陳彩霞 ，馮令枝

（云浮市人民醫(yī)院檢驗科，廣東 云浮 527300）

乙型肝炎病毒感染為慢性乙型肝炎發(fā)生的基礎(chǔ)，可誘導(dǎo)肝臟持續(xù)損傷，如未得到有效控制，可反復(fù)發(fā)作，可導(dǎo)致患者肝臟纖維化，甚至可能發(fā)展為肝硬化病變，嚴重影響患者正常生活。早期識別慢性乙型肝炎肝纖維化并及時治療，對改善患者疾病轉(zhuǎn)歸情況具有重要意義，有利于阻止肝硬化的發(fā)生與發(fā)展。肝穿刺活檢是診斷肝纖維化的“金標準”，但其為創(chuàng)傷性檢查，尋求更簡便易行方法對肝纖維化進行評估具有重要意義[1]。肝纖維化血清標志物及實驗室指標作為無創(chuàng)檢測指標在臨床應(yīng)用廣泛[2]，但是肝纖維化血清標志物在肝纖維化各期的表達狀況、如何根據(jù)血清標志物水平準確判斷患者肝纖維化程度尚未完全明確。因此，本研究旨在探討生化檢驗血清學(xué)指標與慢性乙型肝炎患者肝纖維化分期的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析2021年7月至2023年7月云浮市人民醫(yī)院收治的110 例慢性乙型肝炎患者的臨床資料，將其作為觀察組。其中男性52 例，女性58例；年齡22～84 歲，平均（54.48±7.14）歲；BMI 16.00～27.00 kg/m2；平均（22.51±2.53） kg/m2；病程2～8年，平均（4.42±0.65）年。慢性乙型肝炎患者分組判斷標準[3]：于超聲引導(dǎo)下行肝穿刺，取肝活組織，用甲醛溶液浸泡后送病理檢查。肝纖維化的病理分期包括：S0 期：無肝纖維化；S1 期：匯管區(qū)纖維化擴大，局限于竇周、小葉內(nèi)纖維化；S2 期：匯管區(qū)周圍纖維化，形成纖維間隔，大部分小葉結(jié)構(gòu)保留；S3 期：大量纖維間隔，致小葉結(jié)構(gòu)紊亂，尚無肝硬化；S4 期：肝硬化。以肝臟組織病理檢查結(jié)果為標準將觀察組患者分為S0 組（33 例）、S1～S2 組（41 例）、S3～S4 組（36 例），S0 組患者中男性15 例，女性18 例；年齡22～84 歲，平均（55.33±6.99）歲；BMI 16.00～27.00 kg/m2；平均（22.31±2.59） kg/m2。S1～S2 組患者中男性20 例，女性21 例；年齡21～80歲，平均（54.77±7.08）歲；BMI 16.00～26.00 kg/m2，平均（22.57±2.23） kg/m2。S3～S4 組患者中男性17 例，女性19 例；年齡23～81 歲，平均（53.94±7.23）歲；BMI 17.00～27.00 kg/m2，平均（22.44±2.12） kg/m2。另回顧性分析同期56 例健康體檢者的體檢資料，將其作為對照組，其中男性25 例，女性31 例；年齡21～79 歲，平均（53.11±6.78）歲；BMI 16.00～27.00 kg/m2；平均（22.31±2.55） kg/m2。觀察組4 組患者和對照組研究對象一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），組間可比。診斷標準：慢性乙型肝炎依據(jù)《慢性乙型肝炎防治指南（2019年版）》[4]中的相關(guān)診斷標準。納入標準：①與上述診斷標準符合；②乙肝病毒檢測均為陽性并經(jīng)肝活組織檢查確診；③臨床資料完整。排除標準：①除乙型肝炎外的其他類型病毒性肝炎；②失代償期肝硬化；③合并原發(fā)性肝癌或轉(zhuǎn)移性肝癌。本研究方案已經(jīng)通過云浮市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會部門詳細審核，并在批準通過后實施。

1.2 研究方法采集所有研究對象空腹靜脈血約6 mL，以轉(zhuǎn)速為3000 r/min 進行離心處理15 min，分離血清，采用化學(xué)發(fā)光法檢測所有研究對象的血清透明質(zhì)酸（HA）、層粘連蛋白（LN）、IV 型前膠原（IV-C）、Ⅲ型前膠原（PC Ⅲ）水平；采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測所有研究對象血清缺氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）、巨噬細胞移動抑制因子（MIF）水平。

1.3 觀察指標①比較各組研究對象血清肝纖維化指標HA、 LN、 IV-C、 PC Ⅲ水平。②比較各組研究對象實驗室指標HIF-1α、 MIF 水平。③分析實驗室指標與肝纖維化指標及肝纖維化程度的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS 26.0 統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計量資料經(jīng)S-W 法檢驗證實符合正態(tài)分布且方差齊，以(±s)表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q檢驗；采用Pearson相關(guān)系數(shù)法分析實驗室指標與肝纖維化指標、肝纖維化程度的相關(guān)性。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組研究對象肝纖維化指標比較與對照組比，S0組、 S1～S2 組、 S3～S4 組患者血清HA、 LN、 IV-C、 PC Ⅲ水平均升高，且隨著肝纖維化分期的升高，各指標均逐漸升高，各組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 各組研究對象肝纖維化指標比較(μg/L，±s)

表1 各組研究對象肝纖維化指標比較(μg/L，±s)

注：與對照組比，*P＜0.05；與S0 組比，#P＜0.05；與S1～S2 組比，△P＜0.05。HA：透明質(zhì)酸；LN：層粘連蛋白；IV-C：IV 型前膠原；PC Ⅲ：Ⅲ型前膠原。

組別例數(shù)HALNIV-CPC Ⅲ對照組5620.63±5.398.67±2.286.45±2.267.34±1.81 S0 組3341.22±8.67*25.62±5.54*24.64±6.05*24.46±7.38*S1～S2 組4155.74±9.87*# 31.77±6.59*# 27.88±7.14*# 33.89±6.97*#S3～S4 組36 96.99±10.45*#△ 57.69±8.44*#△ 39.95±8.63*#△ 45.93±7.42*#△F 值606.658524.492236.640339.392 P 值＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05

2.2 各組研究對象實驗室指標比較與對照組比， S0 組、S1～S2 組、 S3～S4 組患者血清HIF-1α、MIF 水平均升高；且隨著肝纖維化分期的升高，實驗室指標逐漸升高，各組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 各組研究對象實驗室指標比較(μg/L， ±s)

注：與對照組比，*P＜0.05；與S0 組比，#P＜0.05；與S1～S2 組比，△P＜0.05。HIF-1α：缺氧誘導(dǎo)因子1α；MIF：巨噬細胞移動抑制因子。

組別例數(shù)HIF-1αMIF對照組5634.63±6.3918.44±5.81 S0 組3345.22±8.67* 29.46±6.38*S1～S2 組4159.87±9.44*# 43.79±8.93*#S3～S4 組36 88.71±11.26*#△ 53.47±11.91*#△F 值291.308151.665 P 值＜0.05＜0.05

2.3 分析實驗室指標與肝纖維化指標及程度的相關(guān)性Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清HIF-1α、 MIF 水平與HA、 LN、 IV-C、 PC Ⅲ及纖維化程度均呈正相關(guān)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表3。

表3 分析實驗室指標與肝纖維化指標、肝纖維化程度的相關(guān)性

3 討論

慢性乙型肝炎肝纖維化患者可表現(xiàn)出乏力、食欲減退、厭油膩、右上腹不適等癥狀，治療難度較大，嚴重影響其預(yù)后，給患者和社會帶來沉重的經(jīng)濟負擔。肝活組織病理檢查存在不能連續(xù)動態(tài)監(jiān)測的缺點，且對機體損傷大，因此，尋找客觀、準確的指標來評價肝纖維化程度已經(jīng)成為研究熱點。

HA 為肝星狀細胞合成的糖胺多糖，肝纖維化過程中合成HA 增加，進入血液循環(huán)達到肝血竇內(nèi)皮細胞降解，肝血竇內(nèi)皮細胞受損導(dǎo)致失去代謝HA 能力，進而使肝臟對血清HA 攝取減少，導(dǎo)致其水平異常升高[5]。LN 屬結(jié)構(gòu)性糖蛋白，存在于基膜的透明層中，為基底膜中特有的非膠原性結(jié)構(gòu)蛋白，與肝纖維化活動程度呈正相關(guān)[6]。IV-C升高反映了肝臟內(nèi)纖維化的程度，其水平在機體血清含量逐漸升高，則病情發(fā)展由慢性肝炎逐漸轉(zhuǎn)化為肝硬化，繼而轉(zhuǎn)化為肝癌[7]。PC Ⅲ水平與肝纖維化病變程度關(guān)系密切，其能夠反映肝纖維合成的狀況及是否處于炎癥活動性，在肝硬化早期有明顯升高[8]。本研究中，與對照組比，S0 組、S1～S2 組、S3～S4 組患者血清HA、LN、IV-C、PC Ⅲ水平均升高，且隨著肝纖維化分期的升高，各指標均逐漸升高，提示慢性乙型肝炎患者肝纖維化程度加重與上述指標密切相關(guān)。

HIF-1α 促進肝纖維化的發(fā)展可能與激活轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）信號通路有關(guān)，研究發(fā)現(xiàn)，HIF-1α 可通過抑制TGF-β 信號通路的激活阻斷TGF-β 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，減少肝臟細胞外基質(zhì)的沉積，降低肝纖維化程度[9]。MIF作為免疫調(diào)節(jié)因子，主要在肝細胞表達，可抑制巨噬細胞游走，其在肝炎患者血清和局部病變中呈現(xiàn)高表達，患者肝纖維化程度與患者MIF 釋放關(guān)系密切[10]。本研究中，與對照組比，S0 組、S1～S2 組、S3～S4 組患者血清HIF-1α、MIF 水平均升高，且隨著肝纖維化分期的升高，實驗室指標變化幅度越大，說明上述實驗室指標水平對于初步判斷慢性乙型肝炎患者肝組織纖維化程度具有一定的意義。

本研究Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清HIF-1α、MIF 水平與HA、LN、IV-C、PC Ⅲ及纖維化程度呈正相關(guān)。分析其原因，慢性乙型肝炎導(dǎo)致的肝纖維化為肝臟細胞外基質(zhì)膠原、蛋白多糖等病理性沉積，HA 反映肝內(nèi)細胞功能，LN 反映肝纖維化，正常肝臟間質(zhì)含少量LN，在纖維化和肝硬化時，肌成纖維細胞增多，大量合成和分泌膠原、LN 等間質(zhì)成分，IV-C 是基底膜的主要成分，PC Ⅲ反映Ⅲ型膠原代謝的活性，上述指標均為纖維化特異性血清學(xué)標志物，在肝臟組織纖維化過程中會逐漸被釋放入血，因此慢性乙型肝炎患者上述指標明顯升高。HIF-1α 對肝纖維化的發(fā)展及肝星形細胞的活化具有重要調(diào)節(jié)作用，其可通過調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶/組織抑制劑基質(zhì)金屬蛋白酶-1 的表達促進肝纖維化；MIF 作為一種參與遲發(fā)性超敏反應(yīng)和多種巨噬細胞功能淋巴因子，能夠抑制巨噬細胞的移動，并參與炎癥及免疫疾病的發(fā)生，抑制MIF 活性能夠抑制周細胞向肌成纖維細胞表型分化，下調(diào)肝纖維化指標的表達[11]。

綜上， 慢性乙型肝炎患者肝纖維化發(fā)生與發(fā)展均與血清HA、LN、IV-C、PC Ⅲ、HIF-1α、MIF 水平的升高密切相關(guān)，且肝纖維化指標及肝纖維化程度均與HIF-1α、MIF水平正相關(guān)，臨床可通過檢測上述指標水平診斷肝纖維病情，防治肝纖維化的發(fā)生與發(fā)展，降低慢性乙型肝炎患者發(fā)生肝纖維化的風(fēng)險。