摘要：目的" 評估m(xù)iR-30a-5p作為急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）新診斷指標(biāo)的潛力和潛在的分子機(jī)制。方法" 下載GEO數(shù)據(jù)庫中AMI相關(guān)microRNAs（miRNAs）和mRNA芯片數(shù)據(jù)集。qRT-PCR技術(shù)檢測血清樣本中miRNAs的水平，全自動生化儀檢測其他的生化指標(biāo)。受試者工作特征（ROC）曲線分析和Spearman相關(guān)性分析評估m(xù)iR-30a-5p作為診斷AMI標(biāo)志物的價(jià)值。R語言multiMiR包對miR-30a-5p的靶基因進(jìn)行預(yù)測，STRING數(shù)據(jù)庫構(gòu)建蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)，將結(jié)果導(dǎo)入Cytoscape3.7.1軟件，篩選網(wǎng)絡(luò)的中樞基因。R語言clusterProfiler包對中樞基因進(jìn)行KEGG及GO分析，探索miR-30a-5p在AMI中的臨床意義及其潛在的分子機(jī)制。結(jié)果" 與對照組比較，AMI組患者血清中的miR-30a-5p上調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）；miR-30a-5p與CK-MB、CK、TnT、proBNP和CRP水平呈正相關(guān)（rs=0.489，Plt;0.001；rs=0.347，Plt;0.001；rs=0.545，Plt;0.001；rs=0.533，Plt;0.001;rs=0.206，Plt;0.05），ROC曲線下面積（AUC）為0.862，靈敏度為84.4%，特異度為74.2%；2個(gè)數(shù)據(jù)集共得到差異表達(dá)基因（differentially expressed genes，DEGs）780個(gè)，miR-30a-5p的靶基因共1 061個(gè)，取交集共鑒定出61個(gè)共同基因。在PPI的中樞基因中BCL6、FOSL2、JDP2、LYN、PDE4D、SOCS3和SOX4得分較高且與AMI的發(fā)生密切相關(guān)；KEGG和GO富集分析顯示，miR-30a-5p可能調(diào)節(jié)JAK-STAT、NF-kappaB及Wnt等信號通路參與炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡、自噬及心肌梗死后重塑等過程進(jìn)而參與AMI的發(fā)生。結(jié)論" 血清miR-30a-5p在AMI早期表達(dá)上調(diào)，對miR-30a-5p及其調(diào)控通路的研究，有助于診斷及治療AMI。

關(guān)鍵詞：基因表達(dá)數(shù)據(jù)庫（GEO）；急性心肌梗死（AMI）；microRNAs（miRNAs）；生物信息學(xué)

中圖分類號：R542.2+2""" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

DOI：10.7652/jdyxb202404007

收稿日期：2023-06-20" 修回日期：2024-04-07

基金項(xiàng)目：2021年度河北省“三三三人才工程”資助項(xiàng)目（No. A202105015）

Supported by the 2021 Hebei Province “Three Thirty-Three Talents Project” Funding Program（No. A202105015）

通信作者：張明明，教授，主任技師. E-mail： zhangmm197612@126.com

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：//kns.cnki.net/kcms/detail/61.1399.R.20240417.1441.010.html （2024-04-18）

Changes of miR-30a-5p during the pathogenesis of acute myocardial

infarction and its potential molecular mechanisms

LIANG Guoxin1，2， GUO Chang1，2， TANG Hongyue1，3， ZHANG Mingming1.2

（1. Clinical Medical Research Center， Hebei General Hospital， Shijiazhuang 050051;

2. Graduate School of North China University of Science and Technology， Tangshan 063000;

3. Graduate School of Hebei North College， Zhangjiakou 075000， China）

ABSTRACT： Objective" To evaluate the potential of miR-30a-5p as a novel indicator of acute myocardial infarction （AMI） and the underlying molecular mechanisms. Methods" AMI-associated microRNAs （miRNAs） and mRNA microarray datasets were downloaded from the GEO database. Real-time fluorescence quantitative PCR （qRT-PCR） technique was used to detect the level of miRNAs in serum samples; automatic biochemistry was used to detect other biochemical indicators. Receiver operating characteristic （ROC） curve analysis and Spearson correlation analysis were performed to assess the value of miR-30a-5p as a diagnostic AMI marker. The target genes of miR-30a-5p were predicted with the R language multiMiR package， and the protein interaction network was constructed by the STRING database. The results were imported into Cytoscape 3.7.1 software to screen the pivotal genes of the network. The R language clusterProfiler package performed KEGG and GO analyses on the hub genes to explore the clinical significance of miR-30a-5p in AMI and its potential molecular mechanisms. Results" Compared with the control group， miR-30a-5p was upregulated significantly in the serum of patients in the AMI group （Plt;0.05）; miR-30a-5p was positively correlated with the levels of CK-MB， CK， TnT， proBNP and CRP （rs=0.489， Plt;0.001; rs=0.347， Plt;0.001; rs=0.545， Plt;0.001; rs=0.533， Plt;0.001; rs=0.206， Plt;0.05）. The area under the ROC curve was 0.862， with sensitivity of 84.4% and specificity of 74.2%. A total of 780 differentially expressed genes （DEGs） were obtained from the two datasets. A total of 1 061 target genes of miR-30a-5p and 61 common genes were identified by taking the intersection set. Among the central genes of PPI， BCL6， FOSL2， JDP2， LYN， PDE4D， SOCS3 and SOX4 scored high and were closely associated with the occurrence of AMI. KEGG and GO enrichment analyses showed that miR-30a-5p might regulate JAK-STAT， NF-kappaB and Wnt signaling pathways， which were involved in inflammatory response， apoptosis， autophagy and post-infarction remodeling， and thus participated in the process of AMI. Conclusion" Serum miR-30a-5p is up-regulated in the early stage of AMI， and the study on miR-30a-5p and its regulatory pathways can help with the diagnosis and treatment of myocardial infarction.

KEY WORDS：" Gene Expression Omnibus （GEO）; acute myocardial infarction （AMI）; microRNAs （miRNAs）; bioinformatics

急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）已成為一種嚴(yán)重危害健康的全球性疾病。老年人是主要發(fā)病人群，但近年來年輕人的發(fā)病率也有所上升。根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）的評估，到2030年，全球每年預(yù)計(jì)將有2 360萬人死于心血管疾?。?］。目前，診斷AMI的首選生物標(biāo)志物是肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌鈣蛋白I和T（cTnI和cTnT）［2］，其中，hs-cTnI是最常用的標(biāo)志物。然而，研究表明，hs-cTnI的水平在各種疾病的發(fā)展過程中都可顯著升高，而且只有在心肌梗死發(fā)生后3～4 h內(nèi)才能檢測到［3］。因此，迫切需要尋找新的診斷標(biāo)記物，使其在診斷AMI時(shí)具有更高的敏感性、特異性和準(zhǔn)確性。

microRNAs（miRNAs）是一種長度約為20～24個(gè)核苷酸的內(nèi)源性RNA，在血液循環(huán)中高度穩(wěn)定，已被證明在基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中發(fā)揮重要作用［4］。miRNA的表達(dá)水平因組織和發(fā)育階段的不同而有顯著差異。miRNA具有分化、時(shí)相、時(shí)序等特征，提示miRNA有潛力成為疾病診斷的指標(biāo)［5-6］。大量研究表明，miRNA與心血管疾病之間存在密切關(guān)系。據(jù)報(bào)道，miR-30c與腫瘤發(fā)生和心血管疾病密切相關(guān)［7-8］。在缺血再灌注（I/R）損傷中，miR-30a-5p抑制劑通過靶向Runx2抑制MC3T3-E1細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)成骨，減輕炎癥反應(yīng)［9］。HOTAIR通過調(diào)節(jié)miR-30a-5p靶向KDM3A來改善慢性心力衰竭（CHF）患者的心臟損傷［10］。通過靶向SOCS3，miR-30a-5p促進(jìn)膽管癌（CCA）細(xì)胞增殖［11］。有研究表明，miR-30a-5p在心血管疾病中表達(dá)升高，并與心臟損傷的程度相關(guān)［12-13］。因此，異常表達(dá)miR-30a-5p的分子機(jī)制以及作為AMI生物標(biāo)志物的潛力值得進(jìn)一步探究。

本研究的目的是評估m(xù)iR-30a-5p作為AMI臨床診療的價(jià)值，并概述miRNA-30a-5p的上調(diào)可能靶向各種新基因，調(diào)控AMI的發(fā)生和發(fā)展中的分子機(jī)制。

1" 材料與方法

1.1" 研究對象

研究對象為2020年2月至2022年2月在河北省人民醫(yī)院就診的155例AMI患者和90例健康體檢者（healthy controls，HCs）。納入標(biāo)準(zhǔn)：①胸疼痛超過30 min；②心電圖有典型的心肌缺血證據(jù)；③cTnI和CK-MB上調(diào)；④服用硝酸酯類藥物后持續(xù)胸悶無緩解；⑤胸痛發(fā)生后3 h內(nèi)入院；⑥首次發(fā)病的AMI患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有心肌梗死史；②有心肌梗死溶栓藥史；③嚴(yán)重病毒性心肌炎；④至少過去6個(gè)月無中風(fēng)病史；⑤已知的出血性疾病。如果創(chuàng)傷、藥物和醫(yī)療干預(yù)導(dǎo)致胸痛，則排除患者。本研究已通過河北省人民醫(yī)院倫理委員會審查（倫理審查編號：No.202104），取得所有納入人群知情同意。

1.2" 實(shí)驗(yàn)儀器和試劑

實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀ABI 7500（Applied Biosystems公司，美國）；電化學(xué)發(fā)光免疫分析分析儀COBAS 601（羅氏診斷公司，德國）；Beckman系列全自動生化分析儀（美國貝克曼庫爾特商貿(mào)有限公司，美國）；循環(huán)增強(qiáng)熒光分析儀Pylon3D（星童醫(yī)療技術(shù)有限公司，中國）。所用試劑為配套試劑：miRcute miRNA提取分離試劑盒（離心柱型）；miRcute增強(qiáng)型miRNA cDNA第一鏈合成試劑盒（miRcute Plus miRNA First-Strand cDNA Kit）；miRcute增強(qiáng)型miRNA cDNA第一鏈合成試劑盒（KR211-01）；miRNA熒光定量檢測試劑盒（SYBR Green， FP411），均購自天根生化科技（北京）有限公司。

1.3" 檢測方法

患者入院確診后于24 h內(nèi)抽取空腹靜脈血10 mL，離心力調(diào)至2 180×g，10 min分離血清及血漿，應(yīng)用miRcute miRNA提取分離試劑盒（離心柱型）收集并提純miRNA，RT-qPCR技術(shù)對各組miR-30a-5p進(jìn)行定量測定，并用2-ΔΔCt法計(jì)算其表達(dá)；貝克曼自動生化分析儀對CK、CK-MB、CRP及血脂進(jìn)行檢測；全自動電化學(xué)發(fā)光分析儀測定血清中TNT及proBNP的濃度；循環(huán)增強(qiáng)熒光分析儀測定血清中PCT的濃度。

1.4" 組學(xué)分析

本研究包含3個(gè)獨(dú)立的AMI研究數(shù)據(jù)集，從Gene Expression Omnibus （GEO）數(shù)據(jù)庫下載基因表達(dá)數(shù)據(jù)。GSE2301數(shù)據(jù)集包括70個(gè)AMI組織和相應(yīng)的鄰近正常組織。GSE66360數(shù)據(jù)集包含來自50例對照者和49例心肌梗死患者的循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞（CEC）的微陣列。在7例對照者和7例ST段抬高型心肌梗死患者的GSE60993數(shù)據(jù)集中獲得了外周血微陣列。在線網(wǎng)絡(luò)工具GEO2R用于分析對照組和AMI組之間的差異表達(dá)基因（DEGs）。通過R軟件的limma包用于篩選原始數(shù)據(jù)集以進(jìn)行表達(dá)歸一化和差異表達(dá)分析［14］。DEGs篩選的閾值為|logFC|gt;1.5且Plt;0.05（FC：倍數(shù)變化）。R4.13軟件中的multiMiR包用于預(yù)測miR-30a-5p的靶基因［15］。為了保證獲得的數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，每個(gè)基因都出現(xiàn)在3個(gè)以上的數(shù)據(jù)庫中被認(rèn)為是重要的靶基因。

1.5" 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建和中樞基因的鑒定

本項(xiàng)研究用到STRING 數(shù)據(jù)庫（http：//string-db.org，版本：11.5）涵蓋的生物數(shù)量增加了1倍以上，達(dá)到5090種。它收集、評分和整合所有公共來源的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)相互作用信息，并通過計(jì)算預(yù)測補(bǔ)充這些信息，包括蛋白質(zhì)之間的直接和間接相關(guān)性。在這項(xiàng)研究中，將交集的DEGs輸入到STRING中，并將物種設(shè)置為“智人”。此外，選擇置信度得分大于0.7的數(shù)據(jù)（低置信度：得分gt;0.15;中度置信度：得分gt;0.4；高置信度：得分gt;0.7）。將結(jié)果導(dǎo)入Cytoscape 3.7.1（https：//cytoscape.org/）建立蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)模型，模塊使用MCODE（Molecular Complex Detection）插件分析。參數(shù)設(shè)置為默認(rèn)值（degree cut off=2，node score cut off=0.2，K-core=2，Max：depth=100）。然后，應(yīng)用“cytoHubba”中的最大團(tuán)中心性（maximal clique centrality，MCC）算法篩選PPI網(wǎng)絡(luò)中具有高連通性的中樞基因［16］。

1.6" 功能富集分析

基因本體論（GO）分析具有生物學(xué)功能的基因，例如分子功能（MF）、生物學(xué)過程（BP）和細(xì)胞成分（CC）。京都基因和基因組百科全書（KEGG）分析提供了有關(guān)基因信號和疾病通路的注釋信息，為基因功能和通路研究奠定了基礎(chǔ)。使用R軟件中的“clusterProfiler”包執(zhí)行GO注釋和KEGG通路富集分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.7" 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS Statistics Version 22.0（IBM Corp，Armonk，NY，USA）、GraphPad PRISM Version 8和R Version 4.13對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析及作圖?；颊叩挠?jì)量資料被描述為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s），實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布或者近似正太分布，兩組之間的比較采用t檢驗(yàn)；如果不符合正態(tài)分布及方差不齊的數(shù)據(jù)，兩組間比較用Mann-Whitney U檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以［n（%）］表示，應(yīng)用卡方檢驗(yàn)分析；Spearman法分析各指標(biāo)間的相關(guān)性；所有統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)都是雙尾的，Plt;0.05認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。此外，受試者工作特征（ROC）曲線的線下面積（AUC）被用來評估m(xù)iRNA作為AMI的診斷標(biāo)志物的準(zhǔn)確性，通過Youden指數(shù)（J）計(jì)算ROC曲線的最佳分界值。

2nbsp; 結(jié)" 果

2.1" 參與者的基線臨床特征

本研究共收集了155例AMI患者和90例健康體檢者的血清。生化分析結(jié)果顯示，AMI組CK、CK-MB、cTnI、proBNP、CRP和PCT的水平均明顯高于對照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；血脂指標(biāo)、年齡、性別、吸煙和飲酒方面，AMI患者和對照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05，見表1）。

2.2" 各組患者血清miR-30a-5p的表達(dá)

使用miRNA相關(guān)微陣列數(shù)據(jù)對AMI組和HC組樣本進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)miR-30a-5p的表達(dá)顯著上調(diào)（圖1A）。各組血液標(biāo)本經(jīng)離心分離血清后，采用qRT-PCR技術(shù)檢測miR-30a-5p的相對表達(dá)水平，與HC組相比，AMI組患者miR-30a-5p的表達(dá)明顯增加（0.77±0.21 vs. 0.34±0.17，Plt;0.001，圖1B）。

2.3" 評估m(xù)iR-30a-5p對AMI患者的診斷潛力

Spearman相關(guān)性分析結(jié)果表明，miR-30a-5p的水平與CK-MB、CK、TnT、proBNP及CRP的水平呈正相關(guān)（rs=0.489，Plt;0.001；rs=0.347，Plt;0.001；rs=0.545，Plt;0.001；rs=0.533，Plt;0.001;rs=0.206，Plt;0.05）。 ROC曲線分析， miR-30a-5p AUC值為""" 0.862，靈敏度為84.4%，特異度為74.2%（圖2）。

2.4" miR-30a-5p的心血管疾病相關(guān)靶基因分析

為了闡明miR-30a-5p的功能，使用3個(gè)數(shù)據(jù)庫（miRecords、miRTarBase 和 TarBase）和multiMiR包，共有1 161個(gè)預(yù)測靶基因被預(yù)測為miR-30a-5p的潛在靶基因。通過分析GSE66360和GSE31568公共數(shù)據(jù)集，共獲得780個(gè)DEGs。在miR-30a-5p的靶基因和DEGS之間共有61個(gè)共有基因（圖3A）。將得到的共有基因?qū)隨TRING數(shù)據(jù)庫，選取置信度大于0.7的數(shù)據(jù)，Cytoscape軟件用于這些相互作用的DEG的網(wǎng)絡(luò)可視化分析。根據(jù)MCC算法，選擇網(wǎng)絡(luò)中最穩(wěn)定、得分最高的基因作為中樞基因，包括BCL6、FOSL2、JDP2、LYN、PDE4D、SOCS3和SOX4（圖3B）。

2.5" 重疊DEGs的富集分析

本研究通過R語言clusterProfiler包對61個(gè)重疊基因進(jìn)行GO和KEGG通路富集分析。根據(jù)Plt;0.05篩選后，在GO功能富集分析中，參與心血管疾病的通路被富集。主要GO術(shù)語：JAK-STAT調(diào)節(jié)受體信號通路、Toll信號通路、Wnt信號通路、JAK-STAT的受體信號通路、I-kappaB激酶/NF-kappaB信號通路。主要CC和MF條目有：受體復(fù)合物（receptor complex）、粘附筋膜（fascia adherens）、GTPase復(fù)合物（GTPase complex）、SH3結(jié)構(gòu)域結(jié)合（phosphatase activity，（SH3 structural domain binding參與分化的細(xì)胞形態(tài)發(fā)生調(diào)節(jié)（MF）有關(guān)，圖4A）。KEGG分析表明，差異的miRNAs參與了多條主要途徑：cGMP-PKG信號通路（cGMP-PKG signaling pathway）、NF-kappa B信號通路（NF-kappa B signaling pathway）、JAK-STAT信號通路（JAK-STAT signaling pathway）、趨化因子信號通路（chemokine signaling pathway）、轉(zhuǎn)化生長因子-β信號通路（TGF-beta signaling pathway）、腫瘤壞死因子信號通路（TNF signaling pathway）和細(xì)胞凋亡通路（apoptotic pathway，圖4B）。

3" 討" 論

AMI是一種具有高發(fā)病率和死亡率的缺血性心臟病。近年來AMI的診斷和治療取得了重大進(jìn)展，但AMI仍是威脅人群健康的主要疾病之一。AMI也是老年人群的常見病。AMI高死亡率和發(fā)生率的部分原因是缺乏早期基于血液的生物標(biāo)志物，例如，升高的cTnI也見于慢性腎病、敗血癥和心力衰竭患者，尤其是老年患者［17］。此外，CK-MB在胸痛發(fā)作后4～9 h開始升高，這對于AMI診斷來說為時(shí)已晚。因此，在AMI發(fā)病早期（尤其是胸痛發(fā)病4 h內(nèi)），部分患者并無典型的臨床綜合征和心電圖表現(xiàn)，cTnI和CK-MB的應(yīng)用存在局限性，無法準(zhǔn)確識別AMI患者，從而延遲最佳治療時(shí)間［18-19］。因此，新的敏感診斷生物標(biāo)志物的鑒定和機(jī)制研究通常是關(guān)注的主要焦點(diǎn)。

miRNA是一種新型血液生物標(biāo)志物。先前研究表明，異常miRNA在心血管疾病的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮作用，它們參與心臟分化、血管功能、細(xì)胞凋亡、自噬、炎癥和增殖［20-22］。miR-30a-5p是miRNAs家族中重要的一員，近期由于其在心腦血管疾病的病理損害過程中的異常表達(dá)而被研究者注意［13，23］。例如，缺氧/再氧化（H/R）誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞損傷過程中miR-30a-5p的水平顯著增加［24］。AAV2介導(dǎo)的長鏈

非編

碼RNAH19過表達(dá)通過沉默microRNA-30a-5p的表達(dá)減輕缺血性急性腎損傷［25］。HOTAIR通過調(diào)控miR-30a-5p靶向KDM3A的表達(dá)改善CHF心臟損傷［10］。miR-30a在腎臟I/R損傷中升高，并可能通過調(diào)節(jié)Beclin1/ATG16途徑來減弱自噬［26］。抑制miR-30a-5p或SIRT1的過表達(dá)可改善CHF大鼠的心臟和心肌功能，抑制炎癥反應(yīng)，減輕病理變化，抑制心肌細(xì)胞凋亡［27］。這些研究提示在缺血誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷中miR-30a-5p的異常表達(dá)具有重要的意義。因此，miR-30a-5p在心血管疾病調(diào)控中的靶基因和分子機(jī)制值得深入研究。

本研究提供了大量關(guān)于miR-30a-5p作為AMI生物標(biāo)志物的證據(jù)。首先，微陣列數(shù)據(jù)和臨床檢測結(jié)果表明，與健康檢查者相比，AMI患者血漿中miR-30a-5p的表達(dá)水平顯著上調(diào)。然后，經(jīng)Spearman分析發(fā)現(xiàn)，AMI患者血清miR-30a-5p的相對表達(dá)量與CK、CK-MB、TnT、proBNP和CRP水平呈正相關(guān)。ROC曲線下的AUC值為0.862，靈敏度為84.4%，特異度為74.2%，證明miRNA-30a-5p具有中上水平的診斷能力。這些結(jié)果都表明，miR-30a-5p可能比傳統(tǒng)診斷標(biāo)志物在診斷方面更具有優(yōu)勢，更值得進(jìn)一步的研究。

為初步探討miR-30a-5p在AMI中的分子機(jī)制，應(yīng)用生物信息學(xué)分析，確定了61個(gè)與AMI死相關(guān)的差異基因和miR-30a-5p的靶基因。其中BCL6、RHOB、FOSL2、RGS2、JDP2、NT5E、KLF10、PDE4D、SOCS3和SOX4是得分較高的中樞基因。GO和KEGG分析的結(jié)果表明，miR-30a-5p與其調(diào)控靶基因SOCS3和JAK-STATA在AMI中起著關(guān)鍵作用。JAK/STAT信號通路能夠進(jìn)行細(xì)胞因子易位，并自然負(fù)責(zé)將刺激信號傳遞到細(xì)胞核，促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄。該通路廣泛參與細(xì)胞抑制反應(yīng)、細(xì)胞凋亡、炎癥和其他生物學(xué)過程，從而參與了大量心血管疾病的發(fā)生發(fā)展［28-29］。JAK/STAT通路可以由多種不同的因素觸發(fā)，例如IL-6、粒細(xì)胞集落刺激因子、缺氧和炎癥等［30］。在轉(zhuǎn)基因小鼠中，心肌肥大的進(jìn)展以心肌中STAT的過度表達(dá)為標(biāo)志。由此可見，心肌梗死后STAT過表達(dá)以及通過心室壁機(jī)械張力通路激活JAK/STAT信號通路是心肌梗死后心肌肥厚的重要機(jī)制。此外，JAK/STAT信號通路與AMI和心肌肥厚并發(fā)心肌梗死后的心臟重構(gòu)密切相關(guān)。JAK/STAT信號通路在AMI中被觸發(fā)，并已被確定參與細(xì)胞保護(hù)信號通路［31］。此外，miR-30a-5p的預(yù)測靶基因與KEGG富集的信號通路證明了上述的觀點(diǎn)。一些研究報(bào)道，SOCS3是JAK-STAT信號通路的內(nèi)在負(fù)反饋調(diào)節(jié)因子。SOCS3通過JAK/STAT信號通路促進(jìn)心肌缺血再灌注大鼠心肌細(xì)胞的凋亡［32］。JAK/STAT3在AMI后左心室（LV）重構(gòu)中發(fā)揮作用，并增強(qiáng)AMI對缺血預(yù)處理的敏感性。阻斷SOCS3顯示出預(yù)防心肌損傷和心室重構(gòu)的作用［33］。

鑒于這些結(jié)果，本研究中發(fā)現(xiàn)的某些新基因可能作為AMI的生物標(biāo)志物，也為我們的后續(xù)研究鋪平了道路。雖然本研究證明了miR-30a-5p在AMI中的重要診斷價(jià)值及功能，但仍存在一些局限性。首先，本研究只收集了健康受試者和AMI患者的血清標(biāo)本，沒有把AMI患者分類；其次是收集的標(biāo)本可能時(shí)限有點(diǎn)長，應(yīng)該收集發(fā)生后2 h內(nèi)的患者血清。因此，miR-30a-5p表達(dá)在不穩(wěn)定型心絞痛患者和AMI患者之間是否存在差異需要進(jìn)一步研究。其次，通過預(yù)測miR-30a-5p的靶基因來分析其潛在機(jī)制，但能否通過調(diào)控這些功能參與AMI的發(fā)生發(fā)展還有待在動物實(shí)驗(yàn)中驗(yàn)證。在后續(xù)的研究中，我們將進(jìn)一步收集2 h內(nèi)、分類的患者血清并從細(xì)胞和動物層面來研究miR-30a-5p的分子機(jī)制。

綜上所述，miR-30a-5p在AMI中高表達(dá)，可作為一種非侵入性生物標(biāo)志物。其對AMI診斷和治療具有巨大潛力，值得進(jìn)一步開展病理機(jī)制研究。

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（編輯" 陳" 波）