摘要：【目的】了解香蘇雜交豬組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶P300/CBP結(jié)合因子（KAT2B）基因在組織中的表達(dá)量，篩選其單核苷酸多態(tài)性（Single nucleotide polymorphism，SNP）位點(diǎn)，并分析基因多態(tài)性與生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)性，為香蘇雜交豬新品系培育提供參考依據(jù)?！痉椒ā恳韵闾K雜交豬為研究對(duì)象，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)KAT2B基因在3日齡和6月齡不同組織中的相對(duì)表達(dá)量，通過(guò)直接測(cè)序檢測(cè)KAT2B基因的SNP位點(diǎn)，統(tǒng)計(jì)SNP位點(diǎn)等位基因頻率、基因型頻率、觀測(cè)雜合度（Ho）、期望雜合度（He）、有效等位基因數(shù)（Ne）及平均多肽信息含量（PIC）等，以卡方（χ2）檢驗(yàn)分析基因型是否處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)，分析不同基因型與香蘇雜交豬生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)性?！窘Y(jié)果】實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示，KAT2B基因在心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和背最長(zhǎng)肌6個(gè)組織中均有表達(dá)，與3日齡相比，6月齡KAT2B基因相對(duì)表達(dá)量在肝臟和脾臟組織中極顯著升高（Plt;0.01，下同），在肺臟中極顯著降低。KAT2B基因Exon-2、Exon-14和Exon-15區(qū)域均分別存在1個(gè)外顯子突變，分別為g.36682Ggt;A、g.104540Ggt;T和g.106651Agt;G，3個(gè)SNPs位點(diǎn)PIC均處于中度多態(tài)性水平且Hardy-Weinberg平衡。g.36682Ggt;A位點(diǎn)優(yōu)勢(shì)基因型為GA型，等位基因頻率Ggt;A；g.104540Ggt;T位點(diǎn)優(yōu)勢(shì)基因型為GG型，等位基因頻率Ggt;T；g.106651Agt;G位點(diǎn)優(yōu)勢(shì)基因型為AA型，等位基因頻率Agt;G。關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明，g.36682Ggt;A位點(diǎn)各基因型生長(zhǎng)性狀之間無(wú)顯著差異（Pgt;0.05），g.106651Agt;G位點(diǎn)AA基因型與AG基因型胸深存在顯著差異（Plt;0.05）?！窘Y(jié)論】香蘇雜交豬KAT2B基因在各組織中均有表達(dá)且存在3個(gè)SNPs位點(diǎn)（g.36682Ggt;A、g.104540Ggt;T和g.106651Agt;G），KAT2B基因可作為與香蘇雜交豬生長(zhǎng)性狀相關(guān)的候選基因。

關(guān)鍵詞：香蘇雜交豬；KAT2B基因；實(shí)時(shí)熒光定量PCR；SNPs；生長(zhǎng)性狀

中圖分類(lèi)號(hào)：S828.89文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：2095-1191（2024）05-1463-08

Association between KAT2B gene polymorphisms and growth traits in Xiangsu hybrid pigs

LI Ji-feng，RUAN Yong，JIANG Chuan-mei，XIAO Mei-mei，HUANG Jia-jin，XU Jia-li，XU Hou-qiang*

（Key Laboratory of Animal Genetics，Breeding and Reproduction in the Plateau Mountainous Region，Ministry ofEducation/Guizhou Key Laboratory of Animal Genetics，Breeding and Reproduction/College of Zoology，Guizhou University，Guiyang，Guizhou 550025，China）

Abstract：【Objective】To understand the expression level of K（lysine）acetyltransferase 2B（KAT2B）gene in thetis-sues of Xiangsu hybrid pigs，to select the single nucleotide polymorphism（SNP）site of Xiangsu hybrid pigs，and to ana-lyze the association between gene polymorphism and growth traits，so as to provide reference for breeding new Xiangsu hybrid pigs.【Method】Xiangsu hybrid pigs were selected as the study object.Real-time fluorescence quantitative PCR was used to detect the relative expression of KAT2B gene in different tissues of 3 days and 6 months of age，and the SNP sites of KAT2B gene were detected by direct sequencing.Allele frequency，genotype frequency，heterozygosity（Ho），ex-pected heterozygosity（He），effective allele number（Ne）and average peptide information content（PIC）of SNP sites were measured.Chi-square test（χ2）was used to analyze whether the genotypes were in Hardy-Weinberg equilibrium state.Then analyzed the relationship between different genotypes and growth traits of Xiangsu hybrid pigs.【Result】Real-time fluorescence quantitative PCR results showed that KAT2B gene was expressed in 6 tissues of heart，liver，spleen，lung，kidney and longissimusdorsimuscle.Compared with 3 days of age，the relative expression level of liver and spleen was extremely significantly increased（Plt;0.01，the same below），while the relative expression level of lung was ex-tremely significantly decreased.Exon-2，Exon-14 and Exon-15 regions in KAT2B gene had one exon mutation，which were g.36682Ggt;A，g.104540Ggt;T and g.106651Agt;G，respectively.All the three SNPs sites were in moderate polymor-phism level and Hardy-Weinberg equilibrium.The dominant genotype of g.36682Ggt;A site was GA type，and the allele frequency Ggt;A；the dominant genotype of g.104540Ggt;T site was GG genotype，and the allele frequency Ggt;T；the domi-nant genotype of G.106651Agt;G site was AA，and the allele frequency was Agt;G.The results of association analysis showed that there was no significant difference between genotype and growth traits of g.36682Ggt;A sites（Pgt;0.05），and there was significant difference in chest depth between AA genotype and AG genotype at g.106651Agt;G（Plt;0.05）.【Con-clusion】The KAT2B gene is expressed in all tissues of Xiangsu hybrid pigs and there are three SNPs sites（g.36682Ggt;A，g.104540Ggt;T and g.106651Agt;G），KAT2B gene can be used as a candidate gene related to growth traits of Xiangsuhy-brid pigs.

Key words：Xiangsu hybrid pig；KAT2B gene；real-time fluorescence quantitative PCR；SNPs；growth traits

Foundation items：National Natural Science Foundation of China（31860242）；Guizhou Science and Technology Plan Project［QKHFQ〔2018〕4007（002）］；Guizhou Agricultural Major Industrial Scientific Research Tackling Project（Qianjiaohe KY〔2019〕011）

0引言

【研究意義】從江香豬是我國(guó)特色的地方小型豬種，具有耐粗飼，肉質(zhì)香嫩，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高等優(yōu)點(diǎn)，但存在瘦肉率低，生長(zhǎng)發(fā)育慢等缺點(diǎn)（許厚強(qiáng)，2019）。為改善從江香豬在生長(zhǎng)繁殖上的不足，課題組前期將從江香豬與蘇太豬雜交，培育出香蘇雜交豬新品系（倪萌萌等，2018；阮涌等，2018）。因此，研究香蘇雜交豬與生長(zhǎng)性狀相關(guān)基因多態(tài)性的關(guān)聯(lián)性，對(duì)培育生長(zhǎng)發(fā)育快、肉質(zhì)好、風(fēng)味佳的香蘇雜交豬新品系具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶P300/CBP結(jié)合因子［K（lysine）acetyltransferase 2B，KAT2B］是一種轉(zhuǎn)錄共激活因子，具有乙酰轉(zhuǎn)移酶活性并調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞周期進(jìn)程和分化的作用，參與控制肌源性轉(zhuǎn)錄和分化（Sartorelli et al.，1999；Nagy and Troa，2007），能與組蛋白及其他蛋白結(jié)合形成大蛋白復(fù)合物調(diào)節(jié)組蛋白乙酰化修飾（Jin et al.，2011）。有研究認(rèn)為KAT2B參與骨骼肌分化，在肌生成素啟動(dòng)子中起作用，當(dāng)成肌細(xì)胞退出細(xì)胞周期時(shí)，KAT2B取代HDAC2并使MyoD乙?；?，誘導(dǎo)肌肉基因轉(zhuǎn)錄（Polesskaya et al.，2001；Cho et al.，2015）。KAT2B特異性缺失可顯著降低哺乳動(dòng)物細(xì)胞中組蛋白H3賴(lài)氨酸9（Histone 3 acetylation K9，H3K9）的乙?；―ominique and László，2017），KAT2B介導(dǎo)PLK4賴(lài)氨酸乙酰化負(fù)調(diào)控其激酶活性，從而控制人類(lèi)細(xì)胞中中心體數(shù)量，有助于維持基因組完整性（Fournier et al.，2016）。為研究KAT2A和KAT2B在動(dòng)物體內(nèi)的作用，Tushar等（2018）以斑馬魚(yú)為研究對(duì)象，在其發(fā)育早期階段進(jìn)行基因敲除試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)斑馬魚(yú)心臟和肢體發(fā)育均受到影響。在骨肉瘤細(xì)胞研究中，KAT2B基因沉默可抑制自噬體數(shù)量，其在骨肉瘤癌細(xì)胞中正調(diào)控H3S28ph，通過(guò)靶向ATG5和ATG7調(diào)節(jié)H3S28磷酸化，促進(jìn)骨肉瘤癌細(xì)胞自噬（Kong et al.，2019）。在人成肌細(xì)胞研究中，發(fā)現(xiàn)KAT2B在肌肉分化過(guò)程中可調(diào)節(jié)層粘膠蛋白A/C-HDAC2的結(jié)合，而核纖層蛋白A和法尼化前層蛋白A促進(jìn)KAT2B向核層募集與纖層蛋白A/C結(jié)合，在肌管分化過(guò)程中，蛋白相互作用減少（Santi et al.，2020）。通過(guò)建立B細(xì)胞中缺乏GCN5和KAT2B小鼠模型，發(fā)現(xiàn)小鼠骨髓和外周器官成熟B細(xì)胞水平偏低，證實(shí)GCN5和KAT2B均為體內(nèi)B細(xì)胞發(fā)育所必需（Oksenychetal.，2021）。在KAT2A和KAT2B角質(zhì)形成細(xì)胞自我更新和分化功能研究中，發(fā)現(xiàn)二者之間存在差異，KAT2A基因缺失會(huì)導(dǎo)致表皮分化基因過(guò)早表達(dá)，而KAT2B基因缺失會(huì)導(dǎo)致表皮延遲分化，二者間的相互作用對(duì)動(dòng)物體皮膚傷口正常愈合有重要作用（Walters et al.，2023）?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】KAT2B在哺乳動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育、DNA復(fù)制和修復(fù)、細(xì)胞周期和死亡、肌動(dòng)蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞收縮、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和中心體復(fù)制調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用（Bondy-Chorney et al.，2019）。目前已有研究發(fā)現(xiàn)KAT2B基因是我國(guó)4種主要肉用牛品種生長(zhǎng)性狀相關(guān)基因，可作為肉牛選育的重要分子標(biāo)記（Lin etal.，2022）。而有關(guān)豬KAT2B基因在各組織中的表達(dá)量及其基因多態(tài)性與生長(zhǎng)性狀相關(guān)性鮮有文獻(xiàn)報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】以香蘇雜交豬為研究對(duì)象，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR，計(jì)算KAT2B基因在3日齡及6月齡心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和背最長(zhǎng)肌6個(gè)組織中的相對(duì)表達(dá)量；以直接測(cè)序方法對(duì)KAT2B基因單核苷酸多態(tài)性（Single nucleotide polymorphism，SNP）進(jìn)行鑒定，篩選出KAT2B基因調(diào)控香蘇雜交豬生長(zhǎng)的關(guān)鍵SNP位點(diǎn)，為培育香蘇雜交豬新品系提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

選擇同一飼養(yǎng)條件6月齡香蘇雜交豬164頭，由貴州大學(xué)香豬育種場(chǎng)提供。通過(guò)耳緣靜脈或前腔靜脈采集5 mL血液置于EDTA抗凝管中。測(cè)量并記錄香蘇雜交豬的體重、體長(zhǎng)、體高、胸圍、腹圍、管?chē)?、胸深、胸寬和腿臀圍等生長(zhǎng)數(shù)據(jù)。選擇3日齡和6月齡健康狀況良好、體型大小相近的香蘇雜交豬各3頭，屠宰后采集其心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和背最長(zhǎng)肌組織置于含有RNA保存液的凍存管中，-80℃保存?zhèn)溆?。?dòng)物試驗(yàn)由貴州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，批準(zhǔn)號(hào)EAE-GZU-2022-E033。

主要試劑：血液DNA提取試劑盒、StarScriptⅡRT Mix with gDNA Remover試劑盒和2×RealStar Fast SYBR qPCR Mix試劑盒購(gòu)自上海西寶生物科技有限公司；2×Hieff?PCR Master Mix購(gòu)自上海翌圣生物科技有限公司；DL2000 DNA Marker和核酸染料購(gòu)自上海索萊寶生物科技有限公司。主要儀器設(shè)備：NanoDrop 2000超微量分光光度計(jì)和RC-6 Plus高速冷凍離心機(jī)購(gòu)自美國(guó)賽默飛世爾科技公司；9902梯度PCR儀購(gòu)自美國(guó)ABI公司；Universal Hood II凝膠成像系統(tǒng)購(gòu)自美國(guó)Bio-Rad公司。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1引物設(shè)計(jì)與合成根據(jù)NCBI網(wǎng)站上發(fā)布的豬KAT2B的mRNA參考序列（XM_021071366.1）和全基因組序列（NC_010455.5），利用Primer Pre-mier 5.0設(shè)計(jì)實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物及豬KAT2B基因外顯子區(qū)域PCR擴(kuò)增引物（表1），送至北京擎科生物技術(shù)有限公司合成，置于4℃保存。

1.2.2血液DNA、組織RNA的提取及cDNA合成采用TRIzol試劑盒分別提取3日齡和6月齡香蘇雜交豬心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和背最長(zhǎng)肌組織總RNA，溶于RNA se-Free ddH2O中，使用NanoDrop 2000超微量分光光度計(jì)檢測(cè)其濃度，1.5%瓊脂糖凝膠電泳驗(yàn)證其質(zhì)量，提取合格的RNA于-80℃保存?zhèn)溆?。采用StarScriptⅡRT Mix with gDNA Remover試劑盒對(duì)RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，NanoDrop 2000分光光度計(jì)檢測(cè)cDNA濃度，所得合格cDNA于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

采用血液DNA提取試劑盒提取香蘇雜交豬血液DNA，并通過(guò)NanoDrop 2000超微量分光光度計(jì)檢測(cè)DNA的濃度及純度，以1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其質(zhì)量，將提取的血液DNA樣品進(jìn)行等量混合，制備成DNA混池樣品，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 PCR擴(kuò)增及測(cè)序?qū)NA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，PCR反應(yīng)體系30.0μL：2×Hieff?PCR Master Mix 15.0μL，上、下游引物各1.5μL，DNA模板1.5μL，ddH2O 10.5μL。擴(kuò)增程序：94℃預(yù)變性5 min；94℃30 s，55～65℃30 s，72℃30 s，進(jìn)行35個(gè)循環(huán)；72℃延伸10min。采用1.5%瓊脂糖凝膠電泳對(duì)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)。最后將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送至北京擎科生物科技有限公司測(cè)序，采用DNAStar進(jìn)行測(cè)序結(jié)果與原始序列對(duì)比，篩選出SNPs位點(diǎn)。1.2.4 KAT2B基因相對(duì)表達(dá)量檢測(cè)分別以3日齡和6月齡的香蘇雜交豬心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和背最長(zhǎng)肌組織的cDNA為模板，以GAPDH為內(nèi)參基因，利用2×RealStar Fast SYBR qPCR Mix試劑盒進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，PCR反應(yīng)體系10.0μL：SYBR qPCR Mix（2×）5.0μL，上、下游引物各0.3μL，模板0.5μL，ddH2O 3.9μL。擴(kuò)增程序：95℃2 min；95℃15 s，62℃30 s，72℃30 s，進(jìn)行40個(gè)循環(huán)；95℃15 s，60℃15 s，95.5℃5 s。采用2-ΔΔCt法計(jì)算KAT2B基因在香蘇雜交豬不同組織中的相對(duì)表達(dá)量。1.3統(tǒng)計(jì)分析

利用Excel 2010計(jì)算篩選SNPs位點(diǎn)的等位基因頻率、基因型頻率、觀測(cè)雜合度（Ho）、期望雜合度（He）、有效等位基因數(shù)（Ne）及平均多肽信息含量（PIC）等，以卡方（χ2）檢驗(yàn)分析基因型是否處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。使用SPSS 25.0中一般線(xiàn)性模型（GLM）將KAT2B基因SNPs位點(diǎn)不同基因型與香蘇雜交豬生長(zhǎng)性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，數(shù)據(jù)分析模型采用方程：Yijk=μ+Gi+Aj+eijk，式中，Yijk為生長(zhǎng)性狀測(cè)定值，μ為群體平均值，Gi為基因型效應(yīng)，Aj為年齡效應(yīng)，eijk為隨機(jī)殘差。采用SPSS 25.0進(jìn)行差異顯著性分析，使用GraphPad Prism 8.0作圖。

2結(jié)果與分析

2.1 KAT2B基因在香蘇雜交豬不同組織中相對(duì)表達(dá)量分析結(jié)果

由實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定KAT2B基因在香蘇雜交豬各組織中的相對(duì)表達(dá)量結(jié)果（圖1）可知，KAT2B基因在香蘇雜交豬心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和背最長(zhǎng)肌組織中均有表達(dá)，3日齡KAT2B基因的相對(duì)表達(dá)量排序?yàn)榉闻Kgt;脾臟gt;肝臟gt;腎臟gt;心臟gt;背最長(zhǎng)肌；6月齡排序?yàn)椋焊闻Kgt;脾臟gt;腎臟gt;肺臟gt;背最長(zhǎng)肌gt;心臟。與3日齡相比，6月齡肝臟和脾臟KAT2B基因相對(duì)表達(dá)量極顯著升高（Plt;0.01，下同），肺臟極顯著降低；3日齡和6月齡香蘇雜交豬KAT2B基因在心臟、腎臟和背最長(zhǎng)肌組織中的相對(duì)表達(dá)量無(wú)顯著差異（Pgt;0.05，下同）。3日齡香蘇雜交豬肺臟組織中的KAT2B基因相對(duì)表達(dá)量最高，6月齡肝臟組織該基因的相對(duì)表達(dá)量最高。

2.2香蘇雜交豬KAT2B基因SNPs位點(diǎn)檢測(cè)結(jié)果結(jié)合香蘇雜交豬KAT2B基因PCR擴(kuò)增電泳結(jié)果（圖2）和測(cè)序結(jié)果對(duì)香蘇雜交豬KAT2B基因SNP位點(diǎn)進(jìn)行篩選（圖3）可知，香蘇雜交豬KAT2B基因Exon-2、Exon-14和Exon-15擴(kuò)增區(qū)域均分別存在1個(gè)外顯子突變，即g.36682Ggt;A、g.104540Ggt;T和g.106651Agt;G位點(diǎn)。

2.3香蘇雜交豬KAT2B基因SNPs位點(diǎn)遺傳學(xué)分析結(jié)果

由表2可知，香蘇雜交豬KAT2B基因g.36682Ggt;A、g.104540Ggt;T和g.106651Agt;G等3個(gè)SNPs位點(diǎn)PIC均處于中度多態(tài)性水平。g.36682Ggt;A位點(diǎn)的優(yōu)勢(shì)基因型為GA型，等位基因頻率Ggt;A；g.104540Ggt;T位點(diǎn)的優(yōu)勢(shì)基因型為GG型，等位基因頻率Ggt;T；g.106651Agt;G位點(diǎn)的優(yōu)勢(shì)基因型為AA型，等位基因頻率Agt;G。χ2檢驗(yàn)結(jié)果表明，3個(gè)SNPs位點(diǎn)（g.36682Ggt;A、g.104540Ggt;T和g.106651Agt;G）均處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。

2.4香蘇雜交豬KAT2B基因SNPs位點(diǎn)不同基因型與生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)性

運(yùn)用SPSS 25.0對(duì)香蘇雜交豬KAT2B基因SNPs位點(diǎn)各基因型與其6月齡時(shí)的生長(zhǎng)性狀（體重、體長(zhǎng)、體高、胸圍、腹圍、管?chē)?、胸深、胸寬和腿臀圍）進(jìn)行關(guān)聯(lián)性分析。結(jié)果（表3）顯示，g.36682Ggt;A位點(diǎn)3個(gè)基因型生長(zhǎng)性狀之間無(wú)顯著差異。g.106651Agt;G位點(diǎn)AA基因型與AG基因型胸深存在顯著差異（Plt;0.05，下同）。

3討論

目前，有關(guān)KAT2B基因在不同組織和發(fā)育階段中表達(dá)量的研究較少。前人研究發(fā)現(xiàn)，KAT2B基因在肺臟和心臟中相對(duì)表達(dá)量較高，在肝臟中相對(duì)表達(dá)量較低（Li etal.，2017）。而本研究通過(guò)實(shí)時(shí)熒光PCR對(duì)KAT2B基因在不同生長(zhǎng)階段香蘇雜交豬不同組織中的相對(duì)表達(dá)量進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，KAT2B基因在心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和背最長(zhǎng)肌組織中均有表達(dá)，3日齡KAT2B基因的相對(duì)表達(dá)量在肺臟組織中表現(xiàn)最高，背最長(zhǎng)肌組織中最低；6月齡時(shí)在肝臟組織中相對(duì)表達(dá)最高，在心臟組織中相對(duì)表達(dá)量最小，與前人的研究結(jié)果有所不同，猜測(cè)由于豬種和生長(zhǎng)階段不同導(dǎo)致。KAT2B基因的相對(duì)表達(dá)量整體上隨著香蘇雜交豬的生長(zhǎng)呈增加趨勢(shì)，這一結(jié)論可為深入研究該基因調(diào)控豬生長(zhǎng)發(fā)育的功能機(jī)制提供參考依據(jù)。

目前，與豬生長(zhǎng)性狀相關(guān)的基因已有較多研究報(bào)道，如pGH基因與大白豬的20日齡體重以及2月齡體重相關(guān)，且CC基因型在生長(zhǎng)性狀上優(yōu)于CT和TT基因型（趙聰哲等，2019）；PPARGC1A基因與豬的平均日增重和達(dá)到目標(biāo)體重日齡相關(guān)，可能影響個(gè)體的生長(zhǎng)發(fā)育（白瑩等，2020）；ENO3基因多態(tài)性與大白豬日增重、眼肌面積及體重達(dá)100kg時(shí)的日齡相關(guān)（趙玉強(qiáng)等，2022）。DKK1基因多態(tài)性與香蘇雜交豬的體高、胸圍、管?chē)⑿厣詈屯韧螄嚓P(guān)（許家利等，2022），PRKAA2基因多態(tài)性與體重、體長(zhǎng)、體高、胸圍、腹圍、管?chē)?、胸深和臀腿圍均具有不同程度相關(guān)性，2個(gè)基因都可作為培育新品系的主效候選基因，可能對(duì)豬的生長(zhǎng)性能產(chǎn)生影響（許家利，2022）。本研究的結(jié)果表明，香蘇雜交豬KAT2B基因的3個(gè)外顯子突變位點(diǎn)均處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)，其g.36682Ggt;A、g.104540Ggt;T和g.106651Agt;G位點(diǎn)的PIC處于中度多態(tài)性水平，可進(jìn)行生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)分析。

KAT2B最早發(fā)現(xiàn)于1996年，與其他諸多乙酰轉(zhuǎn)移酶一樣能催化組蛋白的乙?；?，而組蛋白在被修飾后，能對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄起到調(diào)節(jié)作用（Clements et al.，1999）。此外，有研究表明KAT2B還能修飾許多代謝酶，通過(guò)乙?；揎椪{(diào)節(jié)酶活性進(jìn)而調(diào)節(jié)糖代謝反應(yīng)以及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝途徑等（Drazic etal.，2016）。有關(guān)KAT2B基因在畜禽育種中的研究已有相關(guān)報(bào)道，Moisa等（2013）研究發(fā)現(xiàn)，在安格斯和安格斯×西門(mén)特閹牛的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，KAT2B基因不足以促進(jìn)前脂肪的生成反應(yīng)，但在育肥階段肌肉中KAT2B基因表達(dá)存在時(shí)間與飼料處理的交互作用，表明KAT2B基因可能參與了牛的生長(zhǎng)發(fā)育。Sen等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，KAT2A和KAT2B基因通過(guò)調(diào)節(jié)H3K9乙?；龠M(jìn)斑馬魚(yú)和小鼠顱面軟骨和骨的生長(zhǎng)及分化。Lin等（2022）對(duì)中國(guó)4個(gè)地方牛品種富牛、秦川牛、牦牛和柴達(dá)木牛的KAT2B基因多態(tài)性檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)有3個(gè)基因多態(tài)性與牛體測(cè)量性狀相關(guān)。本研究通過(guò)直接測(cè)序發(fā)現(xiàn)香蘇雜交豬KAT2B基因外顯子區(qū)域存在3個(gè)SNPs位點(diǎn)，在6月齡的香蘇雜交豬群體中，g.106651Agt;G位點(diǎn)AA基因型與AG基因型胸深存在顯著差異。因此，KAT2B基因g.106651Agt;G位點(diǎn)可應(yīng)用于香蘇雜交豬的后續(xù)育種工作。

4結(jié)論

香蘇雜交豬KAT2B基因在心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和背最長(zhǎng)肌組織中均有表達(dá)且存在3個(gè)SNPs位點(diǎn)，分別是g.36682Ggt;A、g.104540Ggt;T和g.106651Agt;G，其中g(shù).106651Agt;G的胸深有顯著差異，KAT2B基因可作為香蘇雜交豬生長(zhǎng)性狀相關(guān)的候選基因。

參考文獻(xiàn)（References）：

白瑩，張清陽(yáng)，韓海銀，張偉峰，楊俊琦，張輝，劉玉芳.2020.豬PPARGC1A基因多態(tài)性與生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)分析及其表達(dá)［J］.畜牧與獸醫(yī)，52（11）：1-6.［Bai Y，Zhang Q Y，Han H Y，Zhang W F，Yang J Q，Zhang H，Liu Y F.2020.Association of polymorphisms of PPARGC1A with growth traits and its expression in pig breeds［J］.Animal Hus-bandryamp;Veterinary Medicine，52（11）：1-6.］

倪萌萌，謝玲玲，阮涌，蔡剛志，張林華，許厚強(qiáng).2018.從江香豬與蘇太豬不同組合雜交性能比較研究［J］.畜牧與獸醫(yī)，50（10）：12-16.［Ni M M，Xie L L，Ruan Y，Cai G Z，Zhang L H，Xu H Q.2018.Comparative study of the cros-sing performance of different combinations of Congjiang Xiang pigs and Sutai pigs［J］.Animal Husbandryamp;Veteri-nary Medicine，50（10）：12-16.］

阮涌，嵇辛勤，茍維勝，盧賢君，趙佳福，段志強(qiáng)，倪萌萌.2018.F1代蘇香雜交豬GAS7、JHDM1A基因組織表達(dá)水平研究［J］.生物技術(shù)，28（2）：196-199.［Ruan Y，Ji X Q，Gou W S，Lu X J，Zhao J F，Duan Z Q，Ni M M.2018.Study the expression level of GAS7 and JHDMIA gene in different tissues in Suxiang hybrid F1 pig［J］.Biotechno-logy，28（2）：196-199.］doi：10.16519/j.cnki.1004-311x.2018.02.0034.

許家利，許厚強(qiáng)，阮涌，趙佳福，倪萌萌，孫金魁，石鵬飛.2022.F3代香蘇雜交豬DKK1基因多態(tài)性與生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)性［J］.南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，53（4）：969-976.［Xu J L，Xu H Q，RuanY，Zhao J F，Ni M M，Sun J K，Shi P F.2022.Cor-relation analysis of DKK1 gene polymorphism and growth traits of F3 generation Xiangsu hybrid pigs［J］.Journal of Southern Agriculture，53（4）：969-976.］doi：10.3969/j.issn.2095-1191.2022.04.009.

許家利.2022.F3代香蘇雜交豬生長(zhǎng)及繁殖性狀研究［D］.貴陽(yáng)：貴州大學(xué).［Xu J L.2022.Study on growth and repro-ductive traits ofF3 generation Xiangsu hybrid pigs［D］.Gui-yang：Guizhou University.］doi：10.27047/d.cnki.ggudu.2022.001873.

許厚強(qiáng).2019.貴州地方畜禽遺傳資源志［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社.［Xu H Q.2019.Animal genetic resources in Guizhou［M］.Beijing：China Agriculture Press.］

趙聰哲，胡忠昌，張立春，張志彬，于永生.2019.大白豬pGH基因的多態(tài)性與生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)研究［J］.東北農(nóng)業(yè)科學(xué)，44（2）：39-43.［Zhao C Z，Hu Z C，Zhang L C，Zhang Z B，Yu Y S.2019.Association between polymorphism and growth traits of pGH gene in large white pigs［J］.Jour-nal of Northeast Agricultural Sciences，44（2）：39-43.］doi：10.16423/j.cnki.1003-8701.2019.02.008.

趙玉強(qiáng)，陳鑫，李清春，馬繼林，董銀河，汪德明，郭凌云，黃濤.2022.大白豬ENO3基因多態(tài)性及其與生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)分析［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，49（1）：188-196.［Zhao Y Q，Chen X，Li Q C，Ma J L，Dong Y H，Wang D M，Guo LY，Huang T.2022.Polymorphism of ENO3 gene and its corre-lation with growth traits in Yorkshire pigs［J］.China Ani-mal Husbandryamp;Veterinary Medicine，49（1）：188-196.］doi：10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.01.020.

Bondy-Chorney E，Denoncourt A，Sai Y K，Downey M.2019.Nonhistone targets of KAT2A and KAT2B implicated in cancer biology［J］.Biochemstry Cell Biology，97（1），30-45.doi：10.1139/bcb-2017-0297.

Cho O H，Mallappa C，Hernández-Hernández J M，Rivera-Pérez J A，Imbalzano A N.2015.Contrasting roles for MyoD in organizing myogenic promoter structures during embryonic skeletal muscle development［J］.Devlopmental Dynamics，244（1），43-55.doi：10.1002/dvdy.24217.

Clements A，Rojas J R，Trievel R C，Wang L，Berger S L，Mar-morstein R.1999.Crystal structure of the histone acetyl-transferase domain of the human PCAF transcriptionalregulator bound to coenzyme A［J］.The EMBO Journal，18（13），3521-3532.doi：10.1093/emboj/18.13.3521.

Dominique H，LászlóT.2017.Sharing the SAGA［J］.Trends in Biochemical Sciences，42（11）：850-861.doi：10.1016/j.tibs.2017.09.001.

Drazic A，Myklebust L M，Ree R，Arnesen T.2016.The world of protein acetylation［J］.Biochimica et Biophysica Acta（BBA）-Proteins and Proteomics，1864（10）：1372-1401.doi：10.1016/j.bbapap.2016.06.007.

Fournier M，Orpinell M，Grauffel C，Scheer E，Garnier Jean-M，Ye T，Chavant V，Joint M，Esashi F，Dejaegere A，G?nczy P，Tora L.2016.KAT2A/KAT2B-targeted acetylome reveals a role for PLK4 acetylation in preventing centro-some amplification［J］.Nature Communications，7：13227.doi：10.1038/ncomms 13227.

Jin Q H，Yu L R，Wang L F，Zhang Z J，Kasper L H，Lee J E，Wang C C，Brindle P K，Dent S Y R，Ge K.2011.Distinctroles of GCN5/PCAF-mediated H3K9ac and CBP/p300-mediated H3K18/27ac in nuclear receptor transactivation［J］.The EMBO Journal，30（2）：249-262.doi：10.1038/emboj.2010.318.

Kong D L，Ying B D，Zhang J R，Ying H L.2019.PCAF regu-lates H3 phosphorylation and promotes autophagyinosteo-sarcoma cells［J］.Biomedicineamp;Pharmacotherapy，118：109395.doi：10.1016/j.biopha.2019.109395.

Li M Z，Chen L，Tian S L，Lin Y，Tang Q Z，Zhou X M，Li D Y，Yeung C K，Che T D，Jin L，F(xiàn)u Y H，Ma J D，Wang X，Jiang A A，Lan J，Pan Q，Liu Y K，Luo Z G，Guo Z Y，Liu H F，Zhu L，Shuai S R，Tang G Q，Zhao J G，Jiang Y Z，Bai L，Zhang S H，Mai M M，Li C C，Wang D W，Gu Y R，Wang G S，Lu H F，Li Y，Zhu H H，Li Z W，Li M，Glady-shev V N，Jiang Z，Zhao S H，Wang J Y，Li R Q，Li X W.2017.Comprehensive variation discovery and recovery of missing sequence in the pig genome using multiple de novo assemblies［J］.Genome Research，27（5）：865-874.doi：10.1101/gr.207456.116.

Lin X D，Li B，Chen Y H，Chen H，Liu M.2022.KAT2B gene polymorphisms are associated with body measure traits in four Chinese cattle breeds［J］.Animals，12（15）：1954.doi：10.3390/ANI12151954.

Moisa S J，Shike D W，Meteer W T，Keisler D，F(xiàn)aulkner D B，Loor J J.2013.Yin yang 1 and adipogenic gene network expression in longissimus muscle of beef cattle in response to nutritional management［J］.Gene Regulation.Systems.Biology，7：71-83.doi：10.4137/GRSB.S11783.

Nagy Z，Tora L.2007.Distinct GCN5/PCAF-containing com-plexes function as co-activators and are involved in tran-scription factor and global histone acetylation［J］.Onco-gene，26（37）：5341-5357.doi：10.1038/sj.onc.1210604.

Oksenych V，Su D，Daniel J A.2021.Acetyltransferases GCN5 and PCAF are required for B lymphocyte maturation in mice［J］.Biomolecules，12（1）：61.doi：10.3390/biom 12 010061.

Polesskaya A，Naguibneva I，F(xiàn)ritsch L，DuquetA，Ait-Si-Ali S，Robin P，Vervisch A，Pritchard L L，Cole P，Harel-Bellan A.2001.CBP/p300 and muscle differentiation：No HAT，no muscle［J］.The EMBO Journal，20（23）：6816-6825.doi：10.1093/emboj/20.23.6816.

Santi S，Cenni V，Capanni C，Lattanzi G，Mattioli E.2020.PCAF involvement in lamin A/C-HDAC2 interplay during the early phase of muscle differentiation［J］.Cells，9（7）：1735.doi：10.3390/cells9071735.

Sartorelli V，Puri P L，Hamamori Y，Ogryzko V，Chung G，Nakatani Y，Wang J Y，Kedes L.1999.Acetylation of MyoD directed by PCAF is necessary for the execution of the muscle program［J］.Molecular Cell，4（5）：725-734.doi：10.1016/s 1097-2765（00）80383-4.

Sen R，Pezoa S A，Carpio S L，Heranndez-Lagunas L，Niswan-der LA，Artinger K B.2018.Kat2a and Kat2bacetyltrans-ferase activity regulates craniofacial cartilage and bonedif-ferentiation in zebrafish and mice［J］.Journal De-velopmental Biology，6（4）：27.doi：10.3390/jdb6040027.

Tushar K G，JoséJ A，Sarah B，Ami K，Tasabeeh M，Catrin S R，Siobhan L，Brook J D.2018.Acetylation of TBX5 by KAT2B and KAT2A regulates heart and limb development［J］.Journal of Molecular and Cellular Cardiology，114：185-198.doi：10.1016/j.yjmcc.2017.11.013.

Walters B W，Tan T J，Tan C T，Dube C T，Lee K T，Koh J，Ong Y H B，Tan V X H，Jahan F R S，Lim C Y.2023.Divergent functions of histone acetyltransferases KAT2A and KAT2B in keratinocyte self-renewal and differentiation［J］.Journal of Cell Science，136（12）：jcs260723.doi：10.1242/JCS.260723.

（責(zé)任編輯李洪艷）