中圖分類號:S965.124文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A
牛磺酸是一種廣泛分布于動物機(jī)體各組織和器官中的小分子 β -含硫氨基酸。研究發(fā)現(xiàn),?;撬峋哂刑岣邉游锷L和繁殖能力、調(diào)節(jié)機(jī)體滲透壓、增強(qiáng)維持生物膜穩(wěn)定性、促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)代謝、提升免疫能力和抗氧化能力等生物學(xué)功能[1]。近年來,?;撬釋λa(chǎn)動物的營養(yǎng)作用及其在飼料中的應(yīng)用得到廣泛關(guān)注[2]。研究表明,飼料中添加?;撬峥梢燥@著提升多種魚類的生長性能、免疫力和抗氧化能力[3]。此外,牛磺酸還是一種重要的誘食劑,可以提高養(yǎng)殖魚類的攝食率。
黃尾密(Xenocyprisdavidi),俗稱黃尾、黃片,屬鯉形目、鯉科魚類,是一種生活在江河、湖泊、水庫的底層的優(yōu)質(zhì)淡水經(jīng)濟(jì)魚類。其食性主要以腐殖質(zhì)、底層著生藻類、高等植物碎屑等為主,與鰱、鳙混養(yǎng),可充分利用水體餌料資源。新鮮成魚蓋上有黃色斑,尾鰭黃色,具有體形好、色澤艷、肉質(zhì)細(xì)嫩可口、含肉率高、疾病少、生長快等優(yōu)點,在中國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)具有一定的發(fā)展前景[4]
目前,國內(nèi)外尚未見有關(guān)飼料?;撬崴脚c黃尾密鯛生長性能、飼料利用和免疫關(guān)系的研究報道。因此,該實驗研究了飼料?;撬崴綄S尾密鯛生長性能、體成分、消化酶、免疫指標(biāo)和抗氧化能力的影響,旨在確定黃尾密鯛對飼料中?;撬岬淖钸m需求量,為其配合飼料配制提供理論依據(jù)。
1材料與方法
1. 1 實驗設(shè)計和管理
實驗用黃尾密鯛取自丹東東港市長山鎮(zhèn)漁業(yè)良種場。該批次親魚從湖南省長沙市引進(jìn),將其繁殖的魚苗培育至實驗規(guī)格。選取初始體重為 10g 左右的黃尾密鯛400尾,于 4.0m×1.5m×1.3m 水泥池暫養(yǎng)7d,暫養(yǎng)期間投喂對照組飼料,暫養(yǎng)后選取體重大小相近、活力較好、體表無傷的黃尾密300尾,隨機(jī)分為5組,每組3個平行,每個平行20尾,實驗使用15個水族箱( 80cm×60cm×60cm) 飼養(yǎng),以曝氣 24h 以上的自來水作為實驗水體,飼養(yǎng)前用強(qiáng)氯精進(jìn)行消毒,實驗期間采用氣石 24h 充氣,每日08:00和16:00投喂2次,表觀飽食,每日吸底1次、換水1次,換水量約為 1/2 ,實驗期間實時監(jiān)測水溫及水質(zhì)變化,養(yǎng)殖周期為8周。
1.2 實驗飼料
實驗飼料配方見表1,以魚粉、豆粕等為主要蛋白源,以豆油為主要脂肪源配制5組等氮等脂飼料,其中?;撬崽砑恿糠謩e為 0% (D1組) 0.4% (D2組) ,0.8% (D3組)、 1.2% (D4組)和 1.6% (D5組),飼料原料過80目篩,逐級混勻,混合后的粉狀飼料經(jīng)制粒機(jī)制成 0.2mm 的顆粒飼料,放入烘箱中42% 烘干至水分含量為 10% ,于 -20% 冰箱中保存。
表1實驗飼料組成/
注:維生素預(yù)混料為每 1kg 飼料含有維生素 A7000IU ,維生素 ,維生素 E50mg ,維生素
,維生素
,維生素 B220mg",維生素
,維生素
,煙酸 80mg ,維生素C100mg ,泛酸鈣 50mg ,葉酸 6mg ,肌醇 80mg礦物質(zhì)預(yù)混料為每1kg 飼料含有
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1.3樣品采集及指標(biāo)測定
取樣前,實驗魚停食 24h ,放入冰水中,用濃度為 100mg/L 的MS-222進(jìn)行麻醉處理,稱重測量體長、體重及內(nèi)臟器官重,計算其生長指標(biāo)。稱重后,于冰上進(jìn)行無菌解剖,每個重復(fù)15尾魚全部取肝臟和背部肌肉,同組混樣裝入樣品管。肝臟和肌肉樣品分別注入質(zhì)量體積比為1:9的生理鹽水,經(jīng) !
高速離心后,取上清液, 4% 保存,用于測定酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)、堿性磷酸酶(alkalinephosphatase,AKP)、過氧化氫酶(catalase,CAT)和總超氧化物歧化酶(total superoxidedismutase,T-SOD)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)酶活力,上述酶活指標(biāo)均利用南京建成生物工程研究所試劑盒進(jìn)行測定。
1.4數(shù)據(jù)處理
實驗數(shù)據(jù)用平均值 ± 標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±standard er-ror,SE)表示,用SPSS25.0軟件(IBM,USA)進(jìn)行單因素方差分析(one-wayANOVA)。并采用Duncan's進(jìn)行多重比較來分析各處理組間的顯著性,設(shè)置 Plt; 0.05為差異顯著。
2結(jié)果
2.1飼料中添加不同水平的牛磺酸對黃尾密CAT活力的影響
由圖1可知,飼料中添加不同水平的?;撬釋S尾密鯛肝臟和肌肉的CAT有顯著性影響( Plt; 0.05)。與對照組(D1)相比,D3和D4組的CAT活力顯著升高( Plt;0.05) ,且在D3組達(dá)到峰值。
2.2飼料中添加不同水平的?;撬釋S尾密MDA活力的影響
由圖2可知,添加?;撬岬母鹘MMDA含量顯著低于對照組( Plt;0.05, 。與對照組(D1)相比,MDA活力在D3組達(dá)到最低值。
2.3飼料中添加不同水平的?;撬釋S尾密T-SOD活力的影響
由圖3可知,添加?;撬岬母鹘MT-SOD含量顯著高于對照組( Plt;0.05 )。與對照組(D1)相比,T-SOD在肌肉和肝胰腺中的活力均隨著牛磺酸添加量的增加而升高,并在D4組時達(dá)到峰值,隨后出現(xiàn)下降趨勢。
注:不同小寫母表示不同處理間肌肉測定指標(biāo)差異顯著( Plt;0.05) ,不同大寫母表示不同處理間肝臟測定指標(biāo)差異顯著( Plt;0.05) ,后圖同此。 Note:Diferentlowercase female meanssignificant diferencein musclemeasurementindexesbetween diffrenttreatments( ,and different uppercase female means significant diference in liver measurement indexes between different treatments ( Plt;0.05 ),as shown in the following figure.
2.4飼料中添加不同水平的?;撬釋S尾密 AKP活力的影響
由圖4可知,添加?;撬岬母鹘MAKP含量有顯著影響( Plt;0.05) 。其中,肌肉中的AKP活力在D2組達(dá)到峰值,肝臟中AKP活力在D5組達(dá)到峰值。
2.5 飼料中添加不同水平的?;撬釋S尾密ACP活力的影響
由圖5可知,各組?;撬崽砑语暳蠈∪庵?ACP活力無顯著影響( Pgt;0.05) ,但對肝臟中ACP活力影響顯著( Plt;0.05 )。對照組ACP活力最低,D5組酶活力最高,D2、D3和D4組酶活力顯著高于對照組( 。
3討論與分析
肝臟在新陳代謝過程中會產(chǎn)生大量的氧自由基(ROS),而正常的抗氧化防御系統(tǒng)可以清除這些氧自由基,保持機(jī)體內(nèi)的動態(tài)平衡,減少氧化損傷[5]。缺乏?;撬岬膭游锬P椭写嬖诟闻K組織發(fā)育異常或不完全的現(xiàn)象,而?;撬峥梢员Wo(hù)肝臟免受氧化應(yīng)激等多重?fù)p害。本研究結(jié)果顯示,添加不同水平的?;撬釋S尾密鯛的抗氧化能力產(chǎn)生了顯著影響。特別是,在肝臟和肌肉組織中,CAT、T-SOD等抗氧化酶活性在?;撬崽砑雍竺黠@提高,而MDA等氧化應(yīng)激代謝物的含量則顯著降低。這些結(jié)果表明,?;撬峥梢杂行г鰪?qiáng)黃尾密鯛的抗氧化防御系統(tǒng),提高其清除氧自由基的能力,從而減輕細(xì)胞氧化損傷。這一發(fā)現(xiàn)也在紅鰭東方鲀[、虹[和許氏平[8]等魚類研究中得到了驗證。對于飼料配方的調(diào)整和魚類健康管理具有實際意義,有助于提高黃尾密鯛在養(yǎng)殖過程中的生存率和抗逆能力。值得注意的是,不同添加量的?;撬峥赡軙寡趸芰Ξa(chǎn)生不同程度的影響,因此在實際應(yīng)用中需要根據(jù)具體情況進(jìn)行合理調(diào)整,以達(dá)到最佳的營養(yǎng)調(diào)節(jié)效果。
在實驗中觀察到,牛磺酸的適量添加顯著增強(qiáng)了黃尾密鯛體內(nèi)的免疫酶活性,如ACP和AKP。這種增強(qiáng)的免疫酶活性有助于提高黃尾密鯛對外來病原體的抵抗能力,從而減少疾病發(fā)生的可能性,確保了養(yǎng)殖的穩(wěn)定性和產(chǎn)出的質(zhì)量。值得注意的是,?;撬釋S尾密的ACP活力在肌肉和肝臟中的影響存在差異。在肌肉組織中,各組添加不同水平的?;撬釋CP活力沒有產(chǎn)生顯著影響,這可能暗示著肌肉組織對牛磺酸的反應(yīng)不如肝臟明顯。然而,在肝臟組織中,牛磺酸的添加對ACP活力有顯著影響( ? Plt;0.05) ,且呈現(xiàn)出劑量依賴性的趨勢。特別是D5組的ACP活力最高,而對照組的ACP活力最低。這種結(jié)果可能反映了?;撬釋Ω闻K代謝活性的促進(jìn)作用,導(dǎo)致了ACP活力的增加。
4結(jié)論
牛磺酸對黃尾密鯛的抗氧化能力具有顯著影響,能夠有效增強(qiáng)其抗氧化防御系統(tǒng)的活性,提高清除氧自由基的能力,降低氧化應(yīng)激損傷。特別是在肝臟和肌肉組織中,?;撬岬奶砑语@著提高了CAT、T-SOD等抗氧化酶活性,同時降低了MDA等氧化應(yīng)激代謝物的含量。同時,適量添加?;撬崮軌蝻@著增強(qiáng)黃尾密鯛的免疫酶活性,如ACP和AKP,提高其抵抗外來病原體的能力,有助于減少疾病的發(fā)生,提高養(yǎng)殖質(zhì)量和產(chǎn)出穩(wěn)定性。但在實際應(yīng)用中,需要根據(jù)具體情況調(diào)整牛磺酸的添加量,以達(dá)到最佳的營養(yǎng)調(diào)節(jié)效果。
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Effects of dietary taurine level on immunity and antioxidant enzyme activity of Xenocypris davidi
SUN Shuhao (DandongFisheryDevelopment ServiceCenter,Dandong118O17,LiaoningChina)
Abstract:Inthisstudy,Xenocyprisdavidiwastakenasthesubject.Byadingdiferentlevelsoftaurineintofeed, theeffectsof taurineontheactivitiesof various enzymes inliverand muscleof Xenocyprisdavidi were studied.Atotal of300Xenocypris davidiwithan initial bodyweightof about 10g"were randomly divided into5 groupswith3 parallels and 20 tails in each group.Theculture cycleof theexperiment was 8 weeks.Theresults showed that taurine supplementation had significant effects on various enzyme activities of Xenocypris davidi ( ).In liver and muscle, CAT(catalase),MDA(malondialdehyde),T-SOD(total superoxide dismutase),AKP(alkaline phosphatase), ACP(acid phosphatase)and other enzymeactivities were regulated to varying degres,among which CATactivity reachedthe highestvalueinD3 group,MDAactivityreached thelowest value in D3 group.T-SODactivity increased with the increase of taurine suppementation,and then decreased after reaching the peak value in D4 group.AKPand ACPactivitiesshoweddifferent trends indiferent treatmentgroups,but were significantly higherthanthose incontrol group.Thecomprehensive analysis showed that taurine couldregulate theactivityof variousenzymes in Xenocypris davidi,which wasof great significancefor maintainingphysiologicalfunctionandantioxidantcapacityoforganism. Keywords:Xenocypris davidi;taurine;immunoenzymeactivity;antioxidant enzyme activity;regulating effect