【摘要】 背景 調(diào)節(jié)性B淋巴細(xì)胞（Breg）是一類具有負(fù)向免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞，在多種自身免疫性疾病中表達(dá)異常，視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病（NMOSD）系自身免疫性疾病，目前關(guān)于Breg在NMOSD患者外周血中的表達(dá)和意義的研究較少。目的 研究Breg在NMOSD患者外周血中的表達(dá)和意義。方法 選取2019年6月—2021年12月新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的NMOSD患者55例作為NMOSD組，選取同期本院體檢正常的健康志愿者50例作為對(duì)照組。運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)兩組研究對(duì)象外周血中CD19+CD24hiCD38hi Breg、CD19+CD24hiCD27+ Breg的表達(dá)。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)和比較兩組研究對(duì)象血清中白介素10（IL-10）、白介素35（IL-35）和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）的水平。結(jié)果 NMOSD組患者CD19+CD24hiCD38hi Breg、CD19+CD24hiCD27+ Breg細(xì)胞表型比例低于對(duì)照組（t=6.235、12.131，Plt;0.05）。NMOSD組患者IL-10、IL-35、TGF-β1水平均低于對(duì)照組（t=4.249、7.316、2.057，Plt;0.05）。結(jié)論 Breg及其細(xì)胞因子在NMOSD患者中表達(dá)下降，提示負(fù)性免疫調(diào)節(jié)在NMOSD疾病的發(fā)生和進(jìn)展中發(fā)揮作用。

【關(guān)鍵詞】 視神經(jīng)脊髓炎；視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病；B淋巴細(xì)胞，調(diào)節(jié)性；細(xì)胞因子類；免疫調(diào)節(jié)；白細(xì)胞介素類；淋巴細(xì)胞表型；酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定

【中圖分類號(hào)】 R 744.52 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A DOI：10.12114/j.issn.1007-9572.2023.0031

【引用本文】 何丹，馬建華，馬娟，等. 調(diào)節(jié)性B淋巴細(xì)胞在視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病患者外周血中的表達(dá)和意義［J］. 中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2023，26（20）：2513-2517. DOI：10.12114/j.issn.1007-9572.2023.0031.［www.chinagp.net］

HE D，MA J H，MA J，et al. Expression and significance of regulatory B-lymphocytes in peripheral blood of patients with neuromyelitis optica spectrum disorders［J］. Chinese General Practice，2023，26（20）：2513-2517.

Expression and Significance of Regulatory B-lymphocytes in Peripheral Blood of Patients with Neuromyelitis Optica Spectrum Disorders HE Dan，MA Jianhua，MA Juan，DU Lei，ZHANG Yan，HAO Chenguang*

Department of Neurology，the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University，Urumqi 830054，China

*Corresponding author：HAO Chenguang，Chief physician；E-mail：haoqiang123321@sina.com

【Abstract】 Background Regulatory B-lymphocytes（Breg）are a group of cells with negative immunoregulatory effect，which have been detected of abnormal expression in the researches of various autoimmune diseases. Neuromyelitis optica spectrum disorders（NMOSD）belong to the category of autoimmune diseases，there are few studies on the expression and significance of Breg in the peripheral blood of patients with NMOSD. Objective To explore the expression and significance of Breg in peripheral blood of patients with NMOSD. Methods A total of 55 patients with NMOSD admitted to the Department of Neurology of the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University from June 2019 to December 2021 were selected as the NMOSD group，and 50 healthy volunteers in the same period were selected as the control group. The expression of CD19+CD24hiCD38hi Breg and CD19+CD24hiCD27+ Breg in peripheral blood of patients in the two groups was detected using flow cytometry，the levels of interleukin 10（IL-10），interleukin 35（IL-35）and transforming growth factor β1（TGF-β1）in the serum of patients in the two groups were compared and measured by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）. Results The proportions of CD19+CD24hiCD38hi Breg and CD19+CD24hiCD27+ Breg cell phenotypes were lower in patients in the NMOSD group than in the control group（t=6.235，12.131，Plt;0.05）. The levels of IL-10，IL-35 and TGF-β1 were lower in patients in the NMOSD group than in the control group（t=4.249，7.316，2.057，Plt;0.05）. Conclusion The reduced expression of Breg and their cytokines in patients with NMOSD suggests a role for negative immune regulation in the development and progression of NMOSD disease.

【Key words】 Neuromyelitis optica；Neuromyelitis optica spectrum disorders；B-lymphocytes，regulatory；Cytokines；Immunomodulation；Interleukins；Lymphocyte phenotypings；Enzyme-linked immunosorbent assay

視神經(jīng)脊髓炎譜系疾?。∟MOSD）是近年來(lái)神經(jīng)系統(tǒng)炎性脫髓鞘疾病領(lǐng)域研究和探索的重點(diǎn)，某發(fā)病機(jī)制主要與自身免疫介導(dǎo)有關(guān)，臨床癥狀多表現(xiàn)為長(zhǎng)節(jié)段橫貫性脊髓炎（LETM）和視神經(jīng)炎（ON）等，因該病脫髓鞘的特點(diǎn)導(dǎo)致其較高的致殘率和復(fù)發(fā)率［1］。從目前的流行病學(xué)數(shù)據(jù)來(lái)看，NMOSD好發(fā)于青壯年尤其是女性，其全球患病率為（0.5～10.0）/10萬(wàn)人年，根據(jù)2020年住院登記系統(tǒng)的數(shù)據(jù)，中國(guó)的NMOSD發(fā)病率約為0.278/10萬(wàn)人年，其中成人發(fā)病率略高為0.347/10萬(wàn)人年［2］。目前發(fā)現(xiàn)NMOSD的發(fā)病機(jī)制主要與水通道蛋白4（AQP4）抗體有關(guān)，該抗體由外周血中的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，可以透過(guò)血腦屏障（BBB）選擇性地與中樞部分的靶抗原AQP4結(jié)合，特別是與存在于BBB和腦-腦脊液屏障（CSF-BB）處的星形膠質(zhì)細(xì)胞足突中突觸末端的AQP4結(jié)合，因此免疫調(diào)節(jié)尤其是B淋巴細(xì)胞免疫在NMOSD疾病發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用［3-4］。目前的研究提示，B淋巴細(xì)胞除了引起體液免疫反應(yīng)外，部分亞群調(diào)節(jié)性B淋巴細(xì)胞（Breg）在多種不同的自身免疫性疾病中均可能存在負(fù)向的免疫調(diào)節(jié)作用，考慮與其分泌細(xì)胞因子參與炎性反應(yīng)的發(fā)生有關(guān)，如白介素10（IL-10）、白介素35（IL-35）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）等［5］，探索B淋巴細(xì)胞亞群在免疫性脫髓鞘性脊髓炎的疾病中的表達(dá)和功能有助于NMOSD的機(jī)制研究。因此，本研究重點(diǎn)是檢測(cè)NMOSD患者的外周血中Breg亞群和其細(xì)胞因子的水平，研究其在NMOSD疾病發(fā)生過(guò)程中的作用，提高對(duì)NMOSD患者免疫機(jī)制的認(rèn)識(shí)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2019年6月—2021年12月新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科診治的NMOSD成人住院患者55例作為NMOSD組，其中女43例、男12例；年齡為21～77歲，平均年齡為（44.9±12.7）歲，病程3 d～16年。納入標(biāo)準(zhǔn)：NMOSD患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2016年公布的《中國(guó)視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病診斷與治療指南》［6］，由兩位主治以上職稱醫(yī)師確認(rèn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有其他自身免疫性疾病以及其他惡性腫瘤、急性感染、器官移植術(shù)后、人類免疫缺陷病毒感染者等；入院前3個(gè)月內(nèi)已經(jīng)接受免疫球蛋白、大劑量糖皮質(zhì)激素或嗎替麥考酚酯/利妥昔單抗/硫唑嘌呤等其他免疫調(diào)節(jié)藥物治療的患者。另選擇同時(shí)期本院體檢正常的健康志愿者50例作為對(duì)照組，其中女30例、男20例，年齡為20～70歲，平均年齡為（46.8±14.3）歲。本研究獲得新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)審批（院K201910-06），患者或家屬均簽署知情同意書(shū)。

1.2 研究方法

1.2.1 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血中Breg計(jì)數(shù) （1）NMOSD組患者在入院后的次日清晨空腹及對(duì)照組志愿者在空腹體檢時(shí)各取肘靜脈血70 mL置于乙二胺四乙酸（EDTA）管，分別標(biāo)記為A和B。（2）首先在A中依次加入異硫氰酸熒光素（FITC）-單克隆鼠抗人CD19抗體、人藻紅蛋白（PE）-單克隆鼠抗人CD24抗體、別藻藍(lán)蛋白（APC）-單克隆鼠抗人CD38抗體，其次在B中依次加入FITC-單克隆鼠抗人CD19抗體、PE-單克隆鼠抗人CD24抗體和APC-單克隆鼠抗人CD27抗體（抗體均購(gòu)自新疆華康潤(rùn)博生物科技有限公司）。在室溫下混勻并避光孵育18 min。（3）加入紅細(xì)胞裂解液2 mL，室溫避光裂解5 min，然后放置于臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠，型號(hào)：EDL-80-2C），離心速度：2 000 r/min，離心時(shí)間：5 min，棄去離心管上清液，使用1 mL磷酸鹽緩沖溶液（PBS）洗滌，再次2 000 r/min速度離心5 min，棄去上清液加PBS 3 mL重懸。室溫下避光后上流式細(xì)胞儀（Becton Dickinson公司，型號(hào)：Apriall型）檢測(cè)Breg。

1.2.2 外周血清中細(xì)胞因子水平測(cè)定 （1）NMOSD組患者和對(duì)照組志愿者在空腹?fàn)顟B(tài)下分別采外周靜脈血

5 mL，離心機(jī)速度：1 000 r/min，離心時(shí)間：20 min，離心半徑為10 cm，離心后分離出血清，置于-80 ℃冰箱后續(xù)待測(cè)。（2）使用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)兩組研究對(duì)象血清中IL-10、IL-35和TGF-β1細(xì)胞因子水平。嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，記錄IL-10、IL-35和TGF-β1的測(cè)定值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（x-±s）表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象細(xì)胞表型比較 NMOSD組患者CD19+CD24hiCD38hi Breg、CD19+CD24hiCD27+ Breg細(xì)胞表型比例低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），見(jiàn)表1。兩組研究對(duì)象外周血CD19+CD24hiCD38hi Breg、CD19+CD24hiCD27+ Breg的表達(dá)見(jiàn)圖1。

2.2 兩組研究對(duì)象細(xì)胞因子水平比較 NMOSD組患者IL-10、IL-35、TGF-β1水平均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），見(jiàn)表2。

3 討論

NMOSD是一組由自身免疫介導(dǎo)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）炎性脫髓鞘性疾病，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為其與B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫有關(guān)，可能的發(fā)病機(jī)制是AQP4-IgG高度聚集在CNS脊髓的灰質(zhì)、中腦導(dǎo)水管腦室周圍等處，尤其是BBB和CSF-BB的星形膠質(zhì)細(xì)胞的足突中，繼而引起了NMOSD的發(fā)?。?，7］。隨著對(duì)其發(fā)病機(jī)制的不斷深入研究發(fā)現(xiàn)，免疫耐受異?？赡芤彩茿QP4-IgG產(chǎn)生的重要因素。

既往研究表明，體液免疫中B淋巴細(xì)胞主要通過(guò)分泌抗體和抗原提呈作用來(lái)激活免疫反應(yīng)從而發(fā)揮正向免疫調(diào)節(jié)作用，而近年來(lái)對(duì)于B淋巴細(xì)胞亞群研究的熱點(diǎn)是一類具有負(fù)性免疫調(diào)節(jié)功能的B淋巴細(xì)胞——Breg，其對(duì)維持機(jī)體的免疫耐受和穩(wěn)態(tài)同樣發(fā)揮著重要作用。自20世紀(jì)90年代以來(lái)，越來(lái)越多的關(guān)于Breg與自身免疫性疾病關(guān)系的實(shí)驗(yàn)和研究結(jié)果發(fā)表，逐漸揭開(kāi)了這個(gè)B淋巴細(xì)胞亞群在免疫性疾病中的作用。在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）的動(dòng)物模型中，WOLF等［8］首次發(fā)現(xiàn)，由于遺傳性B淋巴細(xì)胞缺陷的實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)的EAE更易發(fā)生病情惡化，而野生型小鼠卻有自愈的傾向，提示小鼠體內(nèi)存在一種抑制免疫炎性反應(yīng)的B淋巴細(xì)胞亞群，而隨后的研究證實(shí)，Breg參與調(diào)節(jié)炎癥免疫反應(yīng)、維持/誘導(dǎo)調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞（Treg）和預(yù)防自身免疫等病理過(guò)程［9］。

與天然Treg不同，目前的人類和動(dòng)物研究模型發(fā)現(xiàn)，任何B淋巴細(xì)胞都可能在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境刺激下分化為Breg，包括幼稚B淋巴細(xì)胞、未成熟B淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞等。雖然在介導(dǎo)炎性反應(yīng)中，Breg不直接調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞的增殖，但通過(guò)分泌以IL-10為主的細(xì)胞因子，對(duì)輔助T淋巴細(xì)胞（Th）1和Th17的分化進(jìn)行抑制，降低樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）的抗原提呈作用，減少其致炎因子的分泌作用，從而間接影響T淋巴細(xì)胞的增殖和分化從而發(fā)揮負(fù)向免疫調(diào)節(jié)作用［10］。

截至目前，Breg的表型尚沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，而在不同的疾病模型中，有多種不同的表型和交叉重疊的表型被報(bào)道和證實(shí)。盡管動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其表型多樣，但目前研究發(fā)現(xiàn)與人體內(nèi)負(fù)向免疫調(diào)節(jié)功能有關(guān)的Breg細(xì)胞表型主要是CD19+CD24hiCD38hi和CD19+CD24hiCD27+［10］，通過(guò)產(chǎn)生細(xì)胞因子抑制CD4+ T淋巴細(xì)胞增殖以及干擾素g（IFN-g）/IL-17的表達(dá)，并且CD24hiCD27+ B淋巴細(xì)胞在抑制CD4+ T淋巴細(xì)胞增殖和IFN-g/IL-17表達(dá)方面比過(guò)渡性B淋巴細(xì)胞（TBs）更有效［11］。本研究結(jié)果顯示，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，分析NMOSD組和對(duì)照組的Breg亞群發(fā)現(xiàn)，NMOSD組患者的CD19+CD24hiCD38hi Breg、CD19+CD24hiCD27+ Breg

比例均低于對(duì)照組，提示以上Breg可能也參與了NMOSD患者的疾病發(fā)生和發(fā)展進(jìn)程。同樣，在其他自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡的研究中，對(duì)試驗(yàn)組患者的外周血Breg表型的計(jì)數(shù)分析討論后，可見(jiàn)Breg的表達(dá)下降對(duì)疾病的活動(dòng)度、疾病特征和進(jìn)展有一定的提示意義［12］。但在LUNDQVIST等［13］的研究中，對(duì)于單純ON患者淋巴細(xì)胞表型的分析中，CD19+CD24hiCD38hi Breg較對(duì)照組更高，且CD19+CD24hiCD38hi Breg和CD19+CD24hiCD27+ Breg表達(dá)水平存在一定的差異，因此，對(duì)于免疫疾病中Breg兩種表型的有效性仍有待于進(jìn)一步研究。

IL-10是一種非常經(jīng)典的具有抗炎作用的細(xì)胞因子，在抑制疾病的活動(dòng)、發(fā)生和預(yù)防方面均發(fā)揮作用，IL-10可降低DC在抗原提呈過(guò)程中促炎細(xì)胞的細(xì)胞因子和分子主要組織相容性復(fù)合體（MHC）Ⅰ、MHCⅡ、黏附分子等的表達(dá)［14］。近年來(lái)，在其他神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾?。ㄈ缍喟l(fā)性硬化、重癥肌無(wú)力、吉蘭巴雷綜合征［9，15-16］）等疾病中，均發(fā)現(xiàn)IL-10不同程度的介導(dǎo)和參與了負(fù)向免疫的炎性反應(yīng)過(guò)程，同樣在本研究中，NMOSD組患者的IL-10水平較對(duì)照組下降，考慮與負(fù)向免疫調(diào)節(jié)功能下調(diào)有關(guān)。

IL-35是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的IL-12細(xì)胞因子的新家族成員，主要作用是調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡，其可以抑制Th2和Th17的產(chǎn)生，抑制CD4+ T淋巴細(xì)胞的增殖和分化效應(yīng)，可作用于IL-35受體激活信號(hào)傳感器和轉(zhuǎn)錄激活物（STAT）1/STAT3通路，誘導(dǎo)人B淋巴細(xì)胞分化為IL-10和產(chǎn)生IL-35的Breg，抑制自身免疫性疾病的過(guò)度炎性反應(yīng)，從而發(fā)揮負(fù)向免疫調(diào)節(jié)作用［9］。本研究對(duì)兩組研究對(duì)象的IL-35水平測(cè)定后發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，NMOSD組患者的IL-35水平明顯下降。上述研究結(jié)果表明在NMOSD患者中，IL-35參與了負(fù)向的免疫反應(yīng)和調(diào)節(jié)。

TGF-β1及其家族成員具有多效性，其作用與細(xì)胞類型和環(huán)境有關(guān)。TGF-β參與調(diào)節(jié)B淋巴細(xì)胞發(fā)育的各個(gè)階段，在控制自身耐受和自身免疫中起著重要作用。目前已被證實(shí)在Breg的負(fù)向免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要功能，在對(duì)促進(jìn)移植耐受的機(jī)制研究中發(fā)現(xiàn)，通過(guò)過(guò)繼轉(zhuǎn)移，能夠產(chǎn)生TGF-β的Breg誘導(dǎo)CD4+CD25 T淋巴細(xì)胞中叉頭框蛋白P3（Foxp3）的表達(dá)，促進(jìn)Treg的增加，進(jìn)而誘導(dǎo)免疫耐受［17］。B淋巴細(xì)胞中特異性缺乏TGF-β1的轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型對(duì)照相比，EAE的發(fā)展速度加快，這與CNS中DC活化頻率的增加和致病干擾素γ（IFN-γ）+IL-17+CD4+ T淋巴細(xì)胞的增加有關(guān)，提示TGF-β+Breg對(duì)炎癥性T淋巴細(xì)胞的間接控制［18］。本研究NMOSD組患者TGF-β1水平的下降考慮與NMOSD疾病的負(fù)向免疫調(diào)節(jié)減弱有關(guān)，NMOSD患者的TGF-β1表達(dá)下降是否直接影響B(tài)淋巴細(xì)胞免疫中抗原提呈功能和具體的調(diào)節(jié)機(jī)制仍需進(jìn)一步研究證實(shí)。

本研究旨在分析NMOSD患者和健康對(duì)照組的Breg的表型比例，同時(shí)使用ELISA法對(duì)其主要的細(xì)胞因子IL-10、IL-35、TGF-β1水平進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)CD19+CD24hiCD38hi Breg、CD19+CD24hiCD27+ Breg的計(jì)數(shù)與NMOSD相關(guān)，且NMOSD組患者三種細(xì)胞因子的水平均下降，進(jìn)一步說(shuō)明負(fù)向免疫調(diào)節(jié)有關(guān)的細(xì)胞因子在其疾病的發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮作用。

綜上所述，免疫系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)平穩(wěn)是維持免疫穩(wěn)定的重要因素，且當(dāng)前NMOSD的發(fā)病機(jī)制仍未闡明，通過(guò)本研究發(fā)現(xiàn)，在NMOSD組患者中，CD19+CD24hiCD38hi Breg、CD19+CD24hiCD27+ Breg及其主要細(xì)胞因子IL-10、IL-35、TGF-β1的水平均下降，提示Breg在NMOSD的發(fā)生、發(fā)展環(huán)節(jié)中發(fā)揮了重要作用。目前自身免疫性疾病中更多的研究和診療方向在Treg。因此，發(fā)現(xiàn)更多的免疫靶點(diǎn)并進(jìn)行動(dòng)態(tài)的檢測(cè)和復(fù)查有望為NMOSD患者提供更多的診療方向。另外，由于本研究為單中心研究，NMOSD發(fā)病率低，因此整體樣本量較少，期待未來(lái)有多中心、大樣本或前瞻性隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)對(duì)本研究結(jié)果進(jìn)行證實(shí)及補(bǔ)充。

作者貢獻(xiàn)：何丹、馬建華、郝晨光進(jìn)行文章的構(gòu)思與設(shè)計(jì)；何丹進(jìn)行研究的實(shí)施與可行性分析，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)果的分析與解釋，撰寫(xiě)論文并修訂論文；何丹、馬娟、張艷進(jìn)行數(shù)據(jù)整理；杜磊、郝晨光負(fù)責(zé)文章的質(zhì)量控制及審校；何丹、郝晨光對(duì)文章整體負(fù)責(zé)，監(jiān)督管理。

本文無(wú)利益沖突。

參考文獻(xiàn)

中國(guó)免疫學(xué)會(huì)神經(jīng)免疫分會(huì). 中國(guó)視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病診斷與治療指南（2021版）［J］. 中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志，2021，28（6）：423-436. DOI：10.3969/j.issn.1006-2963.

2021.06.002.

TIAN D C，LI Z X，YUAN M，et al. Incidence of neuromyelitis optica spectrum disorder（NMOSD）in China：a national population-based study［J］. Lancet Reg Health West Pac，2020，

2：100021. DOI：10.1016/j.lanwpc.2020.100021.

LENNON V A，KRYZER T J，PITTOCK S J，et al. IgG marker of optic-spinal multiple sclerosis binds to the aquaporin-4 water channel［J］. J Exp Med，2005，202（4）：473-477. DOI：10.1084/jem.20050304.

馬如雪，于秀軍. 水通道蛋白4抗體陽(yáng)性與陰性視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病發(fā)病機(jī)制及臨床特點(diǎn)比較分析［J］. 中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志，2018，25（4）：292-298. DOI：10.3969/j.issn.1006-2963.2018.04.013.

MIZOGUCHI E，MIZOGUCHI A，PREFFER F I，et al. Regulatory role of mature B cells in a murine model of inflammatory bowel disease［J］. Int Immunol，2000，12（5）：597-605. DOI：10.1093/intimm/12.5.597.

中國(guó)免疫學(xué)會(huì)神經(jīng)免疫學(xué)分會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)神經(jīng)免疫學(xué)組，中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)內(nèi)科分會(huì)神經(jīng)免疫專業(yè)委員會(huì). 中國(guó)視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病診斷與治療指南［J］. 中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志，2016，23（3）：155-166. DOI：10.3969/j.issn.1006-2963.2016.03.001.

VINCENT T，SAIKALI P，CAYROL R，et al. Functional consequences of neuromyelitis optica-IgG astrocyte interactions on blood-brain barrier permeability and granulocyte recruitment［J］. J Immunol，2008，181（8）：5730-5737. DOI：10.4049/jimmunol.181.8.5730.

WOLF S D，DITTEL B N，HARDARDOTTIR F，et al. Experimental autoimmune encephalomyelitis induction in genetically B cell-deficient mice［J］. J Exp Med，1996，184（6）：2271-2278. DOI：10.1084/jem.184.6.2271.

ZHOU R，LUO Y B，ZENG Q M，et al. Regulatory B cells and its role in central nervous system inflammatory demyelinating diseases［J］. Front Immunol，2020，11：1884. DOI：10.3389/fimmu.2020.01884.

SOKOLOV A V，SHMIDT A A，LOMAKIN Y A. B cell regulation in autoimmune diseases［J］. Acta Naturae，2018，10（3）：11-22.

HASAN M M，THOMPSON-SNIPES L，KLINTMALM G，et al. CD24hiCD38hi and CD24hiCD27+ human regulatory B cells display common and distinct functional characteristics［J］. J Immunol，2019，203（8）：2110-2120. DOI：10.4049/jimmunol.1900488.

閆成蘭，楊金華，吳萌，等. CD19+CD24hiCD38hi調(diào)節(jié)性B細(xì)胞在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的表達(dá)及意義［J］. 中國(guó)藥物與臨床，2020，20（15）：2469-2472. DOI：10.11655/zgywylc2020.15.001.

LUNDQVIST S，MODVIG S，F(xiàn)ISCHER E A，et al. Frequency and immunophenotype of IL10-producing regulatory B cells in optic neuritis［J］. Immunology，2019，156（3）：259-269. DOI：10.1111/imm.13024.

韓婉君，劉雅微，楊丹. 調(diào)節(jié)性B細(xì)胞參與多發(fā)性硬化發(fā)病的研究進(jìn)展［J］. 國(guó)際免疫學(xué)雜志，2021，44（1）：76-80. DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-4394.2021.01.013.

LIN Y，CHANG T，LIN J J，et al. Regulatory B cells are decreased and functionally impaired in myasthenia gravis patients［J］. Front Neurol，2022，13：808322. DOI：10.3389/fneur.2022.808322.

郝晨光，王艷，馬建華. 調(diào)節(jié)性B細(xì)胞在吉蘭-巴雷綜合征患者外周血中的表達(dá)及意義［J］. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2020，30（4）：34-38. DOI：10.3969/j.issn.1005-8982.2020.04.006.

LEE K M，STOTT R T，ZHAO G P，et al. TGF-β-producing regulatory B cells induce regulatory T cells and promote transplantation tolerance［J］. Eur J Immunol，2014，44（6）：1728-1736. DOI：10.1002/eji.201344062.

CATALáN D，MANSILLA M A，F(xiàn)ERRIER A，et al. Immunosuppressive mechanisms of regulatory B cells［J］. Front Immunol，2021，12：611795. DOI：10.3389/fimmu.2021.611795.

（收稿日期：2022-11-21；修回日期：2023-02-05）

（本文編輯：康艷輝）