吳雯丹 陳洪 黃桂瓊

摘要 目的： 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討鉤藤.桑寄生治療原發(fā)性高血壓的潛在作用機制。 方法： 通過中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺（TCMSP）檢索并篩選出鉤藤、桑寄生藥對的藥物活性成分及作用靶點。利用基因名片數(shù)據(jù)庫（GeneCards）及DisGeNET數(shù)據(jù)庫篩選原發(fā)性高血壓的疾病靶點。利用韋恩平臺（Venny）取活性成分作用靶點和疾病靶點交集，得到共同靶點。通過Cytoscape 3.9.1軟件構(gòu)建“藥物.活性成分.靶點.疾病”網(wǎng)絡(luò)。通過STRING數(shù)據(jù)庫構(gòu)建蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)；利用Cytoscape CentisCape 2.2插件提取核心靶點進行分析，并構(gòu)建“有效成分.核心靶點”網(wǎng)絡(luò)圖。利用DAVID數(shù)據(jù)庫對核心靶點進行基因本體（GO）和京都基因與基因組百科全書（KEGG）富集分析，并將富集結(jié)果可視化。 結(jié)果： 共篩選出鉤藤.桑寄生的活性成分32個，作用于原發(fā)性高血壓的主要靶點有絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶B1（AKT1）、白細胞介素（IL）.6、腫瘤壞死因子（TNF）、血管內(nèi)皮生長因子A（VEGFA）等；主要集中于晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGE）/糖基化終末產(chǎn)物受體（RAGE）信號通路、脂質(zhì)與動脈粥樣硬化通路、流體剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化通路、TNF信號通路、IL.17信號通路等。 結(jié)論： 鉤藤.桑寄生藥對可通過調(diào)節(jié)AKT1、IL.6、TNF、VEGFA等核心靶點調(diào)控AGE/RAGE、脂質(zhì)和動脈粥樣硬化、流體剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化、TNF、IL.17等多條信號通路，發(fā)揮治療原發(fā)性高血壓的作用。

關(guān)鍵詞 ?原發(fā)性高血壓；鉤藤；桑寄生；網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；作用機制

doi： ?10.12102/j.issn.1672.1349.2024.09.001

Mechanism of Uncaria and Mulberry Parasitism for the Treatment of Essential Hypertension Based on Network Pharmacology

WU Wendan， CHEN Hong， HUANG Guiqiong

Huizhou Hospital， Guangzhou University of Chinese Medicine， Huizhou 516000， Guangdong， China

Corresponding Author ?HUANG Guiqiong， E.mail： hgqiong2005@126.com

Abstract Objective： To explore the potential mechanism of action of uncaria and mulberry parasitism for treating essential hypertension based on network pharmacology. ?Methods： Traditional Chinese medicine（TCM） system pharmacological database（TCMSP） was used to retrieve and screen the active drug components and targets of uncaria and mulberry parasitism.GeneCards and DisGeNET databases were used to search for disease targets of essential hypertension.The intersection of active ingredient components and disease targets were selected by Vennny platform.The “drug.active ingredient.target.disease” network diagram was constructed using Cytoscape 3.9.1 software.The protein interaction（PPI） network was constructed through the STRING online platform.Cytoscape CentisCape 2.2 plug.in was used to extract core targets for analysis and then constructed the “active ingredient.core target” network diagram.The DAVID database was used to perform Gene Ontology（GO） and the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG） enrichment analysis of core targets，and the enrichment results were visualized. ?Results： A total of 32 active ingredients of uncaria and mulberry parasitism were screened，and the main targets of essential hypertension were serine/threonine protein kinase B1（AKT1），interleukin（IL）.6，tumor necrosis factor（TNF） and vascular endothelial growth factor A（VEGFA），which mainly focused on advanced glycation end product（AGE）/receptor for advanced glycation end products（RAGE） signaling pathway，lipid and atherosclerosis pathway，fluid shear stress and atherosclerosis pathway，TNF signaling pathway，IL.17 signaling pathway，etc. ?Conclusion： Uncaria and mulberry parasitism can regulate AGE/RAGE，lipid and atherosclerosis，fluid shear stress，atherosclerosis，TNF，IL.17，and other signaling pathway by regulating AKT1，IL.6，TNF VEGFA and other core targets，and play some role in the treatment of essential hypertension.

Keywords ?essential hypertension; ?uncaria; ?mulberry parasitism; network pharmacology; mechanism

原發(fā)性高血壓（essential hypertension，EH）為體循環(huán)動脈血壓持續(xù)升高的心血管綜合征，同時也屬于 代謝性疾病范疇?！吨袊难芙】蹬c疾病報告2021》指出高血壓患病率呈逐年上升趨勢，目前我國高血壓患病人數(shù)大約有2.45億人，而原發(fā)性高血壓患病率占全部高血壓人群的90%～95% ?［1］ 。因其患病率高、控制率低、患心血管病風險高等特點，已經(jīng)成為世界范圍內(nèi)心腦血管疾病及過早死亡的高風險因素之一 ?［2］ 。血壓的不斷增高往往會使許多重要的組織器官如心、腦、腎、視網(wǎng)膜及血管的功能和結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，同時也會造成代謝功能紊亂。臨床上主要通過西藥控制血壓，長期服用易產(chǎn)生一系列問題。中醫(yī)藥在平穩(wěn)控制原發(fā)性高血壓病人的血壓，改善其臨床癥狀，防止心、腦、肺、腎等重要臟器受損，提高生活質(zhì)量方面發(fā)揮著重要作用。劉巍等 ?［3］ 認為肝腎陰虛為高血壓發(fā)病之本，標為“痰濁”“瘀血”等瘀阻脈絡(luò)，故滋養(yǎng)肝腎降壓是治療原發(fā)性高血壓的關(guān)鍵。鉤藤歸肝經(jīng)，桑寄生屬腎經(jīng)，二者在平肝降壓的同時，又起到了補益肝腎、活血化瘀的作用。鉤藤.桑寄生藥對是惠州市中醫(yī)醫(yī)院陳洪教授臨床治療原發(fā)性高血壓的常用藥對之一，其長期的臨床觀察發(fā)現(xiàn)該藥對輔助西藥治療可平穩(wěn)降壓，同時也可改善頭暈、頭痛、腰膝酸軟等臨床癥狀。王心意等 ?［4］ 分析國醫(yī)大師治療高血壓用藥規(guī)律發(fā)現(xiàn)，鉤藤.桑寄生的用藥頻次為131次，頻率為58.91%?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明

，桑寄生具有一定的抗炎鎮(zhèn)痛、降血壓、降血脂、抗氧化、保護神經(jīng)等藥理作用，在治療炎癥、心腦血管系統(tǒng)疾病方面具有較好的臨床應(yīng)用前景，值得進一步研究 ?［5］ 。研究發(fā)現(xiàn)，鉤藤主要活性成分鉤藤堿、異鉤藤堿、鉤藤總堿均有降壓作用，降壓原理可能是通過抑制血管運動中樞，擴張周圍血管，降低心排血量，減小阻力以達到降低血壓、減慢心率的目的 ?［6］ 。

近年來，中藥單藥及復(fù)方多成分、多靶點、多途徑治療高血壓病及其并發(fā)癥的機制被逐漸揭示，但是鉤藤.桑寄生治療原發(fā)性高血壓的作用機制尚未明確。本研究在現(xiàn)代藥理學(xué)研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，運用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法在分子水平揭示鉤藤.桑寄生與原發(fā)性高血壓之間的關(guān)系，挖掘藥物的有效活性成分，預(yù)測其治療原發(fā)性高血壓的主要靶點及通路，為后續(xù)研究提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 鉤藤.桑寄生主要活性成分篩選及對應(yīng)靶點預(yù)測

分別以鉤藤、桑寄生為檢索詞，以口服生物利用度（OB）≥30%和藥物相似性（DL）≥0.18為篩選條件，在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺（TCMSP）數(shù)據(jù)庫中檢索主要活性成分。然后利用MOL ID號在TCMSP數(shù)據(jù)庫中預(yù)測對應(yīng)靶點，剔除未檢索出相關(guān)靶蛋白的成分。借助UniProt蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫檢索人類相關(guān)基因，檢索條件限定為“Reviewed”“Human”。將上述得到的靶點蛋白與人類相關(guān)基因相映射，獲得藥物的相關(guān)靶點基因。

1.2 疾病相關(guān)靶點的獲取

以“essential hypertension”為檢索詞，檢索基因名片數(shù)據(jù)庫（GeneCards）和DisGeNET數(shù)據(jù)庫中原發(fā)性高血壓的相關(guān)靶點，然后以Score值大于中位數(shù)為臨界值，分別對結(jié)果進行篩選合并、去重，獲得原發(fā)性高血壓相關(guān)靶點。

1.3 交集靶點篩選及韋恩圖的繪制

在Venn 2.1.0平臺上傳藥物和疾病相關(guān)靶點基因名稱，將藥物與疾病相關(guān)靶點取交集，并繪制韋恩圖。

1.4 藥物.有效活性成分.靶點.疾病網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建

將交集靶點與藥物的主要活性成分相映射，獲得有效活性成分；將有效活性成分與交集靶點導(dǎo)入Cytoscape 3.9.1軟件，構(gòu)建“藥物.有效活性成分.靶 點.疾病”網(wǎng)絡(luò)圖，并利用“Network Analyzer”進行 分析。

1.5 交集靶點蛋白互作網(wǎng)絡(luò)關(guān)系及“有效活性成分.核心靶點”網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建

將交集靶點導(dǎo)入STRING在線分析平臺，限定物種為“Homo sapiens”，互作蛋白評分＞0.4，得到蛋白 質(zhì)相互作用（PPI）關(guān)系，將所得數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.9.1 軟件構(gòu)建交集靶點PPI網(wǎng)絡(luò)圖，并進行可視化分析。利用CentisCape 2.2插件計算各節(jié)點的度值（Degree），并以Degree值大于平均值為篩選標準，得到鉤藤.桑寄生治療原發(fā)性高血壓的核心靶點，并構(gòu)建“有效活性成分.核心靶點”網(wǎng)絡(luò)。

1.6 基因本體（GO）功能富集分析與京都基因和基因組百科全書（KEGG）通路富集分析

利用DAVID數(shù)據(jù)庫對交集靶點進行GO功能與KEGG通路富集分析，將物種限定為“Homo sapiens”。以 P ＜0.05為篩選標準對GO結(jié)果進行篩選，并分別將生物過程（BP）、細胞組成（CC）、分子功能（MF）3個條目的前20條結(jié)果導(dǎo)入微生信在線平臺（www.bioinformatics.com.cn）繪制成氣泡圖展示；同時以 P ＜0.05且錯誤發(fā)現(xiàn)率（FDR）＜0.5為限定條件對KEGG結(jié)果進行篩選，并選取相關(guān)通路前20條，同樣通過微生信在線繪圖網(wǎng)站進行可視化展示。

2 結(jié) 果

2.1 鉤藤.桑寄生藥對有效活性成分及靶點預(yù)測結(jié)果

在TCMSP數(shù)據(jù)庫共檢索到111個活性成分，其中鉤藤65個、桑寄生46個。以O(shè)B≥30%、DL≥0.18為篩選標準，剔除未預(yù)測到相關(guān)靶點的有效活性成分（MOL ID：MOL008455），篩選獲得鉤藤有效活性成分32個、桑寄生有效活性成分2個，合并去重后，共獲得32個主要的活性成分。詳見表1。通過TCMSP數(shù)據(jù)庫預(yù)測有效活性成分的靶點，檢索到鉤藤對應(yīng)的靶點792個，桑寄生相關(guān)靶點157個，相對應(yīng)靶點共949個。利用UniProt數(shù)據(jù)庫將獲得的949個靶點蛋白，轉(zhuǎn)換成基因名稱，得到943個主要靶點基因（6個靶蛋白未能找到基因名稱），去除重復(fù)項后得到藥物最終目標靶點209個。

2.2 原發(fā)性高血壓相關(guān)靶點

通過檢索GeneCards和DisGeNET數(shù)據(jù)庫，分別檢索獲得9 132、445個靶點，以Score大于中位數(shù)為界值，篩選合并，刪除重復(fù)靶點后共獲得4 581個疾病相關(guān)靶點。

2.3 鉤藤.桑寄生與原發(fā)性高血壓靶點交集韋恩圖

分別將鉤藤.桑寄生209個相關(guān)靶點基因、原發(fā)性高血壓的4 581個疾病靶點導(dǎo)入至Venny 2.1.0數(shù)據(jù)庫進行分析，獲得182個交集靶點，并制成Venn圖展示（見圖1）。說明鉤藤.桑寄生可能通過這些靶點參與治療原發(fā)性高血壓。

2.4 藥物.有效活性成分.靶點.疾病調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

基于所得數(shù)據(jù)，運用Cytoscape 3.9.1軟件構(gòu)建藥物.有效活性成分.靶點.疾病網(wǎng)絡(luò)關(guān)系（見圖2）。該網(wǎng)絡(luò)關(guān)系圖中共包含216個節(jié)點、867條邊，節(jié)點分別代表鉤藤、桑寄生、有效活性成分、疾病及其共同靶點，而邊則表示相互作用關(guān)系；設(shè)置紅色菱形代表疾病，紫色三角形代表鉤藤.桑寄生，綠色六邊形代表有效活性成分，藍色圓形代表靶點基因。β.谷甾醇、槲皮素為鉤藤與桑寄生共有的活性成分，其中，槲皮素對應(yīng)140個靶點，山柰酚對應(yīng)54個靶點。說明鉤藤.桑寄生是通過多種成分、多種靶點來發(fā)揮平穩(wěn)降壓作用，其中槲皮素、山柰酚、β.谷甾醇可能是核心成分。

2.5 PPI網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建與核心靶點的篩選

將獲得的182個交集靶點上傳至STRING 11.5 數(shù)據(jù)庫，限定物種為“Homo sapiens”，互作蛋白評 分＞0.4，剔除游離節(jié)點，將所得數(shù)據(jù)導(dǎo)入至Cytoscape 3.9.1軟件，構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)（見圖3）。網(wǎng)絡(luò)中包括180個節(jié)點、6 640條邊；利用CentisCape 2.2插件進行分析，得出Degree值，節(jié)點越大，顏色越深，Degree值越高。以Degree值＞36.89為篩選條件，獲得鉤藤.桑寄生治療原發(fā)性高血壓的78個核心靶點（見圖4），并構(gòu)建“有效活性成分.核心靶點”網(wǎng)絡(luò)（見圖5）。78個核心靶點中，蘇氨酸蛋白激酶1（AKT1）、腫瘤蛋白p53（TP53）、白細胞介素（IL）.6、腫瘤壞死因子（TNF）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGFA）、半胱氨酸蛋白酶3（CASP3）位居前列，其Degree值分別為125，113，111，111，106，100，提示這些靶點可能為鉤藤.桑寄生治療原發(fā)性高血壓的關(guān)鍵靶點。

2.6 GO功能富集分析與KEGG通路富集分析

將182個交集靶點導(dǎo)入至DAVID數(shù)據(jù)庫進行GO功能和KEGG通路富集分析。結(jié)果顯示，GO共富集到1 134個結(jié)果，以 P ＜0.05為篩選標準，得到BP條目697條，CC條目79條，MF條目136條；其中BP主要涉及對藥物的反應(yīng)、基因表達的正向調(diào)控、RNA聚合酶Ⅱ?qū)D(zhuǎn)錄的正向調(diào)節(jié)、對細胞外刺激的反應(yīng)等；CC主要涉及細胞外間隙、含蛋白質(zhì)復(fù)合物、質(zhì)膜等；MF主要涉及酶結(jié)合、蛋白質(zhì)結(jié)合和相同的蛋白質(zhì)結(jié)合等。分別選取BP、CC、MF條目前20條制成氣泡圖展示（見圖6～圖8）。KEGG通路富集得到172條結(jié)果，篩選 P ＜0.05且FDR＜0.5的主要通路，共有161條，將前20條通路繪制成氣泡圖展示（見圖9）。進一步分析數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，鉤藤.桑寄生治療原發(fā)性高血壓的靶點主要富集在

糖基化終末產(chǎn)物/糖基化終末產(chǎn)物受體 （AGE/RAGE）、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、TNF、IL.17 等信號通路；疾病相關(guān)通路如脂質(zhì)和動脈粥樣硬 化（lipid and atherosclerosis）、流體剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化（fluid shear stress and atherosclerosis）等，提示鉤藤.桑寄生可能通過以上通路發(fā)揮治療原發(fā)性高血壓的作用。

3 討 論

原發(fā)性高血壓歸屬于中醫(yī)學(xué)“眩暈”“頭痛”等范疇，由于部分原發(fā)性高血壓病人無任何不適，僅以血壓升高為主，故有學(xué)者認為也可歸屬于“脈脹”范疇 ?［7］ 。因情志失調(diào)、飲食失節(jié)、久病過勞、年老體虛等引起肝腎陰虛、肝陽上亢、痰瘀互結(jié)而發(fā)為眩暈、頭痛 ?［8.9］ 。其病位多在肝、腎，病機特點為本虛標實。因此，鉤藤、桑寄生二者配伍，共奏滋腎養(yǎng)肝之功，可有效調(diào)節(jié)機體陰陽，控制血壓。

本研究分析顯示，鉤藤.桑寄生治療原發(fā)性高血壓的有效活性成分主要為槲皮素、β.谷甾醇和山柰酚等，說明這些有效活性成分可能是核心成分。臨床研究發(fā)現(xiàn)，高血壓與氧化應(yīng)激、血管內(nèi)皮功能障礙、慢性炎癥、胰島素抵抗、糖脂代謝紊亂密切相關(guān) ?［10.11］ 。其中，氧化應(yīng)激和慢性炎癥是引起血管內(nèi)皮損傷和血管重構(gòu)硬化的主要原因 ?［12］ 。內(nèi)皮受損、炎癥與氧化應(yīng)激三者密切相關(guān)。研究證實，抗氧化應(yīng)激能夠減輕血管內(nèi)皮損傷，促進血管重塑，減少高血壓病的發(fā)生 ?［13］ 。血管內(nèi)皮細胞通過合成和釋放血管平滑肌舒張因子一氧化氮（NO）或收縮因子內(nèi)皮素.1（ET.1）從而維持血管舒縮平衡，而內(nèi)皮功能障礙引起血管舒縮失常是高血壓的重要特征。還原型輔酶Ⅱ（NADPH）氧化酶（NOX）是體內(nèi)促進氧自由基（ROS）生成的底物，王敏等 ?［14］ 研究發(fā)現(xiàn)，槲皮素及其代謝產(chǎn)物可通過抑制血管NOX活性，減少ROS生成，抵抗氧化損傷，從而抑制血管內(nèi)皮氧化刺激，提高血管抗氧化能力，預(yù)防和治療高血壓引起的血管肥厚性重構(gòu)。與此同時，可有效下調(diào)抑制性κB激酶β（IKKβ）與核因子.κB（NF.κB）的磷酸化水平，降低IL.6和TNF.α的蛋白合成，從而發(fā)揮抑制內(nèi)皮炎性反應(yīng)的功能。因此，槲皮素可能通過抗炎、抗氧化應(yīng)激從而改善內(nèi)皮功能等多種生物活性過程參與治療高血壓病。研究發(fā)現(xiàn)，β.谷甾醇可通過抗炎、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝等途徑調(diào)節(jié)血壓 ?［15］ ，這可能與β.谷甾醇抑制MAPK等炎癥信號相關(guān)通路的活化，降低IL.6、TNF.α等炎性細胞因子的分泌和表達水平 ?［16］ ，從而影響原發(fā)性高血壓發(fā)生發(fā)展的病理過程有關(guān)。山柰酚具有廣泛的藥理活性，包括抗氧化、抗炎、心臟保護、改善血脂和葡萄糖耐量等 ?［17.18］ ，其可通過降低炎性因子如TNF.α、IL.1β和細菌內(nèi)毒素對血管內(nèi)皮細胞的刺激，減少血管細胞黏附分子.1（VCAM.1）、細胞間黏附分子.1（ICAM.1）和內(nèi)皮細胞選擇素等黏附分子的表達，阻止動脈粥樣硬化斑塊的形成和進一步發(fā)展 ?［19］ 。進一步證實鉤藤.桑寄生藥對可能通過槲皮素、β.谷甾醇和山柰酚等有效活性成分參與治療原發(fā)性高血壓。

本研究發(fā)現(xiàn)，鉤藤.桑寄生調(diào)控原發(fā)性高血壓的核心靶點主要是AKT1、IL.6、TNF、VEGFA、TP53等，這些靶點主要涉及細胞增殖與凋亡、炎癥應(yīng)答、血管內(nèi)皮生長因子，與目前研究發(fā)現(xiàn)的原發(fā)性高血壓發(fā)病機制密切相關(guān)。慢性炎癥通過損傷血管內(nèi)皮，引起內(nèi)皮功能障礙，最終導(dǎo)致血管重塑阻力增加而血壓升高 ?［20］ 。AKT1參與代謝、增殖、細胞存活和凋亡等多種生物學(xué)過程，對炎癥反應(yīng)的激活至關(guān)重要 ?［21］ 。也有研究認為高血壓的發(fā)生機制與巨噬細胞極化相關(guān) ?［22］ 。脂多糖（LPS）等外來因素激活Toll樣受體4（TLR4）信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，刺激巨噬細胞表達并向M1轉(zhuǎn)化，使更多的TNF、IL.17等炎性細胞因子，促進血管炎癥反應(yīng)，對高血壓的發(fā)展起促進作用 ?［23］ 。而研究發(fā)現(xiàn)，磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/AKT1信號通路可通過影響巨噬細胞極化 ?［24］ 、脂質(zhì)代謝 ?［25］ 、自噬 ?［26］ 等多種功能參與治療原發(fā)性高血壓。

通過分析GO條目可以發(fā)現(xiàn)，鉤藤.桑寄生在氧化應(yīng)激的反應(yīng)、細胞外刺激的反應(yīng)、基因表達的正向調(diào)控、RNA聚合酶Ⅱ?qū)D(zhuǎn)錄的正向調(diào)節(jié)等方面具有特異性作用。這些生物過程均與氧化應(yīng)激、炎癥應(yīng)答及代謝調(diào)節(jié)相關(guān)。對182個交集靶點進行KEGG通路分析，在剔除不相關(guān)的信號通路后，發(fā)現(xiàn)鉤藤.桑寄生主要可能通過脂質(zhì)和動脈粥樣硬化通路、流體剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化通路以及一些炎癥相關(guān)通路，包括AGE/RAGE信號通路、MAPK、TNF信號通路、IL.17信號通路等途徑發(fā)揮對原發(fā)性高血壓的作用。

脂質(zhì)和動脈粥樣硬化、流體剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化兩條信號通路主要參與動脈粥樣硬化斑塊的形成與發(fā)展。血流剪切應(yīng)力代表血液流動在血管壁內(nèi)皮表面施加的摩擦力，在血管生物學(xué)中起著核心作用，并有助于動脈粥樣硬化的進展。研究表明，在血流紊亂的動脈區(qū)域，低血流剪切應(yīng)力通過激活PI3K/AKT信號通路，抑制內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）的合成來降低NO的生物利用度，從而誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞分泌內(nèi)皮素、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶、炎癥介質(zhì)等，促進細胞增生、脂質(zhì)蓄積和白細胞黏附，使內(nèi)皮細胞受損，導(dǎo)致動脈粥樣硬化的發(fā)生。因此，低血流剪切應(yīng)力可誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞功能紊亂，分泌內(nèi)皮素、炎性介質(zhì)等因子，促使動脈粥樣硬化的發(fā)生及斑塊形成。另外，低的和振蕩的內(nèi)皮剪切應(yīng)力還可通過復(fù)雜的機械接收和機械轉(zhuǎn)導(dǎo)過程激活細胞因子介導(dǎo)的NF.κB信號通路，從而誘導(dǎo)促動脈粥樣硬化基因的表達，致動脈粥樣硬化內(nèi)皮表型和早期動脈粥樣硬化斑塊的形成 ?［27］ 。低血流剪切應(yīng)力同時可導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白（SREBPs）持續(xù)激活，上調(diào)編碼低密度脂蛋白（LDL）受體、膽固醇合成酶和脂肪酸合成酶的基因表達，導(dǎo)致內(nèi)皮細胞對LDL的參與和合成增加，最終促進LDL在內(nèi)皮下蓄積。活化的SREBPs還能誘導(dǎo)IL.18，在局部炎癥過程中發(fā)揮額外的作用 ?［28］ 。氧化型低密度脂蛋白（ox.LDL）是導(dǎo)致動脈粥樣硬化、高血壓病的危險因素 ?［29］ 。脂質(zhì)和動脈粥樣硬化通路可促進LDL的攝取、合成以及滲入內(nèi)膜下，并促進氧化應(yīng)激增加ox.LDL的產(chǎn)生。因此，脂質(zhì)和動脈粥樣硬化通路、流體剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化通路可通過抑制內(nèi)皮炎癥、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝等抑制動脈粥樣硬化斑塊的形成，從而發(fā)揮抗高血壓的作用。

AGE/RAGE、MAPK、TNF、IL.17信號通路主要參與炎癥反應(yīng)。研究表明，AGE/RAGE信號通路可激活NOX氧化酶，減少內(nèi)皮eNOS表達和NO生成，使體內(nèi)活性氧產(chǎn)生增多，誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞釋放多種炎性因子，從而引發(fā)血管內(nèi)皮炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激；還可激活 MAPK信號通路，使NF.κB磷酸化，導(dǎo)致ET.1、 ICAM.1、E.選擇素和組織因子等的表達增加，上調(diào)氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)，誘發(fā)內(nèi)皮功能障礙 ?［30］ 。研究表明，AGEs可通過激活巨噬細胞中CD 36 分子介導(dǎo)ox.LDL內(nèi)吞，減少膽固醇向高密度脂蛋白轉(zhuǎn)化，進而影響脂質(zhì)代謝的動態(tài)平衡，最終導(dǎo)致巨噬細胞在內(nèi)脂質(zhì)大量蓄積，形成泡沫細胞，進而引發(fā)血管炎癥和血管內(nèi)皮細胞增殖，導(dǎo)致動脈粥樣硬化和血管功能障礙 ?［31］ 。AGEs與受體RAGE結(jié)合，相互作用激活下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，如細胞 內(nèi)氧自由基、MAPK和細胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK）1/2， 促使相關(guān)基因表達及細胞內(nèi)ROS大量生成，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激的發(fā)生 ?［32］ 。TNF、IL.17在參與炎癥反應(yīng)的調(diào)控過程中能夠引起血管內(nèi)皮細胞炎癥性病理損害，進而直接或間接地導(dǎo)致血壓升高。

胰島素抵抗引起的血管內(nèi)皮細胞受損、脂質(zhì)代謝紊亂等病理變化與高血壓的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，Janus激酶（JAK）/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子（STAT）信號通路在全身炎癥反應(yīng)和胰島素抵抗過程 中發(fā)揮重要作用 ?［33］ 。JAK/STAT信號通路是AGE/RAGE 的下游通路，其可調(diào)控體內(nèi)各種細胞因子、激素和生長因子的下游介質(zhì)，可調(diào)節(jié)能量消耗、胰島素敏感性等多種代謝過程，是治療代謝綜合征、糖尿病的有效靶點。AGE/RAGE信號通路的激活可導(dǎo)致炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、血管平滑肌的細胞代謝。于嘉祥等 ?［34］ 研究證明，通過抑制AGE/RAGE通路中的AGEs、RAGE等相關(guān)蛋白的表達，可以發(fā)揮抗炎、抑制氧化應(yīng)激的作用，進而改善胰島素抵抗，起到預(yù)防高血壓的作用。上述研究表明，鉤藤.桑寄生中的有效活性成分可能通過以上途徑調(diào)控炎癥反應(yīng)、抗氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)內(nèi)皮功能、改善糖脂代謝等方面參與治療原發(fā)性高血壓。

4 小 結(jié)

綜上所述，本研究推測鉤藤.桑寄生可能通過槲皮素、β.谷甾醇和山柰酚等核心成分，作用于AKT1、IL.6、TNF、TP53等核心靶點，通過脂質(zhì)和動脈粥樣硬化、流體剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化、AGE/RAGE、MAPK、TNF、IL.17等核心通路，發(fā)揮治療原發(fā)性高血壓的作用。本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)揭示了鉤藤.桑寄生多成分、多靶點、多通路聯(lián)合作用調(diào)控血壓的潛在機制，為后續(xù)研究鉤藤.桑寄生提供一定的理論依據(jù)。

參考文獻：

［1］ ?馬麗媛， 王增武，樊靜，等.《中國心血管健康與疾病報告2021》關(guān)于中國高血壓流行和防治現(xiàn)狀［J］.中國全科醫(yī)學(xué)，2022，25（30）：3715.3720.

［2］ ?YIN R Y， YIN L S，LI L， et al. Hypertension in China：burdens，guidelines and policy responses：a state.of.the.art review［J］.Journal of Human Hypertension，2022，36：126.134.

［3］ ?劉巍， 熊興江，王階.論六味地黃丸在高血壓病治療中的運用［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2013，28（11）：3329.3333.

［4］ ?王心意， 鞠建慶，徐璇，等.基于數(shù)據(jù)挖掘的國家級名老中醫(yī)治療高血壓用藥規(guī)律研究［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2020，18（17）：2753.2758.

［5］ ?管俊， 崔瑛.桑寄生藥理作用及臨床應(yīng)用研究進展［J］.河北中醫(yī)，2017，39（3）：460.463.

［6］ ?謝林虎， 王華東，宋丹華，等.鉤藤堿對心血管系統(tǒng)的藥理作用研究進展［J］.科技視界，2017（1）：65.66.

［7］ ?王清海， 陶軍.創(chuàng)新中醫(yī)脈脹理論，推動高血壓中西醫(yī)結(jié)合防治［J］.中華高血壓雜志，2018，26（2）：123.125.

［8］ ?孟醒， 熊興江.《高血壓中醫(yī)診療專家共識》解讀［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2022，28（11）：192.205.

［9］ ?劉如松， 嚴萍.從肝腎陰虛論治高血壓性眩暈［J］.中外醫(yī)學(xué)研究，2022，20（29）：173.176.

［10］ ?萬基偉， 樊小農(nóng)，王舒，等.氧化應(yīng)激與高血壓發(fā)病機制研究［J］.中醫(yī)學(xué)報，2015，30（1）：101.104.

［11］ ?丁存濤， 周亞群，孫希鵬，等.糖脂代謝對原發(fā)性高血壓病人血管內(nèi)皮功能的影響［J］.首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2017，38（3）：401.405.

［12］ ?FRANCO C， SCIATTI E，F(xiàn)AVERO G， et al. Essential hypertension and oxidative stress：novel future perspectives［J］.International Journal of Molecular Sciences，2022，23（22）：14489.

［13］ ?SINHA N， DABLA P K.Oxidative stress and antioxidants in hypertension..a current review［J］.Current Hypertension Reviews，2015，11（2）：132.142.

［14］ ?王敏， 劉保林，國旭丹.槲皮素及其代謝物抑制氧化應(yīng)激與炎癥［J］.食品科學(xué)，2013，34（15）：256.260.

［15］ ?肖志彬， 劉小雷，成日青，等.β.谷甾醇對阿司匹林致胃黏膜損傷副作用及其藥理作用的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2016，22（1）：148.152.

［16］ ?陳元堃， 曾奧，羅振輝，等.β.谷甾醇藥理作用研究進展［J］.廣東藥科大學(xué)學(xué)報，2021，37（1）：148.153.

［17］ ?OCHIAI A， BEN OTHMAN M，SAKAMOTO K.Kaempferol ameliorates symptoms of metabolic syndrome by improving blood lipid profile and glucose tolerance［J］.Bioscience，Biotechnology，and Biochemistry，2021，85（10）：2169.2176.

［18］ ?ASHRAFIZADEH M ，TAVAKOL S，AHMADI Z， et al. Therapeutic effects of kaempferol affecting autophagy and endoplasmic reticulum stress［J］.Phytotherapy Research，2020，34（5）：911.923.

［19］ ?CRESPO I， GARCA.MEDIAVILLA M V，GUTIRREZ B， et al. A comparison of the effects of kaempferol and quercetin on cytokine.induced pro.inflammatory status of cultured human endothelial cells［J］.The British Journal of Nutrition，2008，100（5）：968.976.

［20］ ?徐騰飛， 劉巍.高血壓與炎癥反應(yīng)的關(guān)系［J］.國際免疫學(xué)雜志，2013，36（5）：347.350.

［21］ ?張玉潔， 裴麗霞，周俊靈，等.電針調(diào)節(jié)AKT/NF.κB信號通路炎癥反應(yīng) 修復(fù)受損腸黏膜屏障的機制研究［J］.中醫(yī)藥信息，2021，38（7）：9.17.

［22］ ?陳達. 高血壓發(fā)病機制研究進展［J］.醫(yī)學(xué)理論與實踐，2020，33（22）：3722.3724.

［23］ ?張群輝， 馬駿，郭琰，等.巨噬細胞極化在心血管疾病中的作用及應(yīng)用研究進展［J］.現(xiàn)代免疫學(xué)，2020，40（1）：52.56.

［24］ ?阮靜瑤， 陳必成，張喜樂，等.巨噬細胞M1/M2極化的信號通路研究進展［J］.免疫學(xué)雜志，2015，31（10）：911.917.

［25］ ?王曉卿. PI3K/AKT信號通路對動脈粥樣硬化的調(diào)節(jié)作用及其機制的研究［D］.大連：大連醫(yī)科大學(xué)，2015.

［26］ ?柳鵬， 陳祺，葛嘉媛，等.自噬對巨噬細胞極化的影響及其與慢性炎癥性疾病的關(guān)系［J］.臨床急診雜志，2018，19（10）：719.722.

［27］ ?張焰， 馬虹，鄭振聲.血管內(nèi)皮細胞的剪切應(yīng)力信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制與動脈粥樣硬化［J］.中國動脈硬化雜志，2005，13（4）：513.516.

［28］ ?CHATZIZISIS Y S， COSKUN A U，JONAS M， et al. Role of endothelial shear stress in the natural history of coronary atherosclerosis and vascular remodeling：molecular，cellular，and vascular behavior［J］.Journal of the American College of Cardiology，2007，49（25）：2379.2393.

［29］ ?樊碧嬈， 姚偉娟.氧化型低密度脂蛋白受體在動脈粥樣硬化發(fā)病機制中的作用［J］.中國病理生理雜志，2020，36（10）：1897.1901.

［30］ ?KAY A M， SIMPSON C L，JR STEWART J A.The role of AGE/RAGE signaling in diabetes.mediated vascular calcification［J］.Journal of Diabetes Research，2016，2016：6809703.

［31］ ?ISODA K， FOLCO E J，SHIMIZU K， et al. AGE.BSA decreases ABCG1 expression and reduces macrophage cholesterol efflux to HDL［J］.Atherosclerosis，2007，192（2）：298.304.

［32］ ?MANIGRASSO M B， JURANEK J，RAMASAMY R， et al. Unlocking the biology of RAGE in diabetic microvascular complications［J］.Trends in Endocrinology and Metabolism，2014，25（1）：15.22.

［33］ ?王冠怡， 許嵐.胰島素抵抗與高血壓的關(guān)系［J］.國際內(nèi)分泌代謝雜志，2013，33（1）：36.39.

［34］ ?于嘉祥， 張瀚文，楊宇峰，等.基于AGEs.RAGE信號通路研究中藥復(fù)方益糖康改善大鼠骨骼肌胰島素抵抗的作用機制［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2022，40（6）：25.30.

（收稿日期：2023.04.25）

（本文編輯 鄒麗）