黃林家 陳良鳳 王憲耀 趙奕懷 林明祥 蔡銳濤

急性呼吸道感染的傳播速度快且發(fā)病率高, 是兒童常見(jiàn)感染性疾病。呼吸道感染主要源于病毒、細(xì)菌,以及真菌等病原體。近年來(lái), 由于病原體不斷發(fā)生變異以及抗菌藥物的濫用, 導(dǎo)致病原體譜變化, 兒童呼吸道感染尤為突出［1］。呼吸道病原體的流行存在顯著的地域、季節(jié)流行特征, 不同地區(qū)、季節(jié)的流行特征存在差異。了解兒童呼吸道感染病原學(xué)特點(diǎn)和流行特征,及時(shí)準(zhǔn)確的進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè), 能夠?yàn)榕R床工作診治提供重要依據(jù)。進(jìn)行呼吸道感染病原學(xué)檢測(cè), 能夠?yàn)榕R床診療提供指導(dǎo)［2］。為了解兒童呼吸道感染在粵東地區(qū)的流行特征, 本研究采用RT-PCR 及多重PCR 技術(shù),選取2019～2022 年上述地區(qū)呼吸道感染患兒, 對(duì)15 種常見(jiàn)病原體進(jìn)行檢測(cè)分析, 旨在為臨床診療提供參考依據(jù), 具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2019 年5 月～2022 年10 月期間于汕頭市中心醫(yī)院就診的急性呼吸道感染患兒的咽拭子標(biāo)本3052 份, 其中陽(yáng)性 2714 份, 陰性338 份, 提取病原體核酸, 覆蓋汕頭、揭陽(yáng)、潮州、汕尾、梅州五市,其中陽(yáng)性樣本中男1643 例(60.5%), 女1071 例(39.5%),男女比例為1∶0.65；0～1 歲1290 例, 1～3 歲875 例,3～6 歲342 例, 6～14 歲207 例；上呼吸道感染1413 例,下呼吸道感染1301 例；就診時(shí)體溫37.5～39.9℃, 平均體溫(38.75±1.06)℃。本研究經(jīng)汕頭市中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)［審批文號(hào)：(2023)科研017 號(hào)］, 并且監(jiān)護(hù)人對(duì)患兒的診治均知情同意。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 呼吸道感染根據(jù)第8 版《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》診斷［3］：①滿足急性咽炎、急性喉炎、急性扁桃體炎、急性會(huì)厭炎等臨床癥狀及體征, 可伴肌肉疼痛、疲乏、出汗等全身癥狀, 并排除變應(yīng)性鼻炎及急性傳染病等所致的相似癥狀及體征, 即可診斷為上呼吸道感染；②滿足咳嗽、咳痰、痰粘稠等癥狀,肺部可聞及濕啰音, 可伴發(fā)熱, 經(jīng)肺部X 線片、CT 檢查可見(jiàn)支氣管或肺部有炎性浸潤(rùn)性病變, 結(jié)合血常規(guī)、病原學(xué)等檢查, 并排除其他系統(tǒng)炎性疾病或肺結(jié)核等傳染病所致的相似癥狀及體征, 即可診斷為下呼吸道感染。

1.3 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)；②發(fā)病至就診時(shí)間1～5 d；③伴咽痛、咳嗽、咳痰、發(fā)熱等癥狀, 或可伴肌肉酸痛、納差、乏力等全身性癥狀。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肺結(jié)核、猩紅熱、麻疹、手足口病等傳染病；②其他系統(tǒng)炎性疾病所致的類似呼吸道感染癥狀及體征；③臨床資料缺失。

1.4 方法 入院后2 h 內(nèi), 取無(wú)菌拭子采集扁桃體及后咽雙側(cè)部位的分泌物, 將拭子置入含培養(yǎng)液的無(wú)菌小瓶中, 標(biāo)記后, 置于-20℃中待檢。記錄患兒臨床資料, 采用呼吸道病原菌核酸檢測(cè)試劑盒, 應(yīng)用RT-PCR、PCR 技術(shù), 在微流控碟式芯片上進(jìn)行反應(yīng),摻入熒光染料, 進(jìn)行熒光分析(實(shí)時(shí)), 進(jìn)行靶基因擴(kuò)增、檢測(cè)。在汕頭市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科運(yùn)用RTisochip TM-A恒溫?cái)U(kuò)增微流控芯片核酸分析儀以及配套軟件, 完成該項(xiàng)檢測(cè)。

1.5 觀察指標(biāo) 檢測(cè)15 種病原體, 包括腺病毒、博卡病毒、巨細(xì)胞病毒、EB、肺炎支原體、百日咳桿菌、肺炎鏈球菌、卡他莫拉菌、流感嗜血桿菌、鼻病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、人偏肺病毒、乙型流感病毒。按檢測(cè)結(jié)果分為單純DNA 病毒、單純RNA 病毒組、單純細(xì)菌組、單純肺炎支原體組、混合DNA 和RNA 病毒組、混合病毒和細(xì)菌組、混合肺炎支原體和病毒或細(xì)菌組。分析兒童呼吸道感染病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果、各組的性別構(gòu)成情況, 比較各年齡段兒童呼吸道病原體檢測(cè)陽(yáng)性情況、月份分布情況。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)或Fisher 檢驗(yàn)。計(jì)量資料以( x-±s)表示, 用t 檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 呼吸道感染患兒的流行特征 呼吸道感染患兒的咽拭子標(biāo)本3052 份, 其中陽(yáng)性2714 份, 陰性338 份,呼吸道感染陽(yáng)性患兒的性別比例、年齡分布、疾病類型、月份分布和就診時(shí)體溫與呼吸道感染陰性患兒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 呼吸道感染患兒的流行特征［n(%), ±s］

表1 呼吸道感染患兒的流行特征［n(%), ±s］

組別類別例數(shù)陽(yáng)性(n=2714)陰性(n=338)t/χ2P性別男18251643(90.0)182(10.0)5.5990.018女12271071(87.3)156(12.7)年齡分布0～1 歲13851290(93.1)95(6.9)68.9610.000 2～3 歲989875(88.5)114(11.5)4～6 歲420342(81.4)78(18.6)7～14 歲258207(80.2)51(19.8)疾病類型上呼吸道感染16181413(87.3)205(12.7)8.8990.025下呼吸道感染14341301(90.7)133(9.3)月份分布1～3 月530453(85.5)77(14.5)9.3200.041 4～6 月757670(88.5)87(11.5)7～9 月1053947(89.9)106(10.1)10～12 月712644(90.4)68(9.6)就診時(shí)體溫(℃)38.75±1.0638.23±0.698.7890.000

2.2 呼吸道感染患兒病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果 2714 例呼吸道感染患兒中, 檢出率最高的為巨細(xì)胞病毒759 例, 檢出率為28.0%。見(jiàn)表2。

表2 2714 例呼吸道感染患兒病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果(n, %)

2.3 各組的性別構(gòu)成情況分析 2714 例呼吸道感染患兒中, 男性1643 例(60.5%), 女性1071 例(39.5%)。同一病原體的男性發(fā)病率明顯高于女性。見(jiàn)表3。

表3 各組的性別構(gòu)成情況分析［n(%)］

2.4 各年齡段兒童呼吸道病原體檢測(cè)陽(yáng)性情況比較 單純肺炎支原體感染發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)逐漸增加；單純DNA 病毒、單純RNA 病毒、單純細(xì)菌、混合DNA 和RNA 病毒、混合病毒和細(xì)菌發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)逐漸降低。見(jiàn)表4。

表4 各年齡段兒童呼吸道病原體檢測(cè)陽(yáng)性情況比較［n(%)］

2.5 各組的月份分布情況比較 單純DNA 病毒組、單純RNA 病毒組、單純肺炎支原體組、混合DNA 和RNA 病毒組、混合肺炎支原體和病毒或細(xì)菌組7～9 月發(fā)病率最高, 單純細(xì)菌組、混合病毒和細(xì)菌組4～6 月發(fā)病率最高。見(jiàn)表5。

表5 各組的月份分布情況比較［n(%)］

3 討論

急性呼吸道感染包含急性上、下呼吸道感染兩種情況, 其中急性上呼吸道感染包括急性咽峽炎、扁桃體炎、喉炎等疾病［4-6］, 急性下呼吸道感染包括急性支氣管炎、支氣管肺炎、毛細(xì)支氣管炎、喘息性肺炎、社區(qū)獲得性肺炎等疾?。?-10］。急性呼吸道感染是兒童的常見(jiàn)病、多發(fā)病, 嚴(yán)重影響患兒的身體健康, 給家庭和社會(huì)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)［11-13］。對(duì)于急性呼吸道感染, 權(quán)威部門分析其臨床表現(xiàn)和病原學(xué)等方面特征,總結(jié)其病原學(xué)特點(diǎn), 制定了相關(guān)規(guī)范和指南等, 同時(shí)也對(duì)病原學(xué)做了說(shuō)明［14-16］。導(dǎo)致急性呼吸道感染的病原體可為一種或多種, 且病原體在不斷變化, 細(xì)菌耐藥現(xiàn)象較多［17］。

劉芮等［18］收集分析了12881 例呼吸道感染住院兒童的血清和咽拭子, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)檢出率前 3 位依次為肺炎支原體、呼吸道合胞病毒、副流感病毒3, 男、女肺炎支原體感染陽(yáng)性率有差異, 各年齡段的病原體陽(yáng)性率有差異, 呼吸道合胞病毒、副流感病毒感染主要在0～3 歲, 肺炎支原體感染主要在1～6 歲, 呼吸道病原體感染陽(yáng)性率受季節(jié)影響, 副流感病毒3 感染主要在春、夏季, 肺炎支原體感染主要在秋季, 呼吸道病原體感染主要在冬季。

本研究重點(diǎn)研究分析了急性呼吸道感染的病原學(xué)特征, 根據(jù)病原體檢出結(jié)果, 對(duì)急性呼吸道感染的病原體分布情況進(jìn)行了分析、總結(jié), 并且分為“單純細(xì)菌組、混合肺炎支原體和病毒或細(xì)菌組、混合病毒和細(xì)菌組、單純RNA 病毒組、單純肺炎支原體組、混合DNA 和RNA 病毒組、單純DNA 病毒組”進(jìn)行分析, 以期歸納、總結(jié)各種病原體感染所引起的急性呼吸道感染的特點(diǎn),結(jié)果顯示：居前3 位的病原體為巨細(xì)胞病毒、呼吸道合胞病毒、肺炎鏈球菌；性別差異方面, 比較“單純細(xì)菌組、混合肺炎支原體和病毒或細(xì)菌組、混合病毒和細(xì)菌組、單純RNA 病毒組、單純肺炎支原體組、混合DNA 和RNA 病毒組、單純DNA 病毒組”各病原體組發(fā)病率發(fā)現(xiàn), 男性均比女性高, 考慮與男性患兒更活潑好動(dòng)、交叉感染幾率高相關(guān)；各年齡段兒童呼吸道病原體檢測(cè)陽(yáng)性情況方面, 單純肺炎支原體感染發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)逐漸增加, 6 歲以上感染率占近乎1/2, 單純DNA 病毒、單純RNA 病毒、單純細(xì)菌、混合DNA和RNA 病毒、混合病毒和細(xì)菌發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)逐漸降低；呼吸道病原檢出率與月份的關(guān)系方面, 單純DNA 病毒組、單純RNA 病毒組、單純肺炎支原體組、混合DNA 和RNA 病毒組、混合肺炎支原體和病毒或細(xì)菌組7～9 月發(fā)病率最高, 單純細(xì)菌組、混合病毒和細(xì)菌組4～6 月發(fā)病率最高。

綜上所述, 粵東地區(qū)兒童急性呼吸道感染以巨細(xì)胞病毒為主；發(fā)病率男性均比女性高；單純肺炎支原體感染發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)逐漸增加, 單純DNA 病毒、單純RNA 病毒、單純細(xì)菌、混合DNA 和RNA 病毒、混合病毒和細(xì)菌發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)逐漸降低；7～9 月呼吸道感染首先應(yīng)警惕病毒和肺炎支原體感染, 如果7～9 月呼吸道感染考慮存在細(xì)菌感染, 應(yīng)警惕混合病毒或肺炎支原體感染可能。