劉志君

(四川省眉山市中心血站，四川 眉山 620010)

冷沉淀是新鮮冰凍血漿在1～5℃條件下的白色沉淀物。其被加熱至37℃時呈溶解的液態(tài)，主要含有Ⅷ因子和纖維蛋白原、血管性血友病因子及纖維結(jié)合蛋白等成分，臨床上主要用于甲型血友病、血管性血友病、先天性或獲得性纖維蛋白原缺乏癥的患者及術(shù)后出血、嚴(yán)重外傷及DIC患者的治療。其中的Ⅷ因子和纖維蛋白原含量是衡量冷沉淀制品質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。目前我站使用的是CPDA(抗凝劑為枸櫞酸鹽-磷酸鹽-葡萄糖-腺嘌呤，進(jìn)口材料)和ACD(抗凝劑為枸櫞酸鹽-葡萄糖，國產(chǎn)材料)兩種配方保養(yǎng)液的血袋。在制備過程中，我們發(fā)現(xiàn)兩種血袋制備的冷沉淀產(chǎn)品外觀存在差異，其中甲血袋白色沉淀物明顯，乙血袋的白色沉淀物不如甲血袋明顯。因兩種血袋保養(yǎng)液配方不同，為了確證兩種血袋制備的冷沉淀中Ⅷ因子和纖維蛋白原含量是否存在差異，我們進(jìn)行了對比實(shí)驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備 ①樣本來源:隨機(jī)抽取CPDA(甲血袋)和ACD(乙血袋)兩種配方保養(yǎng)液血袋制備的冷沉淀各40袋。②采血、制備設(shè)備:采血秤、低溫大容量離心機(jī)、分漿夾、熱合機(jī)、天平、采血四聯(lián)袋(CPDA配方血袋和ACD配方血袋)。③檢測設(shè)備:CA-50全自動血凝儀、HH.W21—600型37℃電熱恒溫箱、5－50 μl加樣器等。④檢測試劑:凝血因子(即Ⅷ因子)檢測試劑盒(中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)輸血研究所出品);纖維蛋白原檢測試劑盒(中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)輸血研究所出品)。

1.2 制備方法 ①將符合GB 18467-2001《獻(xiàn)血者健康檢查要求》的獻(xiàn)血者血液采集于四聯(lián)血袋(即由一個主袋和兩個轉(zhuǎn)移袋及裝有紅細(xì)胞保存液的塑料袋連接成的完整的密封管袋系統(tǒng))主袋內(nèi)。要求一針見血，采血通暢，400ml血液于6分鐘內(nèi)采集完畢，200 ml血液于3分鐘內(nèi)采集完畢。CPDA抗凝劑血袋于8小時內(nèi)，ACD抗凝劑血袋于6小時內(nèi)將其離心、分離出紅細(xì)胞和血漿［1］，將血漿進(jìn)行二次離心后再次分離，在－50℃速凍成塊，即為新鮮冰凍血漿，在－20℃以下保存。②制備冷沉淀時，隨機(jī)抽取兩種血袋所制備的新鮮冰凍血漿各40袋(均為200ml)，于2～6℃冷藏箱內(nèi)緩慢融化。③待其融化至少量冰渣時取出，于0～4℃以離心力2000×g離心10分鐘，分離出上層血漿于轉(zhuǎn)移袋，剩下的白色沉淀物(約20～30 ml)即為冷沉淀。［2］④將每袋冷沉淀熱合留取約5 cm充滿冷沉淀的轉(zhuǎn)移管為樣品作檢測用。

1.3 檢測方法 將充滿冷沉淀的轉(zhuǎn)移管融化。調(diào)節(jié)CA-50全自動血凝儀處于正常待用狀態(tài)。按血凝儀標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程檢測樣品中Ⅷ因子和纖維蛋白原含量，記錄測試數(shù)據(jù)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

甲、乙兩種血袋制備的冷沉淀其Ⅷ因子、纖維蛋白原含量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P﹥0.5)，見表1。

表1 甲、乙兩種血袋制備的冷沉淀中Ⅷ因子和纖維蛋白原含量比較

3 討論

CPDA、ACD兩種配方保養(yǎng)液血袋制備的冷沉淀質(zhì)量評價 按GB 18469-2001《全血及成分血質(zhì)量要求》，Ⅷ因子含量應(yīng)≥80 IU/200 ml新鮮冰凍血漿制備，纖維蛋白原含量應(yīng)≥150 mg/200 ml新鮮冰凍血漿制備［3］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，兩種配方保養(yǎng)液血袋制備的冷沉淀中，Ⅷ因子和纖維蛋白原含量均達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)。

上述結(jié)果表明，甲、乙兩種血袋制備的冷沉淀的外觀差異與保養(yǎng)液配方無關(guān)，可能與血袋的材料有關(guān)。咨詢血袋生產(chǎn)廠家得知，甲血袋為進(jìn)口材料生產(chǎn)，產(chǎn)品透明度較高。乙血袋為國產(chǎn)材料生產(chǎn)，產(chǎn)品透明度低些。因?yàn)椴牧喜煌耐该鞫炔煌?，因而冷沉淀的外觀目測效果會有差異。透明度高的甲血袋，其白色沉淀物較明顯，而透明度較低的乙血袋，其白色沉淀物就不如甲血袋明顯。

CPDA、ACD兩種配方保養(yǎng)液的血袋由于使用材料不同，因而價格不同。制備的產(chǎn)品在不影響質(zhì)量的前提下，使用ACD保養(yǎng)液的血袋，可以達(dá)到節(jié)約成本的目的。

如何控制冷沉淀的制備過程，確保質(zhì)量，達(dá)到臨床療效是血液成分制備人員的職責(zé)要求。不斷改進(jìn)成分制備方法，提高血液成分的質(zhì)量是成分制備人員應(yīng)該思考的問題。

［1］高國靜.輸血管理學(xué)［M］.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002.

［2］王培華.輸血技術(shù)學(xué)［M］.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002.

［3］GB 18469-2001全血及成分血質(zhì)量要求［M］.北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2002.