【摘要】目的 分析膝骨性關(guān)節(jié)炎患者血清及關(guān)節(jié)液內(nèi)血管內(nèi)皮細(xì)胞因子（VEGF）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-8（IL-8）水平表達(dá)情況與臨床意義，為臨床治療該疾病提供依據(jù)。方法 回顧性分析鹽城市第三人民醫(yī)院2020年8月至2022年8月期間收治的明確診斷為膝骨性關(guān)節(jié)炎的60例患者的臨床資料，將其設(shè)為觀察組，并根據(jù)膝骨性關(guān)節(jié)炎臨床分期將患者分為3個(gè)亞組，包括早期組（20例）、中期組（20例）及晚期組（20例）；同時(shí)回顧性分析同期院內(nèi)60例健康體檢者的體檢資料，將其設(shè)為對(duì)照組。采取所有研究對(duì)象血清和關(guān)節(jié)液標(biāo)本，測(cè)定VEGF、IL-6、IL-8水平。觀察對(duì)比對(duì)照組與觀察組，早、中、晚期組研究對(duì)象血清和關(guān)節(jié)液中VEGF、IL-6、IL-8水平表達(dá)情況。結(jié)果 與對(duì)照組比，觀察組研究對(duì)象血清及關(guān)節(jié)液中VEGF、IL-6、IL-8水平均更高；早、中、晚期組患者血清及關(guān)節(jié)液中VEGF、IL-6水平呈逐漸升高趨勢(shì)，且組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05）；而早、中、晚期組患者血清及關(guān)節(jié)液中IL-8水平組間比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05）。結(jié)論 膝骨性關(guān)節(jié)炎患者血清及關(guān)節(jié)液內(nèi)VEGF、IL-6、IL-8水平異常升高，且在患者無菌性炎癥反應(yīng)期間，IL-6、VEGF可作為疾病嚴(yán)重程度的評(píng)價(jià)指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】膝骨性關(guān)節(jié)炎 ; 血管內(nèi)皮細(xì)胞因子 ; 白細(xì)胞介素 -6 ; 白細(xì)胞介素 -8

【中圖分類號(hào)】R684.3 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2096-3718.2023.11.0099.03

DOI：10.3969/j.issn.2096-3718.2023.11.033

膝骨性關(guān)節(jié)炎是常發(fā)于中老年人的一種常見膝關(guān)節(jié)慢性、退行性病癥，并且該病的出現(xiàn)也和關(guān)節(jié)畸形、關(guān)節(jié)腔積液、關(guān)節(jié)功能障礙等一系列疾病有著密切聯(lián)系。目前臨床在對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎診斷中常見方法有關(guān)節(jié)鏡及X線片、膝關(guān)節(jié)核磁共振掃描等影像學(xué)手段，以上診斷方法雖然能夠在早期發(fā)現(xiàn)關(guān)節(jié)軟骨病變，但此類方法仍然有一定的不足之處，也導(dǎo)致部分患者對(duì)其接受度不高[1]。近年來許多學(xué)者將對(duì)于該病的診斷轉(zhuǎn)向炎癥細(xì)胞因子領(lǐng)域。研究發(fā)現(xiàn)，在膝骨性關(guān)節(jié)炎病變期間，滑膜組織有著最為顯著的病理變化，在病變?cè)缙陔A段滑膜組織內(nèi)就存在了大量炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子異常表達(dá)，包括血管內(nèi)皮細(xì)胞因子（VEGF）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-8（IL-8）等，均會(huì)導(dǎo)致滑膜細(xì)胞、白細(xì)胞、軟骨細(xì)胞分泌大量的溶酶體酶或金屬基質(zhì)蛋白酶，對(duì)軟骨形成持續(xù)損害，造成滑膜增生[2-3]?；诖耍狙芯糠治鱿ス切躁P(guān)節(jié)炎患者血清及關(guān)節(jié)液內(nèi)炎癥細(xì)胞因子水平表達(dá)和意義，旨在為該病的早期診治提供有效依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析鹽城市第三人民醫(yī)院2020年8月至2022年8月期間收治的明確診斷為膝骨性關(guān)節(jié)炎的60例患者的臨床資料，將其設(shè)為觀察組，并根據(jù)膝骨性關(guān)節(jié)炎臨床分期[4]將患者分為3個(gè)亞組，包括早期組（20例）、中期組（20例）及晚期組（20例）；同時(shí)回顧性分析同期院內(nèi)60例健康體檢者的體檢資料，將其設(shè)為對(duì)照組。對(duì)照組研究對(duì)象中男性35例，女性25例；年齡34～78歲，平均（55.62±7.11）歲。觀察組患者中男性33例，女性27例；年齡35～74歲，平均（55.37±7.27）歲。兩組研究對(duì)象一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），組間可比。納入標(biāo)準(zhǔn)：膝骨性關(guān)節(jié)炎患者符合《骨關(guān)節(jié)炎診治指南（2007年版）》 [5]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且通過病史、癥狀體征、影像學(xué)檢查確診者；1個(gè)月內(nèi)膝關(guān)節(jié)反復(fù)出現(xiàn)疼痛者；膝關(guān)節(jié)X線掃查提示關(guān)節(jié)腔變窄，存在關(guān)節(jié)緣骨贅者；膝關(guān)節(jié)活動(dòng)有骨摩擦音者；年齡均不低于18歲者等。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎者；下肢存在先天性畸形或發(fā)育障礙者；膝關(guān)節(jié)存在骨折、骨質(zhì)損傷等明確外傷者等。研究經(jīng)院內(nèi)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 檢查方法

1.2.1 血清標(biāo)本采集方法 分別于觀察組患者入院

第2天、對(duì)照組研究對(duì)象體檢當(dāng)天，采集所有研究對(duì)象肘靜脈外周血共10 mL，采血前一晚禁食、禁水，在第2天清晨空腹?fàn)顟B(tài)下完成血液采集。離心（3 000 r/min，15 min）取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清VEGF、IL-6、IL-8水平。

1.2.2 關(guān)節(jié)液標(biāo)本采集方法 分別于觀察組患者入院

第2天、對(duì)照組研究對(duì)象體檢當(dāng)天，通過關(guān)節(jié)鏡檢采集所有研究對(duì)象關(guān)節(jié)液標(biāo)本，指導(dǎo)研究對(duì)象采取仰臥位或坐位，使用5 mL 2%鹽酸利多卡因注射液（湖北天圣藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H42021839，規(guī)格：5 mL∶0.1 g）進(jìn)行局部麻醉，在髕骨下緣、股四頭肌腱外側(cè)向內(nèi)上進(jìn)行穿刺直達(dá)關(guān)節(jié)囊，采集關(guān)節(jié)腔內(nèi)的關(guān)節(jié)液共3 mL左右，放置在Eppendorf管內(nèi)，于 -75 ℃冰箱保存待測(cè)，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)關(guān)節(jié)液VEGF、IL-6、IL-8水平。

1.3 觀察指標(biāo) ①對(duì)比對(duì)照組與觀察組研究對(duì)象血清及關(guān)節(jié)液標(biāo)本中VEGF、IL-6、IL-8水平表達(dá)的差異。②對(duì)比膝骨性關(guān)節(jié)炎不同臨床分期患者血清及關(guān)節(jié)液標(biāo)本中VEGF、IL-6、IL-8水平表達(dá)的差異。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料均經(jīng)K-S檢驗(yàn)證實(shí)符合正態(tài)分布且方差齊，以（ x ±s）表示，兩組間比較行t檢驗(yàn)，多組間比較采用F檢驗(yàn)，兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)照組與觀察組研究對(duì)象血清VEGF、IL-6、IL-8水平比較 與對(duì)照組比，觀察組研究對(duì)象血清VEGF、IL-6、IL-8水平均更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05），見表1。

2.2 對(duì)照組與觀察組研究對(duì)象關(guān)節(jié)液中VEGF、IL-6、IL-8水平比較 與對(duì)照組比，觀察組研究對(duì)象關(guān)節(jié)液中VEGF、IL-6、IL-8水平均更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05），見表2。

2.3 觀察組不同亞組患者血清VEGF、IL-6、IL-8水平比較 與早期組比，中、晚期患者血清VEGF、IL-6水平呈逐漸升高趨勢(shì)，且晚期組顯著高于中期組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05）；3組間患者血清IL-8水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05），見表3。

2.4 觀察組不同亞組患者關(guān)節(jié)液中VEGF、IL-6、IL-8水平表達(dá)比較 與早期組比，中、晚期患者關(guān)節(jié)液中VEGF、IL-6水平呈逐漸升高趨勢(shì)，且晚期組顯著高于中期組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Plt;0.05）；3組間患者關(guān)節(jié)液IL-8水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均Pgt;0.05），見表4。

3 討論

在膝骨性關(guān)節(jié)炎病情發(fā)展期間，關(guān)節(jié)軟骨破壞和關(guān)節(jié)內(nèi)炎癥反應(yīng)有著密切聯(lián)系[6]。炎癥細(xì)胞可因子可誘導(dǎo)滑膜細(xì)胞和軟骨細(xì)胞產(chǎn)生并釋放基質(zhì)金屬蛋白酶、膠原酶等，導(dǎo)致滑膜炎癥、軟骨破壞，同時(shí)可激活破骨細(xì)胞，減少軟骨細(xì)胞的生長，并促進(jìn)軟骨細(xì)胞凋亡。因此在膝骨性關(guān)節(jié)炎病變中，眾多炎癥細(xì)胞因子均發(fā)揮了重要的作用。

IL-6有著多方面的生物學(xué)活性，在機(jī)體免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)誘導(dǎo)、細(xì)胞增殖分化等過程有重要作用。在膝骨性關(guān)節(jié)炎患者中IL-6呈現(xiàn)出異常高表達(dá)狀態(tài)，其參與了膝骨性關(guān)節(jié)炎的病理變化。IL-6可對(duì)滑膜細(xì)胞和軟骨進(jìn)行刺激，使其分泌大量膠原酶和前列腺素，造成關(guān)節(jié)炎癥反應(yīng)，從而破壞關(guān)節(jié)軟骨[7]。本研究結(jié)果顯示，觀察組患者血清及關(guān)節(jié)液中IL-6水平均明顯高于對(duì)照組，且隨著病變發(fā)展其血清及關(guān)節(jié)液中IL-6水平不斷升高，提示IL-6在膝骨性關(guān)節(jié)炎患者中呈現(xiàn)出高表達(dá)狀態(tài)，存在明顯炎癥反應(yīng)。因此可以認(rèn)為，IL-6在膝骨性關(guān)節(jié)炎軟骨退變中有著重要的作用，可呈現(xiàn)出關(guān)節(jié)軟骨的病變嚴(yán)重性；但其具體的作用機(jī)制還比較復(fù)雜，是一系列炎癥細(xì)胞、滑膜組織、軟骨細(xì)胞及配體-受體介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制交織影響的結(jié)果。因此，對(duì)IL-6在軟骨細(xì)胞及滑膜組織中的表達(dá)深入探索，可幫助發(fā)現(xiàn)軟骨細(xì)胞合成及分解代謝的平衡點(diǎn)，為臨床針對(duì)性干預(yù)保護(hù)軟骨細(xì)胞提供依據(jù)。

IL-8通常由白細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、滑膜細(xì)胞及纖維細(xì)胞等所釋放，可以對(duì)中性粒細(xì)胞起到刺激作用，發(fā)揮去顆粒作用，促進(jìn)溶酶體酶分泌，并形成大量超氧化物陰離子，持續(xù)趨化B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞，因此IL-8在炎癥反應(yīng)發(fā)展中有著重要作用。在膝骨性關(guān)節(jié)炎病理變化中，IL-8可以促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶的分泌，對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行活化，并促使其快速聚集到滑膜組織。另外，IL-8和其他細(xì)胞因子相互作用，可促進(jìn)軟骨細(xì)胞的生長與分化[8]。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組患者血清及關(guān)節(jié)液中IL-8表達(dá)明顯高于對(duì)照組，可見膝骨性關(guān)節(jié)炎患者血清和關(guān)節(jié)液中IL-8呈高表達(dá)狀態(tài)，提示體內(nèi)存在明顯炎癥狀態(tài)。IL-8表達(dá)和膝骨性關(guān)節(jié)炎患者軟骨細(xì)胞增生有著密切聯(lián)系，能夠加快骨質(zhì)鈣化及軟骨基質(zhì)修復(fù)，同時(shí)誘導(dǎo)化膜血管形成，促進(jìn)軟骨退變。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)，IL-8在膝骨性關(guān)節(jié)炎病變?cè)缙诒氵_(dá)到較高水平，中晚期差異不明顯，進(jìn)一步說明IL-8在膝骨性關(guān)節(jié)炎患者血清及關(guān)節(jié)液中均有明顯升高，可以作為評(píng)估該病炎癥反應(yīng)的有效指標(biāo)，但對(duì)于疾病嚴(yán)重程度評(píng)估不明顯，可能由于本研究選取病例較少，研究結(jié)果存在偏差，后期建議增加樣本量深入研究。

VEGF在機(jī)體血管形成中有關(guān)鍵作用，相關(guān)研究指出類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的滑膜血管翳產(chǎn)生與VEGF有緊密聯(lián)系，VEGF含量能夠呈現(xiàn)出類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病變程度[9]。近年來臨床逐漸發(fā)現(xiàn)，膝骨性關(guān)節(jié)炎也和血管存在緊密聯(lián)系，從受累滑膜組織和軟骨中均發(fā)現(xiàn)了大量血管生成介質(zhì)。VEGF可在膝骨性關(guān)節(jié)炎患者滑膜細(xì)胞、軟骨細(xì)胞中呈高表達(dá)，加快軟骨細(xì)胞凋亡，促進(jìn)其他炎癥介質(zhì)分泌，導(dǎo)致軟骨基質(zhì)減少，直接破壞軟骨[10]。本研究也發(fā)現(xiàn)，觀察組患者血清及關(guān)節(jié)液中VEGF表達(dá)明顯高于對(duì)照組，觀察組患者隨著病變發(fā)展其血清及關(guān)節(jié)液中VEGF水平不斷升高，由此可見，VEGF和膝骨性關(guān)節(jié)炎病變嚴(yán)重程度有著密切聯(lián)系，病變?cè)絿?yán)重，其表達(dá)隨之升高，因此VEGF也可作為臨床評(píng)估該病嚴(yán)重程度的有效生化指標(biāo)。可能是由于VEGF通過誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞因子轉(zhuǎn)移到病變處，加快血管形成，加重該部位損傷，造成關(guān)節(jié)軟骨損傷，最終引起關(guān)節(jié)退變，因此病情越嚴(yán)重，其水平越高。

綜上，膝骨性關(guān)節(jié)炎患者伴隨病程發(fā)展，其IL-6、IL-8及VEGF異常高表達(dá)，且在患者無菌性炎癥反應(yīng)期間，IL-6、VEGF可作為疾病嚴(yán)重程度的評(píng)價(jià)指標(biāo)，但由于本研究樣本量較小，因此仍需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行深入研究。

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