羅清華

凝血測定中抗凝劑的應(yīng)用

羅清華

目的 探討血液與抗凝劑不同比例及紅細胞壓積(Hct)的變化對測定凝血酶原時間(PT)和活化部分凝血活酶時間(APTT)的影響。方法 抽取25例體檢健康者血液與抗凝劑9:1和5:1混勻，分離血漿后立即測定PT、APTT，另取PT、APTT、Hct均正常血液10份，每份模擬成Hct是10%～80%各系列標本，全血與抗凝劑9:1抗凝，混勻，分離血漿測定。結(jié)果 血液與抗凝劑比例縮小，PT、APTT時間延長(P＜0．01);Hct的變化對PT、APTT測定結(jié)果均有影響(P＜0．01)。結(jié)論 檢測PT、APTT應(yīng)嚴格把握抗凝劑比例，特別是Hct≥60%時。

凝血測定;抗凝劑;凝血酶原時間;活化部分凝血活酶時間

在凝血測定時所用標本均為抗凝劑與全血按1:9比例混勻的抗凝血，經(jīng)分離血漿后進行檢測，因為抗凝劑只對血漿起作用，準確的說，1:9指的是1份抗凝劑對9份紅細胞壓積正常血液中血漿總量而言，由于抗凝劑加入量不準和由于貧血或紅細胞增多癥，血漿量的變化引起抗凝劑的比例變化均可影響實驗結(jié)果，因此抗凝劑的合理使用是凝血分析質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)，筆者對此進行了探討，現(xiàn)報告如下。

1 對象與方法

1．1 對象 紅細胞壓積正常(Hct40%～50%)者25例，紅細胞壓積(Hct)、凝血酶原時間(PT)和活化部分凝血活酶時間(APTT)三者均正常者10例。采血部位為肘前靜脈，均抽血順利。

1．2 方法 儀器與試劑:ACL200凝血儀及配套試劑，抗凝劑為ICSH和ICTH推薦使用的3．2%0．109 mol/L枸椽酸鈉抗凝劑。操作方法:(1)取Hct正常的靜脈血液25份，用枸椽酸鈉抗凝劑與同一份血液按1:9、1:5配制成抗凝血，混合后，以4 000轉(zhuǎn)/min離心15 min，測定PT和APTT。(2)取Hct、PT、APTT均正常的血液10份，根據(jù)計算模擬成Hct為10% ～80%各系列的標本，分別按抗凝劑與全血1:9抗凝，再測定它們的PT、APTT。

2 結(jié)果

2．1 正常壓積下血液與抗凝劑不同比例混合，PT、APTT測定結(jié)果 抗凝劑比例增大可引起PT、APTT明顯延長。經(jīng)配對t檢驗，1:5比例抗凝劑較1:9比例抗凝結(jié)果差異有顯著性(P ＜0．01)。見表1。

表1 抗凝劑與不同全血比例PT、APTT的測定結(jié)果(±s)

表1 抗凝劑與不同全血比例PT、APTT的測定結(jié)果(±s)

抗凝劑:全血 例數(shù) PT(s) APTT(s) 1: 5 25 17．5±2．64 47．8±4．71 9 25 12．4±0．66 35．5±2．66 1:

2．2 不同Hct的枸椽酸鈉抗凝血PT、APTT的測定結(jié)果 正常Hct者(Hct45%)的測定結(jié)果與各非正常Hct者結(jié)果均進行配對t檢驗，顯示差異均有顯著性(P＜0．01)。見表2。

表2 Hct枸椽酸鈉抗凝血漿PT、APTT的影響(±s)

表2 Hct枸椽酸鈉抗凝血漿PT、APTT的影響(±s)

Hct(10%) 例數(shù) PT(s) APTT(s) 10 10 12．06±0．65 29．94±2．19 20 10 12．24±0．67 31．93±2．47 30 10 12．54±0．73 33．74±2．47 45 10 12．65±0．79 35．03±2．72 60 10 14．80±1．08 40．02±3．05 70 10 17．75±1．48 46．82±3．73 80 10 51．43±7．91 90．75±16．69

3 討論

凝血酶原時間(PT)和活化部分凝血活酶時間(APTT)是臨床上的常規(guī)檢測項目。PT測定是一種外源性凝血系統(tǒng)的過篩實驗，綜合反映血漿中凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ活性。APTT實驗是較敏感的初篩內(nèi)源性凝血系統(tǒng)凝血缺陷的常規(guī)方法［1］。

在目前的日常工作中，特別是已經(jīng)使用真空采血管采血的醫(yī)院，加入抗凝劑的量是固定的，但當抽血量過多或過少時，加入的抗凝劑量沒進行相應(yīng)的調(diào)整而造成抗凝劑量相對過少或過多。從表1的結(jié)果中可以知道抗凝劑量的改變，對實驗結(jié)果有影響，特別是抗凝劑增多可使PT、APTT結(jié)果明顯延長。這樣的標本，特別是血量嚴重偏少時應(yīng)重新采樣。

從表2的結(jié)果中可以看出，Hct的多少也會直接影響實驗結(jié)果，特別是當Hct≥60%時，不僅與Hct正常的結(jié)果差異有顯著性(P＜0．01)，而且超出了正常參考范圍(PT11s～14s，APTT30s～40s)。因為準確的1:9是指1份抗凝劑對9份紅細胞壓積正常血液中血漿總量而言，Hct的變化間接引起了抗凝劑的過多或過少。在實際工作中，經(jīng)常會遇到貧血或紅細胞增多癥引起Hct增減的標本，測定了患者Hct后，可用公式:抗凝劑用量(ml)=0．185×血量×(1-患者紅細胞壓積)計算后調(diào)整抗凝劑量再進行PT、APTT的測定。但根據(jù)表2的結(jié)論，Hct＜40%時雖與Hct正常的結(jié)果差異有顯著性，但并未超出正常的參考范圍，對這樣的標本，只在必要時重新采樣即可［2］。

綜上分析，掌握好抗凝劑的量在凝血實驗中的應(yīng)用，對實驗結(jié)果的準確性、可靠性有很大意義，可為臨床診斷及治療提供更準確的輔助檢查依據(jù)。

［1］ 李綿綿，陳小劍，江明華．不同抗凝劑濃度對TEST1全自動血沉儀測定血沉結(jié)果的影響［J］．江西醫(yī)學(xué)檢驗，2007，25(3):282．

［2］ 吳 凱，熊建輝，趙 健．不同抗凝劑濃度對血細胞分析儀測定結(jié)果的影響［J］．實用醫(yī)技雜志，2005，12(8B):2197．

10．14126/j．cnki．1008-7044．2015．06．032

R446．11

A

1008-7044(2015)06-0574-02

江西省豐城礦務(wù)局總醫(yī)院檢驗科，331141

羅清華(1974-)，男，江西豐城市人，主管檢驗師，大學(xué)。

2015-05-04)