摘要：檢索英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)（RHS）蘭花登錄情況并記錄26個(gè)野生石斛的育種情況，對(duì) 26份代表野生石斛種質(zhì)資源的23個(gè)表型性狀進(jìn)行相關(guān)計(jì)算，并對(duì)主成分分析得到的重要性狀進(jìn)行聚類分析，了解不同石斛的表型多樣性及組間親緣關(guān)系，評(píng)估石斛蘭原生種的育種潛力。結(jié)果表明，截至2023年12月，26種石斛原生種作親本的雜交種登錄總數(shù)量為74個(gè)，組內(nèi)雜交種45個(gè)，組間雜交種29個(gè)。26個(gè)石斛供試材料的變異系數(shù)（CV）為28.33%～47.14%，其中萼片寬的CV最小（28.3%），葉寬的CV最大（47.14%）；Simpson指數(shù)（D）在0.22～0.78之間，Shannon-Wiener指數(shù)（H′）在0.43～1.47之間，節(jié)間形態(tài)的D值（0.22）和H′值（0.43）最小，唇瓣形狀的D值（0.78）和H′值（1.47）最大。通過(guò)主成分分析得到了權(quán)重大于4%的13個(gè)主要性狀，對(duì)13個(gè)主要性狀根據(jù)Euclidean距離，采用ward法進(jìn)行系統(tǒng)聚類發(fā)現(xiàn)，在歐氏距離為15.3處，將 26份石斛種質(zhì)資源劃分為4個(gè)類群。重唇石斛、球花石斛最早聚在一起，親緣關(guān)系最近，鼓槌石斛與尖刀唇石斛的親緣關(guān)系最遠(yuǎn)。綜合蘭花登錄情況和表型聚類發(fā)現(xiàn)，有39個(gè)組合雜交成功且在表型聚類中顯示近緣關(guān)系。表型聚類結(jié)果與石斛蘭雜交登錄情況保持較高的一致性，可為后續(xù)石斛蘭雜交親本選配提供參考。金釵石斛、細(xì)莖石斛、蜻蜓石斛、鼓槌石斛等與其他供試石斛雜交親和性高，是較理想的雜交親本。重唇石斛和球花石斛，高山石斛和兜唇石斛，束花石斛和流蘇石斛，長(zhǎng)距石斛和竹葉石斛，串珠石斛和蘇瓣石斛，玫瑰石斛和翅萼石斛間的親緣關(guān)系較近，但未見(jiàn)有雜交種登錄，可作為后續(xù)雜交育種的親本考慮。

關(guān)鍵詞：石斛；表型性狀；聚類分析；親緣關(guān)系；親本選配

中圖分類號(hào)：S682.310.3""文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2025）01-0191-09

石斛（Dendrobium spp.），蘭科第二大屬，因其花色豐富、顏色艷麗、花姿優(yōu)美、花期較長(zhǎng)，與蝴蝶蘭（Phalaenopsis spp.）、萬(wàn)代蘭（Vanda spp.）、卡特蘭（Cattleya spp.）并稱為“四大觀賞蘭花”，既可作切花，也可作盆花，是國(guó)際花卉市場(chǎng)的重要花卉種類之一，作為高檔商品花卉，石斛蘭新品種的選育具有重要應(yīng)用價(jià)值^［1-4］。全球約產(chǎn)1 000種，目前，國(guó)際上以Schlechter 分類系統(tǒng)為框架，按照親緣關(guān)系將石斛蘭整理為5個(gè)亞屬40個(gè)組^［5-6］。

雜交育種可以綜合父母本優(yōu)良性狀，改變現(xiàn)有的觀賞性狀，是獲得植物新品種的重要手段，而蘭科植物雜交的不親和性和不育性是雜交育種的兩大障礙，因而，基于親緣關(guān)系的親本篩選研究對(duì)蘭科植物雜交育種具有重要意義。英國(guó)育種家John Dominy在1864年培育出了第一個(gè)石斛蘭雜交種，即金釵石斛（D.nobile Lindl.）和櫻石斛（D.linawianum Rchb.f.）的組內(nèi)雜交種^［7-10］。石斛蘭育種至今150多年，截至2023年12月，在英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)（RHS）蘭花登錄的石斛蘭雜交品種有 20 013 個(gè)。較歐美而言我國(guó)石斛蘭育種研究起步較晚，直到2000年我國(guó)才在國(guó)際上進(jìn)行石斛蘭新品種登錄，自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新品種數(shù)量較少^［11-13］。與蘭科其他植物材料相比，石斛蘭屬的遠(yuǎn)緣雜交親和性較低，不同組間雜交結(jié)實(shí)率不高，組內(nèi)雜交結(jié)實(shí)率亦存在較大差異^［14］。葉秀仙等根據(jù)親本的觀賞特性、抗性等對(duì)燈籠石斛組［Section Callista （Lour.）Schltr.］、模式石斛組（Sects.Dendrobium Lindl.）進(jìn)行雜交結(jié)實(shí)性研究，發(fā)現(xiàn)鼓槌石斛（D. chrysotoxum Lindl.）、報(bào)春石斛（D. polyanthum Wall. ex Lindl.）、兜唇石斛［D.aphyllum （Roxb.） C.E.C. Fisch.］、玫瑰石斛（D. crepidatum Lindl.ex Paxton）、細(xì)莖石斛［D.moniliforme （L.）Sw.］等育種親本材料，不同組合的結(jié)實(shí)率存在差異^［15-16］。潘春香等選用種間性狀差異較大的石斛雜交發(fā)現(xiàn)，玫瑰石斛、鼓槌石斛、細(xì)莖石斛和金釵石斛4個(gè)種相互雜交均可結(jié)實(shí)^［16］。以上研究證實(shí)模式石斛組與燈籠石斛組可進(jìn)行組間雜交。鄧茜玫對(duì)不同組的石斛蘭原生種進(jìn)行雜交試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)黑毛石斛組［Sects.Formosae （Benth.et Hook.f.）Hook.f.］與燈籠石斛組組間雜交親和性強(qiáng)，雜交容易結(jié)實(shí)，但不同組間雜交親和性存在較大的差異^［14］。

目前，蘭科植物雜交育種中親本篩選的方法主要是分子標(biāo)記輔助篩選和基于表型性狀的親本親緣關(guān)系評(píng)估。任羽等利用相關(guān)序列擴(kuò)增多態(tài)性（sequence-related amplified polymorphism，SRAP）分子標(biāo)記研究了54種石斛的親緣關(guān)系^［11］。王利民通過(guò)利用擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（amplified fragment length polymorphism，AFLP）標(biāo)記對(duì)35個(gè)大花蕙蘭（Cymbidium hybrid）的雜種進(jìn)行早期鑒定，總結(jié)了親本選配、雜交等環(huán)節(jié)中具有指導(dǎo)意義的指標(biāo)或技術(shù)體系，為我國(guó)蘭科植物分子輔助育種提供基礎(chǔ)^［17］。此外，前人采用SRAP標(biāo)記和隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（random amplified polymorphic DNA，RAPD）標(biāo)記分析了42個(gè)大花蕙蘭品種及4個(gè)蘭屬原生種之間的遺傳親緣關(guān)系，揭示了大花蕙蘭品種及國(guó)蘭間的遺傳多樣性與親緣關(guān)系，為大花蕙蘭種質(zhì)資源利用及雜交育種中的親本選擇提供科學(xué)依據(jù)^［18-19］。由于分子標(biāo)記種類選擇關(guān)系到遺傳信息的覆蓋面，加之試驗(yàn)可重復(fù)性差異都會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生較大影響。傳統(tǒng)育種依舊是目前蘭科植物雜交育種的最主要手段，植物表型性狀是基因與環(huán)境相互作用表現(xiàn)的直觀性狀，能夠反映植物遺傳變異的表征，基于表型性狀分析種間親緣關(guān)系具有性狀直接、遺傳穩(wěn)定性高的優(yōu)勢(shì)，被廣泛應(yīng)用到遠(yuǎn)緣雜交親本篩選^［20-22］。李洪池等比較了西藏地區(qū)13種蝦脊蘭植物花部表型，為確定蝦脊蘭（Calanthe discolor）植物的種間親緣關(guān)系提供了新的依據(jù)^［23］。此外，多個(gè)學(xué)者通過(guò)研究200多個(gè)春蘭（Cymbidium spp.）品種的表型性狀，為了解野生春蘭種質(zhì)間親緣關(guān)系及利用提供了理論依據(jù)^［24-25］。還有一些學(xué)者通過(guò)分析29個(gè)兜蘭屬（Paphiopedilum spp.）物種的表型性狀，研究了它們之間的親緣關(guān)系^［26］。

我國(guó)產(chǎn)石斛蘭79種，2個(gè)變種，分屬于13個(gè)組，主要分布于云南、廣西、貴州、四川等地，以云南的資源最為豐富，產(chǎn)的石斛就有60多種，其中可作觀賞用石斛有39 種，1個(gè)變種^{［6-7，27-28］}。資源主要集中在燈籠石斛組、模式石斛組、短花石斛組（Sects.Breviflores Hook.f.）、黑毛石斛組、寡花石斛組（Sects.Holochrysa Lindl.），例如燈籠組，我國(guó)僅6個(gè)種，云南產(chǎn)4個(gè)種，占全國(guó)的66.67%^［7］。因此，本研究以云南產(chǎn)的觀賞價(jià)值高、株型不同、色系各異的這5個(gè)優(yōu)勢(shì)組的26個(gè)石斛原生種作為研究對(duì)象，通過(guò)檢索英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)（RHS）蘭花登錄情況，梳理26種石斛原生種雜交育種情況；基于表型性狀變異多樣性和親緣關(guān)系評(píng)估不同石斛組間雜交的難易程度及育種潛力，為培育云南特色的石斛新品種提供基礎(chǔ)。

1"材料與方法

1.1"試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2022年3—12月在云南省昆明市西南林業(yè)大學(xué)園藝與園林學(xué)院溫室進(jìn)行。供試的26份野生石斛資源引種于云南騰沖、保山昌寧、西雙版納、德宏等地，具體名稱和來(lái)源見(jiàn)表1，每個(gè)野生種隨機(jī)選取10盆，以椰糠和樹皮為材料，按照1 ∶1的比例栽植于西南林業(yè)大學(xué)園藝與園林學(xué)院溫室進(jìn)行后續(xù)肥水管理。

1.2"研究方法

1.2.1"26個(gè)石斛材料育種情況統(tǒng)計(jì)

利用英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)開(kāi)發(fā)的Encyclopedia X9.0軟件（OrchidWiz Orchid Database Software），將26個(gè)種分別以父本和母本為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索，并記錄26個(gè)原生種之間的雜交情況，截至2023年12月。

1.2.2"供試材料表型性狀的測(cè)定

在石斛屬植物盛花期測(cè)量葉部數(shù)量性狀4個(gè)，包括葉長(zhǎng)（cm）、葉寬（cm）、莖粗（cm）、節(jié)長(zhǎng)（cm）；花部數(shù)量性狀6個(gè)，包括花瓣長(zhǎng)（cm）、花瓣寬（cm）、萼片長(zhǎng)（cm）、萼片寬（cm）、唇瓣長(zhǎng)（cm）、唇瓣寬（cm）。測(cè)量葉部質(zhì)量性狀5個(gè)，包括假鱗莖形態(tài)、莖稈色、節(jié)間形態(tài)、葉色、葉形；花部質(zhì)量性狀8個(gè)，包括萼片形狀、花瓣形狀、花瓣顏色數(shù)量、花瓣主色、唇瓣顏色數(shù)量、唇瓣形狀、唇瓣主色、唇斑。

測(cè)量方法：隨機(jī)選取盛花期長(zhǎng)勢(shì)一致的同種石斛10株，使用游標(biāo)卡尺（0.001 cm）和皮尺（0.1 cm）測(cè)量從頂葉向下第4張葉片的葉長(zhǎng)（cm）、葉寬（cm），從頂端向下第4節(jié)的莖粗（cm）、節(jié)長(zhǎng)（cm）。13個(gè)質(zhì)量性狀標(biāo)準(zhǔn)均按照尹俊梅等編寫的石斛蘭種質(zhì)資源相關(guān)規(guī)范^［29］進(jìn)行目測(cè)，賦值情況見(jiàn)表2。

1.3"數(shù)據(jù)處理

使用Excel 2010計(jì)算試驗(yàn)數(shù)據(jù)的平均值（Mean）、標(biāo)準(zhǔn)差（SD）、變異系數(shù)（CV）、Simpson指數(shù)（D）、 Shannon-Wiener指數(shù)（H′）。用SPSS 20.0對(duì)表型數(shù)據(jù)進(jìn)行主成分分析，然后以特征值大于1、權(quán)重大于4%提取主成分，得到可以代表石斛全部遺傳信息的13個(gè)主要性狀，對(duì)13個(gè)主要性狀根據(jù)Euclidean距離，采用Ward法進(jìn)行系統(tǒng)聚類，使用Origin 2021構(gòu)建系統(tǒng)聚類圖。

Shannon-Wiener多樣性指數(shù)：H′=-∑（ni/N）log2 （ni/N）；

Simpson多樣性指數(shù)：D=1-∑（ni/N）²；

變異系數(shù)：CV=（SD/Mean）×100%。

式中：ni為分布頻率；N為樣本總數(shù)；SD表示標(biāo)準(zhǔn)偏差；Mean表示平均值。

2"結(jié)果與分析

2.1"26種石斛的英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)蘭花登錄情況

通過(guò)檢索英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)蘭花登錄情況（表3）可知，截至2023年12月，26種石斛供試材料間雜交的登錄總數(shù)量為74個(gè)，包括組內(nèi)雜交種45個(gè)，組間雜交種29個(gè)。其中玫瑰石斛、串珠石斛、尖刀唇石斛、喇叭唇石斛、大苞鞘石斛、翅萼石斛、喉紅石斛、翅梗石斛僅存在組內(nèi)雜交種，重唇石斛僅存在組間雜交種登錄，鼓槌石斛、密花石斛、球花石斛、兜唇石斛、細(xì)莖石斛、金釵石斛、報(bào)春石斛、高山石斛、長(zhǎng)蘇石斛、流蘇石斛、蜻蜓石斛既存在組內(nèi)雜交種也存在組間雜交種。雜交種登錄最多的是金釵石斛，為13個(gè)，包括7個(gè)組內(nèi)雜交登錄種，6個(gè)組間雜交登錄種；其次是細(xì)莖石斛，共9個(gè)，由5個(gè)組內(nèi)雜交登錄種和4個(gè)組間雜交登錄種組成；雜交種登錄最少的是束花石斛、齒瓣石斛、紫菀石斛、長(zhǎng)距石斛、竹葉石斛、蘇瓣石斛，分別與其他25個(gè)供試材料無(wú)雜交種登錄。

2.2"野生石斛質(zhì)量性狀的頻率分布及數(shù)量性狀的變異系數(shù)分析

通過(guò)對(duì)26個(gè)供試材料的質(zhì)量性狀分析發(fā)現(xiàn)（圖1）， 不同性狀出現(xiàn)的頻率不同。其中假鱗莖圓柱形、綠色、節(jié)部正常的莖形態(tài)占比最大，葉片深綠色、披針形的葉形態(tài)占比最大；花部形態(tài)中萼片形狀披針形，花瓣形狀長(zhǎng)圓形，唇瓣形狀渾圓且尖端流蘇狀出現(xiàn)的頻率最多；花瓣顏色數(shù)量多為1種，主色白色占比最多，其次是黃色，唇瓣顏色數(shù)量多為2種，以黃色為主色最多，唇斑以斑點(diǎn)和無(wú)唇斑出現(xiàn)頻率最多。

對(duì)10個(gè)數(shù)量性狀的變異系數(shù)分析發(fā)現(xiàn)，10個(gè)數(shù)量性狀的變異系數(shù)范圍為28.33%～47.14%。其中葉寬的變異系數(shù)最大，達(dá)到47.14%，其平均值為2.59 cm，變異系數(shù)最小的是萼片寬，達(dá)到28.33%，平均值為1.02 cm，變異程度?。▓D2）。

2.3"野生石斛質(zhì)量性狀多樣性指數(shù)比較

由圖3可知，14個(gè)質(zhì)量性狀的Simpson指數(shù)（D）在0.22～0.78之間，其中唇瓣形狀的Simpson指數(shù)（D）最大，達(dá)到0.78，節(jié)間形態(tài)的Simpson指數(shù)（D）最小，僅為0.22。Shannon-Wiener指數(shù)（H′）在0.43～1.47之間，其中唇瓣形狀的Shannon-Wiener指數(shù)（H′）最大，達(dá)到1.47，節(jié)間形態(tài)的Shannon-Wiener指數(shù)（H′）最小，為0.43。由上述結(jié)果可以看出，Simpson指數(shù)（D）的結(jié)果和Shannon-Wiener指數(shù)（H′）的結(jié)果一致，且關(guān)聯(lián)性強(qiáng)（R²=0.927），唇瓣形狀和葉形這2個(gè)性狀的多樣性最豐富。

2.4"野生石斛主要性狀的主成分分析

以特征值大于1.0為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算石斛24個(gè)表型性狀的貢獻(xiàn)率，選取貢獻(xiàn)率大于4%且能夠代表石斛大部分遺傳信息的13個(gè)主要性狀進(jìn)行主成分分析，結(jié)果見(jiàn)表4。前4個(gè)主成分的特征值均大于1，且累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到75.638%，說(shuō)明這4個(gè)主成分在石斛的遺傳信息中作用較大，能夠代表石斛的大部分遺傳信息。野生石斛13個(gè)主要性狀在4個(gè)主成分中權(quán)重占比最大的是唇瓣寬，達(dá)到12.85%，其次是葉形和葉寬，分別為10.95%和10.38%，均大于10%，權(quán)重占比最小的是莖粗，僅為4.79%。

2.5"基于系統(tǒng)聚類法的26種野生石斛聚類分析

為進(jìn)一步研究野生石斛間的親緣關(guān)系，依據(jù)主成分分析得到的13個(gè)主要性狀為指標(biāo)，對(duì)26個(gè)野生石斛資源根據(jù)Euclidean距離，采用Ward法進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析。由圖4可知，在歐氏距離為15.3處可將26種野生石斛資源聚集為4個(gè)類群。第Ⅰ類群為12份資源，占46.15%，由6個(gè)模式石斛組、3個(gè)寡花石斛組、2個(gè)燈籠石斛組和1個(gè)短花石斛組構(gòu)成。第Ⅱ類群為1份資源，占3.85%，為燈籠石斛組。第Ⅲ類群為9份資源，占34.62%，包括4個(gè)模式石斛組、3個(gè)黑毛石斛組和2個(gè)寡花石斛組。第Ⅳ類群為4份資源，占15.38%，由2個(gè)模式石斛組和2個(gè)黑毛石斛組構(gòu)成。在歐氏距離為3.15處，重唇石斛和球花石斛最早聚在一起，親緣關(guān)系最近；在歐氏距離3.26處，高山石斛和兜唇石斛聚在一起；在歐氏距離4.87處，長(zhǎng)距石斛和竹葉石斛聚在一起，并與喉紅石斛聚為一支；在歐氏距離7.76處，束花石斛和流蘇石斛聚在一起；在歐氏距離4.12處，密花石斛和喇叭唇石斛聚在一起；在歐氏距離4.76處，玫瑰石斛和翅萼石斛聚在一起；在歐氏距離6.02處，金釵石斛和大苞鞘石斛聚在一起；在歐氏距離7.62處，串珠石斛和蘇瓣石斛聚在一起，并與細(xì)莖石斛聚為一支；說(shuō)明這些石斛間的親緣關(guān)系較近，鼓槌石斛在歐氏距離為20.51處單獨(dú)聚在一起，與尖刀唇石斛親緣關(guān)系最遠(yuǎn)。

2.6"基于石斛蘭登錄情況和聚類關(guān)系的比較分析

綜合英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)蘭花登錄情況和聚類分析結(jié)果（表3、圖3）可知，第Ⅰ類群中金釵石斛和球花石斛、喇叭唇石斛、報(bào)春石斛、大苞鞘石斛、長(zhǎng)蘇石斛、流蘇石斛、蜻蜓石斛，球花石斛和密花石斛、蜻蜓石斛，流蘇石斛和報(bào)春石斛、蜻蜓石斛，喇叭唇石斛和大苞鞘石斛，長(zhǎng)蘇石斛和蜻蜓石斛，報(bào)春石斛自交等均有雜交種登錄，第Ⅲ類群喉紅石斛和高山石斛，串珠石斛和細(xì)莖石斛間存在雜交種登錄，第Ⅳ類群中翅梗石斛和翅萼石斛存在雜交種登錄。其中，高山石斛和翅梗石斛，尖刀唇石斛和串珠石斛、細(xì)莖石斛間也有雜交種登錄，雖未分在一起但依舊聚在一個(gè)分支上，因此，上述石斛間親緣

關(guān)系近且雜交親和性高。此外，重唇石斛和細(xì)莖石斛，金釵石斛和鼓槌石斛、高山石斛、玫瑰石斛、串珠石斛、尖刀唇石斛、細(xì)莖石斛，大苞鞘石斛和鼓槌石斛、尖刀唇石斛、細(xì)莖石斛，密花石斛和兜唇石斛、細(xì)莖石斛，蜻蜓石斛和鼓槌石斛、細(xì)莖石斛，報(bào)春石斛和兜唇石斛，鼓槌石斛和球花石斛、細(xì)莖石斛間也存在雜交登錄種，雖與本研究表型聚類的結(jié)果存在差異，但多為同組石斛組內(nèi)雜交，親緣關(guān)系較近。以上結(jié)果表明表型聚類的結(jié)果與石斛蘭雜交登錄情況保持了較高的一致性，可為石斛蘭雜交親本選配提供參考。

由表型聚類可知，重唇石斛和球花石斛，高山石斛和兜唇石斛，束花石斛和流蘇石斛，長(zhǎng)距石斛和竹葉石斛，串珠石斛和蘇瓣石斛，玫瑰石斛和翅萼石斛，這些石斛間的親緣關(guān)系較近，但未見(jiàn)有雜交種登錄，可以作為后續(xù)石斛蘭雜交的親本選擇。

3"討論

親本間的雜交親和性是雜交育種成功的前提，朱根發(fā)研究發(fā)現(xiàn)親緣關(guān)系越近，雜交親和性越高^［30］。目前，構(gòu)建植物親緣關(guān)系圖譜的常見(jiàn)方式有形態(tài)學(xué)比較法^［31］、分子標(biāo)記技術(shù)^［32］以及分子系統(tǒng)學(xué)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹^［33］等。此外，蘭科植物雜交育種較其他物種而言具有較為完備的新品種登錄系統(tǒng)，是驗(yàn)證石斛蘭雜交親和性最切實(shí)有力的證據(jù)。通過(guò)檢索英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)蘭花登錄情況可知，金釵石斛、細(xì)莖石斛、蜻蜓石斛、尖刀唇石斛、球花石斛、鼓槌石斛等與其他供試材料雜交親和性高，是較為理想的雜交親本。與前人研究發(fā)現(xiàn)金釵石斛、細(xì)莖石斛、尖刀唇石斛、鼓槌石斛、大苞鞘石斛是春石斛主要原生種親本的結(jié)果^［34］一致，還與鄭寶強(qiáng)等發(fā)現(xiàn)的各組骨干親本結(jié)果^［8］相似。

表型性狀遺傳多樣性是目前最為直觀且簡(jiǎn)便的一種方法，既是基因型與環(huán)境相互作用的結(jié)果，也是基因型差異的表現(xiàn)形式，被廣泛應(yīng)用于各種植物研究^［35-36］，包括荷花^［37］、百合^［38］、石斛^［39-41］、春蘭^［24-25］等。通過(guò)計(jì)算遺傳多樣性等指標(biāo)可知，2個(gè)多樣性指數(shù)的結(jié)果基本一致，表明唇瓣形狀和葉形這2個(gè)性狀多樣性豐富，雜交后代的變異率高，對(duì)后續(xù)選育瓣形和葉形多樣化的品種更具有優(yōu)勢(shì)。育種工作中，不可能逐個(gè)性狀改良，因此綜合遺傳多樣性和市場(chǎng)需求可分離所需觀賞性狀，利用變異程度大、遺傳多樣性高且貢獻(xiàn)率高的性狀，可為培育符合育種趨勢(shì)和市場(chǎng)需求的新品種提供理論支持，從而促進(jìn)石斛新品種的創(chuàng)制和商品化發(fā)展。

Swartz第1次提出可用形態(tài)學(xué)分類法對(duì)蘭科植物進(jìn)行系統(tǒng)分類，距今已有200多年的歷史，期間多名學(xué)者對(duì)部分蘭花進(jìn)行了形態(tài)學(xué)分類^［42］，直至1999年，F(xiàn)reudenstein等對(duì)蘭科98個(gè)屬進(jìn)行了較為系統(tǒng)的形態(tài)學(xué)分類，為后續(xù)蘭花分類提供了一個(gè)可靠的模式^［43］。本研究結(jié)果表明，在歐氏距離為15.3處，可將26種野生石斛資源聚集為4個(gè)類群。其中，重唇石斛和球花石斛最早聚在一起，親緣關(guān)系最近，與朱斌等利用葉綠體基因組CDS序列對(duì)27個(gè)石斛聚類發(fā)現(xiàn)，重唇石斛與球花石斛聚在同一類群的結(jié)果^［44］一致，但與Xiang等將短花石斛組并入模式石斛組的結(jié)果^［45］不同，這可能與供試材料的栽培環(huán)境存在差異有關(guān)，不同地域或栽培環(huán)境導(dǎo)致的變異是表型性狀研究中必須要考慮的點(diǎn)，也可能由于前人研究中并未選取燈籠石斛組石斛作為材料，存在局限性，因此與本研究結(jié)果存在一定差異，但本研究中模式石斛組與短花石斛組、燈籠石斛組、寡花石斛組聚為一類的結(jié)果與其結(jié)論相似。其次，高山石斛和兜唇石斛，玫瑰石斛和翅萼石斛聚在一起的結(jié)果，與前人發(fā)現(xiàn)高山石斛、兜唇石斛、玫瑰石斛、翅萼石斛聚在同一類群的結(jié)果^［46］相似。長(zhǎng)距石斛和竹葉石斛聚在一起，并與喉紅石斛聚為一支，與Wang等利用內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（internal transcribed spacer，ITS）和簡(jiǎn)單序列重復(fù)（inter-simple sequence repeat，ISSR）標(biāo)記對(duì)多種石斛進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)距石斛、喉紅石斛、竹葉石斛聚類為一類的結(jié)論^［47-50］相同。串珠石斛和蘇瓣石斛聚在一起，并與細(xì)莖石斛聚為一支，F(xiàn)eng等利用多種標(biāo)記評(píng)價(jià)了30多種石斛種間親緣關(guān)系，發(fā)現(xiàn)細(xì)莖石斛、蘇瓣石斛、串珠石斛聚為一類^［50］，本試驗(yàn)結(jié)論與之相似。束花石斛和流蘇石斛聚在一起，與Yuan等發(fā)現(xiàn)束花石斛和流蘇石斛在同一類群的結(jié)論^{［48，50］}一致。密花石斛和喇叭唇石斛聚在一起，與前人通過(guò)ISSR標(biāo)記對(duì)16個(gè)石斛聚類發(fā)現(xiàn)密花石斛與喇叭唇石斛聚為同一類群的結(jié)果^［51］相似。Li等研究發(fā)現(xiàn)，金釵石斛和大苞鞘石斛聚類為同一分支，親緣關(guān)系近，雜交可產(chǎn)生子代^［52-53］，與本試驗(yàn)金釵石斛和大苞鞘石斛聚在一起的結(jié)果相同。由于地理區(qū)域、研究方法的不同導(dǎo)致上述結(jié)果與前人聚類的結(jié)果存在一定差異，因此綜合英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)蘭花登錄情況驗(yàn)證不同石斛種質(zhì)間的雜交親和性是必要的。

綜合英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)蘭花登錄情況和聚類分析結(jié)果，發(fā)現(xiàn)有39個(gè)組合雜交成功且在表型聚類中顯示近緣關(guān)系，聚類結(jié)果與石斛蘭雜交登錄情況保持較高的一致性，其余35個(gè)雜交登錄種雖與聚類結(jié)果存在區(qū)別但多為同組石斛組內(nèi)雜交，因此，表型聚類可對(duì)后續(xù)石斛蘭雜交親本選配提供參考。由表型聚類可知，重唇石斛和球花石斛，高山石斛和兜唇石斛，束花石斛和流蘇石斛，長(zhǎng)距石斛和竹葉石斛，串珠石斛和蘇瓣石斛，玫瑰石斛和翅萼石斛間的親緣關(guān)系較近，但未見(jiàn)有雜交種登錄，可能與目前的育種趨勢(shì)存在差異有關(guān)，即耐寒、小型以及豐富花色的育種趨勢(shì)，也可能與種質(zhì)資源間的雜交親和性高低有關(guān)，因此可作為后續(xù)育種親本考慮^{［8，54］}。

4"結(jié)論

綜合聚類結(jié)果與雜交登錄情況可知，有39個(gè)組合雜交成功且在表型聚類中顯示近緣關(guān)系，表型聚類結(jié)果與石斛蘭雜交登錄情況保持較高的一致性。其中金釵石斛、細(xì)莖石斛、蜻蜓石斛、鼓槌石斛等與其他供試石斛雜交親和性高，是較理想的雜交親本。重唇石斛和球花石斛，高山石斛和兜唇石斛，束花石斛和流蘇石斛，長(zhǎng)距石斛和竹葉石斛，串珠石斛和蘇瓣石斛，玫瑰石斛和翅萼石斛間的親緣關(guān)系較近，但未見(jiàn)有雜交種登錄，可作為后續(xù)雜交親本考慮。

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