北京市朝陽(yáng)區(qū)藥品檢驗(yàn)所（100028）肖宏華 甄誠(chéng) 許佳

血竭為我國(guó)傳統(tǒng)傷科用藥，現(xiàn)版《中國(guó)藥典》規(guī)定為棕櫚科植物麒麟竭果實(shí)滲出的樹脂制成的加工品[1]，龍血竭是我國(guó)研制的血竭替代品，于1999年獲批局頒標(biāo)準(zhǔn)WS3-082(Z-016)-99(Z)，原植物為百合科劍葉龍血樹。兩者功效相似，但價(jià)格相差較大，從性狀來(lái)看二者極其相似，有些藥品生產(chǎn)企業(yè)在購(gòu)進(jìn)時(shí)如果把關(guān)不嚴(yán)，可能以龍血竭代替血竭投料。我們?cè)谌粘z測(cè)中發(fā)現(xiàn)，處方標(biāo)明為血竭的通絡(luò)活血膠囊[國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)（試行）WS-5574(B-0574)-2002]就存在這種現(xiàn)象。照該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，采用薄層色譜法進(jìn)行鑒別，無(wú)法準(zhǔn)確地對(duì)血竭與龍血竭區(qū)別和定性。本文參考[2～4]相關(guān)文獻(xiàn)，以特征成分龍血素A、龍血素B和血竭對(duì)照藥材為參照物建立了HPLC鑒別方法，可以準(zhǔn)確識(shí)別通絡(luò)活血膠囊中是否含有以上兩種藥味。該法靈敏準(zhǔn)確，重現(xiàn)性良好，可有效地對(duì)通絡(luò)活血膠囊和同類含血竭或龍血竭的制劑進(jìn)行鑒別。

1 儀器與試藥

Waters 2695高效液相色譜儀（2698 PDA 檢測(cè)器，Epower2工作站），Sartorius BT25S電子天平，Mettler-TOLEDOXS 204 電子天平， 龍 血 素A 對(duì)照品（ 11660 -200402）、龍血素B對(duì)照品（111558-200405）和血竭對(duì)照藥材（120906-200609）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院，乙腈（色譜純，J.T.Baker公司），冰醋酸、甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷（分析純，北京化工廠），實(shí)驗(yàn)用純化水（自制），通絡(luò)活血膠囊（市售）。

附圖1 HPLC色譜圖

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 Waters SunFireTMC18色譜柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相為1%冰醋酸溶液-乙腈（58:42）；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；3D掃描（210nm～400nm）；柱溫30℃；流速1.0ml/min。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取龍血素A對(duì)照品6.80mg、龍血素B對(duì)照品5.42mg，分別置50ml量瓶中，加甲醇適量使溶解，并稀釋至刻度。分別精密量取上述兩種對(duì)照品溶液各5ml置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

2.3 供試品溶液的制備 取供試品粉末1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入二氯甲烷25ml，密塞，稱定重量。超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量。用二氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液1ml，置蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

2.4 血竭對(duì)照藥材溶液的制備 取血竭對(duì)照藥材0.2g，精密稱定，照2.3項(xiàng)制成對(duì)照藥材溶液。

2.5 結(jié)果 從附圖1中可見，龍血竭的特征成分龍血素A、龍血素B與血竭對(duì)照藥材的特征峰均分離良好，且相互無(wú)干擾。0～11min主要是處方中其他藥味的特征峰，11～17min主要是血竭的特征峰，比較明顯的有色譜峰1和2，17～25min主要是龍血竭的特征峰，3、4號(hào)峰分別對(duì)應(yīng)龍血素A和B。本文建立的方法可以準(zhǔn)確區(qū)分所投原料是血竭抑或龍血竭，甚至兩者混合投料也可以識(shí)別。我們還采集了這4個(gè)成分對(duì)應(yīng)的紫外光譜圖，結(jié)果表明供試品峰的光譜圖與對(duì)照品和對(duì)照藥材一致，進(jìn)一步佐證了我們的推測(cè)，見附圖2。

3 討論

附圖2 成分1～4對(duì)應(yīng)紫外光譜圖

3.1 制備供試品溶液時(shí)比較了甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷三種溶劑的提取效果，其中甲醇提取雜質(zhì)最多，二氯甲烷與三氯甲烷提取無(wú)明顯差異，但三氯甲烷毒性較大，故選擇二氯甲烷。

3.2 試驗(yàn)中考察了不同品牌的高效液相色譜儀和色譜柱，結(jié)果表明色譜峰的保留時(shí)間稍有差異，但整體分離效果較為一致，均可區(qū)分血竭特征區(qū)和龍血竭特征區(qū)。

3.3 本方法除了對(duì)通絡(luò)活血膠囊進(jìn)行鑒別外，對(duì)其他含血竭或龍血竭類似的制劑均有參考價(jià)值和意義。