE)染色技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化的研究

        2012-11-14 05:45:58勇,袁
        關(guān)鍵詞:伊紅蠟塊病理科

        劉 勇,袁 晟

        (江西省人民醫(yī)院病理科,江西 南昌 330006)

        標(biāo)準(zhǔn)化是組織病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)和發(fā)展的方向之一[1],也是病理科質(zhì)量控制的重要組成部分,而標(biāo)準(zhǔn)化的主要內(nèi)容是技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化,蘇木精-伊紅(HE)染色方法是病理科最常用的染色方法,被稱為常規(guī)染色方法,所以,HE染色的標(biāo)準(zhǔn)化更是病理科質(zhì)控的重中之重。組織芯片(組織微陣列)一般是指將數(shù)十至上千個(gè)小組織整齊地排放在一張載玻片上而制成的組織切片[2]。我們采用組織芯片技術(shù)制作了人體不同正常組織和不同腫瘤組織的組織芯片,分組進(jìn)行了HE染色實(shí)驗(yàn),旨在不同類型的組織中找到一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的染色程序。

        1 材料與方法

        1.1 材料 從我院病理科2010年送檢新鮮標(biāo)本中收集不同病理組織60例制作組織芯片,其中淋巴組織、胃腸腺上皮、皮膚鱗狀上皮、皮下結(jié)締組織、骨骼肌組織、子宮平滑肌組織、肝臟組織、乳腺組織、肺組織、胰腺組織各3例;淋巴腫瘤組織、胃腸腫瘤組織、皮膚鱗狀上皮腫瘤組織、肺腫瘤組織、乳腺腫瘤組織、肝臟腫瘤組織、子宮平滑肌腫瘤組織、骨骼肌腫瘤組織,胰腺腫瘤組織、甲狀腺腫瘤組織各3例。所有標(biāo)本均按中華醫(yī)學(xué)會(huì)編著的《臨床技術(shù)操作規(guī)范—病理學(xué)分冊(cè)》的要求進(jìn)行組織前處理。Mayer蘇木素染色液、伊紅Y染色液均購(gòu)自貝索公司。

        1.2 組織芯片制作 組織芯片制作:將熔化石蠟(加入等量的蜂蠟)制作4.0cm×2.0cm×1.0cm大小的空白蠟塊,設(shè)計(jì)10×6點(diǎn)組織列陣,用打孔機(jī)制成模塊。將原蠟塊放在45℃溫箱中烘5-10min,然后,用打孔針從組織塊選定部位逐個(gè)取出組織芯,組織芯直徑2mm,將組織芯放入預(yù)先設(shè)計(jì)的陣列模塊中,排布成組織芯片。最后,將制成的組織芯片面朝下放在銅板上,于55℃放置30min,輕壓模塊使組織芯在模塊中排平。對(duì)組織芯片蠟塊切片,切下的組織平整地粘貼于載玻片上。

        1.3 方法 將HE染色中的幾個(gè)關(guān)鍵步驟進(jìn)行分組染色:①其中烤片溫度分成5組:A:65℃ 30h、B:70℃ 30min、C:75℃ 30min、D:80℃ 20min,E:85℃15min。②Mayer蘇木素染色分成3組:Ⅰ:2min、Ⅱ:4min、Ⅲ:6min。③伊紅Y染色分成3組:a組:2min、b組:3min、c組 4min。 進(jìn)行交叉分組染色。

        2 結(jié)果

        2.1 60例人體不同組織和腫瘤組織的組織芯片,每張組織芯片上60個(gè)樣品,排列整齊,外形為圓形或類圓形,較少的皺折和掉片現(xiàn)象(圖1)。

        2.2 五個(gè)烤片組中,C、D、E三組切片的細(xì)胞、組織不夠清晰,染色色彩不鮮艷,A、B兩組細(xì)胞組織清晰,染色色彩鮮艷,但A組有少許組織掉片。

        2.3 Mayer蘇木素染色的三個(gè)染色組:I組切片,染色稍淡,對(duì)于一些皮下結(jié)締組織、平滑肌組織的細(xì)胞核顯示不夠清楚,II組切片顯示各類組織中的細(xì)胞核清晰,核膜、染色質(zhì)清晰可見(jiàn),胞漿紅色鮮艷,未見(jiàn)蘇木素染色;III組切片染色過(guò)深,某些淋巴組織、大部分腫瘤組織的細(xì)胞核核膜、染色質(zhì)顯示不清晰。

        圖1 組織芯片排列整齊,外形為圓形或類圓形(HE染色×100)

        2.4 伊紅Y染色組:a組切片:伊紅染色稍淡,顏色不夠鮮艷。一些纖維結(jié)締組織染色過(guò)淺;b組切片:伊紅染色深淺適中,顏色清晰艷麗,顏色層次分明,與藍(lán)色的細(xì)胞核對(duì)比突出。c組切片:染色稍深,顏色層次不分明,部分細(xì)胞核有伊紅著色至細(xì)胞核呈紫藍(lán)色,與細(xì)胞核對(duì)比不突出。

        2.5 本實(shí)驗(yàn)顯示,用70℃烤片30min,蘇木素染色4min,伊紅染色3min的實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行HE染色效果最佳,組織結(jié)構(gòu)清楚,細(xì)胞核蘇木素染色呈藍(lán)色,核膜、染色質(zhì)清晰可辨,胞漿伊紅染色層次分明,顏色鮮艷(圖 2)。

        圖2 細(xì)胞核清晰,核膜、染色質(zhì)清晰可見(jiàn),胞漿層次分明,顏色鮮艷(HE染色×400)

        3 討論

        組織芯片技術(shù)原理:組織芯片是通過(guò)組織芯片制作機(jī)細(xì)針打孔的方法,從眾多的組織蠟塊(供體蠟塊)中采集到數(shù)十至上千的圓柱形小組織(組織芯),并將其整齊排放到另一個(gè)空白蠟塊(受體蠟塊)中而制成組織芯片蠟塊。然后,對(duì)組織芯片蠟塊進(jìn)行切片,再將切片轉(zhuǎn)移到載玻片上制成組織芯片。組織芯片的特點(diǎn)是:體積小,信息含量大,一次性實(shí)驗(yàn)即可獲大量結(jié)果。組織芯片可做HE染色、特殊染色、免疫組織化學(xué)染色、DNA和RNA原位分子雜交、熒光原位雜交。組織芯片蠟塊可做100~200張連續(xù)切片。這樣用同一套組織芯片即可迅速地對(duì)上百種生物分子標(biāo)記 (如抗原、DNA和RNA)進(jìn)行分析、檢測(cè),因而倍受組織病理學(xué)家的重視[3]。1998年Kononen等[4]首次采用組織芯片技術(shù)將645例乳腺癌組織固定于載體上,同時(shí)進(jìn)行多種基因的檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)erbB-2和myc表達(dá)在雌激素受體(ER)陰性者明顯高于ER陽(yáng)性者,p53陽(yáng)性者明顯高于p53陰性者,而CCND1基因則與p53、ER、erbB-2表達(dá)無(wú)明顯關(guān)系。從此,眾多學(xué)者開(kāi)始對(duì)組織芯片技術(shù)進(jìn)行研究,組織芯片技術(shù)不斷發(fā)展和完善,其應(yīng)用也愈來(lái)愈廣泛[5,6]。

        我們制作了60例人體不同組織和腫瘤組織的組織芯片,僅用幾張芯片即完成了全部實(shí)驗(yàn),極大節(jié)約了研究經(jīng)費(fèi)和降低了勞動(dòng)量,因此,應(yīng)用組織芯片大規(guī)模高效檢測(cè)臨床組織樣本是可行的,組織芯片技術(shù)與傳統(tǒng)的病理學(xué)技術(shù)方法相比,具有快速、方便、經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確的特點(diǎn),其應(yīng)用前景廣闊。

        HE染色方法的建立已有一百多年歷史,其技術(shù)雖已很成熟,但由于不同組織內(nèi)所含的成分不同,導(dǎo)致組織與玻片的粘附力不同;蘇木素和伊紅對(duì)不同組織的染色力也有一定的不同,所以不同的組織所需要的烤片時(shí)間、染色時(shí)間理論上也是不同的,并且,因?yàn)镠E染色是一種多步驟、多因素決定的實(shí)驗(yàn)方法,無(wú)論是手工還是機(jī)器操作,都存在著許多影響因素,甚至?xí)霈F(xiàn)不理想的染色結(jié)果,從而導(dǎo)致誤判和誤診[7]。在日常工作中,我們不可能對(duì)每一組織單獨(dú)染色,只能找出一個(gè)相對(duì)適合的染色程序,本實(shí)驗(yàn)顯示,用70℃烤片30min,蘇木素染色4min,伊紅染色3min比較合適于大部分組織的染色,可作為病理實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行批量染色。此外,現(xiàn)在國(guó)內(nèi)病理科用得比較多的Harrys蘇木素是退行性染色,需要用0.5%鹽酸酒精分化,而分化是比較難控制的一個(gè)步驟,不利于進(jìn)行質(zhì)量控制,我們推薦使用Mayer蘇木素進(jìn)行核的染色,因?yàn)镸ayer蘇木素是進(jìn)行性染色,不需要分化,有利于設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)化染色程序而進(jìn)行質(zhì)量控制。

        [1]馬恒輝,周曉軍,陳國(guó)璋.淺淡組織病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)化[J].診斷病理學(xué)雜志,2002,6:374.

        [2]劉 勇,戴艷枝,袁 晟.采用組織芯片技術(shù)檢測(cè)乳腺癌中泛素、S期激酶相關(guān)蛋白2、細(xì)胞周期調(diào)控因子p27的表達(dá)[J].中華外科雜志,2004,5:309-310.

        猜你喜歡
        伊紅蠟塊病理科
        GeoGebra軟件在高中物理教學(xué)中的應(yīng)用
        ——以“蠟塊的運(yùn)動(dòng)”演示實(shí)驗(yàn)為例
        帶你了解病理科
        洪水浸泡后病理切片和蠟塊的搶救措施
        臨床病理科住院醫(yī)師規(guī)范化培訓(xùn)的實(shí)踐與探索
        醇溶性和水溶性伊紅在活檢小組織標(biāo)本預(yù)染上的應(yīng)用比較
        關(guān)于兩種伊紅染液在HE 染色中的選擇探討
        介紹一種簡(jiǎn)便的組織蠟塊修邊法
        不同酸類酸化的伊紅溶液在病理活檢小標(biāo)本預(yù)染色中的應(yīng)用研究
        探討蠟塊脫鈣法在常規(guī)病理技術(shù)制片中的應(yīng)用
        智慧健康(2019年28期)2019-11-07 07:24:44
        QQ遠(yuǎn)程協(xié)助功能在醫(yī)院病理科的應(yīng)用
        久久aⅴ人妻少妇嫩草影院| 91久久精品一区二区| 国产精品久久久天天影视| 日产无人区一线二线三线乱码蘑菇 | 中国女人a毛片免费全部播放| 按摩少妇高潮在线一区| 日韩久久无码免费毛片软件| 亚洲∧v久久久无码精品| 日本不卡一区二区高清中文| 国产二区中文字幕在线观看 | 97精品一区二区视频在线观看 | 国产精品亚洲A∨无码遮挡| 国产麻豆一区二区三区在| 午夜爽爽爽男女污污污网站| 欧美亚洲国产精品久久高清| 国产精品国产三级国产av主| 国产传媒精品成人自拍| 人妻aⅴ中文字幕| 精品四虎免费观看国产高清| av免费在线观看在线观看| 欧美高清视频手机在在线| 成人白浆超碰人人人人| 97超级碰碰碰久久久观看| 亚洲乱码中文字幕一线区| 亚洲人成77777在线播放网站| 国产精品刺激好大好爽视频| 99国产精品欲av麻豆在线观看| 亚洲av熟女少妇久久| 日本丰满熟妇bbxbbxhd| 国产成人久久精品亚洲小说| av在线播放中文专区| 精品伊人久久大香线蕉综合| 69精品免费视频| 日本在线一区二区在线| 久久精品国产99国产精品亚洲| 久草热8精品视频在线观看| 搡老女人老妇女老熟妇69| 婷婷色婷婷开心五月四| 午夜dj在线观看免费视频| 国产男女乱婬真视频免费| 中文字幕女优av在线|